姜黄素调控Notch信号通路对肺癌干细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究姜黄素对肺癌干细胞增殖及凋亡的影响。方法:利用免疫磁珠标记肺癌表面标记物乙醛脱氢酶1(ALDH1)，从肺癌A549细胞系中分离肺癌干细胞；MTT实验检测姜黄素对肺癌干细胞增殖的影响；流式细胞仪检测姜黄素对肺癌干细胞凋亡的影响；Western blot检测Notch1和Hes1蛋白的表达情况；抑制剂γ-分泌酶抑制Notch信号通路研究对肺癌干细胞增殖及凋亡的影响。结果:利用免疫磁珠分选法分选出肺癌细胞系A549中ALDH1+肺癌干细胞。MTT检测结果显示，姜黄素能够呈浓度依赖性的抑制肺癌干细胞的增殖；经姜黄素处理后的肺癌干细胞，与对照组相比，凋亡率明显升高，Notch1和Hes1蛋白的表达明显下降。经γ-分泌酶抑制剂处理肺癌干细胞后，实验结果显示，γ-分泌酶抑制剂通过下调Notch1和Hes1蛋白的表达调控Notch信号通路抑制肺癌干细胞的增殖，诱导其凋亡。结论:姜黄素抑制肺癌干细胞的增殖，诱导其凋亡与Notch信号通路有关。     

PTEN和Nocth信号通路与非小细胞肺癌的关系

肺癌是一种基因性疾病,癌基因激活或抑癌基因失活是导致细胞异常增殖和凋亡障碍从而导致肺癌发生的关键。PTEN 是第一个被发现的具有双重特异性磷酸酶活性的抑癌基因,它与肿瘤发生关系密切。Notch 信号通路在决定细胞分化方向,细胞增殖和凋亡过程中起重要作用,其异常表达常参与肿瘤的发生、发展和血管生成等。因此,针对 PTEN 及 Notch 信号通路的研究有助于对非小细胞肺癌的预防和治疗。本文结合国内外最新报道,对 PTEN 及 Notch 信号通路与非小细胞肺癌相关性研究进展作一综述。     

miR-214通过PTEN调控AKT信号通路抑制鼻咽癌细胞凋亡CSCD

目的探讨miR-214通过PTEN调控下游AKT信号通路激活对鼻咽癌细胞凋亡的影响。方法miR-214抑制剂转染鼻咽癌5-8F和6-10B细胞。MTT法评估细胞增殖情况。Annexin-V/PI染色法检测两种鼻咽癌细胞凋亡情况。Western blot和real-time PCR检测miR-214抑制剂对PTEN基因转录和蛋白表达以及对AKT信号通路和凋亡相关蛋白表达水平的影响。检测shRNA沉默PTEN基因转录和蛋白表达后,miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞凋亡影响。结果miR-214抑制剂可抑制鼻咽癌细胞生长,诱导5-8F和6-10B细胞凋亡。miR-214通过靶向3'-UTR区域调控PTEN基因转录和蛋白表达。抑制miR-214可促进PTEN的表达,抑制AKT信号通路激活,进而调控下游细胞周期和凋亡相关蛋白表达。沉默PTEN基因转录和蛋白表达可逆转miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞AKT信号通路活性和凋亡的影响。结论miR-214可通过直接靶向PTEN基因转录促进AKT信号通路激活抑制鼻咽癌细胞凋亡。     

DFMO通过Fas/FasL通路诱导人肺癌细胞凋亡的研究

背景与目的:Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要通路。为了解Fas/FasL系统在肿瘤多胺生物合成抑制导致恶性表型逆转中的作用,本研究拟探讨多胺生物合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)对人肺癌A549细胞生长、凋亡的影响及其与人肺癌相关抗原、rasP21蛋白及Fas/FasL表达的相关性。方法:用MTT法观察细胞生长,流式细胞仪分析细胞周期,DNAladder电泳法观察细胞凋亡,SP免疫组化法及RT-PCR法检测细胞蛋白及基因表达。结果:DFMO可抑制A549细胞生长并诱导凋亡,使G1期细胞增多(61.0±2.08)%,S期细胞减少(21.2±0.88)%,出现DNAladder;同时下调A549细胞人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达,上调Fas基因mRNA及蛋白表达。结论:DFMO通过Fas/FasL通路诱导肺癌A549细胞的凋亡,并可能与人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达调控有关。     

槲皮素对肺癌干细胞活性的影响

目的 探索槲皮素对 A549 肺癌干细胞活性及对 Wnt / β-连环蛋白(β-catenin)和音猬因子( sonic hedgehog,SHH)信 号通路的影响。 方法 使用不同浓度槲皮素(0、5、10、25、50、100 和 200 μmol / L)处理肺癌 A549 细胞 24、48 和 72 h,MTT 法检 测细胞存活率。 采用无血清培养法分离富集肺癌干细胞,观察槲皮素对 A549 悬浮细胞球体积、数量以及肺癌干细胞分子标 志物表达的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测增殖凋亡相关指标以及 Wnt / β-catenin 和 SHH 信号通路关键 分子的表达变化。 结果 槲皮素能够显著抑制 A549 细胞活力,且呈现时间和浓度依赖性;与空白对照组相比,槲皮素均显著抑 制 A549 成球能力和肺癌干细胞分子标志物[CD133、CD44 和醛脱氢酶 1A1(ALDH1A1)]表达;同时,肺癌干细胞增殖相关蛋 白增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白 D1(Cyclin D1)和 B 细胞白血病/ 淋巴瘤-2(Bcl2)水平显著下调,凋亡相关指标 Bcl2 相关蛋白 X(Bax)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Cleaved Caspase 3)表达显著上调;槲皮素处理后,肺癌干细胞中 Wnt / β-catenin 和 SHH 信号通路关键分子磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK3β)( Ser9)、β-catenin、原癌基因蛋白 c-Myc、胶 质瘤相关癌基因同源物 1(GLi1)、GLi2 和 SHH 的蛋白水平明显下降。 结论 槲皮素显著抑制肺癌干细胞活性,其机制可能与 调控 Wnt / β-catenin 和 SHH 通路有关。     

苦瓜蛋白诱导A549肺癌细胞凋亡及对相关蛋白的影响

[目的]观察苦瓜蛋白对A549非小细胞肺癌细胞凋亡的影响,探讨苦瓜蛋白对PI3K/AKT细胞信号传导通路中相关蛋白分子的作用影响。[方法]以梯度浓度苦瓜蛋白处理A549细胞48h,流式细胞术(TUNEL方法)检测A549细胞凋亡;10μg/ml苦瓜蛋白处理A549细胞,分别作用不同时间(0h、6h、12h、24h、48h、72h)后,提取细胞总蛋白,Westernblot检测AKT信号通路中AKT及p-AKT等信号分子表达的变化。[结果]苦瓜蛋白可以明显诱导A549细胞凋亡,以10μg/ml苦瓜蛋白处理组A549细胞凋亡率最高(50.15%)。苦瓜蛋白处理A549细胞12h后,p-AKT及AKT表达明显下调,呈现时间—效应依赖关系。[结论]苦瓜蛋白可以诱导A549细胞发生显著凋亡,其机制可能是部分通过抑制AKT蛋白的表达及其磷酸化,抑制AKT信号传导通路,导致肿瘤细胞凋亡。     

mTOR信号通路与非小细胞肺癌放疗敏感性的关系

目的:研究mTOR信号通路与非小细胞肺癌放疗敏感性的关系。方法:采用不同剂量的雷帕霉素抑制非小细胞肺癌细胞系A549中的mTOR信号通路;Western blot检测雷帕霉素作用后下游信号分子的表达;将A549细胞分为空白对照组及雷帕霉素作用的实验组,将对照组和实验组经不同剂量射线作用;用MTT实验（噻唑蓝）及克隆形成能力检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果:雷帕霉素药物作用抑制了mTOR信号通路及下游分子的表达,经不同剂量射线照射后细胞的增殖能力和克隆形成能力显著低于对照组,凋亡显著高于对照组。结论:抑制mTOR信号通路可以增加非小细胞肺癌对放疗的敏感性。     

斯钙素1的表达对肺癌细胞A549细胞周期及凋亡的影响

背景与目的：斯钙素1(stanniocalcin l,STC1)在多种癌组织中表达上调,且与癌组织的恶性程度相关,但STC1在肺癌细胞中的分子作用机制尚不明确。本研究旨在探讨STC1的表达对肺癌细胞A549细胞周期及凋亡的影响。方法：构建STC1基因RNA干扰的肺癌细胞株A549-STC1-siRNA和对照细胞株A549-Vector,用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测A549-Vector及A549-STC1-siRNA细胞株的细胞周期蛋白基因CyclinA、CyclinB1、CyclinD1、CyclinE、CDK2、CDK4,凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xl及凋亡诱导基因Caspase-3、Bax、Bak、Bid的表达水平,用流式细胞术检测STC1基因对A549细胞周期的影响,用原位末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick-end labeling,TUNEL)检测STC1基因对A549细胞凋亡的影响。结果：与A549-Vector细胞相比,A549-STC1-siRNA的细胞周期蛋白基因CyclinA、CyclinB1、CyclinD1、CyclinE、CDK2和CDK4在转录和蛋白表达水平上均显著减少(P<0.05),G0/G1期细胞比例明显增加,S期及G2/M期细胞比例降低(P<0.05),细胞周期受阻;A549-STC1-siRNA的凋亡抑制基因Bcl-2和Bcl-xl表达下调(P<0.05),而凋亡诱导基因Caspase-3、Bax、Bak及Bid显著上调(P<0.05);TUNEL实验表明,A549-STC1-siRNA细胞的凋亡率明显增加。结论：STC1基因的低表达可阻滞肺癌细胞A549的细胞周期,抑制细胞增殖,同时促进细胞凋亡。     

长链非编码RNA LIMT调控TGF-β信号通路对肺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:检测lncRNA LIMT在肺癌组织中的表达水平，探讨lncRNA LIMT表达对肺癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能的分子作用机制。方法:利用荧光定量PCR（RT-qPCR）检测lncRNA LIMT在肺癌组织中的表达水平；在肺癌细胞A549中转染lncRNA LIMT过表达质粒pEGFP-C1-LIMT及敲减lncRNA LIMT的特异性siRNA-LIMT及其相关对照，RT-qPCR验证其转染效率；利用CCK-8法、流式细胞术检测转染lncRNA LIMT过表达质粒及siRNA-LIMT后肺癌细胞的增殖及凋亡能力变化；利用Western blotting检测TGF-β信号通路相关蛋白TGF-β1蛋白及Smad4蛋白的表达水平。结果:RT-qPCR结果显示:肺癌组织中lncRNA LIMT的表达水平显著低于配对癌旁组织（P＜0.05）；细胞转染实验结果显示:转染pEGFP-C1-LIMT后A549细胞中lncRNA LIMT的表达水平显著高于转染空载质粒（P＜0.001），转染siRNA-LIMT后A549细胞中lncRNA LIMT的表达水平显著低于转染对照siRNA-NC（P＜0.01）；CCK-8和流式细胞术实验结果显示:过表达lncRNA LIMT显著抑制了肺癌细胞的增殖、诱导细胞凋亡（P＜0.01），敲减lncRNA LIMT显著促进了细胞增殖、抑制细胞凋亡（P＜0.01）；Western blotting结果显示:lncRNA LIMT过表达的肺癌细胞中TGF-β1蛋白表达水平显著降低，Samd4蛋白表达水平显著升高（P＜0.05），敲减lncRNA LIMT的肺癌细胞中TGF-β1蛋白表达显著升高，Samd4蛋白表达显著降低（P＜0.05）。结论:lncRNA LIMT在肺癌组织中表达下调，过表达lncRNA LIMT抑制肺癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，敲减lncRNA LIMT促进肺癌细胞增殖，抑制细胞凋亡，可能通过对TGF-β信号通路的调控来实现。     

SOX4对非小细胞肺癌细胞A549的顺铂耐药作用的影响

背景与目的 肺癌是最严重的恶性肿瘤之一,其中非小细胞肺癌发病率在肺癌中居首位.部分患者对顺铂耐受是导致化疗失败的主要原因.SOX4是转录调节因子,在多种肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用,通过调控β-catenin的表达对Wnt信号通路进行调控.本研究旨在探讨SOX4对非小细胞肺癌细胞A549的顺铂耐药作用的影响.方法 体外诱导法建立顺铂耐药的肺癌细胞株A549/DDP,CCK8法检测A549及A549/DDP细胞对顺铂的耐药性.绘制A549与A549/DDP细胞生长曲线.Western blot检测耐药细胞株中SOX4的蛋白表达水平.CCK8法检测敲减SOX4后耐药细胞株A549/DDP对顺铂耐药性.实时定量PCR和免疫印迹法检测敲减SOX4后A549/DPP细胞中β-catenin和Survivin蛋白的表达.结果 成功构建非小细胞肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP,其耐药性是亲本细胞的13.7倍,差异有统计学意义(P<0.001).生长曲线显示耐药细胞株与亲本细胞增殖速度没有统计学差异(P<0.05);与A549细胞相比,耐药细胞A549/DDP细胞中SOX4的表达显著增高(P<0.001).敲减SOX4后,A549/DDP细胞的耐药性显著降低;敲减SOX4后,A549/DDP细胞中β-catenin和Survivin的mRNA和蛋白表达水平显著降低.结论 SOX4的表达水平影响非小细胞肺癌细胞A549对顺铂的耐药性.     

PTEN基因在非小细胞肺癌中表达的临床研究

目的研究PTEN基因在人非小细胞肺癌中的表达情况,探讨PTEN基因在人肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组化方法检测143例非小细胞肺癌、20例正常肺组织及良性病变中PTEN蛋白的表达情况。结果在正常肺组织及肺良性病变组织中无失表达;肺癌组织中失表达率57.3%(82/143),两者比较差异有显著性(P<0.001)。肺癌组织中PTEN基因表达水平与肿瘤细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移程度存在相关性(P<0.001);PTEN蛋白失表达组肺癌患者的术后5年生存率显著低于表达组(P<0.001);吸烟组患者PTEN基因失表达率显著高于不吸烟组(P<0.001)。结论PTEN蛋白失表达与肺癌的发生、发展及预后有关;多因素分析表明,PTEN基因失表达是影响非小细胞肺癌预后的独立因素。     

miR-145通过靶向AP4对非小细胞肺癌A549细胞迁移侵袭的影响

 目的 探讨miR-145对非小细胞肺癌迁移与侵袭能力的影响及其可能的作用机制。方法 qRTPCR法检测非小细胞肺癌组织中miR-145和激活增强子结合蛋白4（activating enhancer binding protein4, AP4）mRNA的表达。A549细胞转染miR-145 mimic或者AP4 siRNA后，划痕实验与Transwell小室法分别检测A549细胞的迁移与侵袭能力，qRT-PCR法与免疫印迹法（Western blot）检测A549细胞中AP4 mRNA与蛋白表达水平；双荧光素酶报告基因法检测AP4 mRNA与miR-145的关系。结果 与癌旁正常组织相比，非小细胞肺癌组织中miR-145表达明显降低（P<0.05），而AP4 mRNA和蛋白表达均明显升高（均P<0.05）；与对照组相比，转染miR-145 mimic后，A549细胞中miR-145表达明显升高（P<0.05），AP4 mRNA和蛋白水平明显降低（P<0.05）；A549细胞的迁移数与侵袭能力均显著下降（均P<0.05）；双荧光素酶报告基因法验证AP4 mRNA是miR-145的靶基因。A549细胞转染AP4siRNA后，A549细胞的迁移数与侵袭数显著下降（均P<0.05）。结论 上调miR-145能抑制A549细胞的迁移与侵袭能力，可能与其抑制靶基因AP4表达有关。     

非小细胞肺癌中PTEN及p53的表达及其临床意义

目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）中PTEN及p53的表达及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法,对61例NSCLC手术切除标本进行PTEN及突变型p53蛋白表达研究,分析其与NSCLC患者的病理类型及临床分期、预后的关系。结果（1）非小细胞肺癌中PTEN的表达明显低于对照组（P〈0.05）;而p53蛋白则明显增高。（2）PTEN表达与组织学类型、临床分期和淋巴结转移显著相关;p53表达与性别和淋巴结转移显著相关。（3）非小细胞肺癌标本中PTEN与p53的表达呈显著负相关（rs=-0.282,P〈0.05）。（4）Kaplan-Meier生存分析显示,PTEN表达阴性组患者平均生存期为36.5月,阳性组为71.0月;p53表达阴性组患者平均生存期为70.1月,阳性组为46.0月,经Logrank检验均显示P〈0.05。结论PTEN的表达缺失及野生型p53基因的突变,可能是导致NSCLC发生的重要原因之一,可以作为肿瘤基因治疗的靶点;PTEN及p53的表达与NSCLC患者的预后关系密切,可能是肿瘤预后的标志物;PTEN与p53的表达呈明显的负相关,两者是否通过同一途径,或者两条途径如何相互影响,需进一步研究。     

Cross-talk between endothelial cells and tumor via delta-like ligand 4/Notch/PTEN signaling inhibits lung cancer growth

Lung cancer is a leading cause of cancer death in many countries. Notch signaling has been demonstrated to frequently participate in the process of lung carcinogenesis. Delta-like ligand 4 (Dll4) is a vascular-specific ligand of Notch, and has a critical role in the angiogenesis of numerous cancers. However, the role of Dll4 in the cross-talk between endothelial cells (ECs) and tumor cells remains obscure. Herein, our study revealed that Dll4-expressing ECs (EC-Dll4) significantly suppressed the proliferation of neighboring non-small cell lung cancer (NSCLC) cells and attenuated the growth of NSCLC xenograft in nude mice. On the contrary, silencing endothelial Dll4 by its specific interference RNA reversed these effects of Dll4 on NSCLC cell proliferation and tumor formation. Furthermore, activation of Notch1, but not Notch2 or Notch3, was enhanced in NSCLC cells cultured with EC-Dll4, as well as in xenografts induced by a mixture of NSCLC cells and EC-Dll4. Interference of Notch1 significantly attenuated Dll4-mediated suppression of NSCLC cell proliferations, indicating that Dll4/Notch1 signaling negatively modulates the NSCLC growth. Moreover, PTEN expression in NSCLC cells was increased by EC-Dll4 or rhDll4 (recombinant human-Dll4 protein), and the induction was impaired by Notch1 interference suggesting that Dll4 could upregulate PTEN expression by Notch1. Taken together, we conclude that the cross-talk between ECs and NSCLC cells by Dll4/Notch1/PTEN signaling pathway inhibits the growth of NSCLC.     

DLC-1过表达对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨肝癌缺失基因1(deleted in liver cancer-1,DLC-1)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法构建pcDNA3.1-DLC-1重组质粒并转染至人非小细胞肺癌A549和Calu-6细胞,采用Western blot检测DLC-1蛋白表达,qRT-PCR检测DLC-1和ROCK1 mRNA表达,平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果A549和Calu-6细胞转染pcDNA3.1-DLC-1重组质粒后,DLC-1蛋白和mRNA表达量均高于对照组(均P<0.05)。与对照组相比,DLC-1过表达后A549和Calu-6细胞中的ROCK1 mRNA表达量降低(均P<0.05),细胞增殖能力下降(均P<0.05);A549细胞周期被阻滞于G1期,侵袭能力下降(P<0.05)。结论DLC-1过表达可抑制NSCLC细胞增殖和侵袭,其作用机制可能与靶向调控ROCK1有关。     

miR-140-5p靶向HDAC7抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制探讨

目的:探讨miR-140-5p靶向组蛋白去乙酰化酶7(histone deacetylase 7,HDAC7)调控非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法:采用qRT-PCR检测人NSCLC组织及癌旁组织中miR-140-5p的表达水平。用miR-140-5p mimic（模拟物）及miR-140-5p NC（阴性对照）转染A549细胞,CCK8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-5p与HDAC7的靶向关系,Western blot检测各组细胞HDAC7及PI3K、p-PI3K、AKT、和p-AKT表达水平。结果:与癌旁组织相比,miR-140-5p在NSCLC组织中的表达水平明显减低,差异有统计学意义（P＜0.01）。与miR-140-5p NC组相比,过表达miR-140-5p后A549细胞在48和72 h的增殖能力明显降低（P＜0.05）;且细胞克隆形成、细胞迁移和侵袭能力均降低（均P＜0.05）,PI3K/AKT信号通路中关键分子p-PI3K和p-AKT蛋白水平明显降低（均P＜0.05)。生物信息学预测HDAC7可能是miR-140-5p的一个靶基因,且双荧光素酶报告结果证实miR-140-5p直接靶向调节HDAC7表达。结论:miR-140-5p通过靶向HDAC7表达进而抑制NSCLC A549细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与通过抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。     

STAT-3介导的非依赖VEGFR-2通路对NSCLC细胞放射敏感性影响的研究

目的 研究抑制STAT-3对非依赖VEGFR-2通路的NSCLC细胞放射敏感性的影响,并探讨其可能机制。 方法 采用Q-PCR及蛋白印迹法检测各组中VEGFR-2、STAT-3相关信号分子及HIF-1α、CyclinD₁ mRNA与蛋白表达变化;克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡及周期分布。 结果 经VEGFR-2抑制剂Apatinib处理后,Calu-1细胞中VEGFR-2、STAT-3 mRNA无显著变化,HIF-1α、CyclinD₁ mRNA表达降低;联合STAT-3抑制剂S3I-201后,VEGFR-2、STAT-3及下游相关基因mRNA表达降低(F=304.54、118.99,P<0.01);VEGFR-2、STAT-3及下游相关靶蛋白磷酸化水平均降低(F=144.34、529.66,P<0.01);细胞凋亡率与G₂+M期阻滞增加,同时抑制STAT-3和VEGFR-2组更明显(F=72.37,P<0.01)。与Calu-1细胞相比,A549细胞加Apatinib抑制VEGFR-2细胞放射增敏效果有限,SER=1.39;联合S3I-201抑制STAT-3后,放射增敏效果显著,SER=1.72(t=-48.61,P=0.000)。 结论 NSCLC细胞VEGFR-2被抑制时,旁路活化的STAT-3直接和间接调控CyclinD₁表达,进而影响肺癌细胞的放射敏感性,联合抑制肺癌细胞VEGFR-2和STAT-3,具有良好的放射增敏效果。     

Melittin对非小细胞肺癌增殖、凋亡及PI3K／Akt信号通路的影响

目的 探讨Melittin对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、凋亡及PI3K／Akt信号通路的影响。方法 分别采用0、10、20、50、100 μmol／L Melittin处理NSCLC细胞株A549、SPC-A1及人肺上皮细胞株16HBE 24、48、72和96 h后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测各细胞株的增殖抑制率变化,同时采用流式细胞术Annexin-FITC／PI双染法及PI单染法检测不同浓度Melittin 处理24、48 h后的A549细胞凋亡及细胞周期情况,Western blotting检测不同浓度Melittin处理48 h后的A549细胞中PI3K／Akt信号通路相关蛋白（Akt和PTEN）及凋亡促进基因（caspase-9）的表达情况。结果 在10～100 μmol／L范围内,Melittin可呈剂量和时间依赖的方式提高A549、SPC-A1细胞的增殖抑制率,差异均有统计学意义（P＜0.05）,但对16HBE无细胞毒性作用（P＞0.05）;与0 μmol／L比较,除10 μmol／L Melittin处理24 h后的晚期凋亡率和G2／M期细胞比例无统计学差异（P＞0.05）,10～100 μmol／L的早、晚期凋亡率、G0／G1期细胞比例及PTEN和caspase-9蛋白水平均升高,S期、G2／M期细胞比例及Akt水平均降低,以上差异有统计学意义（P＜0.05）,且10～100 μmol／L范围内各浓度间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 Melittin可对NSCLC细胞有毒性作用,但对正常肺上皮细胞无影响,且可诱导A549细胞凋亡及细胞周期阻滞并抑制PI3K／Akt信号通路的激活。