动脉粥样硬化患者PBMC MCP-1基因表达及其临床意义

目的：研究动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）的趋化因子蛋白-1（Monocyte Chemoattractant Protein-1,MCP-1）的基因表达及其临床意义。方法：采用RT-PCR检测20例动脉粥样硬化患者和20例健康者PBMC MCP-1的基因表达。结果：动脉粥样硬化患者PBMC MCP-1基因表达明显高于健康者,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：MCP-1表达与动脉粥样硬化存在一定相关性,在动脉粥样硬化发病过程中起重要的作用。     

强直性脊柱炎患者血清中DKK-1的表达及其意义

目的检测不同病期强直性眷柱炎（ankylosingsporidylitis,AS）患者血清中Dickkopf-1（DKK—1）和肿瘤坏死因子（INF—a）的表达水平,初步探讨成骨相关因子表达水平与As的关系。方法采用酶联免疫吸附法（EUsA）检测47例As患者（包含22例早期患者和25例中晚期患者）、20例类风温性关节炎（RA）患者和20例健康对照人群血清DKK—1和TNF—a的表达水平。结果AS和RA患者血清中DKK—1和TNF—a水平明显高于正常对照,AS和RA患者组相比较血清DKK-1和TNF—a水平没有显著差异。中晚期As患者DICK—1水平较早期患者明显降低,INF—a表达也有降低,但无显著差异,Spearman分析显示,AS患者血清DKK-1和TNF—a表达水平正相关。结论随着AS骨化程度的进展,DKK—1表达呈下调趋势,提示DKK-1的表这下调可能参与了AS患者的骨化,DKK—1可能是与As骨化程度相关的血清标志物。     

TLR-2、TLR-4在强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞中的表达及其临床意义

目的：探讨TLR-2和TLR-4在AS患者PBMC中的表达及其临床意义。方法：选择AS患者及健康志愿者各30例,分为AS组和健康对照组。采用RT-PCR及蛋白免疫印迹技术检测两组受检者PBMC中TLR-2和TLR-4的表达水平。结果：As组TLR-2mRNA、TLR4mRNA表达水平分别为1．59±1．43、0．60±0．73,均高于健康对照组的0．06±0．04、0．06±0．39（JP均〈0．05）。AS组TLR-4蛋白表达水平为12．0±8．6,高于健康对照组的4．5±2．1（P〈0．05）。AS患者的BASDAI、BASFI与TLR-2mRNA表达水平呈正相关（r分别为0．759、0．664,P〈0．01）;AS患者的BASDAI与TLR-4mRNA表达水平呈正相关（r=0．347,P〈0．01）。结论：AS患者TLR-2、和TLR-4的表达水平高于健康志愿者,并与其自身疾病活动性存在一定程度的相关性,TLR-4或许可以作为评估AS病情活动的有价值的参考指标。     

血液透析患者血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白水平与动脉粥样硬化相关性的初步探讨

目的 观察血液透析（hemodialysis,HD）患者血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（adiopocyte fatty acid binding protein,A-FABP,FABP4）的变化,并初步探讨其与HD动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的相关性.方法 选取HD患者29例为研究对象（HD组）,20例健康体检者为对照（HC组）,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定2组血清A-FABP、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein 1,MCP-1）的水平.采用彩色多普勒超声技术测定患者颈总动脉内膜-中层（intima-media thickness,IMT）厚度.再根据是否伴有大血管病变,将HD组分为HD合并AS组（HD＋AS组）、HD不合并AS组（HD-AS组）.结果 HD组患者与HC组比较,血清A-FABP、FFA水平显著升高（P＜0.05）.经pearson相关分析,A-FABP与FFA存在显著相关（r=0.939,P＜0.01）,A-FABP与IL-6、MCP-1亦存在正相关关系.HD＋AS组患者血清A-FABP水平高于CKD-AS组,且存在统计学差异（P＜0.01）.结论 HD患者血清A-FABP及FFA水平高于健康人群,AS的形成可能与血清A-FABP水平的升高有关.推测A-FABP可能主要通过促进炎症反应和活化巨噬细胞参与AS的形成.     

单核细胞趋化蛋白-4在类风湿关节炎中的表达及临床意义

目的：研究CC亚族趋化因子单核细胞趋化蛋白-4（MCP-4/CCL13）在类风湿关节炎（RA）患者外周血的表达水平,并分析MCP-4的水平与疾病活动性的关系,以探讨MCP-4在RA发病机制中的作用。方法：应用酶联免疫吸附实验（ELISA）定量方法测定40例RA患者、20例其它自身免疫性疾病患者和20例正常健康对照者血清MCP-4水平。分析RA组血清MCP-4水平是否与ESR、CRP、RF及双手放射学检查等指标具有相关性。结果：RA组血清MCP-4水平为（203.79±18.64）pg/mL,其它自身免疫性疾病对照组血清MCP-4水平为（207.76±40.37）pg/mL,正常健康对照组血清MCP-4水平为（125.13±11.08）pg/mL。RA组、其它自身免疫性疾病对照组血清MCP-4水平与正常健康对照组相比均有统计学意义（P〈0.05）,RA组与其它自身免疫性疾病对照组间无统计学意义（P=0.787）,RA活动期患者血清MCP-4水平（214.86±24.46）pg/mL和非活动期患者血清MCP-4水平（190.27±29.11）pg/mL比较无统计学意义（P=0.065）。RA组血清MCP-4水平与ESR、CRP、RF及双手X片分期无相关性。结论：RA组的血清MCP-4水平高于正常健康对照组,但与ESR、CRP、RF及双手X片分期无相关性。MCP4可能参与了RA的发病过程。     

肥胖合并或不合并2型糖尿病患者血清单核细胞趋化蛋白-1浓度与胰岛素敏感性的关系

目的：比较肥胖合并或不合并2型糖尿病患者血清单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）浓度与葡萄糖钳夹试验中胰岛素敏感性的关系。方法：分别对20例正常糖耐量者和40例肥胖患者（其中合并2型糖尿病者20例,无糖尿病者20例）进行高胰岛素-葡萄糖钳夹试验,以钳夹稳态期胰岛素介导的葡萄糖利用率（Rd）来判定周围组织胰岛素敏感性。同时用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清MCP-1水平,并测定其他临床指标,分析各指标之间的相关性及与胰岛素敏感性的关系。结果：与正常体质量组相比,肥胖患者外周血MCP-1水平明显升高（P〈0.01）,Rd值明显降低（P〈0.01）,合并糖尿病者其变化明显大于无糖尿病者。两指标呈明显负相关（r=-0.440,P=0.004）。MCP-1是胰岛素敏感性的独立影响因素。结论：外周血MCP-1是胰岛素抵抗的独立影响因素,又与腰围紧密联系,促进胰岛素抵抗的发展。预防和控制腹型肥胖将有助于降低MCP-1水平,改善胰岛素抵抗。     

强直性脊柱炎中血清高迁移率族蛋白 B1和肿瘤坏死因子α的表达与疾病相关性的研究

目的：探讨强直性脊柱炎（AS）患者血清高迁移率族蛋白 B1（HMGB1）和肿瘤坏死因子α（TNFα）的表达及其与疾病活动的相关性,以寻找治疗 AS 新靶点。方法本研究纳入50名 AS 患者,其中30例为初诊未治疗活动期患者,20例为治疗三个月稳定期患者。从同地区选取性别、年龄和种族与疾病组配对的30名正常志愿者作为健康对照。通过 ELISA 方法测定不同组别的血清 HMGB1与 TNFα的表达,检测治疗前后与对照组血清 HMGB1与 TNFα的表达水平,比较分析 AS 患者 HMGB1与 TNFα变化以及其与炎性指标、AS 躯体功能指数 BASFI 和 AS 活动性指数 BASDAI 之间的相关性。结果AS 患者血清中 HMGB1和 TNFα水平明显高于正常组,稳定期较活动期患者二者水平明显下降,但仍高于健康对照组;AS 患者血清中 HMGB1和 TNF-α水平均与血沉、超敏 C 反应蛋白（hsCRP）、BASFI、BASDAI 呈正相关;AS 患者血清中 HMGB1和 TNFα水平呈明显的正相关。结论AS 中 HMGB1与 TNFα的表达升高,与疾病活动性正相关,且两种因子有较强的正相关性,HMGB1在 AS 的发病中可能扮演了重要角色。     

强直性脊柱炎患者血清骨桥蛋白及基质金属蛋白酶-3检测临床意义研究

目的：探讨强直性脊柱炎（AS）患者血清骨桥蛋白（OPN）及基质金属蛋白酶-3（MM P-3）水平的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测并比较50例AS患者及20例健康者血清OPN及MM P-3水平,并与患者血细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）水平进行相关分析。结果AS患者血清OPN水平明显高于健康者（P＜0．05）,且与患者ESR及CRP水平呈正相关（P＜0．05）;AS患者血清MMP-3水平明显高于健康者（P＜0．05）,且与患者ESR、CRP水平呈正相关（P＜0．05）;AS患者血清OPN水平与MMP-3水平呈正相关（P＜0．05）。结论OPN及MMP-3参与AS发病,其血清水平检测可用于患者病情活动判断及疗效评价。     

氯沙坦对糖尿病肾病患者氧化应激的影响

目的：探讨氯沙坦对糖尿病肾病（DN）氧化应激的影响。方法：DN 64例,常规降糖并服氯沙坦100mg/d,健康自愿者20例为对照。测定血糖、血脂、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）、晚期氧化蛋白产物（AOPPs）;血及尿超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、尿单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）及白蛋白排泄率（UAER）。结果：与对照组比较,DN患者SOD活性降低,血清MDA、ox-LDL和AOPPs升高,尿MCP-1降低。氯沙坦治疗后,SOD活性升高,MDA、ox-LDL和AOPP降低,尿MCP-1升高,MDA和UAER降低。血清MDA、ox-LDL、AOPPs、尿MCP-1与UAER呈正相关（P〈0.05）,SOD与UAER呈负相关（P〈0.05）。结论：氯沙坦可抑制DN患者氧化应激,从而减少尿蛋白排泄。     

感染幽门螺杆菌的慢性萎缩性胃炎患者血清hs-CRP水平及其与Cag-A的关系

目的：探讨感染幽门螺杆菌（HP）的慢性萎缩性胃炎（CAG）患者血清超敏C-反应蛋白（hs—CRP）水平及其与HP细胞毒素相关基因CagA的关系。方法：以ELISA法检测CAG组患者血清hsCRP水平和CagA—IgG，并与无临床症状（As）感染者及健康对照者进行比较。结果：CAG组血清hs—CRP平均值（1．30±0．34）mg／L明显高于AS组（0．19±0．03）mg／L和健康对照组（0．11±0．03）mg／L（P均〈0．01），AS组血清hs—CRP平均值显著高于对照组（P〈0．05）；CAG组CagA^＋HP与CagAHP患者之间血清hsCRP水平无明显差异，AS组CagA^＋HP与CagAHP入选者之间血清hsCRP水平亦无明显差异。结论：CAG组与AS组血清hs—CRP水平明显高于对照组。尽管HP感染可导致血清hs～CRP水平升高，但与是否表达CagA无关。     

强直性脊柱炎外周血Th17细胞的检测及意义

目的探讨Th17细胞在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的水平及意义。方法取20例AS患者(分AS病情稳定组及活动组各10例)和健康人外周血单个核细胞(PBMC)、免疫磁珠分选CD4+T细胞,用或不用非特异性刺激剂(anti-CD3、anti-CD28),然后加佛被酯/离子霉素,经固定/透膜处理进行细胞内染色,流式细胞术检测CD4+T细胞内白细胞介素-17(IL-17)、γ-干扰素(IFN-γ)、及IL-6水平。结果免疫磁珠分选CD4+T细胞纯度达90%以上。AS病情活动组IL-17表达水平较病情稳定组和健康对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。用anti-CD3、anti-CD28刺激后,CD4+T细胞IL-17胞内表达水平较无刺激有一定的增加。AS患者CD4+T细胞IFN-γ胞内表达水平呈现与IL-17表达相似的特点。结论 AS患者外周血CD4+T细胞胞内IL-17和IFN-γ呈高表达,提示分泌IL-17的Th17细胞和分泌IFN-γ的Th1细胞共同参与了AS发病过程。     

肝癌患者外周血单个核细胞HLA-G表达研究

目的了解肝细胞癌（HCC）患者外周血单个核细胞（PBMC）人类白细胞抗原G（HLA—G）的表达水平。方法收集38例HCC患者、25例肝硬化患者和40名健康查体者的PBMC,分别用逆转录一聚合酶链反应（PCR）和流式细胞术（FCM）检测其HLA—GmRNA和HLA—G蛋白表达水平。结果HCC组、肝硬化组和健康对照组PBMCHLA—GmRNA表达率分别为94．7％、84．0％和87．5％,差异无统计学意义（P=0．359）;HCC组HLA—G蛋白表达率高于肝硬化组和健康对照组,差异有统计学意义（P=0．002）。HCC组PBMCHLA—G蛋白主要表达于CD4^＋细胞上。结论HCC患者PBMCHLA—G蛋白表达率升高,其机制与临床意义尚待进一步研究。     

胚胎骨髓来源间充质干细胞对人Th17细胞的免疫调节

背景：众多研究表明间充质干细胞能发挥免疫调节功能,抑制T细胞增殖。目的：观察胚胎骨髓来源间充质干细胞对人Th17细胞的调节作用。方法：将人胚胎骨髓间充质干细胞与正常人外周血单个核细胞或CD4＋T细胞以1∶10比例共培养4d,以单个核细胞或CD4＋T细胞单独培养为对照。应用实时定量PCR检测细胞白细胞介素17mRNA表达,酶联免疫吸附试验检测细胞上清中白细胞介素17蛋白水平,流式细胞术检测Th17细胞数量。结果与结论：胚胎骨髓来源间充质干细胞与单个核细胞共培养组白细胞介素17mRNA表达水平明显高于单个核细胞组（P〈0.01）。与此一致的是,胚胎骨髓来源间充质干细胞与单个核细胞或CD4＋T细胞共培养组细胞上清中白细胞介素17蛋白水平明显高于单个核细胞组、CD4＋T细胞组（P〈0.05,P〈0.01）。胚胎骨髓来源间充质干细胞与CD4＋T细胞共培养组Th17细胞数量明显高于CD4＋T细胞组（P〈0.01）,但胚胎骨髓来源间充质干细胞本身并不表达白细胞介素17。表明胚胎骨髓来源间充质干细胞可促进人Th17细胞增殖。     

CD28／CD152：CD80／CD86分子在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞上的表达

目的探讨共刺激分子CD28／CD152：CD80／CD86在强直性脊柱炎（AS）患者外周血淋巴细胞上的表达及与免疫功能的关系。方法流式细胞仪检测AS患者及健康体检者T细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19的表达及CD28／CD152和CD80／CD86在外周血T、B淋巴细胞上的表达水平；采用速率散射比浊法、酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及C-反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果CD3^＋CD4^＋T细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显高于健康对照组（P〈0．05），而CD3^＋CD8^＋T细胞则明显低于健康对照组（P〈0．05）；CD4^＋和CD8^_T细胞上CD28和CD19^＋B细胞上CD80、CD86的表达均较健康对照组增高（P〈0．05），而CD152在CD4^＋T淋巴细胞上的表达也比健康对照组显著增加，但在CD8%＋T淋巴细胞上的表达却显著降低（P〈0.05）；血清IgG、IgA及CRP、IL-6水平均较健康对照组显著增高（P〈0．05）。结论AS患者外周血淋巴细胞CD28／CD152：CD80／CD86分子的异常表达与其免疫功能紊乱有密切关系。     

强直性脊柱炎患者Toll样受体4表达和sTRAIL、TNF-α、IL-12水平的研究

目的探讨Toll样受体（toll-like receptor,TLR）4、可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（soluble TNF-related apoptosis-inducing ligand,sTRAIL）、白介素（interleukin,IL）-12、肿瘤坏死因子（tumornecrosis factor,TNF）-α在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）发病中的作用。方法采用ELISA双抗体夹心法检测110例AS患者和60例正常对照的血清IL-12、TNF-α及sTRAIL水平,并采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测两组对象外周血单个核细胞TLR4基因水平,同时采用两点终点法测定C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、Wintnobe法检测红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）,分析各指标与AS的关联。结果 AS患者TLR4 mRNA表达、血清sTRAIL含量均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。但TNF-α、IL-12与AS发病的相关性无统计学意义（P〉0.05）。AS患者组中,血清sTRAIL与CRP（r=0.445,P〈0.05）、TNF-α与ESR（r=0.622,P〈0.01）均呈正相关。结论 TLR4通路异常及sTRAIL水平增高可能在AS的发病及炎症反应中发挥一定的作用。     

系统性红斑狼疮患者生长激素释放肽与胰岛素抵抗的相关性研究

目的:初步探讨初治SLE患者生长激素释放肽(Ghrelin)表达水平及其与胰岛素抵抗的关系。方法:选择30例初治SLE患者为观察组,另选择30名健康志愿者为正常对照组。分别检测两组外周血单个核细胞(PBMC)中ghrelin mRNA表达水平和空腹血清ghrelin水平,计算两组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),利用Pearson相关系数进行相关分析。结果:SLE组HO-MA-IR明显高于正常对照组(P<0.01);SLE组PBMC ghrelin mRNA表达比正常对照组明显减弱,其血清ghrelin水平亦明显低于正常对照组(P<0.01),且SLE组低水平的ghrelin与HO-MA-IR呈负相关关系(r=-0.60,P<0.01)。结论:SLE患者存在胰岛素抵抗(IR),ghrelin表达水平低下可能与SLE患者IR相关。     

强直性脊柱炎患者 TNF-α表达水平测定分析

目的：通过比较强直性脊柱炎（AS）患者与健康人之间 TNF-α的表达差异,探讨其在该病发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定强直性脊柱炎患者和健康人血浆中 TNF-α蛋白含量;荧光定量 RT-PCR 法对外周血单个核细胞中 TNF-αmRNA 表达量进行测定。结果强直性脊柱炎患者血浆 TNF-α含量（26．307±15．737 ng/L）高于健康人（11．147±13．868 ng/L）,P ＜0．05,差异有统计学意义;强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞 TNF-αmRNA 表达量（0．0024±0．0177）显著高于健康人（0．0014±0．0004）,且 P ＜0．05,差异有统计学意义。结论AS 患者 TNF-α表达量高于健康人,是强直性脊柱炎发病机制中一种重要细胞因子。     

强直性脊柱炎患者外周血中B淋巴细胞亚群、B细胞活化因子及其受体的表达研究

目的 研究强直性脊柱炎(AS)患者外周血中B淋巴细胞亚群、B细胞活化因子(BAFF)及其受体BP3的表达,为进一步探讨AS发病机制提供新的理论依据.方法 采用流式细胞术测定24例AS患者及30名正常健康体检者外周血中CD19+总B细胞、CD19+ CD20+ CD27 -初始B细胞、CD19+ CD20+ CD27+记...