HPLC检测人血浆头孢丙烯及其药动学研究

目的 建立人血浆头孢丙烯检测的高效液相色谱方法,研究头孢丙烯分散片的人体药动学。方法 血浆经高氯酸沉淀,采用ZORBAX Eclipse XDB-C₈色谱柱;流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸-水(15∶40∶45),流速为1.0 mL·min^-1;检测波长282 nm。10名健康志愿者单剂量口服500 mg头孢丙烯分散片后,不同时间点抽取静脉血。用该方法检测血浆中头孢丙烯浓度,用DAS程序计算药动学参数。结果 头孢丙烯浓度在0.10~20.00 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 9);高、中、低3个浓度的相对回收率分别为(99.20±4.41)%,(98.07±3.94)%和(100.07±1.69)%;日内RSD分别为5.28%,5.19%和1.97%,日间RSD分别为4.38%,3.95%和1.33%。头孢丙烯在人体内符合一级吸收的一室模型,C_max为(8.79±1.09)mg·L^-1,t_1/2(ke)为(1.06±0.29) h。结论 本方法简便、快速、准确可靠,可满足药动学研究的要求。     

天麻素血药浓度测定及药动学研究

目的 建立天麻素血浆药物浓度LC-MS/MS测定法,测定健康受试者血浆中天麻素的浓度并评价天麻素胶囊的药动学。方法 建立以阿昔洛韦为内标的天麻素血药浓度LC-MS/MS测定方法,色谱柱为Atlantics T3(100 mm×3.0 mm,3 μm),流动相为乙腈-水(10∶90),对18名健康受试者单剂量口服150 mg天麻素胶囊进行药动学研究。结果 建立了简单、专属的天麻素血浆药物浓度的LC-MS/MS测定法,以沉淀法进行样品前处理,无杂质干扰测定,灵敏度达到了3.00 ng∙mL^-1,每个生物样品分析时间仅为2 min。18名健康受试者口服天麻素胶囊150 mg后,测定血浆样品并估算天麻素的药动学参数,T_max均值为(0.8±0.3)h,t_1/2均值为(2.1±0.4)h,C_max均值为(378±84)ng∙mL^-1,AUC_0-12 均值为(878±175)ng∙h∙mL^-1,AUC_0-∞均值为(897±175)ng∙h∙mL^-1。结论 本法快速、准确、灵敏度高且前处理简单,能很好的应用于药动学研究。     

HPLC荧光法测定高三尖杉酯碱在大鼠体内的分布

目的 研究高三尖杉酯碱注射液在大鼠体内的组织分布,为该药进行临床研究及合理应用提供依据。方法 生物样品在碱性条件下通过氯仿提取,用Kromasil C₁₈柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),乙腈-10 mmol·L^-1 KH₂PO₄缓冲液(含0.2%三乙胺,用H₃PO₄调pH至2.5)(25∶75)为流动相,荧光检测波长为λex 280 nm,λem 320 nm。结果 绝对回收率为91.27%~102.4%,最低检测限为0.5 ng·mL^-1。SD大鼠单次尾静脉注射高三尖杉酯碱注射液0.5,1,2 h后主要效应器官的浓度分布特点是：C_骨髓>C_心,主要消除器官的浓度分布特点是C_肝>C_肺>C_肾。结论 本法准确,灵敏度高,可用于高三尖杉酯碱的体内过程研究。高三尖杉酯碱在骨髓中有较高浓度分布,应引起重视。     

HPLC测定人血浆中霉酚酸及其代谢物浓度

目的 建立反相高效液相色谱法,同时测定人血浆中霉酚酸(mycophenolic acid, MPA)、酚化葡萄糖醛麦考酚酸(phenol glucuronide metabolite, MPAG)、酰基化MPAG(acyl-MPAG, AcMPAG)的浓度。方法 用蛋白沉淀法对样品进行处理。固定相为Zorbax Eclipse XDB C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 mm),流动相：甲醇: 20 mmol×L^-1 NaH₂PO₄(用20%磷酸调至pH 3.0)为55∶45,流速：1.2 mL×min^-1,检测波长：304 nm,柱温：45 ℃。结果 MPA、MPAG、AcMPAG浓度在0.2~50 mg×mL^-1(r=0.999 7)、2.8~531 mg×mL^-1(r=0.999 9)、0.3~24 mg×mL^-1( r=0.999 4)内呈良好的线性关系。MPA及其代谢物的绝对回收率均大于80%,MPA、MPAG、AcMPAG的相对回收率分别为94.0%~101.4%,98.4%~101.9%和96.1%~104.2%。日内及日间RSD远低于15%。结论 采用反相高效液相色谱法测定人血浆中MPA、MPAG、AcMPAG的浓度和进行药物代谢动力学研究,方法灵敏度高、重复性强     

LC-ESI-MS/MS快速测定人血浆中匹伐他汀浓度

目的 建立一种快速灵敏测定人体血浆中匹伐他汀浓度的高效液相色谱串联质谱检测方法。方法 以Agilent C18柱(4.6 mm×150 mm,3.5 μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.005 mol·L^-1甲酸铵水溶液-乙腈-1%甲酸水溶液(7.5∶2.5∶70∶20);流速：0.5 mL·min^-1,柱温：40 ℃。采用选择反应监测(SRM)对匹伐他汀(m/z 422.2→290.2)和内标瑞舒伐他汀(m/z 482.2→258.2)进行测定。结果 匹伐他汀高(80 μg·L^-1)、中(50 μg·L^-1)、低(0.25 μg·L^-1)3个浓度的平均回收率RSD均小于15%;线性范围为：0.1~100 μg·L^-1,回归方程为Y=1.222 6X-1.056 1×10^-4,r=0.996 0。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于匹伐他汀临床血药浓度监测和药动学研究。     

同时定量检测水胺硫磷和水胺氧磷的液相色谱-串联质谱法及应用

建立同时测定大鼠全血中水胺硫磷及其活性代谢产物水胺氧磷的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法,用于毒代动力学研究中血药浓度的测定。方法 采集大鼠全血样品后即刻用4倍体积冰冷乙腈沉淀蛋白。待测物用Zorbax SB C₁₈柱(2.1 mm×50 mm,1.8 μm)分离,以含有0.1%甲酸的水和甲醇为流动相系统进行梯度洗脱。采用ESI源正离子多反应监测模式分析,水胺硫磷、水胺氧磷和内标三唑磷的定量离子对分别为m/z 231→121、274→215和314→162。 结果 水胺硫磷和水胺氧磷在5 μg/L～5 mg/L浓度范围内线性良好,最低定量限为5 μg/L,回收率在63.1%～77.8%的范围内,准确度和精密度符合生物样品的检测要求。大鼠静脉注射3 mg/kg水胺硫磷后,水胺硫磷在血中很快下降,消除半衰期为22.2 min。活性代谢产物水胺氧磷的生成也较快,10～15 min达到(257.91±42.00)ng/ml的平均峰值,消除半衰期为17.6 min。水胺硫磷和水胺氧磷的AUC_0~t分别为(528.62±49.15)和(191.11±33.23)h ·μg/L。结论 本研究首次建立了同时定量测定大鼠全血中水胺硫磷和水胺氧磷的LC-MS/MS分析方法,方法的专属性好、灵敏度高,适用于水胺硫磷及水胺氧磷在大鼠体内的毒物代谢动力学研究。     

HPLC测定合成胸腺肽α1原料药和有关物质含量

目的　研究胸腺肽α1原料含量测定和有关物质考察方法。方法 采用反相高效液相色谱法测定,Vydac C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 mm);流动相：0.02 mol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH 7.00)-异丙醇(95∶5);柱温：25 ℃,检测波长：215 nm。结果 胸腺肽α₁线性范围为0.01~0.83 mg·mL^-1 (r=0.999 8)。最低检出量为10 ng。有关物质含量为2.5%~2.6%。结论 该方法简便、可靠、准确,可用于胸腺肽α1含量测定和有关物质考察。     

肾移植术后环孢素A血药浓度监测及其体内吸收评价

目的 探讨肾移植术后稳定患者口服微乳化环孢素A(CsA-ME)的剂量与其血药浓度谷值(C₀)和给药后2 h的血药浓度(C₂)的关系及其随时间的变化趋势,从而评价CsA-ME的体内吸收过程。方法 采用荧光免疫偏振法(FPIA)对92例肾移植患者术后不同时间内测定全血中环孢素A的C₀和C₂浓度,并分别与每位患者每日每千克体重的用药剂量(ND)相比,得出其相应的浓度(即C₀/ND,C₂/ND)。计算C₂/C₀比值并对所得数据进行统计分析。结果 肾移植患者术后1~3个月内,C₀/ND和C₂/ND均增加。C₀/ND从(43±15)增加到(56±20) (ng·mL^-1)/(mg·kg^-1),C₂/ND从(129±62)增加到(212±80) (ng·mL^-1)/(mg·kg^-1),表明药物的吸收逐渐增加。但术后3~12个月内,C₂/ND维持原有水平,C₀/ND则逐渐降低为48±15 (ng·mL^-1)/(mg·kg^-1),C₂/C₀比值则从4.5±1.9逐渐增加至5.2±2.3,表明药物在体内的消除代谢逐渐增加。术后3~12个月内,C₂/ND的个体间变异系数明显小于C₀/ND的个体间变异系数。结论 肾移植患者服用CsA-ME在术后3~12月内,其环孢素A在体内的累积清除率逐渐增加,表明术后一年内单纯用C₀作为监测指标已不能准确预测CsA-ME在体内的药物暴露总量,应结合C₂监测对于提高个体化的治疗将更有临床意义。     

丹参酮ⅡA自微乳制剂在大鼠体内血药浓度测定

目的 建立大鼠血浆中丹参酮ⅡA浓度的测定方法，考察丹参酮ⅡA自微乳制剂的药动学特征。方法 采用乙腈沉淀蛋白进行血浆预处理，以HPLC测定给药后大鼠血浆中丹参酮Ⅱ_A的浓度。色谱柱为Kromasil C₁₈柱(250 mm×4.6 mm，5.0 μm)，流动相为乙腈-0.01 mol·L^-1枸橼酸水溶液(80∶20)，流速1.0 mL·min^-1，检测波长：270 nm，柱温25 ℃。比较丹参酮Ⅱ_A自微乳制剂组和混悬液组大鼠血药浓度曲线的差异。结果 丹参酮Ⅱ_A在0.102~8.2 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.998 6)，绝对回收率为77.5%~85.6%，相对回收率为88.3%~96.8%，日内和日间精密度RSD均小于15%。丹参酮Ⅱ_A自微乳制剂比丹参酮Ⅱ_A混悬液的AUC值高约2.5倍。结论 本法可以准确、灵敏地测定大鼠血浆中丹参酮Ⅱ_A的浓度。将丹参酮Ⅱ_A制成自微乳制剂，能提高其生物利用度。     

HPLC检测人血浆中厄贝沙坦的浓度

目的 建立人血浆厄贝沙坦检测的高效液相色谱法。方法 血浆经乙醚萃取,以ZORBAX Extend-C₁₈为色谱柱;流动相为乙腈-水-0.1％TFA-0.5 mmol·L^-1 SDS体系,流速为0.8 mL·min^-1;检测波长为242 nm(0~6.5 min)和266 nm(6.5~7.8 min)。结果 厄贝沙坦浓度在0.05~6.00 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 9);定量限为0.05 mg·L^-1;高中低3个浓度的相对回收率分别为(103.93±1.09)%、(99.85±0.65)%和(100.95±1.21)%;日内RSD分别为3.04％,1.15％,1.19%,日间RSD分别为4.50%,3.32%,1.18%。结论 本方法准确可靠、简便快速,适用于人血浆厄贝沙坦浓度的测定及其药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的含量(英文)

目的建立了测定大鼠血浆中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)的液相色谱-串联质谱法。方法血浆样品经液-液萃取后,以甲醇-水(70∶30,V/V)为流动相,通过Restek PinnacleⅡC18柱分离,格列吡嗪为内标,选择负离子扫描方式,以多反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 531→m/z 431(DAS)和m/z 444→m/z319(格列吡嗪,内标)。结果DAS血浆浓度测定方法的线性范围为5～2500 ng/ml,定量下限为5 ng/ml。日内、日间精密度(RSD)均小于9.51%,准确度(RE)在-0.18%~1.93%。样品提取回收率为79.73%~85.99%,每个样品的测试时间为3 min。应用此法测试了大鼠口服或静注穿琥宁(DAS的单钾盐)后DAS的血药浓度,计算出其绝对生物利用度为3.69%。结论本方法灵敏度高、专属性强,适合于DAS的临床前药动学研究。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中泊沙康唑、氟康唑、伏立康唑的血药浓度

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定血浆中3个三唑类抗真菌药物（泊沙康唑、氟康唑、伏立康唑）的浓度。方法:采用WatersBEHC18（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）色谱柱,流速0.5 mL/min,流动相为甲醇（含2 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸）和2 mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）,梯度洗脱,柱温40°C。质谱条件采用电喷雾离子源,正离子多反应监测模式进行扫描分析。结果:泊沙康唑、氟康唑、伏立康唑的专属性良好,线性范围分别为0.083~20.680、0.328~82.075、0.080~20.085 μg/mL,范围内线性关系良好,r均大于0.99。批内、批间精密度（RSD）均小于7.60%,提取回收率和基质效应RSD值均小于14.2%,不同储存条件下稳定性良好,RSD值均小于10.69%。结论:该方法准确度高,重复性好,简便快捷,可同时测定3种血浆中三唑类抗真菌药的浓度,适用于临床对氟康唑、泊沙康唑及伏立康唑的治疗药物监测。     

苗药羊耳菊中7个抗炎活性成分在Raw264.7细胞中含量测定方法的建立

目的: 建立同时测定Raw264.7细胞中羊耳菊提取物中7个抗炎活性成分木犀草苷（luteolin,LUT）、绿原酸（chlorogenic acid,CA）、新绿原酸（neochlorogenic acid,NCA）、隐绿原酸（cryptochlorogenic acid,CCA）、3,4-二咖啡酰基奎宁酸（3,4-dicaffeoylquinic acid,3,4-DCQA）、3,5-二咖啡酰基奎宁酸（3,5-dicaffeoylquinic acid,3,5-DCQA）、4,5-二咖啡酰基奎宁酸（4,5-dicaffeoylquinic acid,4,5-DCQA）含量的方法。方法: 以小鼠巨噬细胞Raw 264.7为研究对象，采用超高液相色谱—三重四级杆质谱联用仪（UPLC-MS/MS）建立同时测定Raw 264.7细胞中LUT、CA、NCA、CCA、3,4-DCQA、3,5-DCQA、4,5-DCQA等7个成分含量的方法，包括专属性、线性、基质效应、回收率、准确度、精密度和稳定性等。结果: 建立了一个快速稳定测量Raw264.7细胞中微量药物的分析方法，该方法的最低定量限为0.48~3.84 ng/mL，准确度为（90.78±5.30）%~（113.99±13.51）%，提取回收率为（87.19±5.33）%~（103.59±14.00）%，基质效应为（94.50±15.17）%~（112.77±7.02）%，稳定性为（91.71±11.70）%~（109.45±10.63）%，能够满足测量的要求。结论: 建立了快速、准确的同时测定Raw264.7细胞羊耳菊提取物中7个活性成分（LUT、CA、NCA、CCA、3,4-DCQA、3,5-DCQA、4,5-DCQA）含量的UPLC-MS/MS方法，为开展羊耳菊提取物的细胞药代动力学研究奠定基础。     

LC-MS/MS法测定人血浆中8′-羟基二氢麦角隐亭浓度及其在生物等效性研究中的应用

建立一种快速测定人血浆中8′-羟基二氢麦角隐亭 (8′-OH-DHEC)浓度的LC-MS/MS 法,以曲马多为内标,采用C₁₈反相柱(150 mm×2.0 mm,5 μm),柱温35 ℃。流动相为甲醇-水(含0.1%甲酸),流速0.2 mL/min;电喷雾离子化(ESI),正离子扫描,选择性反应监测(SRM）8′-OH-DHEC m/z 594.3→270.0;曲马多m/z 264.1→58.3。本方法专属性强,8′-OH-DHEC在50~4 000 pg/mL 呈良好的线性关系,r =0.999 3,最低检测浓度为50 pg/mL,低、中、高浓度下的日内及日间精密度、准确度、稳定性等均符合生物样品测定要求。本方法应用于22名健康受试者口服4 mg 麦角隐亭的生物等效性研究,结果表明此方法专属性强,快速灵敏,适用于临床剂量下麦角隐亭药代动力学及生物等效性研究。     

LC-MS/MS法测定癫痫患者血浆中扑米酮的浓度

［摘要］ 〖HTH〗目的〖HTSS〗〖KG*2〗建立人血浆中测定扑米酮含量的高效液相色谱串联质谱（high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）方法,并用于测定癫痫患者体内的血药浓度。 〖HTH〗方法〖HTSS〗〖KG*2〗色谱柱：Phenomenex Kinetex XB-C18（50 mm×3 mm,2.6 μm）。流动相：甲醇（A）-2%甲酸水（B）,进行梯度洗脱。流量：0.4 mL/min。柱温：40 ℃。进样量：5 μL。以咖啡因为内标,用电喷雾离子源进行正离子模式监测,多反应监测模式进行定量分析,源喷射电压5 500 V,离子源温度600 ℃。考察该方法的专属性、标准曲线及定量下限、精密度、回收率、稳定性及基质效应。选取20例临床口服扑米酮的癫痫患者（起始剂量为50 mg,1次/d;3 d后改为50 mg,2次/d;7 d后改为50 mg,3次/d;10 d后改为250 mg,3次/d）,于2周后清晨取静脉血2 mL。用LC-MS/MS法测定扑米酮的血药浓度。 〖HTH〗结果〖HTSS〗〖KG*2〗扑米酮在1~5 mg/L,最低定量下限为0.01 mg/L。平均回收率在95%以上,日间、日内精密度的相对标准偏差值均小于15%,稳定性良好。用该方法测定20例癫痫患者血样,其血药浓度范围为8.75~36.88 mg/L。 〖HTH〗结论〖HTSS〗〖KG*2〗本法方便、快捷、专属性好、敏感度高、结果准确,可用于测定癫痫患者血浆中的扑米酮浓度。     

LC-MS／MS法测定大鼠血浆中3种丹参酮浓度及药动学研究

目的：建立LC-MS／MS法测定大鼠血浆中丹参酮I、隐丹参酮及丹参酮IIA的浓度,并对大鼠口服丹参酮提取物后的3种丹参酮成分进行药代动学研究。方法：血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以甲醇（含O．1％甲酸）一水（含0．1％甲酸）为流动相,梯度洗脱,采用AgilentZorbaxSB-C18（2．11T11TI×150lrllrt,5斗m）色谱柱分离,质谱以电喷雾离子源,选择反应监测（SRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m／z277．1→249．1（丹参酮I）,m／z297．1→251．2（隐丹参酮）,m／z295．1→277．1（丹参酮IIA）和m／z360．9→233．0（内标,非诺贝特）。结果：丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮IIA的线性范围为2-100ng·mL-1,日内、日间精密度（RSD）均小于12．0％,高、中、低3种浓度平均方法回收率均大于89．4％。结论：本方法灵敏、简便,可用于丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮IIA的药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS同时检测大鼠血浆中阿托伐他汀和伏立康唑的浓度

目的建立并应用同时测定大鼠血浆中阿托伐他汀和伏立康唑浓度的液相质谱联用方法（HPLC-MS/MS）,研究阿托伐他 汀单独给药及与伏立康唑联合给药后,大鼠体内阿托伐他汀的药动学变化以及伏立康唑的浓度变化。方法采用醋酸钠酸化, 甲基叔丁基醚液-液萃取法处理血浆样品,经Thermo Hypersil Gold C1（8 2.1×100 mm, 1.9 μm）色谱柱分离,流动相为乙腈-0.1%甲 酸水溶液,梯度洗脱,分析时间6 min;质谱检测采用加热电喷雾离子源（H-ESI）正离子扫描方式,选择反应监测（SRM）模式检 测,选用m/z559.2→440.2（阿托伐他汀）、m/z350.2→281（伏立康唑）、m/z370.2→252（内标兰索拉唑）作为定量分析的离子。结 果阿托伐他汀在0.01~100 ng/mL（r=0.9957）,伏立康唑在0.025~100 ng/mL（r=0.9966）范围内线性关系良好,阿托伐他汀和伏 立康唑的日间和日内精密度均小于13%,提取回收率66.50%~82.67%,血浆样品稳定性符合测定要求。单独给药和联合给药后 大鼠血浆中阿托伐他汀的AUC0-24 h分别为（438.78±139.61）和（927.43±204.12)）h·μg·L-1,CLz/F分别为（23.89±8.14）和（10.43± 2.58）L·h-1·kg-1,Cmax分别为（149.62±131.10）和（159.37±36.83）μg·L-1,t1/2分别为（5.08±1.63）和（5.58±2.11）h,Tmax分别为（0.37± 0.14）和（3.60±1.52）h,其中AUC0-24 h和CLz/F,Tmax具有显著性差异（P<0.05）。同时可测定合并给药组中伏立康唑的血药浓度。 结论本方法简单快速,灵敏度高,可用于同时检测大鼠血浆中阿托伐他汀和伏立康唑的浓度。伏立康唑和阿托伐他汀联用,使 阿托伐他汀的部分药代动力学参数发生了改变。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中的野漆树苷及其药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中野漆树苷的LC-MS/MS测定方法,并研究静脉注射后野漆树苷在大鼠体内的药代动力学特征。方法大鼠血浆样品经乙酸乙酯萃取处理,用色谱柱Phenomenex C8（30 mm×2.00 mm,3μm）进行分离,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源（ESI）,负离子模式,多反应监测（MRM）,选择离子分别为野漆树苷（m/z 577.6→269.1）,内标柚皮素（m/z 271.0→151.0）,将建立的方法应用于测定大鼠静脉注射野漆树苷后血浆的药物浓度,并采用DAS 2.0计算得主要药代动力学参数。结果大鼠血浆中野漆树苷在1～2000μg/L浓度范围内线性关系良好,日内、日间精密度（RSD）均＜10%,准确度（RE）在±7%之间,低、中、高3个浓度下提取回收率为86.8%～91.0%,无明显基质效应且稳定性良好。大鼠静注该药（5 mg/kg）后AUC0-t为（72627.8±18067.9）μg·min/L,t1/2为（52.1±14.3）min,CLz为（0.07±0.02）L/（min·kg）。结论该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于野漆树苷血药浓度监测及其药动学研究。药代动力学参数表明大鼠静注该药后体内消除较快。     

LC-MS/MS法定量检测恩格列净原料药中杂质的含量

目的：建立一种LC-MS/MS法用于定量检测恩格列净原料药中杂质X（简称EPLZ-X）的含量。方法采用Thermo BDS C18（4.6 mm ×100 mm,2.4μm）色谱柱,以乙腈-水（75∶25,V/V）为流动相,流速0.7 ml/min。质谱扫描方式选用正离子模式,用于定量的多反应监测（MRM）离子对为m/z 785→m/z 475（CE为43 V）和m/z 785→m/z 418（CE为50 V）。结果在0.5~100.6 ng/ml范围内线性关系良好,低、中和高浓度质控样品的日内精密度分别为5.9%、5.4%和7.9%。日间精密度分别为6.3%、11.8%和10.7%,加样回收率分别为105.1%、109.8%、102.6%,最低定量下限为0.5 ng/ml。结论使用此法成功测定了3批原料药中该杂质的含量,均符合要求（不得超过60×10-6 g）。本法专属性强,灵敏度高,可用于其他批次样品的分析。     

HPLC-MS/MS法测定血浆中华法林对映异构体浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中华法林对映异构体的浓度。方法 以乙酸乙酯为萃取剂,采用MS Chiral? MS-OD(50×2.1 mm, 3 μm)为手性柱,流动相为甲醇∶水∶甲酸=85∶15∶0.05,流速为0.18 mL/min。采用负离子模式,电喷雾离子源（ESI）,以萘普生为内标定量,华法林和内标的检测离子对质荷比分别为（m/z）307.2→160.9和（m/z）228.9→185.1。结果 R-华法林批内精密度,其相对标准偏差(RSD)为3.2%~5.8%,批间RSD为2.5%~5.1%;方法回收率(96.1±5.6)%~(105.4±4.7)%,提取回收率80.7%~84.4%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%;S-华法林批内精密度RSD为3.7%~5.2%,批间RSD为3.2%~4.8%;方法回收率(98.3±5.1)%~(103.7±3.8)%,提取回收率81.3%~84.6%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%。最低定量限均为0.1 μg/mL。结论 本文建立的方法准确、灵敏、可靠,可用于人血浆中华法林对映体的拆分和血药浓度的测定。