N-CWS对小鼠膀胱癌抑癌效应的影响--白细胞介素2水平及自然杀伤细胞活性观察

目的:探讨红色诺卡氏菌细胞壁骨架（Nocardiarubracellwallskeleton,N-CWS）对膀胱肿瘤的治疗效果及免疫学机制。方法：膀胱癌荷瘤鼠注射N-CWS,观察N-CWS的抑瘤效果及N-CWS对白细胞介素2（IL-2）水平和自然杀伤（NK）细胞活性的影响。结果：注射N-CWS的膀胱癌荷瘤鼠的抑瘤率为96.2％,其IL-2水平及NK细胞活性明显高于肿瘤对照组。结论：N-CWS对膀胱癌具有明显的抑制作用,其机制可能是通过提高机体的IL-2水平和NK细胞活性促进机体的抗肿瘤免疫而实现的。     

红细胞生成素对血透患者自然杀伤细胞活性的影响

目的 探讨血透患者自然杀伤细胞(NK)活性与贫血之间的关系。方法 采用LDH释放法,对12例血透接受重组人红细胞生成素(rHuEPO)治疗前后血红蛋白(Hb)水平和NK活性进行观察。结果 经rHuEPO治疗后,患者Hb和NK活性均有明显提高,但rHuEPO对NK细胞并无刺激作用,而红细胞对NK细胞活性有明显的增强作用。结论 血透患者的NK细胞活性低下与贫血有关,rHuEPO提高NK细胞活性的作用是通过改善贫血而非rHuEPO的直接作用。     

西咪替丁对肝癌射频消融患者细胞免疫功能的影响

目的研究西咪替丁(Cim)在短期内对肝癌射频消融(RFA)患者细胞免疫功能的影响。方法 39例肝癌患者随机分成RFA加Cim组(治疗组)和RFA组(对照组),用乳酸脱氢酶释放法测定入院时、RFA术前、术后第2天和第7天的NK细胞活性。结果 39例肝癌患者外周血NK细胞活性明显低于正常人(P< 0．01)。入院时和RFA术前治疗组与对照组间各基本指标无显著性差别(P>0．05)。术后第2天,两组NK 细胞活性均较入院时明显降低(P<0．05)。术后第7天,治疗组NK细胞活性较入院时和术后第2天明显增高 (P<0．01),治疗组NK细胞活性明显高于对照组(P<0．05)。结论肝癌患者细胞免疫功能下降,RFA术后细胞免疫功能进一步受到损害;Cim能在短期内增强机体的细胞免疫功能,可作为肝癌患者RFA术的一种重要辅助治疗。     

腹膜透析和血液透析对终末期肾病患者免疫功能的对比研究

目的:探讨腹膜透析和血液透析对终末期肾病患者NK细胞和T细胞亚群的影响。方法:选取2010年6月~2014年3月我院收治的126例终末期肾病患者作为研究对象,按照治疗方法将患者随机分为腹膜透析组和血液透析组。腹膜透析组患者行非卧床持续性腹膜透析,血液透析组行常规血液透析。分别于透析前和透析后6个月采集静脉血,采用流式细胞术对两组患者血液中CD+3CD4、CD+3CD+8T淋巴细胞比例、CD4/CD8比值、调节性T细胞比例以及NK细胞的比例比较分析。采用MTT法检测NK细胞的活性。结果:腹膜透析组和血液透析组患者治疗前CD+3CD4、CD+3CD+8、CD4/CD8比值、调节性T细胞比例以及NK细胞的比例及活性比较差异无统计学意义(P0.05)。两组治疗后CD+3CD4T淋巴细胞比例、CD4/CD8比值、Treg细胞比例、NK细胞比例及活性较治疗前显著下降,而CD+3CD+8T淋巴细胞比例无变化(P0.05)。血液透析组患者治疗后外周血中CD+3CD4T淋巴细胞比例、CD4/CD8比值、Treg细胞比例、NK细胞比例及活性下降较腹膜透析组更为显著(P0.05)。两组治疗后组内CD+3CD+8T淋巴细胞水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:腹膜透析和血液透析会导致患者免疫系统功能低下,其中血液透析对患者免疫系统影响更大。     

榄香烯预防浅表性膀胱癌术后复发的临床观察

目的　观察榄香烯膀胱内灌注预防浅表性膀胱癌术后复发的疗效及毒副反应。　方法　膀胱癌术后患者123例,均为浅表性膀胱癌(T1 ),其中移行细胞癌Ⅰ级37例,Ⅱ级73例,Ⅲ级13例。随机分为2组,榄香烯治疗组63例,丝裂霉素对照组60例,分别采用榄香烯注射液及丝裂霉素C行膀胱内灌注,观察2组肿瘤复发情况、毒副反应及治疗前后血NK细胞活性。　结果　榄香烯组平均随访19. 7个月,复发5例,复发率7. 9%;灌注后出现膀胱刺激症状2例(3. 2% ),无严重血尿及尿道狭窄;患者治疗前血NK细胞活性为(20±2)%,治疗后为(28±2)%,治疗前后比较差异有统计学意义(P<0. 05)。丝裂霉素组平均随访19. 4个月,复发15例,复发率为25. 0%;灌注后出现膀胱刺激症状11例(18. 3% ),严重血尿3例(5. 0% ),尿道狭窄1例(1. 7% )。2组术后复发率、毒副反应发生率差异有统计学意义(P<0. 05)。　结论　榄香烯注射液膀胱灌注预防浅表性膀胱癌术后复发有良好疗效,毒副反应少,是一种值得推广的新方法。     

肿瘤浸润性淋巴细胞对乳腺癌患者细胞免疫功能的影响

目的 探讨肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）对乳腺癌患者细胞免疫功能的影响及临床意义。方法 从肿瘤组织分离培养的TIL,对25例乳腺癌患者进行治疗,检测治疗前后T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞（NK细胞）活性及血清可溶性白介素－2受体（sIL-2R)水平的变化。结果 经TIL治疗后患者外周血CD3、CD4、CD4／CD8和NK细胞活性均明显增高,CD8、sIL-2R水平明显降低。结论 TIL能提高乳腺癌患者的细胞免疫功能。     

膀胱癌免疫治疗相关肿瘤微环境及其在人和小鼠肿瘤中的组成特征初探

目的 应用生物信息学分析鉴定膀胱癌免疫治疗中起关键作用的肿瘤微环境（TME）组成特征,初步分析这些组分在人膀胱癌组织和BBN（N-butyl-N-（4-hydroxybutyl）-nitrosamine）诱导的自发小鼠膀胱肿瘤中表型的相似性。方法 分析晚期膀胱癌PD-L1阻断治疗IMvigor210数据集,利用DESeq2筛选与疗效相关的差异基因,通过GO和KEGG通路富集分析找出差异富集的通路;采用IOBR分析TME中的细胞浸润特征。通过TCGA数据库分析差异浸润细胞基因集与膀胱癌预后和分期的关系,在我院32例膀胱癌组织标本中进行免疫组化验证。建立BBN诱导的自发小鼠膀胱肿瘤模型,通过H&E染色和免疫组化对BBN诱导的自发小鼠膀胱肿瘤和人膀胱癌进展相似性及其TME主要组分进行比较。结果 在IMvigor210数据集中存在521个与免疫治疗疗效相关的差异基因,其中44个差异基因富集在含胶原细胞外基质上,提示成纤维细胞与免疫治疗疗效相关。TME分析发现细胞周期、组蛋白等肿瘤细胞基因集与NK细胞、CD8⁺ T细胞基因集在膀胱癌免疫治疗有效组中富集,而炎症性肿瘤相关成纤维细胞基因集在免疫治疗无效组中富集。TCGA分析显示：NK细胞和CD8⁺ T细胞基因集与膀胱癌患者总体生存时间呈正相关,CD56表达与膀胱癌病理分期呈正相关;PDGFRB表达与膀胱癌病理分期呈正相关。相比于低分期膀胱癌,PDGFRB⁺成纤维细胞在高分期膀胱癌中数量更多。在BBN小鼠模型中,BBN诱导的自发小鼠膀胱肿瘤发生率随着诱导时间逐渐升高,最终发展为肌层浸润性膀胱癌。免疫组化染色显示：小鼠和人膀胱肿瘤的TME中NK细胞和CD8⁺ T细胞以及成纤维细胞的浸润特征相似。结论 本研究结合生信分析和免疫组化评分发现：膀胱癌中NK细胞、CD8⁺ T细胞和成纤维细胞与免疫治疗疗效和预后具有相关性;这些细胞在BBN诱导的自发小鼠膀胱肿瘤与人膀胱癌组织中的浸润表型相似。这些结果可为研究膀胱癌免疫治疗的机制提供理论依据和动物模型。     

黄芪多糖在晚期胃癌新辅助化疗中的作用

目的：观察黄芪多糖对晚期胃癌新辅助化疗患者的作用。方法：将104例晚期胃癌患者随机分为治疗组（黄芪多糖配合化疗）和对照组（单纯化疗）治疗,对治疗前后两组外周血白细胞计数和免疫功能进行比较。结果：治疗组显著提高肿瘤患者化疗期间白细胞数量。能活化T淋巴细胞亚群,提高NK细胞活性。结论：黄芪多糖配合化疗治疗晚期胃癌能够取得减轻骨髓抑制所致的白细胞减少,通过活化T淋巴细胞亚群,提高NK细胞活性增强免疫功能。     

直肠癌腹腔镜切除术对机体NK细胞功能的影响

目的探讨直肠癌腹腔镜切除术对外周NK细胞的影响。方法纳入2012年1月至2013年12月在防城港市中医医院收治直肠癌患者45例,随机分为腹腔镜手术组23例,开腹手术组22例,分别在术前1天,术后第3天,术后第7天采集外周静脉血,运用流式细胞技术检测外周NK细胞,MTT法检测NK细胞杀伤活性。结果术后第3天、第7天腹腔镜手术组患者外周NK细胞均比开腹手术组患者明显增多,差异具有统计学意义(P0.05),不同时间点NK细胞杀伤活性差异无统计学意义(P0.05)。结论直肠癌腹腔镜切除术对外周NK细胞影响较小,不同手术方式对NK细胞杀伤活性无影响。     

导入免疫效应蛋白基因增强自然杀伤细胞抗肝细胞癌作用的研究

目的 观察民入免疫效应蛋白NKG5－SV基因增强肝癌患者自然杀伤（NK）细胞抗肝细胞肝癌的效应。方法 以逆转录病毒为载体,将NKG5－SV导入肝癌患者的NK细胞,MTT法检测不同NK细胞的杀伤活性,测量小分子DNA片段定量检测凋亡。以LCI－D20裸鼠人肝癌转移模型为材料,研究肝癌切除术中脾内或切缘注射生理盐水、NK－LacZ细胞、NK－NKG5－SV细胞对肝癌切除术后转移复发的影响。结果 与NK细胞相比,NK－NKG5－SV细胞对SMMC－7721、HepG2肝癌细胞的杀伤活性明显增强,而K－LacZ细胞则无明显改变。对LO2细胞的杀伤活性和诱导SMMC－7721细胞凋亡产生的降解DNA三种NK细胞组无区别。术中无论切缘注射还是脾注射,NK－NKG5－SV细胞组肝癌肝内和远处的复发转移均少于对照组和NK－LacZ细胞组。结论 转染NKG5－SV基因的NK细胞对肝癌细胞的杀伤能力明显增强,肝癌切除术中无论切缘注射还是脾内注射均可抑制肝癌切除术后在转移复发。     

转染NK4基因对膀胱癌移行上皮细胞HGF基因表达的影响

目的观察转染NK4基因对膀胱癌上皮细胞HGF基因表达的影响。方法利用脂质体Lipofectin-2000将质粒pcDNA3（＋）／NK4导入BIU-87膀胱癌细胞，用pcDNA3（＋）作为阴性对照。G418稳定筛选阳性细胞克隆后，逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染细胞和对照组细胞NK4基因mRNA水平表达，Western blot检测转染后细胞培养上清液NK4和细胞胞质HGF蛋白的表达含量。结果转染阳性细胞NK4 mRNA恒定表达，RT-PCR和Western blot分别显示在mRNA转录水平和蛋白表达水平，稳定转染的膀胱癌细胞NK4含量明显高于对照组。转染了NK4基因的肿瘤细胞HGF蛋白表达水平明显降低，而转染空载体则无作用。结论脂质体将外源NK4基因导入肿瘤细胞后能稳定表达NK4蛋白，而且可以有效降低肿瘤细胞HGF表达的水平。     

草分枝杆菌膀胱灌注预防膀胱癌复发的临床研究

目的：探讨草分枝杆菌膀胱灌注预防浅表性膀胱肿瘤复发的临床疗效。方法：将浅表性膀胱癌术后患者60例随机分为草分枝杆菌灌注疗法组和卡介苗灌注疗法组，各30例。灌注前和灌注后1个月分别采血测定患者自然杀伤细胞（NK细胞），CD4^＋／CD8^＋比值，观察其值并比较分析。结果：患者进行草分枝杆菌灌注疗法组NK细胞，CD4^＋／CD8^＋比值明显高于卡介苗灌注疗法组。结论：草分枝杆菌膀胱内灌注防治膀胱癌无全身毒副作用，提高患者的免疫功能，可以减少膀胱癌的复发率。     

ESWL和输尿管镜下气压弹道碎石术对输尿管结石患者T细胞亚群和NK细胞的影响

目的:探讨体外冲击波碎石术(ESWL)和输尿管镜下气压弹道碎石术(URS-PL)对输尿管下端结石患者T细胞亚群和自然杀伤细胞(NK细胞)的影响及临床意义。方法:收集本院输尿管下段结石61例,行体外冲击波碎石术31例(ESWL组),行输尿管镜下气压弹道碎石术30例(URS-PL组),两组患者分别于术前1天、术毕30 min、术后1天以及术后4天抽取肘静脉血,通过流式细胞仪检测T细胞亚群和NK细胞。统计并比较分析两组患者T细胞亚群、T细胞增殖活性、NK细胞含量以及杀伤活性。结果:ESWL组术后CD_3~+、CD_4~+ T细胞比例、CD_4/CD_8比值、NK细胞比例和杀伤活性无明显变化;URS-PL组术后1天CD_3~+、CD_4~+T细胞比例、CD_4/CD_8比值、NK细胞比例和杀伤活性明显下降(P0.05),与ESWL组比较差异有统计学意义(P0.05),术后4天恢复正常。ESWL组与URS-PL组患者围手术期T细胞增殖变化比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:治疗输尿管下段结石,体外冲击波碎石术相对输尿管镜下气压弹道碎石术对T细胞亚群和NK细胞的抑制更细微。免疫应答反应作为监测机体创伤程度这一因素将对选择ESWL和URS-PL治疗输尿管下段结石具有临床指导价值。     

CD3AK细胞过继治疗对肝癌患者T淋巴细胞亚群及功能活性的影响

目的 探讨CD3AK细胞过继治疗对原发性肝癌（PLC）患者T淋巴细胞亚群及功能活性的影响。方法 58例 PLC患者分为:CD3AK细胞治疗组（n=37）,对照组（n=21）,另取11例献血员为正常对照。治疗组术后第1天开始输注CD3AK细胞,每天1次,每次输注2x109个细胞,输注前30min静脉注射IL-2100u,连续5d为一个疗程;对照组只给予与治疗组相同的保肝治疗。观察两组T淋巴细胞亚群、IL-2R、细胞增殖功能、NK及LAK活性。结果 治疗组CD4/CD8比值、NK活性、LAK活性、IL-2R表达水平及细胞增殖活力与治疗前和对照组比较,差异均有显著性意义。结论 过继输注CD3AK细胞治疗能够补充肝癌患者有效抗肿瘤活性细胞数量的不足,并能够使T淋巴细胞亚群比例失调和功能低下的状况获得不同程度的改善。     

肾癌患者外周血NK细胞活性及T细胞亚群分布初步观察

作者检测了11例肾癌患者外周血NK细胞活性及T细胞亚群分布,并与正常对照组进行了比较。结果表明患者NK细胞活性、OKT_3~+细胞比例及T4/T8比值显著低于正常对照组,OKT_8~+细胞比例显著高于正常对照组,OKT_4~+细胞比例与对照组比较差异无显著性。     

CD3AK细胞过继治疗对肝癌患者T淋巴细胞亚群及功能活性的影响

目的　探讨CD3AK细胞过继治疗对原发性肝癌 (PLC)患者T淋巴细胞亚群及功能活性的影响。方法　5 8例PLC患者分为CD3AK细胞治疗组 (n =3 7)及对照组 (n =2 1) ,另取同期 11例献血员为正常对照组。治疗组术后第 1天开始输注CD3AK细胞 ,每天 1次 ,每次输注 2× 10 9个细胞 ,输注前 3 0min静脉注射IL 2 10 0u ,连续 5天为一疗程 ;对照组只给予与治疗组相同的保肝治疗。观察两组T淋巴细胞亚群、IL 2R、细胞增殖功能、NK及LAK活性。结果　治疗组CD4/CD8比值、NK活性、LAK活性及IL 2R表达水平和细胞增殖活力与治疗前和对照组比较 ,差异均有显著性意义。结论　过继输注CD3AK细胞治疗能够补充肝癌患者有效抗肿瘤活性细胞数量的不足 ,并能够使T淋巴细胞亚群比例失调和功能低下的状况获得不同程度的改善     

淫羊藿基于CCNB1诱导免疫细胞浸润在膀胱癌中的作用及机制研究

目的探究淫羊藿治疗膀胱癌的关键活性成分及其作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台筛选淫羊藿的药物活性成分及靶点,使用R语言筛选GSE13507和GSE37815的差异基因,将药物与差异基因取交集后,运用TCGA和GEO数据库中的临床信息分析和验证药物疾病靶点与膀胱癌预后的关系。运用UALCAN数据库分析CCNB1的表达与膀胱癌临床及病理资料的相关性。最后,运用TIMER分析膀胱癌中CCNB1的表达与免疫细胞浸润及患者预后的关系。结果:共筛选出17个淫羊藿的有效成分和11个药物疾病靶点。靶点最多点的活性成分为槲皮素、木犀草素和山柰酚,活性成分作用最多的靶点为GSK3B和CCNB1。GSK3B与膀胱癌患者总生存期无关。CCNB1高表达于膀胱癌组织中,且与膀胱癌患者预后呈负相关。CCNB1表达与CD8+ T细胞浸润呈正相关,CD8+ T细胞浸润水平越高患者预后越差。结论:CCNB1是淫羊藿的主要作用靶点,淫羊藿可通过靶向CCNB1调节CD8+ T细胞浸润,从而影响膀胱癌患者预后。     

脾脏切除对门脉高压症病人NK细胞活性的影响

门脉高压症瘀血肿大的脾脏是否具有免疫功能尚存有分歧。本文通过对保留脾脏的远端脾肾静脉分流手术病人和切除脾脏的门奇静脉断流手术病人的外周血NK细胞活性的测定,对照分析了脾切除对门脉高压症病人NK细胞活性的影响。结果表明:门脉高压症病人NK细胞活性显著低于正常人;脾切除后NK细胞活性呈渐进性升高,而保留脾脏的病人NK细胞活性无明显变化,术后两周脾切组显著高于保脾组(P<0.01)。提示门脉高压症病人瘀血肿大的脾脏对机体非特异性免疫功能有抑制作用,睥切除术后早期可改善门脉高压症病人的NK细胞活性。其远期效果有待随访。     

肝癌患者外周血T细胞亚群NK活性及IL-2R表达的研究

分别对30例原发性肝癌及30例正常人进行外周血T细胞亚群、NK活性及lL-2R表达检测。结果:肝癌患者外周血CD_8细胞增高,CD_4细胞降低,CD_4/CD_6比值上升,NK活性减低及IL—2R表达阳性率降低。提示肝癌患者机体免疫功能较正常人明显降低。     

肿瘤浸润性淋巴细胞在白细胞介素-2、-4协同下局部过继免疫治疗膀胱癌的实验研究

目的　观察膀胱癌肿瘤浸润性淋巴细胞 (TIL)联合不同细胞因子瘤灶内过继免疫抗癌的效应及对机体全身抗肿瘤免疫机制的影响。方法　建立BTT73 9动物模型 ,分离、培养TIL。采用正交设计实验方法 ,将TIL、白细胞介素 (IL) 2、 4及三因素交互组合悬液分别直接注射至瘤体内 ,定期测量肿瘤体积 ,免疫治疗 2周后检测NK细胞活性、T淋巴细胞转刺激指数 ,观察组织学及超微结构变化。结果　比较对照组 ,治疗 2周时各TIL相关组均不同程度抑制了膀胱肿瘤体积的增长 ,且NK细胞活性及T淋巴细胞转化增殖能力得以提高 (P <0 .0 5 )。TIL/IL 2疗法明显抑制了瘤体的增长 ,免疫治疗 1周后即表现出协同增强效应 (P <0 .0 5 ) ,而NK细胞活性及T淋巴细胞转刺激指数也显著提高 (P <0 .0 5 )。TIL/IL 2 /IL 4组获得了较强的抗癌功效 ,但与TIL/IL 2组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。超微结构变化显示出TIL强烈的溶癌现象。结论　TIL在细胞因子特别是IL 2协同下瘤灶内注射的局部免疫疗法 ,具有较强的抗膀胱癌效应 ,并显著提高了机体全身抗瘤免疫功能。