过继转移FasL基因修饰的树突细胞对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响

目的:观察过继转移FasL基因修饰的树突细胞(DC)对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响,探讨它在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法:构建鼠源FasL(mFasL)真核表达载体pcDNA3.1-mFasL,用电转染法将它转染给DBA/2雄鼠骨髓来源的DC,将转染成功的mFasL-DC于交配前经腹腔注射给CBA/J母鼠。实验动物分为6组:(1)正常妊娠模型组(CBA/J×BALB/c);(2)未添加干预的流产模型组(CBA/J×DBA/2);(3)转输DC培养基(DCCM)的流产模型组;(4)转输单纯DC(DC)的流产模型组;(5)转输转染空质粒DC的流产模型组;(6)转输转染mFasL质粒DC的流产模型组,于妊娠第12~14天观察孕鼠胚胎丢失率。结果:转输mFasL-DC后孕鼠胚胎丢失率明显低于未添加干预或转输DC培养基的流产模型组(P<0.01),与转输单纯DC或带空质粒的DC组相比,其胚胎丢失率也明显下降(P<0.05),它与正常妊娠组相比胚胎丢失率无显著差异(P>0.05);转输单纯DC或空质粒的DC组与未添加干预流产模型组相比胚胎丢失率有所下降,但没有统计学差异;转输DC培养基组与未加干预组之间胚胎丢失率无统计学差异(P>0.05)。结论:过继转移mFasL-DC能诱导妊娠免疫耐受,降低小鼠自然流产模型孕鼠胚胎丢失率。     

经阴道注入重组白细胞介素17对正常妊娠CBA/J孕鼠的影响

目的：观察经阴道注入重组白细胞介素17（r IL-17）对正常妊娠CBA/J孕鼠（CBA/J雌鼠×BALB/c雄鼠）妊娠结局的影响,探讨其在诱导母胎免疫排斥中的作用。方法：将6-8周龄清洁级CBA/J（雌）和BALB/c（雄）近交系小鼠分为3组。对照组：正常妊娠模型CBA/J孕鼠未作任何干扰。磷酸盐缓冲液（PBS）组：正常妊娠模型CBA/J孕鼠,于受孕第1天麻醉状态下经阴道注射50μL PBS。r IL-17组：正常妊娠模型CBA/J孕鼠,于受孕第1天麻醉状态下经阴道注射50μL r IL-17。受孕后第14天观察胚胎丢失率。通过实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）方法、蛋白质印迹（Western blotting）方法检测鼠蜕膜转化生长因子β（TGF-β）和IL-10的表达。结果：给予正常妊娠模型孕鼠外源性r IL-17,能引起其胚胎丢失率明显增加,且蜕膜TGF-β和IL-10 m RNA及蛋白的表达均明显降低（P〈0.05）。而对照组与PBS组相比,胚胎丢失率及TGF-β和IL-10 m RNA及蛋白的表达差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论：经阴道注入r IL-17能够引起正常妊娠模型CBA/J孕鼠胚胎丢失率增加,并引起母胎界面免疫耐受细胞因子分泌异常。     

阻断协同刺激分子对MMP-9/TIMP-3的表达及妊娠结局的影响

目的：探讨阻断CD86协同刺激分子对自然流产模型孕鼠母胎界面MMP-9和TIMP-3的表达及妊娠结局的影响。方法：实验组于妊娠d 4．5腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单抗,对照组注射大鼠同型IgG2b,而正常组不作任何处理。于妊娠d 13．5计算胚胎吸收率,并用免疫组化测定MMP- 9和TIMP-3的表达。结果：实验组的胚胎吸收率和MMP-9均显著低于对照组(P＜0．05),与正常对照组间均无差异；TIMP-3的表达与对照组和正常组比较均无显著差异(P＞0．05)。结论：在妊娠早期阻断CD86协同刺激分子能够通过某些机制诱导自然流产鼠MMP-9/TIMP-3的比值降低并且降低自然流产模型的胚胎吸收率,使模型组的胚胎吸收率恢复至正常妊娠水平。     

协同刺激分子CD86在母-胎免疫调节中的作用

目的　探讨协同刺激分子CD86在母 胎免疫调节中的作用。方法　建立自然流产模型(CBA×DBA/ 2 )及正常妊娠模型 (CBA×BALB/c)。两种模型分别再分为 3个组 :(1)以大鼠的IgG为对照的对照组 ;(2 )于妊娠第 4、6、8、10天 ,分别给CBA孕鼠腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单克隆抗体的多次干预组 ;(3)仅于妊娠第 4天 ,给CBA孕鼠单次腹腔注射抗CD86单克隆抗体的单次干预组。每次腹腔注射的抗体剂量均为 10 0 μg。于妊娠第 14天计算各组胚胎吸收率。 结果　 (1)自然流产模型与正常妊娠模型的对照组胚胎吸收率分别为 2 7 78%和 8 42 %。 (2 )于妊娠第 4、6、8、10天腹腔注射抗CD86单克隆抗体后 ,自然流产模型的多次干预组胚胎吸收率下降至 9 6 8% (P <0 0 5 ) ;而正常妊娠模型的多次干预组胚胎吸收率上升至 13 5 4% (P >0 0 5 )。 (3)妊娠第 4天单次腹腔注射抗CD86单克隆抗体 ,自然流产模型单次干预组的胚胎吸收率下降至 7 14% (P <0 0 0 1) ;而正常妊娠模型单次干预组的胚胎吸收率上升至 11 39% (P >0 0 5 )。结论　妊娠早期 ,尤其在胚胎对母体的致敏阶段 (着床期 ) ,阻断母 胎界面的CD86协同刺激信号 ,将诱导母体对胚胎的免疫耐受 ,从而减少胚胎吸收 ,提高妊娠成功率     

阿奇霉素治疗沙眼衣原体感染孕鼠对其妊娠结局及免疫状态的影响

目的:了解沙眼衣原体感染孕鼠的妊娠结局与体内Th1型、Th2型细胞因子水平的关系,以及阿奇霉素干预治疗对其免疫状态及妊娠结局的影响,探讨沙眼衣原体致不良妊娠结局的免疫机理。方法:随机将孕鼠分成3组,于孕2、3、4天,对照组阴道内接种无感染衣原体由McCoy细胞制备的SPG悬液30μl,模型组阴道内接种1.0×106IFU/ml沙眼衣原体F型株的SPG悬液30μl,给药组阴道接种衣原体后于妊娠第8天腹腔注射阿齐霉素10mg/kg(单次给药)。孕12天用酶联免疫法检测各组小鼠血清中Th1型(IFN-γ、TNF-α)/Th2型(IL-4、IL-10)细胞因子表达水平,计算IL-4/TNF-α,IL-10/TNF-α比率。用方差分析和χ2检验比较3组的妊娠失败率、胚胎吸收率、胎重、孕期体重增加量等,以及3组之间细胞因子水平及Th1/Th2型免疫调节平衡的比率等。结果:模型组与对照组比较体内Th2型细胞因子下降(IL-10),而Th1型细胞因子上升(TNF-α),且代表Th1/Th2型免疫调节平衡的细胞因子比值:IL-4/TNF-α,IL-10/TNF-α模型组显著低于对照组,形成Th1型免疫偏倚。给药组降低了妊娠失败率并降低了Th1型免疫偏倚程度。模型组小鼠妊娠失败率及反复妊娠失败率显著高于对照组;给药组小鼠妊娠失败率较模型组低而较对照组高,反复妊娠失败率较模型组下降明显(P0.05);3组的胚胎吸收率,胚重,孕期体重增加量无显著差异。结论:阴道接种沙眼衣原体使体内细胞因子向Th1型漂移,增加了小鼠的妊娠失败率;阿奇霉素干预可降低Th1型漂移程度,降低小鼠妊娠失败率。     

干预CD86协同刺激信号对母胎界面Th1/Th2型细胞因子转录调控及妊娠结局的影响

目的探讨干预CD86协同刺激信号对母胎界面Th1/Th2型细胞因子转录调控及妊娠结局的影响。方法:将正常妊娠模型(CBA/J×BALB/c)和自然流产模型(CBA/J×DBA/2J)CBA孕鼠均分为两组:对照组(各10只)于孕d 4、d 6、d 8腹腔注射大鼠IgG;干预组(各10只)于孕d 4、d 6、d 8腹腔注射大鼠抗小鼠CD86 mAb。孕d 9竞争性半定量RT-PCR测定各组母胎界面组织中Th1型(IL-12、IFN-γ)/Th2型(IL-4、IL-10)细胞因子转录水平;孕d 12比较两种模型各组的胚胎吸收率。结果:正常妊娠模型中,干预CD86协同刺激信号对母胎界面Th1/Th2型细胞因子转录水平及妊娠预后均无显著影响(P>0.05)。自然流产模型中,干预CD86协同刺激信号能够升调节母胎界面局部Th2型而降调节Th1型细胞因子转录水平,并显著改善其妊娠预后(P<0.05)。结论:于孕早期干预CD86协同刺激信号能够调控母胎界面局部Th1/Th2型细胞因子转录,形成维持正常妊娠所需的Th2型免疫偏倚,诱导母胎免疫耐受。     

干预CD86协同刺激信号在诱导母胎界面Th2型免疫偏倚中的作用

目的 :探讨干预CD86协同刺激信号在诱导母胎界面局部形成Th2型免疫偏倚中的作用。方法 :将正常妊娠模型 (CBA×BALB/c)和自然流产模型 (CBA×DBA/ 2 )CBA孕鼠均分为两组 ,于孕第 4、6、8天 ,对照组腹腔注射大鼠IgG ,实验组腹腔注射大鼠抗小鼠CD86mAb ;孕第 9天 ,ELISA测定母胎界面组织培养上清中Th1型 (IFN γ、TNF α) /Th2型(IL 4、IL 10 )细胞因子表达水平 ,并计算IL 4 /IFN γ、IL 10 /IFN γ比值 ;孕第 12天比较两种模型各组的胚胎吸收率。结果 :正常妊娠模型中 ,干预CD86协同刺激信号对母胎界面原有的Th2型免疫偏离及妊娠预后均无显著影响。自然流产模型中 ,干预CD86协同刺激信号能够诱导母胎界面局部形成Th2型免疫偏倚并显著改善其妊娠预后。结论 :于孕早期 ,干预CD86协同刺激信号能够改善母胎界面局部细胞因子微环境 ,形成维持正常妊娠所需的Th2型免疫偏倚 ,诱导母胎免疫耐受     

胸腺基质淋巴细胞生成素及相关因子在原因不明复发性流产中的表达

目的:探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)与原因不明复发性流产(URSA)的关系。方法:建立研究组自然流产小鼠模型(CBA/J×DBA/2)和对照组正常妊娠小鼠模型(CBA/J×Balb/c),采用免疫印迹(Western Blot)方法和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测绒毛、蜕膜组织中TSLP的表达;采用酶联免疫吸附双抗体夹心(ELISA)方法检测外周血TSLP、细胞因子白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的表达;采用流式细胞仪检测调节性T细胞(Treg)表面FoxP3的表达。结果:RT-PCR法检测自然流产模型组绒毛组织中TSLP的表达低于正常妊娠模型组(P<0.05);Western Blot法分析显示自然流产模型组绒毛、蜕膜组织中TSLP的表达低于正常妊娠模型组(P<0.05);ELISA法检测自然流产模型组血清中TSLP、IL-4的表达低于正常妊娠模型组(P<0.05),而IFN-γ的表达较正常妊娠模型组未见明显增高(P>0.05);流式细胞仪检测自然流产模型组CD4+CD25+Treg和FoxP3的表达明显低于正常妊娠模型组(P<0.05)。结论:TSLP明显降低,可能是导致URSA患者母胎界面免疫耐受异常的重要原因。     

蜕膜转化生长因子-β mRNA表达与自然流产的相关性研究

目的 :探讨蜕膜转化生长因子 β(TGF β)mRNA表达与自然流产的相关性。方法 :采用斑点杂交和图象分析技术检测自然流产小鼠模型CBA/J×DBA/2蜕膜TGF βmRNA表达情况 (n =8) ,以正常妊娠小鼠模型CBA/J×BALB/c为对照 (n =8)。结果 :自然流产模型组胚胎丢失率为 30 .0 0 % (15 /5 0 ) ,显著高于正常妊娠小鼠模型组的 4 .5 4 % (3/6 6 ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。自然流产模型组蜕膜中TGF βmRNA表达的扫描灰度为4 4 .5 2± 9.2 8,明显低于正常妊娠模型组的 117.97± 3.11,差异有高度显著性 (P <0 .0 0 1)。结论 :蜕膜TGF βmRNA表达异常在自然流产发病中起重要作用。     

促胃泌素释放肽(GRP)与小鼠自然流产的关系

目的:研究促胃泌素释放肽(gastrin-releasing peptide,GRP)与自然流产的关系,进一步探讨GRP在妊娠过程中所起的作用。方法:建立小鼠正常妊娠模型(对照组)和自然流产模型(实验组),于妊娠13.5 d计算胚胎吸收率;采用免疫组织化学法测定各组GRP的表达情况。结果:实验组孕鼠的胚胎吸收率明显高于对照组,差异显著(P<0.05)。实验组的GRP表达率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GRP参与正常妊娠过程,自然流产的发生可能与GRP的低表达有关。     

α-MSH、IL-6和NF-κB在晚期流产和早产中的表达及意义

目的:探讨外周血中α-MSH、NF-κB和IL-6表达与亚临床绒毛膜羊膜炎发病的相关性,评价其早期预测感染性流产和早产的价值。方法:选取2010年1月至2012年12月于国际和平妇幼保健院因晚期(先兆)流产或(先兆)早产就诊的孕产妇52例,其中晚期先兆流产、晚期难免流产、先兆早产、早产各13例。同期选取中孕引产、正常妊娠各13例作为对照组。ELISA双抗体夹心法检测血清中α-MSH、NF-κB和IL-6表达水平。结果:(先兆)早产组及(先兆)难免流产组的生殖道感染率增高,其中早产组与流产组生殖道感染与绒毛膜羊膜炎存在相关性(P0.05)。与中孕引产组和晚期难免流产组比较,先兆流产组外周血α-MSH水平明显增高,差异均有统计学意义(P0.01);与正常妊娠组和早产组比较,先兆早产组中α-MSH水平增高,差异均有统计学意义(P0.01);与中孕引产组比较,先兆流产组与难免流产组中外周血IL-6水平增高,其中难免流产组中IL-6水平最高;与正常妊娠对照组比较,先兆早产及早产组中IL-6水平增高,均有统计学意义(P0.01)。6组中NF-κB表达水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:孕中期的生殖道感染是导致早产及流产的主要原因。α-MSH及IL-6可早期预测早产和流产的发生及预后。外周血NF-κB不能作为早产及流产单独的预测因子。     

Th17/Treg平衡与正常妊娠及子痫前期关系的研究

目的:探讨Th17及CD4+CD25+Foxp3+调节性T(regulatory T,Treg)细胞介导的免疫反应在子痫前期发病中的作用。方法:选取在山东大学齐鲁医院进行产前检查的子痫前期患者25例及正常晚孕期妇女27例,并选取育龄期健康未孕妇女20例。利用流式细胞技术检测3组患者血样中分泌IL-17的Th17及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞亚群占CD4+T淋巴细胞的百分比,并计算Th17/Treg比率,比较其在子痫前期与正常妊娠时的变化;再用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组患者外周血中IL-17、IL-10、TGF-β1等细胞因子的表达并进行比较。结果:(1)与正常未孕组及正常妊娠组相比,子痫前期患者外周血中分泌IL-17的Th17细胞占CD4+T淋巴细胞百分比明显升高(P<0.01),CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞百分比明显降低(P<0.01);与正常未孕组相比,正常妊娠组Th17细胞的比例明显降低(P<0.01),Treg细胞比例明显升高(P<0.05);(2)子痫前期患者外周血中Th17/Treg比率明显高于正常未孕组及正常妊娠组(P<0.01),正常妊娠组外周血中Th17/Treg比率与健康未孕组相比明显降低(P<0.01);(3)子痫前期患者外周血中IL-17及TGF-β1的TGF-β1表达明显高于正常未孕组及正常妊娠组(P<0.05),而IL-10的表达未见明显差异(P>0.05);与正常未孕组相比,正常妊娠组外周血中IL-17、IL-10及TGF-β1的水平均未见明显变化(P>0.05)。结论:正常妊娠可能依赖于Treg细胞介导的免疫耐受状态,子痫前期患者外周血中Th17/Treg之间的平衡失调而倾向于Th17介导的促炎状态,这一机制可能参与了子痫前期的发生发展。     

泰山磐石散对复发性流产小鼠母胎界面Th1/Th2细胞因子及妊娠预后的影响

目的:观察泰山磐石散对复发性流产小鼠母胎界面Th1/Th2细胞因子及妊娠预后的影响,为泰山磐石散临床应用提供新的实验依据。方法:采用经典造模方式DBA/2小鼠与CBA/J杂交,获得复发性流产小鼠模型,随机将与DBA/2小鼠合笼的60只CBA/J妊娠小鼠分为模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组和阳性对照组;与BALB/C合笼的10只CBA/J孕鼠作为正常妊娠模型。于妊娠14 d后处死孕鼠,观察小鼠胎盘丢失情况,并提取培养胎界母细胞,24 h后收集细胞上清液,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和IL-10含量。结果:经泰山磐石散治疗后,与模型组比较,复发性流产小鼠胎盘丢失率明显改善,母胎界面细胞上清液中Th1型细胞因子IFN-γ明显降低,Th2型细胞因子IL-4、IL-10明显升高,Th1/Th2免疫调节失衡明显改善,以中药高剂量组改善最为明显。结论:泰山磐石散能改善复发性流产小鼠胎盘丢失情况,其具体机制可能是通过调节Th1/Th2免疫调节平衡实现。     

妊娠早期阻断协同刺激分子诱导自然流产模型孕鼠脾脏细胞母-胎免疫耐受的研究

目的　探讨阻断协同刺激分子———CD80 和CD86对自然流产模型孕鼠妊娠结局及孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原免疫耐受状态的影响。方法　将雌性小鼠 (CBA/J)分别与BALB/c及DBA/2两种雄性小鼠合笼交配 ,分别建立正常妊娠模型CBA/J×BALB/c( 2 0只 ,对照组 )和自然流产模型CBA/J×DBA/2 ( 2 0只 ,研究组 )。CBA/J小鼠于妊娠第 4天 (着床期 )腹腔分别注射大鼠同型IgG 0 2mg( 10只 ) ,或大鼠抗小鼠CD80 和CD86单克隆抗体 ( 10只 )。妊娠第 9天 ,采用单向混合淋巴细胞反应 ,分析孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力 ,并测定细胞培养上清液中白细胞介素 2(IL 2 )水平 ,以研究脾脏细胞母 胎免疫耐受状态 ;妊娠第 14天观察两组的胚胎吸收率。结果　 ( 1)研究组中 ,腹腔注射大鼠IgG的孕鼠胚胎吸收率为 2 4 3% ,而注射大鼠抗小鼠CD80 和CD86单克隆抗体的孕鼠胚胎吸收率为 9 8% ,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。 ( 2 )应用大鼠抗小鼠CD80 和CD86单克隆抗体 ,使妊娠 9d的孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力及IL 2水平显著下降(P <0 0 5 )。结论　孕早期阻断协同刺激分子 ,可诱导产生孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的免疫耐受 ,从而使自然流产模型孕鼠的妊娠结局达到正常妊娠水平。     

辅助生殖技术中的早期流产胚胎染色体分析

目的 :探讨利用辅助生殖技术妊娠后较高的流产率与胚胎染色体异常的关系。方法 :对辅助生殖技术妊娠后自然流产 (ART妊娠组 ) 33例 ,自然妊娠后自然流产 (自然妊娠组 ) 30例的流产绒毛进行染色体检查 ,分析流产胚胎的染色体异常情况。结果 :ART妊娠组 33例中 ,流产胚胎染色体异常率 6 3.6 % (2 1/ 33) ,明显高于其它自然流产相关因素 (P <0 .0 0 5 ) ;自然妊娠组 30例中 ,流产胚胎染色体异常率 5 6 .7% (17/ 30 ) ,明显高于其它自然流产相关因素 (P <0 .0 0 5 )。ART妊娠组与自然妊娠组的自然流产胚胎的染色体异常率无明显差异 (P >0 .0 5 )。两组流产胚胎染色体异常共 38例 ,其中染色体数量异常 34例 (89.5 % ) ,染色体结构异常 4例 (10 .5 % )。在染色体数量异常的 34例中 ,ART妊娠组占 5 0 % (17/ 34) ,自然妊娠组占 5 0 % (17/ 34) ,两组间无差异 ;而染色体结构异常的 4例全部出现在ART妊娠组中的ICSI组。结论 :辅助生殖技术妊娠后的高流产率与流产胚胎的染色体异常密切相关 ,但是其染色体异常的发生率和异常类型与自然妊娠后流产时无明显差异     

行IVF/ICSI各年龄段妇女早期单、双胎妊娠丢失的回顾性研究

目的:分析行IVF/ICSI的各年龄段妊娠妇女早期单、双胎妊娠胚胎丢失的影响因素。方法:回顾性分析行IVF/ICSI治疗,授精后第2日或第3日移植2~3个胚胎后单、双胎妊娠周期中早期妊娠囊丢失情况。结果:共收集到1 674个IVF/ICSI周期,孕6周单胚胎着床1 077例,双胚胎着床597例。孕12周时单胎和双胎的继续妊娠数分别为901例(83.66%)和548例(91.79%)(P<0.001)。双胎妊娠中,21例(3.52%)自然减胎成单胎,28例(4.69%)自然流产。单胎和双胎妊娠中,每个着床妊娠囊的丢失率分别为16.34%(176/1 077),6.45%(741/1 194)(P<0.001)。妊娠妇女早期妊娠囊丢失率单胎者高于同年龄段双胎妊娠者,26~37岁各年龄段妇女单胎与双胎妊娠丢失率间差异均有统计学意义(P<0.05),≥38岁妇女双胎妊娠丢失率显著增加。单胎妊娠组Gn每日用量显著高于双胎妊娠组(P<0.05),而受精率及优质胚胎率单胎妊娠组显著低于双胎妊娠组(P<0.001),Gn每日用量、受精率及优质胚胎率在妊娠丢失组和继续妊娠组间无统计学差异(P>0.05)。结论:双胎妊娠早期能获得更好的继续妊娠机会,随年龄增加尤其是≥38岁妇女,妊娠丢失显著上升。胚胎形态学质量好则有助于双胚胎着床,但是对继续妊娠没有直接明显的影响。     

溴隐亭致流产大鼠TGF-β1、IL-2、IL-4的表达变化及意义

目的:研究转化生长因子-B1(TG9F-β1)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)在溴隐亭致流产大鼠黄体及血清的表达水平,探讨流产的发生机制.方法:将孕雌性wistar大鼠随机分为3组,正常孕组、注射溴隐亭组、注射溴隐亭+γ-干扰素(IFN-γ)抗体组,3组均于孕12天时,腹主动脉采血后心内灌注固定,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组血清TGF-β1、IL-2、IL-4水平,免疫组化SP法检测TGF-β1、IL-2、IL-4在各组大鼠卵巢黄体的表达并进行图像分析,分别对上述结果进行单因素方差分析及t检验.结果:血清与卵巢黄体阳性细胞OD值的变化趋势基本一致,注射溴隐亭组,IL-2水平较正常孕组升高(P<0.05)、TGF-β1、IL-4水平较正常孕组降低(P<0.05);注射溴隐亭+IFN-γ抗体组,血清IL-2水平较注射溴隐亭组有所降低(P<0.05),但仍高于正常孕组(P<0.05),而TGF-β1、IL-4水平有所升高(P<0.05),基本达正常水平.结论:给孕鼠注射溴隐亭及IFN-γ抗体后,TGF-β1、IL-2、IL-4在血清及卵巢黄体的表达有一定改变,此改变可能与流产的发生有一定的关系.     

早期自然流产患者绒毛Notch受体mRNA和蛋白表达及与妊娠关系的初步探讨

目的:初步探讨早期自然流产患者绒毛Notch受体(Notch1、Notch2、Notch3、Notch4)mRNA及蛋白表达及对滋养细胞的调控作用。方法:用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术和免疫印迹法检测6例自然难免流产患者和12例正常早期妊娠妇女绒毛Notch1、Notch2、Notch3、Notch4的mRNA和蛋白的表达水平。结果:(1)自然流产组绒毛Notch1和Notch3 mRNA表达水平高于正常早期妊娠组(P<0.05);(2)Western-blot检测显示早期自然流产患者绒毛中Notch1、Notch2、Notch3受体蛋白的表达水平高于正常早期妊娠组(P<0.05)。结论:Notch受体蛋白在早期自然流产患者绒毛中表达上调,可能与自然流产的发病原因有关。     

蜕膜转化生K因子-β mRNA表达与自然流产的相关性研究

目的:探讨蜕膜转化生长因子-β(TGF-β)mRNA表达与自然流产的相关性.方法:采用斑点杂交和图象分析技术检测自然流产小鼠模型CBA/J×DBA/2蜕膜TGF-βmRNA表达情况(n=8),以正常妊娠小鼠模型CBA/J×BALB/c为对照(n=8).结果:自然流产模型组胚胎丢失率为30.00%(15/50),显著高于正常妊娠小鼠模型组的4.54%(3/66),差异有显著性(P＜0.05).自然流产模型组蜕膜中TGF-β mRNA表达的扫描灰度为44.52±9.28,明显低于正常妊娠模型组的117.97±3.11,差异有高度显著性(P＜0.001).结论:蜕膜TGF-β mRNA表达异常在自然流产发病中起重要作用.     

Th17及相关细胞因子在妊娠早期母-胎免疫耐受中的作用

目的:研究Th17细胞及相关细胞因子IL-22、IL-23在人孕早期不明原因的自发性流产母-胎免疫耐受中的作用。方法:以10例正常人工流产患者为正常早孕组,收集18例染色体正常自发性流产患者为自然流产组。分离两组患者外周血单个核细胞及蜕膜组织免疫细胞,用流式细胞术检测上述细胞中Th17细胞比例及相关细胞因子的表达,探讨其与自发性流产的关系。结果:自然流产组外周血Th17细胞比例显著高于正常早孕组(P<0.05),IL-23显著低于正常早孕组(P<0.01),但两组IL-22无显著差异;自然流产组蜕膜局部Th17细胞比例显著高于正常早孕组(P<0.01),IL-23亦显著高于正常早孕组(P<0.01),IL-22则显著低于正常早孕组(P<0.01)。结论:Th17细胞在孕早期蜕膜局部及外周血中的数量增多可能导致母胎免疫耐受失衡,在早期自然流产中发挥重要的正诱导作用,而IL-22、IL-23等细胞因子在其中的调控效应则具有明显的微环境相关性。