电磁辐照对海马病理形态学及相关因子表达的影响

目的对比性研究3种波段电磁辐射、对大鼠海马脑区的损伤病理及相关因子表达情况,为防治措施提供生物学依据。方法126只大鼠随机分为对照组(C)、高功率S波段微波辐照组(S)、高功率X波段微波辐照组(X)、电磁脉冲辐照组(E),C组给予伪照射、余3组分别给予100 mW.cm-2、100 mW.cm-2及6×104V.m-1,辐照后6 h、1 d、3 d、7 d、14 d、28 d活杀,海马组织经HE染色及甲苯胺兰染色后光镜观察病理学改变;SP免疫组织化学染色法检测GFAP、IL-1β、iN-OS的表达;应用图像分析仪进行定量检测。结果辐照后6 h~7 d各辐照组海马神经元变性和凋亡。辐照后3 d,E、S、X组尼氏体积分光密度(IOD)分别为4.44±0.83、2.70±0.76、2.22±0.69,明显低于C组(13.76±4.88,P<0.01)。辐照后6 h各照射组海马神经元超微结构呈缺血性改变、辐照后3 d出现空泡和次级溶酶体,血管间隙增宽水肿;辐照后3 d,S、X组的IL-1β(IOD)分别为1.29±0.71、1.22±0.43,明显高于C组(0.96±0.29,P<0.01)。iNOS分别为1.44±0.60、1.87±0.52、1.69±0.43,明显高于C组(0.65±0.25,P<0.01)。GFAP分别为0.14±0.07、0.16±0.07、0.16±0.07,明显低于C组(0.19±0.09,P<0.05或p<0.01)。结论本实验条件下,3种波段电磁辐照皆可导致大鼠海马组织损伤,GFAP、IL-1β、iNOS因子参与了电磁辐照所致损伤的病理过程;高功率微波作用较电磁脉冲明显,,而X的作用又较S明显。     

补体C5aR受体在UUO大鼠模型肾组织中的表达

目的动态检测单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织中补体C5a受体（C5aR）的表达变化,从而探讨其在肾小管间质纤维化发展中的可能作用机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为UUO组及假手术（SOR）组,每组18只,UUO组行左侧输尿管梗阻术,SOR组仅游离左侧输尿管不结扎。术后第5、10、15天分别处死每组中6只大鼠,取左肾行HE和Masson染色,并用免疫组化检测肾组织C5aR的表达,RT-PCR检测C5aR的基因表达情况。结果UUO组第5天肾小管扩张,小管间质细胞部分变性,梗阻后第10天小管间质细胞可见坏死,间质纤维增多,第15天可见弥漫的肾小管基底膜增厚皱缩,纤维化明显,UUO组间质损伤指数与肾纤维化程度在术后不同时间点显著高于SOR组（P〈0．01）。免疫组化结果显示：SOR组大鼠肾组织中仅有少量C5aR表达,UUO组术后第5、10及15天C5aR表达[（7．94±2．67）IOD,（12．39±2．64）IOD,（13．37±0．98）IOD]显著高于对应时间点的SOR组[（4．50±2．32）IOD,（5．69±1．73）IOD,（4．30±1．45）IOD]（P〈0．05,P〈0．01）,术后第10天明显高于第5天（P〈0．01）,而从第10天到第15天仅稍有增高。C5aRmRNA在UUO组从术后第5天到第10天梗阻侧肾脏C5aRmRNA表达明显增多（0．10±0．02到0．34±0．10）,而从第10天到第15天表达未见明显增多,甚至有降低的趋势（第15天为0．32±0．06）。结论实验大鼠梗阻侧肾组织中C5aR的表达在早期随着梗阻时间延长而上调,晚期则增多缓慢,其基因水平表达情况同蛋白基本一致,提示C5aR可能在肾脏局部通过与循环系统中的C5a结合在肾间质纤维化早期起作用。     

热电厂锅炉灰粉尘对大鼠肺组织的早期毒效应

[目的 ]探讨某热电厂锅炉灰粉对染尘早期大鼠肺组织的毒性作用及其机制。 [方法 ]分别对石英组、灰粉尘组及对照组Wistar大鼠一次性气管内注入浓度为 5 0mg/ml的石英尘、锅炉灰粉悬浮液及生理盐水各 1ml ,染尘后 10d ,用 2 ,4 二硝基苯肼比色法、Folin 酚试剂法和钼蓝法测定支气管肺泡灌洗液 (BALF)中乳酸脱氢酶活性及总蛋白和磷酯含量 ,免疫组织化学染色法直接检测肺组织中的肿瘤坏死因子 α(TNF α)和转化生长因子 α(TGF α)的表达。 [结果 ]与生理盐水组相比 ,石英组和锅炉灰粉组大鼠BALF乳酸脱氢酶活性增高和总蛋白明显增加 (P <0 0 1) ,且石英组大于锅炉灰粉组 (P <0 0 1) ;锅炉灰粉组磷脂含量未见增高 (P >0 0 5 ) ,且明显低于石英组。生理盐水组未见TNF α表达 ,石英组和锅炉灰粉组均引起TNF α阳性表达 [(4 1 2 4± 3 2 6) %、(16 97± 1 85 ) % ] (P <0 0 1)。生理盐水组和锅炉灰粉组偶见肺泡上皮细胞表达TGF α[(2 19± 0 2 2 ) % ,(2 75± 0 2 7) % ] ,而石英组TGF α呈表达增多 (79 5 7± 5 0 9) % (P <0 0 1)。 [结论 ]染尘大鼠早期 ,锅炉灰粉能够引起大鼠肺组织损害 ,但毒性明显弱于石英尘。     

大鼠气管内注入纳米二氧化钛后的血浆代谢组学研究

目的 运用一维磁共振氢谱(1H MR)结合模式识别的代谢组学技术探讨大鼠气管内注入纳米二氧化钛(nano-TiO2)的毒效应,并寻找毒效应的靶器官及生物标志物.方法 将24只SD大鼠按数字表法随机分为4组,分别为高剂量组(40.0 mg/kg nano-TiO2)、中剂量组(4.0 mg/kg nano-riO2)、低剂量组(0.4 mg/kg nano-TiO2)和对照组(生理盐水),每组各6只大鼠.按0.1 ml/100 g采用非暴露式气管内注入方式,染毒1次.观察1周后,进行血浆1H MR检测,并对代谢图谱进行主成分分析(PCA).同时摘取心、肺、肝、肾等器官作组织病理学检查.结果 血浆代谢组学分析表明:高剂量组乳酸相对含量[(37.86±2.58)×10-3]、柠檬酸相对含量[(2.21±0.45)×10-3]、胆碱相对含量[(7.74±0.76)×10-3]和肌酸相对含量[(4.17 d-1.15)×10-3]低于对照组[(52.07±5.12)×10-3、(3.01±0.21)×10-3、(9.28±0.78)×10-3、(8.59±2.64)×10-3](t值分别为-6.024、-3.177、-3.374、-4.215,P值均<0.05);而葡萄糖相对含量[(19.41±1.72)×10-3]高于对照组[(14.45±2.45)×10-3](t=2.802,P<0.05);中剂量组乳酸相对含量[(44.39±5.09)×10-3]和肌酸相对含量[(3.67±0.76)×10-3]低于对照组[(52.07±5.12)×10-3、(8.59±2.64)×10-3](t值分别为-3.254、-4.694,P值均<0.05);低剂量组丙酮酸相对含量[(3.84±0.70)×10-3]高于对照组[(3.13×±0.46)×10-3](t=2.787,P<0.05),胆碱相对含量[(8.10±0.72)×10-3]低于对照组[(9.28±0.78)×10-3](t=-2.602,P<0.05).各剂最组大鼠各个组织脏器均未见明显的病理变化.结论 大鼠肺脏、肝脏、肾脏和心脏是nano-TiO2气管注入染毒的靶器官;乳酸、丙酮酸、匍萄糖、柠檬酸、胆碱和肌酸可作为寻找nano-TiO2致机体毒作用靶器官的参考生物标志物.     

熊果酸对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞数量和波形蛋白表达的影响

目的研究熊果酸对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞(AM)数量和波形蛋白表达的影响。方法将无特定病原体级Wistar大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、矽肺组和熊果酸组,每组20只。空白对照组大鼠不予任何处理,其余3组大鼠均通过非暴露式气管滴注法一次性予剂量为250 mg/kg体质量的游离二氧化硅混悬液。其后,空白对照组和矽肺组大鼠灌胃剂量为10 m L/kg体质量的0. 9%氯化钠溶液,溶剂对照组大鼠灌胃10 m L/kg体质量为0. 6%的羧甲基纤维素钠溶液,熊果酸组大鼠灌胃剂量为40 mg/kg体质量的熊果酸,1次/d,连续56 d。在灌胃第7、14、28、56天时各组分别处死5只大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)检测AM数量,采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测肺组织中波形蛋白的表达。结果溶剂对照组和矽肺组大鼠4个时间点BALF中AM数量和肺组织中波形蛋白相对表达水平均高于同时间点空白对照组(P 0. 05)。熊果酸组大鼠BALF中AM数量在4个时间点分别低于同时间点溶剂对照组和矽肺组(P 0. 05),在第7和14天均高于同时间点空白对照组(P 0. 05),但在第28和56天分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P 0. 05)。熊果酸组大鼠4个时间点肺组织中波形蛋白相对表达水平分别低于同时间点溶剂对照组和矽肺组(P 0. 05),高于同时间点空白对照组(P 0. 05)。免疫组织化学法结果显示:建立矽肺模型后,溶剂对照组和矽肺组大鼠肺组织纤维化程度逐渐加重,波形蛋白阳性表达在各时点有不同程度增加;熊果酸组大鼠肺组织中波形蛋白表达趋势与上述2组相似,但肺组织纤维化程度和肺泡结构破坏程度均相对较轻,波形蛋白阳性表达相对减弱。结论熊果酸可减少矽肺大鼠肺泡巨噬细胞的数量,下调波形蛋白的表达。     

骨化三醇对大鼠矽肺纤维化的干预作用及其机制

[目的]观察骨化三醇对大鼠矽肺纤维化的干预作用及其可能机制。[方法]将48只SD大鼠随机分为4组:对照组、模型组、溶媒组和骨化三醇组,每组12只。模型组、溶媒组、骨化三醇组采用非气管切开暴露法一次性支气管灌注二氧化硅悬液(50 mg/m L)1m L构建大鼠矽肺模型,对照组大鼠同法注入等体积生理盐水。于造模当天开始每天给药,骨化三醇组给予蓖麻油稀释的骨化三醇(0.5μg/kg)灌胃,溶媒组给予等体积蓖麻油灌胃,对照组及模型组给予等体积生理盐水灌胃。每组分别于造模后第14、28天随机处死6只大鼠。用HE染色、Masson染色法观察大鼠肺组织病理变化,碱水解法检测羟脯氨酸含量,免疫组化法检测大鼠肺组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、SMA-和MAD-相关蛋白(SMA-and MAD-related protein,SMAD)3、SMAD7蛋白表达。[结果]骨化三醇组大鼠肺泡炎症细胞浸润、肺间质纤维化的程度较模型组明显减轻。与同期模型组大鼠相比,骨化三醇组大鼠肺系数、羟脯氨酸含量降低,差异均有统计学意义(P0.05),骨化三醇组TGF-β1(0.021 9±0.003 1)、SMAD3(0.036 9±0.001 6)蛋白表达量低于模型组[(0.036 1±0.002 2)、(0.042 0±0.002 0)](P0.05),SMAD7(0.033 3±0.002 1)蛋白表达明显高于模型组(0.014 4±0.002 4)(P0.05);模型组和溶媒组以上结果差异无统计学意义(P0.05)。[结论]骨化三醇能减轻矽肺纤维化,这与其调控TGF-β1/SMAD通路中蛋白表达有关。     

重组人促红细胞生成素对宫内炎症致新生大鼠脑损伤髓鞘少突细胞糖蛋白表达变化与髓鞘修复关系的研究

目的 通过观察新生大鼠脑组织内髓鞘少突细胞糖蛋白(MOG) mRNA及MOG蛋白动态变化情况,探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)与宫内炎症致脑组织髓鞘损伤、修复的关系,为临床干预新生儿脑白质损伤提供依据。方法 1)选取孕15 d的Wistar大鼠分别经腹腔注射脂多糖及无菌生理盐水后分为脂多糖感染组和对照组,随机选取感染组经苏木素-伊红染色证实胎盘和新生大鼠脑组织存在炎性损伤的同胎新生大鼠64只,分为rhEPO治疗组和感染对照组,随机选取对照组中新生大鼠32只为空白对照组,分别于生后每日腹腔注射rhEPO(5 000 U/kg)或等量生理盐水。2)三组新生大鼠均分别于生后当日、3 d、7 d及14 d行左心室甲醛灌注取脑组织,利用RT-PCR检测脑组织中MOG mRNA,Western blot检测MOG蛋白水平变化。结果 1)空白对照组MOG mRNA水平在3 d[(2.05±0.75)倍]、7 d[(2.37±0.57)倍]及14 d[(3.36±0.81)倍]新生大鼠脑组织中均较当日组[(1.01±0.16)倍]明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);2) 感染对照组MOG mRNA水平在当日、3 d、7 d及14 d新生大鼠脑组织中均较同日龄空白对照组下降,且3 d和7 d组差异具有统计学意义(P＜0.05);3)rhEPO治疗组3 d[(2.18±0.89)倍]、7 d[(3.53±1.55)倍]及14 d[(3.30±1.12)倍]新生大鼠脑组织MOG mRNA水平较同日龄感染对照组均显著上升,差异有统计学意义(P＜0.05);4)rhEPO治疗组MOG蛋白水平在3 d(12.63±0.65 vs. 18.23±0.37)、7 d(13.59±1.10 vs. 22.72±2.77)及14 d(15.63±1.32 vs. 25.85±2.70)时均低于感染对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 宫内炎症致新生大鼠脑组织损害中存在通过抑制髓鞘MOG基因及蛋白表达的机制。早期应用rhEPO能够促进MOG基因及蛋白表达发挥神经修复保护作用,14 d的疗程目前为最佳疗程。     

[Gly14]-Humanin对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激及神经细胞凋亡的影响

目的探讨[Gly14]-Humanin(HNG)预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激及神经细胞凋亡的影响。方法采用改良的Zea-longa法建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注损伤模型。96只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、生理盐水组和HNG组。HNG组大鼠造模前3天给予5μL HNG(100 nmol/m L),股静脉注射,连续3天,每天1次;假手术组与生理盐水组给予5μL生理盐水,缺血3 h再灌注24 h后,采用Zea-longa 5分法对各组大鼠进行神经功能缺损评分(NDS);检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)含量;原位末端标记法观察脑组织细胞凋亡情况。结果假手术组、模型组、生理盐水组和HNG组NDS的中位数(四分位数间距)分别为0(0)、1.5(1)、3(1)和3(1)分,假手术组NDS低于其他3组,HNG组NDS低于模型组和生理盐水组(均P0.05)。与假手术组大鼠比较,模型组、生理盐水组及HNG组大鼠脑组织SOD活性[分别为(11.65±1.66)、(12.15±1.56)和(19.43±1.47)U/m L]及GSH水平[分别为(8.84±1.23)、(7.51±1.16)和(11.17±1.67)mg/L]均降低,MDA水平[分别为(42.61±1.79)、(40.33±1.24)和(35.39±1.29)nmol/m L]升高(P0.05);HNG组SOD活性及GSH水平高于模型组及生理盐水组,而MDA水平低于模型组及生理盐水组(均P0.05)。与假手术组[(0.13±0.01)%]比较,模型组、生理盐水组及HNG组凋亡细胞的百分率[分别为(0.59±0.07)%、(0.51±0.08)%和(0.22±0.03)%]均增多(P0.05),HNG组大鼠凋亡细胞的百分率低于模型组和生理盐水组(均P0.05)。结论 HNG可能通过增加脑组织SOD活性及GSH水平,抵抗缺血再灌注应激损伤,减少神经细胞凋亡,从而减轻神经功能缺损。     

吡非尼酮对大鼠矽肺纤维化的抑制作用

目的 探讨吡非尼酮(PFD)对大鼠矽肺纤维化的抑制作用.方法 75只SD雄性大鼠,随机分成未处理对照组、生理盐水组、生理盐水+PFD组、SiO2组、SiO2+PFD组,每组15只,采用非暴露式气管内染尘法,SiO2组和SiO2+PFD组注入SiO2粉尘悬液(25 mg/ml),生理盐水组和生理盐水+PFD组注入等量生理盐水,染尘后第2天灌胃给予PFD(50 mg/kg),分别观察7、21、42 d后处死.HE、VG和Foot染色观察肺组织的病理形态学改变并进行病理分级,测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量.结果 大鼠肺组织病理观察显示,SiO2+PFD组肺组织纤维化程度比同期SiO2组明显减轻,胶原纤维形成缓慢,矽结节分级评分降低.第42天时,SiO2+PFD组大鼠肺组织HYP含量[(0.75±0.12)mg/g肺组织]比SiO2组[(1.19±0.17)mg/g肺组织]明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PFD能降低大鼠矽肺纤维化程度并减少肺组织中HYP的含量,对实验性大鼠矽肺纤维化具有抑制作用.     

黄精多糖对糖尿病大鼠心肌纤维化影响

目的观察黄精多糖(PSP)对糖尿病心肌病大鼠心肌纤维化影响,探讨其可能机制。方法健康雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、黄精多糖250、500、1000 mg/kg组,所有大鼠给予普通饲料,连续12周,观察各组大鼠一般情况,检测空腹血糖,血生化指标,血流动力学指标,计算心脏质量指数(HMI),左心室质量指数(LVMI),苏木素-伊红染色观察心肌形态学变化;Masson染色观察心肌胶原纤维分布;免疫组化法检测心肌组织骨形态发生蛋白-7(BMP-7)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2/3、Smad7蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠空腹血糖[(24.81±2.30)mmol/L]、HMI[(4.16±1.14)]、LVMI[(2.85±0.09)]及LVEDP升高(P0.05);免疫组化结果显示,模型组大鼠心肌组织中TGF-β1、Smad2/3蛋白的表达显著增加(P0.05),BMP-7、Smad7蛋白表达明显减少(P0.05);HE、M asson染色显示模型组大鼠心肌组织病理损伤严重。与模型组比较,黄精多糖1 000 mg/kg组大鼠空腹血糖[(13.28±2.08)mmol/L]、HMI[(3.21±0.07)]、LVMI[(2.09±0.02)]及LVEDP下降(P0.05),心肌组织中TGF-β1、Smad2/3蛋白表达显著减少(P0.05),BM P-7、Smad7蛋白表达明显升高(P0.05);心肌组织病理改变有所改善。结论黄精多糖可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,其机制可能与促进心肌组织中BMP-7表达,影响TGF-β1/Smads信号通路有关。     

Effect of energy compound on skeletal muscle strain injury and regeneration in rats

This study was designed to determine whether the supplement of energy compound could attenuate strain-induced damage to skeletal muscle in rats. Energy compound is a saline mixture of the following ingredients: ATP (10mg), Coenzyme-A (50 units), Coenzyme-Q(10) (50mg), Cytochrome C (30 mg) and Vitamin B(6) (50mg). Experimental animals were injured in right gastrocnemius muscles by a strain injury model. Energy compound groups were given energy compound 10 ml/kg body weight per day since injured, while saline groups were given saline at the same dose. And a sham operation was performed on the right hindlimb of control group. Plasma was centrifuged to measure lactate dehydrogenase (LDH), lactic acid (La) and creatine kinase (CK) on 3, 7 and 14 d post injury. Muscles were removed and fixed for histology observation and immunohistochemistry assay of desmin and vimentin. The results showed a similar tendency of plasma CK, La and LDH in saline and energy compound groups, while the lower level was found in the energy-compound group. The histological examination of muscle sections revealed a lower degree of damage in the energy compound group in which the expression levels of desmin and vimentin were higher than in the saline group. It is suggested that energy compound supplement may attenuate strain-induced muscle damage and facilitate its regeneration.     

纳米SiO2与标准SiO2对大鼠肺毒作用的比较研究

目的观察纳米SiO_2与标准SiO_2对大鼠的肺部毒性作用。方法72只雄性SD大鼠分为纳米SiO_2组、标准SiO_2组和对照组,每组24只。纳米SiO_2组或标准SiO_2组分别一次性气管注入纳米SiO_2或标准SiO_2颗粒悬浮液0.5 ml,分别观察3、7、14、28d后,各处死6只大鼠,测定肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞总数和总蛋白含量;HE染色和胶原纤维(VG)染色进行病理观察。结果染尘3、7、14d纳米SiO_2组大鼠BALF中自细胞总数[(16.0±6.0)×10~6、(11.1±4.0)×10~6、(12.2±4.6)×10~6]明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),纳米SiO_2染尘3d时明显高于标准SiO_2组[(5.7±3.7)×10~6],差异有统计学意义(P<0.01)。染尘14、28d纳米SiO_2组大鼠BALF中总蛋白含量[(0.41±0.14,0.41±0.19)g/L]明显高于对照组和标准SiO_2组相应时间点的总蛋白含量,高于纳米SiO_2染尘3和7d时的总蛋白含量,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。染尘3d时,纳米SiO_2组肺泡腔、支气管壁及血管壁周白细胞严重浸润,标准SiO_2组肺泡腔及血管壁周也有炎性浸润,但比纳米SiO_2组轻。两组VG染色均未见明显胶原纤维分布。结论在该实验条件下,纳米SiO_2引起大鼠早期肺部炎症反应比标准SiO_2严重,持续时间更长,引起肺部损害的颗粒负荷阈值可能比标准SiO_2低。     

蔺草染土尘致大鼠肺部病变的实验研究

目的　研究蔺草染土粉尘的致尘肺作用。方法　SD雄性大鼠以非暴露式气管内染尘(5 0mg/只 ) ,于染尘后 3、6、12个月 ,取大鼠肺和肺淋巴结作病理和电镜观察 ,测定肺组织胶原蛋白和血清铜蓝蛋白 (CP)含量。结果　染尘后 12个月 ,蔺草染土尘组大鼠肺湿重 (2 .6 9± 0 .2 2 )g ,高于对照组 [(1.87± 0 .2 5 )g]和TiO2 组 [(2 .2 5± 0 .2 6 )g],但低于SiO2 组 [(11.4 1± 1.6 3)g];蔺草染土尘组大鼠肺干重 (0 .4 7± 0 .0 3)g ,高于对照组 [(0 .32± 0 .0 3)g]和TiO2 组 [(0 .4 1± 0 .0 8)g],但低于SiO2 组 [(2 .0 6± 0 .2 8)g];蔺草染土尘组大鼠肺胶原蛋白含量 [(10 3.0 8± 14 .79)mg]高于对照组 [(75 .96± 13.91)mg]和TiO2 组 [(85 .84± 17.6 2 )mg],但低于SiO2 组 [(497.5 0± 10 0 .80 )mg];蔺草染土尘组大鼠血清CP含量为 (18.0 3± 1.87)U/L ,高于对照组 [(15 .0 5± 2 .2 4 )U/L]和TiO2 组 [(16 .92± 1.6 7)U/L],但低于SiO2组 [(2 5 .37± 3.5 8)U/L]。以上各指标各组间的差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。蔺草染土尘组大鼠病理观察可见肺巨噬细胞肺泡炎、Ⅱ型肺泡上皮细胞增多及肺泡间隔增宽 ,有 1～ 2级矽结节和少量胶原纤维性变。电镜下可见 ,蔺草染土尘组大鼠肺有初级和次级溶酶体及     

γ-干扰素对矽肺大鼠肺脏白介素-4和转化生长因子-β1蛋白表达的影响

目的 研究γ-干扰素(IFN-γ)对矽肺大鼠肺中白介素-4(IL-4)和转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达的影响。方法 气管内非暴露法给大鼠染石英粉尘20 mg,第2天开始每日注射IFN-γ(1×105IU),分别在染尘后1个月和2个月时每组各处死半数动物,HE和VG染色观察其肺组织病理改变,免疫组化SABC法观察其肺组织IL-4和TGF-β1蛋白表达情况,用图像分析系统进行定量分析。结果 (1)IFN-γ治疗组大鼠的矽肺纤维化程度明显轻于石英对照组,病理分级较石英对照组减轻半级-1级。(2)图像定量分析结果表明,染尘后1个月,石英对照组IL-4阳性细胞积分光密度值为(3.33±1.27)×104,染尘后2个月降至(1.99±0.80)×104,TGF-β1阳性细胞积分光密度值从(3.67±0.63)×104升至(4.90±1.11)× 104;IFN-γ治疗组IL-4阳性细胞积分光密度值从(2.19±0.90)×104降至(0.61±0.22)× 104,TGF-β1阳性细胞积分光密度值从(1.37±0.31)×104升至(1.76±0.72)×104,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。在这两个时点,IFN-γ治疗组大鼠肺中IL-4、TGF-β1阳性细胞积分光密度值均低于石英对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 IFN-γ对矽肺大鼠肺中IL-4和TGF-β1的表达具有一定的抑制作用。     

外源性肝再生增强因子重组质粒在大鼠肝组织中的表达研究

目的研究外源性肝再生增强因子(ALR)重组质粒在免疫性肝纤维化大鼠肝组织中的表达情况。方法猪血清腹腔注射制备免疫性肝纤维化大鼠模型,pcDNA3-ALR重组质粒静脉注射对其进行干预,通过免疫组化、Western bolting检测大鼠肝组织ALR蛋白质的表达情况,通过RT-PCR检测ALR mRNA的表达情况。结果所有组的大鼠肝组织均有ALR蛋白的表达,其中,以正常组表达最弱,ALR处理组表达最强。图像分析细胞染色密度,正常对照组与模型组的结果分别为(0.109±0.01)和(0.159±0.02),二者相比差异有显著性(P<0.01);ALR处理组为(0.198±0.04),与模型组相比差异也有显著性(P<0.01)。Western bloting测定肝组织ALR的表达的结果与免疫组化相似。ALR mRNA在各组大鼠肝组织的表达pcDNA3-ALR处理组在约550bp处出现了用特定引物扩增的特异基因条带,此条带与直接从大肠杆菌中制备的pcDNA3-ALR重组质粒的扩增条带相同。正常对照组和模型组未出现用特定引物扩增的条带。结论ALR在正常大鼠肝组织的表达较低,在免疫损伤后的肝组织的表达明显增强。ALR重组质粒可在免疫性肝纤维化大鼠肝组织中发生表达,pcDNA3-ALR重组质粒处理组ALR蛋白表达明显增强是由于外源性ALR与内源性ALR表达“叠加”的结果。     

NAC对染尘大鼠模型血清及肺组织中丙二醛的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对二氧化硅所致大鼠肺纤维化血清及肺组织中丙二醛(MDA)的影响。方法取健康、雄性Wistar大鼠90只,随机分为3组:染尘组:采用经非暴露气管注入法,气管内注入无菌SiO2粉尘悬液(50 mg/ml)1 ml建立矽肺模型;4周后再次予以染尘1次。NAC预防治疗组:模型制备同染尘组,于染尘前1周及此后每日予以NAC[500 mg/(kg.d)]灌胃;对照组:同样条件下向气管内注入等量生理盐水。3组动物于实验第8周处死,取肺组织标本行病理学观察、测定肺组织及血清中MDA水平。结果染尘组及预防治疗组MDA含量明显高于对照组;预防治疗组MDA的含量明显低于染尘组,差异有统计学意义(P0.01)。结论 NAC可降低SiO2所致肺纤维化大鼠MDA的产生,抑制肺纤维化的发展,减轻对肺组织的损伤。     

百草枯中毒致大鼠肺纤维化模型中肺组织的胎盘生长因子表达

目的观察在百草枯（PQ）致大鼠肺纤维化模型中肺组织胎盘生长因子（PLGF）的变化。方法将42只健康成年雌性SD大鼠随机分为对照组和染毒组，每组21只，分别观察7、14和28d。染毒组于实验开始一次性灌胃染毒PQ（40mg／kg），对照组予以等量的生理盐水。取肺组织行半定量的病理组织学检查、羟脯氨酸测定，并利用半定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化方法测定PLGFmRNA和蛋白表达。结果PQ染毒后大鼠肺泡炎、肺纤维化程度积分明显增高，肺组织羟脯氮酸含量明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈O．01）。7、14、28d时肺组织PLGFmRNA表达分别1．28±0．29、0．80±0．07、0．65±0．13，均高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；免疫组化阳性指数在3个时点分别为2．27±0．34、1．78±0．41、1．25±0．69，明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PQ中毒大鼠肺组织PLGFmRNA和蛋白水平的表达明显上调。     

哺乳期母鼠接触溴氰菊酯对其仔鼠神经行为发育的影响

目的探讨哺乳期母鼠接触溴氰菊酯(DM)对发育期仔鼠脑一氧化氮合酶(NOS)活力及神经行为发育的影响。方法妊娠大鼠随机分为对照组和2个染毒组,每组6只。染毒剂量分别为3．35和6．70 mg/kg,每只母鼠自产后1～19 d,隔日1次,经口染毒DM；对照组予等量玉米油。观察DM对出生后5、10和21 d仔鼠脑NOS活力及30d仔鼠学习、记忆能力的影响。结果2个染毒组仔鼠哺乳存活率(81．80%、78．60%)均明显降低于对照组(96．70%),差异有统计学意义(P＜0．01)；6．70 mg/kg染毒组10、21 d仔鼠体重[(16．62±2．28)、(31．34±6．94)g]明显低于对照组[(18．81±2．01)、(36．21±7．01)g],差异有统计学意义(P＜0．05)；6．70mg/kg染毒组仔鼠延迟时间为(3．05±1．20)s,被动逃避反应阳性率为21．5%；3．35 mg/kg染毒组被动逃避反应阳性率为22．5%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。旷场实验中,2个染毒组仔鼠行进格子数均明显降低,与对照组的差异均有统计学意义(P＜0．05)；产后5至21 d仔鼠脑NOS活力呈发育性增高趋势；6．70mg/kg染毒组出生后5 d仔鼠脑NOS活力[(0．60±0．07)U·mg pro~(-1)·h~(-1)]明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0．05)结论哺乳期母鼠接触DM可导致仔鼠神经行为发育迟缓,并伴有NOS活力下降。     

Effects of an immune-enhancing diet in endotoxemic rats

OBJECTIVE: This work compared the nutritional efficiency of a recently available enteral formula enriched with arginine, omega-3 fatty acids, and antioxidants and supplied nitrogen as peptides (Crucial, Nestle Clinical Nutrition) with that of a standard polymeric formula (Sondalis HP, Nestle Clinical Nutrition) in endotoxemic rats. METHODS: Male Wistar rats (209 +/- 2 g) underwent catheter gastrostomy and received Sondalis HP until they recovered their preoperative weight. At that time (day 0), an endotoxemic shock was induced by an intraperitoneal injection of lipopolysaccharide (Escherichia coli, 8 mg/kg) and rats then received 290 kcal x kg(-1) x d(-1) and 3.29 g of nitrogen x kg(-1) x d(-1) in the form of Crucial (IED group, n = 7) or Sondalis HP (S group, n = 6) for 3 d. Another group underwent no treatment and was fed ad libitum (AL group). Rats were killed on day 3. Results are presented as mean +/- standard error of the mean (analysis of variance and Newman-Keuls test). RESULTS: The endotoxemic shock induced a weight loss in group S on days 1 and 2 and a weight gain in group IED (-3.5 +/- 1.3 g in group S versus +6.0 +/- 2.2 g in group IED, P < 0.05). In the same way, atrophy of extensor digitorum longus muscle was observed in group S, whereas wasting was limited in group IED (102 +/- 4 mg in group IED versus 90 +/- 3 mg in group S versus 119 +/- 3 mg in group AL, P < 0.05). Muscular atrophy was associated with muscular glutamine depletion and correlated with hyperphenylalaninemia (R = 0.60), with the latter being blunted in group IED (57 +/- 1 microM/L in group AL versus 77 +/- 4 microM/L in group S versus 66 +/- 2 microM/L in group IED, P < 0.05). No difference was observed between the experimental groups of endotoxemic rats with respect to nitrogen balance, urinary excretion of 3-methyl histidine, or total tissue protein content. CONCLUSION: Crucial counteracts injury-mediated weight loss, extensor digitorum longus muscle atrophy, and hyperphenylalaninemia in endotoxemic rats.     

矽肺肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响

目的 探讨矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)是否通过影响肺成纤维细胞(FB)基质金属蛋白酶(MMPs)/金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)系统参与矽肺纤维化的发生发展。方法 收集矽肺患者AM培养上清,与人胚肺FB共同孵育6、12、18、24、36、48 h,用免疫细胞化学的方法检测FB中MMP-1和TIMP-1的表达。结果 未经SiO2刺激的矽肺患者AM培养上清作用于FB 24 h,FB中MMP-1的表达较空白对照组减少(积分光密度值分别为0.103±0.014、0.133±0.023),TIMP-1的表达增多(积分光密度值分别为0.108±0.012、0.065±0.006);经SiO2刺激24 h的矽肺患者AM培养上清作用于FB后,FB中MMP-1的表达量进一步减少(积分光密度值分别为0.062±0.008、0.133±0.023),而TIMP-1的表达量进一步增加(积分光密度值分别为0.143±0.015、0.065±0.006)。结论 SiO2可能通过AM的介导影响了FB中MMP-1/TIMP-1系统的表达,参与了肺纤维化的形成。