大鼠肺动脉平滑肌细胞的外向钾电流及四乙基铵对此电流作…

以全细胞膜片钳制技术观察大鼠肺支浃滑肌细胞外向钾电流的基本特性及四乙基铵（ＴＥＡ）对其作用的量效关系。结果表明：１．将细胞电位钳制在－５０ｍＶ，当指令电位大于－５０ｍＶ时，可以记录么电压依赖性的外向钾电流；２．当指仿电位为＋７０ｍＶ时，在１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ和１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ各尝试伯四乙基铵可使外向钾电流分别降低４８．３７％、４１．２１％、２２．１５     

家兔肺动脉平滑肌细胞的延迟整流钾电流及白花前胡有效成分Pd-Ia对此电流的作用

建立用胰蛋白酶和胶原酶分离制备家兔肺动脉单离平滑肌细胞的方法并以膜片钳制技术观察了此细胞延迟整流钾电流的基本特性及中药白花前胡有效成分Ｐｄ－Ｉａ的作用。结果表明：①将细胞钳制在－４０ｍＶ，当指令电位大于－４０ｍＶ时，可以记录到具时间及电压依赖性的延迟整流钾电流；②Ｐｄ－Ｉａ１０－６ｍｏｌ／Ｌ在指令电位为＋８０ｍＶ时，可以使延迟整流钾电流由给药前的（１．８±０．５）ｎＡ增加至（２．３±０．６）ｎＡ，提示Ｐｄ－Ｉａ可能具有钾通道开放作用。     

家兔肺动脉平滑肌细胞的延迟整流钾电流及白花前胡有效成…

建立用胰蛋白酶和胶原酶分离制备家兔动脉单离平滑肌细胞的方法并以膜片钳制技术观察了此细胞延迟整流钾电流的基本特性及中药白花前胡有效成分Ｐｄ－Ｉａ的作用。结果表明：１．将细胞钳制在－４０ｍＶ，当指令电位大于－４０ｍＶ时，可以记录到具时间及电压依赖性的延迟整流钾电流；２．Ｐｄ－Ｉａ１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ在指令电位＋８０ｍＶ时，可以使延迟整流钾电流由给药前的（１．８±０．５）ｎＡ增加至（２．３±０．６）ｎＡ     

四氢巴马汀对豚鼠心肌单细胞的延迟整流电流的影响

为探讨四氢巴马汀（ＴＨＰ）抗心律失常作用的离子机制，我们采用膜片钳技术观察了ＴＨＰ对豚鼠心室肌单细胞外向钾电流及尾电流的影响。当保持电压－４０ｍＶ，指令电压６０ｍＶ时，心室肌细胞延迟外向钾电流和尾电流最大。灌流含ＴＨＰ１０μｍｏｌ／Ｌ的台氏液后，延迟外向钾电流和尾电流显著下降。在指令电压－２０ｍＶ时，尾电流可从（４８．６±１０．５）ｐＡ降至（３３．３±１１．２）ｐＡ，指令电压５０ｍＶ时尾电流从（９４．５±１９．３）ｐＡ降至（５８．５±２０．５）ｐＡ．在指令电压５０ｍＶ时延迟外向钾电流也从（３６２．８±７６）ｐＡ下降到（１３４．６±３６．７）ｐＡ，上述变化在以台氏液冲洗２０ｍｉｎ后恢复至原来水平。实验结果表明，ＴＨＰ抗心律失常作用与其抑制延迟外向钾电流和尾电流有关。     

大鼠肝细胞外向钾电流的实验研究

目的：研究大鼠肝细胞上外向钾电流。方法：全细胞膜片钳制方法观察大鼠肝细胞延迟外向钾电流（Ｉｋ）和瞬间外向钾电流（Ｉｔｏ）及去甲肾上腺素等对Ｉｋ的影响。结果：正常细胞外液条件下，大鼠肝细胞在保持电位－５０ｍＶ，＋１４０ｍＶ刺激电压时Ｉｋ为（２．８５±１．２１）ｎＡ。应用改变保持电位（－８０ｍＶ和－３０ｍＶ）的方法。初步区分Ｉｔｏ和Ｉｋ，Ｉｔｏ值为（１．３９±０．５８）ｎＡ。结论：去甲肾上腺素明显降低Ｉｋ，异丙肾上腺素和乙酰胆碱对Ｉｋ无影响     

粉防己碱对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

应用全细胞记录式膜片钳技术研究了粉防己碱（Ｔｅｔ）对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流（Ｉ（Ｃａ））的影响。Ｔｅｔ１μｍｏｌ／Ｌ使Ｉ（Ｃａ））的电流－电压关系曲线之各电流值均降低。指令电位（ＶＴ）为０ｍＶ，Ｔｅｔ０．１～３．２μｍｏｌ／Ｌ　使Ｉ（Ｃａ）呈浓度依赖性降低，半数抑制浓度（Ｌ（５０））为０．７μｍｏｌ／Ｌ。此外，Ｔｅｔ０．３μｍｏｌ／Ｌ能阻滞异丙基肾上腺素（Ｉ（ｓｐ））０．１μｍｏｌ／Ｌ引起的Ｉ（Ｃａ）的增大。证明Ｔｅｔ可阻滞豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流，并提示有增大延迟整流钾电流（Ｉ（ｏｕｔ））的作用。     

粉防己碱对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

应用全细胞记录式膜片技术研究了粉防己碱（Ｔｅｔ）对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙电流（Ｉｃａ）的影响，Ｔｅｔ１μｍｏｌ／Ｌ使Ｉｃａ的电流－电压关系曲线之各电流值为均降低，指令电位（ＶＴ）为０ｍＶ，Ｔｅｔ０．１～３．２μｍｏｌ／Ｌ使Ｌｃａ呈浓度依赖性降低，半数抑制浓度（ＩＣ５０）为０．７μｍｏｌ／Ｌ，此外Ｔｅｔ０．３μｍｏｌ／Ｌ能阻滞异丙基肾上腺素（Ｉａｐ）０．１μｍｏｌ／Ｌ引起的Ｉｃａ的增大，证明了Ｔｅｔ可     

罗比卡因对脊髓背角神经元钠电流特性的影响

目的 探讨酰胺类避麻药罗比卡因对脊髓神经阻滞作用的机制。方法 以全细胞膜片钳技术记录罗比卡因对急性分离新生ＳＤ鼠（０￣７ｄ）脊髓背角神经元钠电流的影响。结果 在电压钳的状态下（钳制电压Ｖｈ－８０ｍＶ，刺激电压Ｖｔ０ｍＶ），罗比卡因（１０－４００μｍｏｌ）对钠电流有抑制作用，且呈浓度依赖性，其ＩＣ５０为１１７．３２μｍｏｌ，明显高于相同电压钳条件下布比卡因的ＩＣ５０（５３．７０１μｍｏｌ）；罗比卡因     

人参皂甙单体Rb1对豚鼠心肌细胞ICa^2＋电流阻滞作用的研究

研究人参单体Ｒｂ１对ＩＣａ＾２＋电流的影响。采用全细胞电压钳技术记录了豚鼠心室肌细胞ＩＣａ＾２＋电流，给出了电流－电压关系曲线。在保持电压－５０ｍＶ时，阶跃命令在－５０－＋６０ｍＶ，０ｍＶ时电流最大，并发现Ｒｂ１时ＩＣａ＾２＋电流有明显的阻滞作用。而且在１００μｍｏｌ／Ｌ，２００μｍｏｌ／Ｌ，３００μｍｏｌ／Ｌ，４００μｍｏｌ／Ｌ范围时有剂量依赖关系。     

川芎嗪对单个心室肌细胞电生理的影响

采用全细胞膜片钳（Ｗｈｏｌｅｃｅｌｌｐａｔｃｈ ｃｌａｍｐ） 技术研究川芎嗪（ 四甲基吡嗪,ｔｒｔｒａｍｅｔｈｙｌｐｙｒａｚｉｎｅ,ＴＭＰ） 对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙通道电流（Ｌ ＩＣａ）的浓度依赖性影响。当维持电位为－ ４０ ｍ Ｖ,刺激频率为０－５ Ｈｚ,钳制时间为４００ ｍｓ,步进电压为１０ ｍ Ｖ,去极到６０ ｍＶ,发现３ μｍｏｌ／ＬＴＭＰ对Ｌ ＩＣａ无影响（Ｐ＞ ０－０５） ;１０ ,３０ 和１００ μｍｏｌ／ＬＴＭＰ对Ｌ ＩＣａ的抑制为３６－３４ ％ ,５８－９４ ％ 和７４－２４％ （Ｐ均＜ ０－０１） ,且浓度愈大,其抑制作用愈强,但都不使Ｉ Ｖ曲线的峰值发生偏移。提示ＴＭＰ具有阻断Ｌ ＩＣａ的作用,且呈浓度依赖性阻滞效应。     

人参皂甙单体Rb_1对豚鼠心肌细胞ICa~(2+)电流阻滞作用的研究

研究人参单体Ｒｂ１对ＩＣａ２＋电流的影响。采用全细胞电压钳技术记录了豚鼠心室肌细胞ＩＣａ２＋电流，绘出了电流—电压关系曲线。在保持电压－５０ｍＶ时，阶跃命令在一５０～＋６０ｍＶ，０ｍＶ时电流最大。并发现Ｒｂ１对ＩＣａ２＋电流有明显的阻滞作用。而且在１００μｍｏｌ／Ｌ，２００μｍｏｌ／Ｌ，３００μｍｏｌ／Ｌ，４００μｍｏｌ／Ｌ范围时有剂量依赖关系。     

牛蛙球囊毛细胞电压依赖性钾通道电流的研究

目的 :研究牛蛙球囊毛细胞膜上钾通道的类型。方法 :全细胞膜片钳技术。结果 :1当钳制电位为 - 1 0 0 m V,以 1 0 m V的步距阶跃 ,阶跃从 - 70 m V至 + 2 0 m V,随着膜电位的去极化 ,可记录到一系列快速、瞬时的外向电流 ,4- Ap对其有特异性阻断作用。激活电压为 - 53.85± 7.8m V。2 A型钾通道的数量在牛蛙毛细胞间存在差异。 3当钳制电位为 - 70 m V,以 1 0 m V的步距阶跃去极化 ( - 50 m V～ + 4 0 m V) ,可产生一延迟整流性钾离子流 ,四乙基氯化氨 ( TEA)能使该电流幅度下降 59%± 1 1 %。结论 :牛蛙毛细胞膜上含有 A型钾通道和延迟整流性钾通道。     

豚鼠初级精母细胞延迟外向K~+电流的研究

笔者应用机械分离获得豚鼠单个初级精母细胞,采用全细胞式膜片钳技术记录该细胞离子通道电流.结果表明:在标准盐溶液中,当钳制电位-90mV、指令电压-60～+180mV、步阶电压20mV时,可记录到外向离子电流;将标准盐溶液换成含4mmol/L的四乙基氯化氨(TEA)盐溶液,外向电流显著抑制,冲洗换液后大部分电流恢复,表明此电流为外向K~+流.     

δ阿片受体激动剂对NGl08—15细胞延迟整流钾通道的双向调节作用

目的 观察δ阿片受体激动剂DPDPE对NGl08—15细胞膜上延迟整流钾通道的调节作用。方法 将NGl08—15细胞膜电位钳制在—90mV,给予时程为150ms的阶跃脉冲刺激,由—50mV逐渐增至 80mV,每次递增10mV,记录到一系列外向延迟整流钾电流,记录给予不同浓度S阿片受体激动剂DPDPE前后的钾电流变化,比较其作用与给药浓度的关系,同时观察阿片受体拮抗剂纳洛酮(NAL)和特异性δ阿片受体拮抗剂纳曲酮(NTI)对δ阿片受体激动剂DPDPE的阻断效应。结果 δ阿片受体激动剂DPDPE在高浓度(≥10^-6mo1/L)时,对钾通道产生兴奋性作用;而低浓度(≤10^-7mol/L)时,对延迟整流钾通道产生抑制作用,且作用均随着时间的延长而逐渐增强。结论 δ阿片受体激动剂DPDPE对延迟整流钾通道的作用具有双向调节作用。     

褪黑激素对新生大鼠海马神经元延迟整流钾电流的影响

目的 用膜片钳技术观察褪黑激素对电压门控性延迟整流钾电流(Ik)的影响,探讨褪黑激素在中枢神经系统的作用机制及其生物学意义.方法 选择7～12 d原代培养的新生Wistar大鼠海马锥体神经元,用膜片钳电压钳全细胞记录模式观察Ik的基本电生理特点,并观察不同浓度褪黑激素,包括1、10、100 nmol/L、1、10、100 μmol/L和1 mmol/L对Ik的幅度及动力学特性的影响.结果 利用海马锥体神经元的钾电流对4-AP、TEA的敏感性及电生理特性的不同可分离出激活、失活缓慢,具有强烈外向整流特性的延迟整流钾电流.褪黑激素对海马锥体神经元Ik的影响是快速、可逆、呈电压依赖性的,但对其激活曲线没有影响.褪黑激素对Ik的作用具有浓度依赖性.1～100nmoI/L的褪黑激素可逐渐递增地增加Ik幅度;1～100 μmol/L褪黑激素对Ik的增加程度随浓度增加而增大,而1 mmol/L褪黑激素的增加程度却减小.结论 褪黑激素可逆地增强体外培养新生大鼠海马神经元的Ik电流,这或许参与了神经元损伤和记忆损害的某些环节.     

ATP sensitive K+ channels affecting hypoxia-induced action potential shortening in isolated guinea pig cardiocytes

ＡＴＰｓｅｎｓｉｔｉｖｅＫ＋ｃｈａｎｎｅｌｓａｆｅｃｔｉｎｇｈｙｐｏｘｉａｉｎｄｕｃｅｄａｃｔｉｏｎｐｏｔｅｎｔｉａｌｓｈｏｒｔｅｎｉｎｇｉｎｉｓｏｌａｔｅｄｇｕｉｎｅａｐｉｇｃａｒｄｉｏｃｙｔｅｓＬｉｕＨｕａｊｕｎ刘华军，ＹａｎｇＸｕｅｙｉ杨学义...     

Effect of etomidate on voltage-dependent potassium currents in rat isolated hippocampal pyramidal neurons

Background Previous studies demonstrated general anesthetics affect potassium ion channels, which may be one of the mechanisms of general anesthesia. Because the effect of etomidate on potassium channels in rat hippocampus which is involved in memory function has not been studied, we investigated the effects of etomidate on both delayed rectifier potassium current （IK（DR）） and transient outward potassium current （I_K（A）） in acutely dissociated rat hippocampal pyramidal neurons.Methods Single rat hippocampal pyramidal neurons from male Wistar rats of 7-10 days were acutely dissociated by enzymatic digestion and mechanical dispersion according to the methods of Kay and Wong with slight modification. Voltage-clamp recordings were performed in the whole-cell patch clamp configuration. Currents were recorded with a List EPC-10 amplifier and data were stored in a computer using Pulse 8.5. Student＇s paired two-tail t test was used for data analysis. Results At the concentration of 100 μmol/L, etomidate significantly inhibited IK（DR） by 49.2% at ＋40 mV when depolarized from -110 mV （P 〈0.01, n=8）, while did not affect IK（A） （/1=8, P 〉0.05）. The IC50value of etomidate for blocking IK（DR）was calculated as 5.4 μmol/L, with a Hill slope of 2.45. At the presence of 10 μmol/L etomidate, the V1/2 of activation curve was shifted from （17.3±1.5） mV to （10.7±9.9） mV （n=8, P 〈0.05）, the V1/2 of inactivation curve was shifted from （-18.3±2.2） mV to （-45.3±9.4） mV （n=8, P 〈0.05）. Etomidate 10 μmol/L shifted both the activation curve and inactivation curve of IK（DR））to negative potential, but mainly affected the inactivation kinetics.Conclusions Etomidate potently inhibited IK（DR） but not IK（A） in rat hippocampal pyramidal neurons. IK（DR） was inhibited by etomidate in a concentration-dependent manner, while IK（A） remained unaffected.     

多非力特对豚鼠心室肌细胞的电生理作用

目的探讨多非力特对心肌细胞电生理作用的特点。方法（1）应用膜片钳全细胞技术记录单个豚鼠心室肌细胞膜延迟整流性钾流（IK）,观察不同浓度多非力特对IK的影响,并探讨IK的快速激活成分（IKr）的电生理特性。（2）标准微电极技术记录豚鼠右室乳头肌细胞动作电位,观察不同浓度多非力特灌流前后动作电位各参数的变化。结果（1）多非力特0.01～0.5μmol/L呈浓度依赖性抑制IK的时间依赖性外向钾流（IK.time）和尾电流（IK.tail）,但浓度再增大至1μmol/L后,此抑制作用趋于最大。对-20mV钳制电压下IK.time、IK.tail的抑制程度比＋50mV时更明显（P〈0.05或0.01）。（2）通道动力学分析发现,多非力特1μmol/L使IK.tail快失活过程消失,慢失活时间常数无明显变化（P〉0.05）。（3）多非力特敏感的电流成分在-40mV开始呈电压依赖性快速激活,峰值电压为0,开始出现内向整流,其IK.tail也呈电压依赖,无内向整流,但膜电位达＋20mV后达饱和,以上均符合IKr的特点。（4）多非力特对动作电位的影响：0.5和1.0μmol/L浓度下可使动作电位时程（APD30、APD90）均明显延长（P〈0.05或〈0.01）,且呈反转频率依赖性。结论多非力特对IK的作用符合特异性IKr阻滞剂的特点,并呈反转频率依赖性延长APD,是其抗心律失常作用的电生理基础。     

氯胺酮对大鼠海马神经元瞬间外向钾电流的抑制作用

目的：观察氯胺酮对大鼠海马锥体神经元瞬间外向钾电流（I_A）的影响。方法：酶消化法急性分离Wistar大鼠海马锥体神经元,采用全细胞膜片钳技术测定I_A。加用不同浓度（10、30、100、300和1 000 μmol/L）氯胺酮后,计算I_A抑制率,建立氯胺酮的浓度-效应曲线,选择30 μmol/L氯胺酮作I_A稳态激活（及失活）曲线。结果：10 μmol/L的氯胺酮对I_A的电流幅度无影响;30、100、300和1 000 μmol/L的氯胺酮对I_A的电流幅度抑制率分别为（11±2）%、（22±3）%、（45±5）%和(53±5)%。IC₅₀为（130±24）μmol/L, Hill系数为1.19±0.56。30 μmol/L氯胺酮使激活曲线的半数最大激活膜电位（V _{1/ 2}）从（-8.70±0.13） mV 移动到 （-11.2±2.10） mV (n=8, P<0.05), K从（15.0±4.6） mV移动到（17.6±5.7）mV (n=8, P>0.05);失活曲线的V _1/2从（-75.53±7.98） mV移动到（-91.94±11.85） mV（n=8, P < 0.05）,K从（10.5±2.2） mV移动到（8.0±1.2） mV（n=8, P>0.05）。30 μmol/L氯胺酮使I_A的激活和失活曲线均向超极化方向明显移动。 结论： 临床浓度的氯胺酮能够同时加速I_A的激活和失活过程,但加速I_A失活的能力大于其加速I_A激活的能力。氯胺酮对中枢神经系统的作用可能与I_A抑制有关。     

Frequency and Voltage-dependent Inhibition of Delayed Outward Potassium Current by Flecainide in Isolated Atrial Cell of Guinea Pig Heart

Effects of flecanide on membrane currents were studied using an isolated single atrial cell from guinea pig hearts. The tightseal cell clamp technique was used. In the current clamp condition, flecainide prol(?)nged significantly the atrial action potential (APD) with frequency dependence.Delayed outward K current (I_k) and outward tail current were specifically inhibited by flecainide in a frequency and concentration fashion. Flecainide inhibit(?)d I_k more strongly as the membrane potential become more positive from+10mV to+60mV.The value of I_k was attenuated to 0.973 nA from 1.105 nA of control and the value of tail current was reduced to 0.113 nA from 0.288 nA of control at 60 mV. The drug did not affect on the holding current.The effects of flecainide on the action potential and transmembrane ionic currents strongly suggest that the main mechanism of action of this agent is to inhibit Voltage-dependent potassium current. In the Voltage clamp condition, flecainide affected neither the conventional L type Ca~(2+) current nor the I~(k1) current significantly. Our research proved that F1e was not completely consistent with class Ic agents, because F1e could markedly increase the APD in the experiment.