HPLC法测定人血浆中丙泊酚浓度

目的:建立测定人血浆中丙泊酚浓度的高效液相色谱荧光检测法.方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,取上清液进样分析,色谱条件为采用Symmetry C18柱(3.9 mm×150 mm,5 μm),甲醇-水 (70:30) 为流动相,流速1.0 ml·min-1,荧光检测激发波长276 nm、发射波长310 nm,进样量为20 μl.结果:丙泊酚血药浓度在0.010～10.00 μg·ml-1内,线性关系良好(r=0.999 9),最低定量浓度为0.010 μg·ml-1,提取回收率为93.41%~96.94%,方法回收率为98.65%～102.17%,日内、日间RSD均小于10%.结论:本方法快速、准确、灵敏、专一性好,适用于临床丙泊酚血药浓度检测和药动学研究.     

高效液相色谱-荧光法测定人指甲中伊曲康唑的浓度

目的建立测定人指甲中伊曲康唑浓度的高效液相色谱-荧光法。方法将指甲样本（20—40mg）先与2．5mol·L-1 NaOH于80℃水浴孵育30min,待样本完全溶解后采用甲基叔丁基醚萃取。色谱柱：DiamonsilTMC18（200mm×4．6mm,5μm）,流动相：乙腈-0．2％三氟乙酸（49：51,V/V）,流速1．0mL·min-1,荧光检测器：激发波长260nm,发射波长365nm。结果指甲样品在质量分数53．5—2140ng·g-1内线性良好,检测限为21．4ng·g-1,方法回收率为97．05％～104．32％,批内、批间RSD均〈12％。结论此法准确、灵敏、专属,适于指甲中伊曲康唑浓度的测定。     

HPLC荧光检测法测定人血浆中的罗格列酮钠

目的 采用HPLC荧光检测法测定人血浆中的罗格列酮钠.方法 用Agilent C_(18)色谱柱(150mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-pH3磷酸盐缓冲液(35:65)为流动相,流速1.0 mL·min~(-1),进样量20μL,血浆样品经乙醚提取后进样,荧光检测器检测波长λ_(ex)=250 nm,λ_(em)=370 nm.结果 罗格列酮钠的线性范围为10～1000 ng·mL~(-1)(r=0.9999),最低定量限为10 ng·mL~(-1)(S/N>3),日内RSD<4%(n=5),日间RSD<16%(n=5),萃取回收率>94.81%.结论 所建方法适用于临床上罗格列酮钠片的血药浓度监测及药动学的研究.     

HPLC-FLD测定大鼠血浆中的10-羟基喜树碱方法学研究

目的 建立一种简单、准确的测定大鼠血浆中10-羟基喜树碱含量的高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD).方法 用1%冰醋酸-甲醇溶液处理血浆样品,采用高效液相色谱-荧光检测器,以喜树碱为内标.色谱柱:Phenomenex Luna C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:以5%乙腈为流动相A,乙腈为流动相B,流速为1.2 mL·min-1,荧光检测器激发波长和发射波长分别为Ex=380 nm,Em=515 nm.采用室温梯度洗脱,进样体积为50μL.结果 本试验采用两条分段函数,大鼠血浆中10-羟基喜树碱在1.25~20 ng·mL-1及20~320 ng·mL-1范围内线性良好,线回归系数分别为0.9998和0.9995.方法 准确度为98.9%~103.8%,10-羟基喜树碱高、中、低3个浓度的提取回收率均大于80%.日内精密度RSD<4.2%,日间精密度RSD<4.8%.结论 该方法 操作简便,灵敏度高,精密度和准确度好,适用于大鼠血浆中10-羟基喜树碱含量的测定.     

高效液相-荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱的含量

目的建立高效液相-荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱含量的方法学。方法色谱柱为D iscovery C18(15cm×4.6mm,5μm),流动相为柠檬酸缓冲液-乙腈-75nm o.lL-1-磷酸二氢钾(70∶23∶7),75nm o.lL-1磷酸二氢钾中含1%三乙胺。流速为1.0m.lm in-1,柱温为40℃,荧光检测波长为λex363nm和λem 530nm。结果该方法的线性范围为13.7656~1957.4468ng.mL-1(r=0.9993)。提取回收率和方法回收率分别为80.90%~103.59%,102.72%~108.16%.日内RSD 7.49%,日间RSD 9.40%。最低检测限为5.2ng.mL-1。结论该方法专属性强,重现性好,操作简便,适用于羟基喜树碱的药代动力学研究和血药浓度监测。     

HPLC测定茄尼醇的含量

目的 采用RP-HPLC法测定茄尼醇粗品中的茄尼醇.方法 色谱柱为PRONTOSIL 120-5-C18-ace-APS(250 mm×4.6mm,5 μm);流动相为甲醇-乙醇(40:60);流速1.0 ml · min-1,检测波长210 nm. 结果茄尼醇的线性范围为3.24～51.84 μg · ml-1 (r=0.9998),最小检出限为0.52 ng.茄尼醇的平均回收率为109.1%,RSD=0.95%;结论所建方法简便、快速、准确,适用于茄尼醇的含量测定.     

高效液相色谱-荧光检测法测定复合维B片中维生素B1含量

目的建立测定复合维B片中维生素B1含量的高效液相色谱-荧光检测法。方法样品用0．1mol／L盐酸提取，碱性铁氰化钾氧化，正丁醇萃取；采用Kromasil 100—5 C18柱（150mm×4．6mm，5μm）为色谱柱，以0．02mol／L乙酸铵-甲醇（70：30）为流动相，流速为1.0mL／min，荧光检测激发波长365nm，发射波长475nm。结果维生素B1质量浓度在0．5～20μg／mL范围内与峰面积线性关系良好，平均回收率为100.37％，RSD为1．34％，方法检出限（S／N=3）为2．3ng。结论高效液相色谱-荧光检测法快速、简便、准确，适用于复合维B片中维生素B1的含量测定。     

HPLC测定人体血浆中盐酸格拉司琼

目的 建立RP-HPLC-荧光色谱法测定人血浆中盐酸格拉司琼的含量.方法 以20名健康男性志愿者为研究对象,采用交叉给药方案,分别单剂量口服2 mg的试验制剂和参比制剂.采取液-液萃取法处理血浆样品,色谱柱为Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.5%三乙胺水溶液(pH 4.0)(46∶54),激发和发射波长分别为305 nm和360 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果 盐酸格拉司琼在0.078～20.08 ng·mL-1线性关系良好(r=0.999 4),最低检测限为1.95×10-2 ng·mL-1,日内RSD<1.9%,日间RSD<3.3%,平均提取回收率为85.7%,平均方法回收率为100.0%.结论 该方法快速、准确,适用于盐酸格拉司琼的临床药动学研究和血药浓度监测.     

兔血浆中地非三唑(DL111-IT)高效液相色谱荧光检测方法

目的　建立兔血浆中DL111 IT的高效液相色谱荧光检测法。方法　血浆样品和内标格列本脲经氯仿提取后 ,选用DiamonsilODS C18柱 (15 0mm× 4 . 6mm ,5 μm) ,乙腈 - 0 . 0 2 5mol·L-1磷酸氢二铵缓冲溶液 (磷酸调pH 5 .0 ) (6 0 .4 0 ,V/V)为流动相 ,流速 1 0mL·min-1,荧光检测 (λex=2 5 0nm ,λem=332nm)。结果　DL111 IT在浓度 1 .0 0～ 2 0. 0 0ng·mL-1范围内呈良好线性 ,r=0. 9996 ,n =5。高 (2 0 . 0 0ng·mL-1)、中 (10 . 0 0ng·mL-1)、低 (1 .0 0ng·mL-1) 3个质控样本平均提取回收率分别为85 . 3%± 1 .3% ,84 .9%± 2 . 7% ,85 . 8%± 1 .8% ,方法回收率分别为 99 .5 %± 0 . 4 % ,10 2 . 1%± 1. 8% ,10 .1 3%± 2 .4 % ;日内(n =5 )和日间 (n =5 )RSD分别低于 3 .0 %和 7. 0 %。血浆样品检测限为 0 3ng·mL-1(S/N =3) ,定量限为 1ng·mL-1(S/N =10 ,RSD <7 .0 % )。结论　本法准确、灵敏、操作简便 ,为DL111 IT药代动力学研究提供了方法学基础。     

超高效液相色谱法测定复合维生素B片中4种成分的含量

目的 建立复合维生素B片中维生素B1、维生素B2、烟酰胺及维生素B6的超高效液相色谱含量测定方法.方法 采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),以0.005 mol·L-1 庚烷磺酸钠溶液(含0.15%的三乙胺,用冰醋酸调节pH值至4.3)-甲醇(80∶20)为流动相,流速为0.2 mL·min-1,柱温为30 ℃,检测波长280 nm.结果 维生素B1、维生素B2、烟酰胺及维生素B6分别在0.006~0.24、0.003~0.12、0.02~0.8、0.003~0.12 μg范围内呈现良好的线性关系,检出限(S/N=3)分别为0.32、0.14、1.25和0.18 ng,平均回收率分别为97.9%、100.1%、98.7%、98.1%,RSD均小于2.0%.结论 该方法简便快速,准确,重复性好,可用于复合维生素B 片4 种成分的含量测定.     

布洛芬原料药中残留有机溶剂和微量金属杂质的检测研究

目的:针对布洛芬的生产工艺,建立原料药中残留有机溶剂(二氯甲烷、乙醇)和微量金属杂质(铝、钴、镍)的检测方法。方法:残留溶剂采用顶空毛细管气相色谱法,使用DB-624毛细管色谱柱(30 m×0.53 mm,膜厚3.0μm),载气为氮气,检测器采用FID,柱温采用程序升温,顶空平衡温度80℃,平衡时间60 min,以N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂;金属杂质采用微波消解-石墨炉原子吸收法测定,通过石墨炉程序升温进行测定。结果:在残留溶剂的测定中,两待测组分之间的分离度为6.3,在测定浓度范围内r分别为0.9999和0.9998,检测限分别为0.2μg.g-1和2μg.g-1,加样回收率分别为101.1%和101.0%。在3种金属杂质的测定中,检测限分别为5 ng.g-1、5 ng.g-1和10 ng.g-1;在测定浓度范围内,r分别为0.9996,0.9993,0.9998;3种待测元素的加样回收率均大于90.0%;结论:测定方法准确可靠,灵敏度高,适用于布洛芬原料药中残留溶剂和微量金属杂质的分析检测。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆及组织中多柔比星含量

目的：建立高效液相色谱法测定大鼠血浆及组织样品中多柔比星的含量,并研究其在大鼠体内的分布特征。方法：生物样品经过液-液萃取后,采用HPLC-FLD法,色谱柱为Zorbax SB-C1（8150mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈和0.01mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（pH2.3）,梯度洗脱,流速为1mL·min-1,柱温为35℃;荧光检测器,激发波长为237nm,发射波长为555nm。结果：该法测定血浆中多柔比星的线性范围为2.5-500ng·mL-1,r=0.9991。其他组织的分析方法也均满足生物样品的测定要求。静脉给予5mg·kg-1多柔比星,结果显示其在大鼠体内分布广泛且持久,肾脏和脾脏及毒性靶器官心脏中浓度较高。结论：该方法准确度、灵敏度高,可以测定72h内多柔比星在主要组织中的分布,可用于研究心脏毒性与多柔比星＂量＂之间相关性。     

QuECHERS-HPLC-MS/MS测定祛痘化妆品中7种硝基咪唑类抗菌药物

目的建立测定祛痘化妆品中硝基咪唑类抗菌药物甲硝唑、地美硝唑、洛硝哒唑、异并硝唑及其代谢物羟基甲硝唑、羟基二甲硝咪唑和羟基异丙硝唑的方法。方法试样用0.1%甲酸乙腈溶液提取,通过QuEChERS净化后过滤膜上机检测,以ZORBAX SB-C18色谱柱分离,0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液作为流动相梯度洗脱,电喷雾正离子模式(ESI+),多重反应监测(MRM)扫描,外标法定量。结果 7种目标分析物在5.0~500.0ng·mL^-1内与峰面积均呈良好线性关系,相关系数均>0.995,在3个不同浓度添加水平下,平均加样回收率为87.9%~114.9%,相对标准偏差RSD(n=6)为0.4%~4.5%。方法的定量限为5~40μg·kg^-1,最低检测限为1.4~12.0μg·kg^-1。结论该方法具有净化效果好、操作简单、准确快速的特点,适用于祛痘化妆品中硝基咪唑类抗菌药物及其代谢物的检测。     

高效液相柱前衍生化法和高效液相荧光法测定栀子厚朴汤4种生物碱的比较

目的建立高效液相柱前衍生化法和高效液相荧光法测定栀子厚朴汤中4个生物碱,并比较两种方法优缺点。方法①高效液相柱前衍生化法：采用色谱柱Lichrospher C18（250mm×4．6mm,5μm）．以甲醇．水（57：43）为流动相;流速：1．0mL·min^-1;紫外检测器：257nm。②高效液相荧光法：采用色谱柱Lichrospher C18（250mm×4．6mm,5μm）,以[10mM己烷磺酸钠用磷酸调节pH至2．5]-甲醇（85：15）为流动相;流速为1．0mL·min^-1;荧光检测器：激发波长为281nm;发射波长为302nm。结果①高效液相柱前衍生化法：4个生物碱的线性范围为0．05～5μg·mL^-1（r≥0．9994）,平均回收率在96．2％～98．8％之间（RSD≤3．4％）。②高效液相荧光法：4个生物碱的线性范围为0．025～1μg·mL^-1（r≥0．9998）．平均回收率在100．0％～101．4％之间（RSD≤3．0％）。两种方法比较：从方法准确性、专属性、系统适应性、样品处理、峰面积的响应、检测限和定量限、流动相和色谱分离角度进行全面评价。结论两种方法准确、专属、灵敏．可用于桅子厚朴汤中4个生物碱的含量测定。与高效液相柱前衍生化法相比,高效液相荧光法更简单,灵敏度更高。     

水环境中6种残留药物的固相萃取-高效液相色谱分析方法研究

目的建立专属、灵敏的固相萃取-液相色谱分析方法测定污水处理厂出水中6种残留药物(氯霉素、青霉素、水杨酸、泼尼松、尼莫地平、辛伐他汀)的质量浓度。方法样品经PEP固相萃取小柱预处理后,用HPLC法测定。色谱柱:C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-体积分数0.2%乙酸水溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL.min-1;检测波长:230 nm。结果氯霉素、青霉素、水杨酸、泼尼松、尼莫地平、辛伐他汀质量浓度分别在0.2～20.0 mg.L-1、1.0～100.0 mg.L-1、0.1～10.0 mg.L-1、0.2～20.0 mg.L-1、0.1～10.0 mg.L-1、0.1～10.0 mg.L-1内线性关系良好,相关系数均大于0.999 3,精密度(RSD)为1.1%～1.9%,平均加样回收率在73.1%～100.2%内,样品溶液在12 h内稳定性良好。结论该方法简单、灵敏、准确,可用于水环境中残留药物的分析。     

GC-MS法测定药物制剂中邻苯二甲酸酯类化合物的含量

目的建立盐酸雷尼替丁制剂中邻苯二甲酸酯类化合物的检测方法。方法以甲醇为溶剂制备溶液;采用GC-MS法检测,使用DB-5MS色谱柱,载气为氦气,流速为1.0 mL·min-1,检测方式为SCAN和SIR。结果实验条件下,20种邻苯二甲酸酯类化合物能很好分离检测;各组分的检测限（S/N=3）大于2μg·g-1,线性范围在2～40μg·mL-1之间,r〉0.99;加样回收率在79%～99%之间,RSD〈10.8%。结论本法操作简便、准确,分离效果好,对色谱柱和仪器污染小,进样残留少,可同时测定口服固体制剂中的20种邻苯二甲酸酯类化合物。     

HPLC-PAD法同时测定精制银翘解毒胶囊中对乙酰氨基酚、绿原酸、连翘苷和牛蒡苷的含量

目的:采用HPLC-PAD法同时测定精制银翘解毒胶囊中对乙酰氨基酚、绿原酸、连翘苷和牛蒡苷的含量.方法:色谱柱:Capcell Pak C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(含0.25％的冰醋酸)梯度洗脱;检测波长:300 nm和228 nm;流速:1mL· min-1;柱温:30C.结果:对乙酰氨基酚测定的线性范围28.15～84.45 μg (r=0.9999),平均含量为235.06 mg·g-1,RSD为0.17％;绿原酸测定的线性范围0.2048～0.6144 μg (r=0.9998),平均含量为1.91 mg·g-1,RSD为0.21％;连翘苷测定的线性范围0.1054～0.3162μg (r=0.9994),平均含量为1.00 mg·g-1,RSD为0.32％;牛蒡苷测定的线性范围1.044～3.132 μg (r=0.9998),平均含量为7.04 mg·g-1,RSD为0.16％.结论:该法简便、灵敏、准确,适用于精制银翘解毒胶囊的质量控制.     

HPLC-FLD同时测定全血中加替沙星和莫西沙星含量

目的建立一种灵敏、可靠的全血中加替沙星和莫西沙星的高效液相色谱荧光检测方法。方法样品经磷酸盐缓冲液提取后,用Waters OasisMAX小柱进行净化,甲醇-乙腈-0.2%甲酸（15∶15∶70）为流动相,采用Cloversil-C18柱（3.0mm×150mm,5μm）分离,荧光检测波长：λex288nm和λem493nm,内标法定量。结果加替沙星和莫西沙星在15.0～240.0μg·L^-1内呈良好线性,方法回收率在97.7%～101.3%之间,日内RSD〈6.0%,其定量限为15.0μg·L^-1。结论本方法简便、灵敏、干扰少,特异性好,能满足血液中加替沙星和莫西沙星的检测要求。     

HPLC同时测定枸骨叶提取物中异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素的含量

目的 建立枸骨叶提取物中异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素的高效液相色谱同时测定方法.方法 采用高效液相色谱法,Phenomenex C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),甲醇-0.15%醋酸水为流动相梯度洗脱,检测波长:254 nm,流速:1 mL·min-1,柱温:30 ℃.结果 异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素分别在6.97~278.8 μg·mL-1范围和2.96~118.4 μg·mL-1范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.41%和97.43%.结论 该方法准确、可靠、重复性好,可用于枸骨叶提取物的质量评价与控制标准.