RP-HPLC同时测定知母中芒果苷和新芒果苷含量

 目的 建立一种RP-HPLC测定知母及其总黄酮提物、片剂中芒果苷和新芒果苷含量的方法。方法 采用色谱柱为C₁₈-ODS反相柱,Hypersil填料(200mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05 mol·L^-1 NaH₂PO₄(pH3.20)(10:90),检测波长317nm。结果 芒果苷和新芒果苷分别在2.0～40.5,3.0～59.2μg·mL^-1的浓度内呈良好的线性关系(r=0.9997,0.9995)。回收率分别为96.4%(RSD=1.79％,n=5),97.1％(RSD=2.14％,n=5)。结论本法简便,准确,灵敏度高,重现性好,可用于该药材及其制剂原料中芒果苷和新芒果苷的含量测定。     

高效液相色谱法测定山楂中枸橼酸的含量

 目的建立山楂中枸橼酸的高效液相含量测定方法。方法 高效液相色谱法,Zorbax-sb C₁₈柱,磷酸二氢铵-磷酸缓冲液为流动相,流速1.0 mL·min^-1;检测波长为210nm;柱温25℃。结果枸橼酸回归方程Y=3510.8+56992.3X,r=0.999 9,线性范围0.79～15.96μg。生山楂中枸橼酸平均回收率为103.4％,RSD=0.9％;焦山楂中枸橼酸平均回收率为98.8％,RSD=2.8％(n=5)。结论该方法简便易行,可用于山楂饮片中枸橼酸的含量测定。     

RP-HPLC测定人血浆中咪唑斯汀浓度

 目的测定人血浆中咪唑斯汀的浓度方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为日本HiQ silC₁₈ V(4.6 mm×150 mm,5μm),检测波长为285nm,流动相为0.025 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液-乙腈-甲醇(75:25:5)(pH=2.58).流速0.5 mL·mm^-1。结果回归方程Y=0.002 8X+0.0013(r=0.999 4),其线性范围为20.8～554.7 ng·mL^-1,最低检测浓度为13.87 ng·mL^-1(S/N>3),提取回收率在77.93%～88.84%之间(RSD为2.49%-7.45%),日内和日间RSD分别为4.58%～8.25%和2.08%～7.65% 结论该法操做简便、快速、准确、重现性好,适用于咪唑斯汀的药动学研究。     

高效液相色谱法同时测定双嘧达莫和阿司匹林的血药浓度

 目的建立高效液相色谱法测定血浆中双嘧达莫及阿司匹林的浓度。方法 色谱柱:Hypersil BDS(200 mm×4.6 mm5μm,大连依利特);流动相:乙腈-甲醇-水-磷酸-二乙胺(50:250:200:0.3:0.1):流速:0.9 mL·min^-1;检测波长:288 nm。结果阿司匹林、双嘧达莫在0.1～16μg·mL^-1浓度内进样量与色谱峰面积呈良好的线性关系。阿司匹林r=0.994 2,双嘧达莫,r=0.9947,回收率分别为101.21％,100.35％,精密度测定RSD小于1.78％。阿司匹林及双嘧达莫的t_max分别为1.75和3.33h,c_max分别为7.71,3.68μg·mL^-1,t_1/2分别为2.71,3.13 h。结论该方法灵敏、准确、经济。用此法测定了家犬口服复方双嘧达莫缓释胶囊的血药浓度并计算了药动学参数。     

RP-HPLC测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯含量

 目的建立了反相高效液相色谱法同时测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯的方法。方法采用Phenomenex Kromasil C₁₈色谱柱(4.6mm×250mm,5.0μm);流动相为乙腈-0.04%磷酸溶液(50∶50);检测波长:194nm;流速:1.0mL.min^-1。结果异构体土木香内酯和异土木香内酯达到基线分离,含量测定的线性良好,线性范围和相关系数分别为0.07～4.80μg·L^-1(r=0.9998),0.07～4.85μg·L^-1(r=0.9998);回收率分别为97.5%和102.1%;方法精密度良好,RSD分别为1.56%和1.87%(n=5);方法重现性良好,RSD分别为1.67%和0.92%(n=5)。结论所建立的方法简便、快捷、准确,重现性好,可用于藏木香药材及其制剂的质量控制。     

异亚丙基莽草酸原料及其制剂抗栓素片的含量及稳定性研究

 目的建立抗栓素片中异亚丙基莽草(ISA)的含量测定方法。方法采用RP-HPLC,Nova-pak-C₁₈柱(3.9mm×150mm,4μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液(15:85);检测波长:220nm;流速:0.8mL·min^-1。结果异亚丙基莽草酸在0.1024～4.7268μg线性关系良好,r=0.9999(n=6),平均回收率为103.04%,RSD为1.21%(n=5)。结论本方法灵敏、准确、操作简便,重现性良好。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中氟伐他汀浓度及其药动学研究应用

 目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中氟伐他汀的浓度,以用于药动学研究。方法采用体积分数0.2%磷酸乙腈溶液沉淀100μL血浆样品蛋白,高速离心后上清液直接进样分析。分析柱Kromasil C₁₈色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相0.02mol·L^-1磷酸二氢钾溶液-乙腈(53∶47);流速1.2mL·min^-1;检测器荧光检测器(激发波长305nm,发射波长390nm)。以外标法定量,进行方法学确证试验,并用于20名健康志愿者单剂量po40mg氟伐他汀胶囊(来适可)的药动学研究。结果本方法专属性强,内源性杂质和代谢物不干扰氟伐他汀的出峰。在2～600μg·L^-1内线性良好,相关系数r=0.999999(n=6)。定量限为2μg·L^-1。高、中、低质控样品的日内、日间RSD均小于10%,方法学回收率为95.0%～100.9%,平均提取回收率为111.4%。药-时曲线提示,氟伐他汀在中国人体内处置过程存在较大的个体差异。ρ_max,t_max,t_1/2和AUC_0～t值分别为(491.4±211.4)μg·L^-1,(0.6±0.2)h,(1.1±0.3)h和(540.2±226.5)μg·h·L^-1。结论本测定方法稳定、操作简便、快速、准确、灵敏,可用于氟伐他汀药动学的研究。中国人群中的ρ_max,AUC_0-t显著高于白人,而且还具有吸收更快、末端相消除更快的特点。     

高效液相色谱法测定华细辛中马兜铃酸A含量

 目的测定华细辛中马兜铃酸A的含量。方法建立高效液相色谱方法,采用Agilent Zorbax SB-C₁₈色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-1%冰醋酸水溶液(39:61)为流动相,流速为0.8mL·min^-1,检测波长为317nm,分别测定20个华细辛样品中马兜铃酸A的含量。结果高效液相色谱法的回收率为98.9%,RSD为2.1%,标准曲线回归方程为y=2.40x+0.267, 在5.2～68ng内呈良好线性关系。结论华细辛中马兜铃酸A含量在6.8～45.4μg·g^-1。     

高效液相色谱法测定西酞普兰血药浓度

 目的建立高效液相色谱法测定西酞普兰血药浓度。方法采用液-液萃取法,用正己烷-异戊醇(98:2)提取血浆中西酞普兰,选用普萘洛尔为内标。色谱柱为NucleodurCN(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-30mmol·L^-1KH₂PO₄缓冲液(0.1%三乙胺,pH5.0)(40:60),激发波长:236nm,发射波长:306nm,流速:1.3ml·min^-1,柱温:室温。结果本法线性范围在1-75μg·L^-1(r=0.9996)。平均方法回收率为(96.8±5.0)%(n=15),日内RSD≤8.6%,日间RSD≤9.6%。结论本法简单、快速、准确,可用于临床血药浓度监测及人体药动学研究。     

HPLC同时测定复方布洛芬软胶囊中布洛芬、对乙酰氨基酚的含量

 目的采用高效液相色谱法同时测定复方布洛芬软胶囊中布洛芬和对乙酰氨基酚的含量。方法采用氰基色谱柱,以磷酸盐缓冲液(pH6.6)-甲醇(60:40)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为223nm,柱温30℃,外标法测定。结果布洛芬和对乙酰氨基酚与已知杂质时氨基酚、对氯苯乙酰胺之间能够达到很好分离,理论板数以对乙酰氨基酚峰计为12 696,以布洛芬峰计为4 188;布洛芬的线性范围为0.21～124.86μg·mL^-1,r=0.999 9(n=9),平均回收率为99.80%,RSD=0.26%;对乙酰氨基酚的线性范围为0.17～100.14μg·mL^-1,r=0.999 9(n=9),平均回收率为99.82%,RSD=0.28%;两组分精密度分别为0.31%和0.36%,结果良好。结论该法能够同时准确测定两组分的含量,而且简便、准确、快速,可用于批次样品的含量测定及质量控制。     

固相萃取和高效液相色谱-荧光法测定普萘洛尔贴剂对家兔给药后血药浓度

 目的建立家兔体内普萘洛尔血药浓度的测定方法。方法用Waters Oasis HLB柱萃取血清中的普萘洛尔,用Xterra C₁₈色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为甲醇-0.05mol·L^-1的碳酸氢铵水溶液(pH9.5),(48:52),流速1.0mL·min^-1。用高效液相色谱-荧光法测定普萘洛尔血药浓度。结果普萘洛尔血药浓度在5～160μm·L^-1内线性良好,相关系数为0.9996,最低检测浓度为2μg·L^-1。低、中、高浓度时普萘洛尔的方法回收率分别为93.25%,94.30%和96.20%,萃取回收率分别为89.31%,92.45%,94.27%。日内和日间精密度RSD分别小于4.0%和7.0%。结论建立了简单、快速和准确的家兔体内普萘洛尔血药浓度的固相萃取和高效液相色谱-荧光测定方法。透皮贴剂中的普萘洛尔可以平稳地透过家兔皮肤,稳定地控释达2d。     

HPLC测定盐酸头孢吡肟的含量和有关物质

 目的建立盐酸头孢吡肟有关物质及含量的分析方法。方法使用C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm),检测波长为257nm。测定有关物质时,为线性梯度洗脱,流动相A为0.005mol·L^-1磷酸二氢铵-乙腈(93:7),流动相B为0.005mol·L^-1磷酸二氢铵-乙腈(70:30);测定含量时,为等度洗脱,流动相为0.005mol·L^-1磷酸二氢铵-乙腈(93:7)。结果盐酸头孢吡肟与其中间体、降解产物及E异构体分离良好。结论方法简便、专属,可用于盐酸头孢吡肟含量及有关物质的测定。     

HPLC测定富马酸福莫特罗粉吸入剂单次喷射量均匀度

 目的 测定富马酸福莫特罗粉吸入剂单次喷射量均匀度。方法 采用高效液相色谱,用Lichrospher 60 RP-select B色谱柱(4.6mm×150mm),以无水乙醇-磷酸盐缓冲溶液(pH 3.1)(16:Sd)为流动相,检测波长为214nm。结果 富马酸福莫特罗在0.054-0.536μg·mL^-1浓度范围内,峰面积与浓度呈良好线性,r=0.9999(n:5),回收率分别为99.6％(每吸4.5μg)和100.2％(每吸9.0μg)。结论方法简便、准确、稳定、重现性好。     

高效液相色谱法测定人乳汁中枸橼酸芬太尼浓度

 目的建立剖宫产产妇乳汁中枸橼酸芬太尼浓度测定的HPLC方法,并考察剖宫产产妇应用枸橼酸芬太尼镇痛泵镇痛后,芬太尼在乳汁中的分布情况,探讨剖宫产术后新生儿的合理哺乳时间。方法1mL乳汁中加入0.5mol·L^-1NaOH200μL碱化,涡旋30s,再加入环己烷5mL,涡旋2min,于2000r·min^-1离心20min,静置10min,取上述有机相4mL于另一干净试管中,在N₂流下吹干,残渣用流动相350μL溶解,进样量100μL。采用AgillentZorbaxSB-C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.015mol·L^-1磷酸二氢钠-乙腈(60∶40)为流动相,流速为0.7mL·min^-1,于200nm波长下检测。结果枸橼酸芬太尼在40～2000μg·L^-1内线性关系良好(r=0.9997),方法回收率为85.3%～101.6%,乳汁低、中、高3种浓度的萃取回收率(n=5)分别为62.7%,66.3%,65.6%;RSD(n=5)分别为8.11%,6.72%,4.83%;方法回收率(n=5)分别为86.1%,96.4%,103.7%,日内和日间精密度RSD小于12%。结论本法操作简单,灵敏,准确,重现性好,能满足临床对芬太尼乳药浓度的测定,可用于芬太尼在乳汁中的浓度分布研究。     

人红细胞中巯嘌呤甲基转移酶活性的HPLC测定法

 目的建立人红细胞中巯嘌呤甲基转移酶(thiopurinemethyltransferase,TPMT)活性的HPLC测定法,为初步考察汉族健康人及自身免疫病患者TPMT活性分布状况及TPMT遗传多态性对硫唑嘌呤药动学影响提供方法学基础。方法以S-腺苷L-甲硫氨酸(S-adenosyle-L-methionine,SAM)作为甲基供体,6巯基嘌呤(6mercaptopurine,6MP)作为酶反应底物,TPMT催化6MP生成6甲基巯基嘌呤(6methylmercaptopurine,6MeMP),采用二氯甲烷异丙醇(80∶20)萃取6MeMP,常温下氮气吹干,120μL流动相复溶,10～50μL进样分析。色谱条件ShimpackCLCODS(6mm×150mm,5μm)柱;流动相甲醇水三乙胺(24∶756∶04),磷酸调至pH7,流速为10mL·min^-1;紫外检测,λ=290nm。结果该方法在50～2000ng·mL^-1内线性良好,相关系数r=09996,斜率变异系数RSD=473%(n=7);高、中、低浓度质控样本的批内、批间RSD在111%～429%之间,回收率在949%～1032%之间(n=7)。结论该方法灵敏、准确、重现性好,满足临床研究需要。     

吴茱萸水溶性成分指纹图谱研究

 目的建立吴茱萸水溶性成分的HPLC指纹图谱,为鉴定吴茱萸药材提供依据。方法色谱柱:YWG-C18(250mm×4.6mm,10μm),流动相:乙腈-0.4%磷酸梯度洗脱,流速:0～8min为1.0mL·min^-1,8-20min为0.5mL·min^-1,20-35min为1.0mL·min^-1,检测波长327nm,柱温30℃,进样量20μL。结果测定的10批吴茱萸样品有15个共有峰,共有峰相对保留时间的RSD为0.24%～1.3%,相对峰面积的RSD为11.8%～59.3%。10批样品之间的重叠率均在0.80以上,共有峰占总峰面积均约在90%。结论本实验首次建立了中药吴茱萸中水溶性成分的HPLC指纹图谱,为吴茱萸药材的真伪鉴别提供了科学依据。     

高效液相色谱法测定艾拉莫德及其片剂的含量

 目的建立高效液相色谱法测定艾拉莫德含量的方法。方法色谱柱Waters Symmetry C₁₈柱(3.9mm×15cm,5μm);检测波长257nm;流动相甲醇-0.1%磷酸(42∶58);流速1.0mL·min^-1。结果在0.01～4μg内有良好的线性关系,线性相关系数为0.9999,精密度小于1.0%(n=5)。结论本方法简便、准确,可用于艾拉莫德含量测定。     

人血清中伊立替康的液质联用测定方法

 目的　建立高效液相-质谱联用法(LC-MS)测定人血清中伊立替康(CPT-11)的浓度。方法　液相 :采用WatersSymmetryC₁₈色谱柱(2.1mm×150mm,5μm) ;流动相 :甲醇-5mmol·L^-1甲酸铵缓冲液(38∶62);流速:0.2mL·min^-1。质谱:电喷雾电离源(ESI⁺ ) ,选择性离子监测 (SIR)质荷比 (m/z)为 587。以盐酸洛贝林为内标 ,采用乙腈沉淀蛋白 ,上清液经酸化后进样分析。结果　本方法在 10～10000ng·mL^-1内线性良好,相关系数r=0.996.7(n =7)。高、中、低浓度质控样品的批内RSD均在2.70%～4.58% ,批间RSD均在2.74%～5.82%,方法学回收率为98.21%～110.49%,最低检测浓度为0.2ng·mL^-1。结论　本方法灵敏度高,操作简便易行 ,完全能满足体内低药物浓度的测定,可用于该药临床药物动力学特性的研究。     

高效液相色谱法测定接骨胶囊中阿魏酸、补骨脂素及异补骨脂素的含量

 目的建立以高效液相色谱法测定接骨胶囊中阿魏酸、补骨脂素及异补骨脂素含量的方法。方法以甲醇-1%冰醋酸(40∶60)为流动相,于330 nm波长处,以外标法测定。结果阿魏酸在0.25～8.0 μg·mL^-1;补骨脂素在0.75～12.0 μg·mL^-1;异补骨脂素在1.0～16.0 μg·mL^-1范围内,浓度与峰面积线性关系良好(r=0.9999,0.9998及0.9997)。平均回收率为：96.60%,101.1%,99.62%;RSD为0.86%,0.93%,0.74%。结论此种方法灵敏、准确、简便。