肌腱损伤后腱中心区域组织愈合能力

背景：实验发现，在肌腱损伤后，腱中心部分细胞生长增殖能力不如腱外膜细胞和周边部分腱内膜细胞，肌腱中心部位细胞的分裂增殖能力及自愈能力究竟如何?目的：研究肌腱损伤后腱中心区域组织的愈合能力。设计：设立对照的重复测量设计。地点和对象：南通医学院第二附属医院骨科。白色纯种Leghorn鸡8只，雌雄不拘，体质量约400g，购自南通医学院动物中心，许可证号SYXK(苏)2002-0066。干预：在无菌条件下切取鸡双侧最长趾Ⅱ区趾深屈肌腱，切成4mm长的肌腱段，分为两组，每组12条。实验组：切除腱外膜和外膜下腱组织肌的肌腱中心区域组织；对照组：仅剥除腱外膜组织的肌腱段。将两组肌腱组织进行体外培养，另取4条肌腱作正常对照组。主要观察指标：实验组和对照组于培养第9，18，27天取标本及正常对照组均进行大体观察和组织学检查。结果：腱细胞数两组培养前为167&;#177;13，培养第9，18，27天对照组分别为80&;#177;7，95&;#177;10，112&;#177;14，实验组分别为237&;#177;16，202&;#177;16，188&;#177;10。对照组均明显少于实验组及培养前，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；实验组比培养前明显增多，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；但培养第18和27天时，实验组腱细胞数较培养第9天少(P&;lt;0．01)。结论：屈肌腱损伤后肌腱中心区域组织有良好的愈合能力。     

不同区域的肌腱组成细胞的增殖能力及其行为差异

背景目前已经证实肌腱具有内在愈合的潜能,但不同区域的肌腱组成细胞在修复过程中的增殖能力及行为差异还有待进一步研究.目的研究不同区域的肌腱组成细胞在体外培养过程中的增殖能力及行为学差异.设计重复测量设计.地点和对象南通医学院第二附属医院骨科.白色纯种Leghorn鸡15只,雌雄不拘,体质量约400 g,购自南通医学院动物中心.方法将鸡Ⅱ区趾深屈肌腱立体分割成4区腱外膜组织、外膜下腱组织、亚中心腱组织、中心腱组织.两相同区域肌腱组织按间隔0.5,1,2 mm 3种排列方式培养于24孔培养板中,每种排列方式培养5孔.完整肌腱段组织也以相同方式培养作为对照.每天计数每种排列方式细胞游出数目、方向及来源,培养第9天作组织学检查.主要观察指标①不同区域的肌腱组织细胞增殖能力及其行为.②立体分割的肌腱段组织体外培养后的组织学变化.结果细胞游出最早、数目最多的组织为腱外膜组织,其他依次为亚中心腱组织、中心腱组织、外膜下腱组织.两腱外膜组织间距越小细胞游出越早,而其他区域的肌腱组织则相反.组织学检查显示培养第9天的完整肌腱段组织,表面腱外膜细胞明显增殖;外膜下腱组织、亚中心腱组织内的腱内膜细胞与培养前相比,差异无显著性意义(t=2.31,P＞0.05);中心腱组织的腱内膜细胞(84±3)较培养前(167±5)减少,两者间差异有非常显著性意义(t=58.08,P＜0.01).培养第9天的中心腱组织,其腱内膜细胞(237±3)比培养前(167±5)增多,两者差异有非常显著性意义(t=33.73,P＜0.01).结论不同区域的肌腱组成细胞在体外培养过程中的增殖能力及行为存在差异.     

肌腱损伤后腱中心区域组织愈合能力

背景实验发现,在肌腱损伤后,腱中心部分细胞生长增殖能力不如腱外膜细胞和周边部分腱内膜细胞,肌腱中心部位细胞的分裂增殖能力及自愈能力究竟如何?目的研究肌腱损伤后腱中心区域组织的愈合能力.设计设立对照的重复测量设计.地点和对象南通医学院第二附属医院骨科.白色纯种Leghorn鸡8只,雌雄不拘,体质量约400 g,购自南通医学院动物中心,许可证号SYXK(苏)2002-0066.干预在无菌条件下切取鸡双侧最长趾Ⅱ区趾深屈肌腱,切成4 nn长的肌腱段,分为两组,每组12条.实验组切除腱外膜和外膜下腱组织肌的肌腱中心区域组织;对照组仅剥除腱外膜组织的肌腱段.将两组肌腱组织进行体外培养,另取4条肌腱作正常对照组.主要观察指标实验组和对照组于培养第9,8,7天取标本及正常对照组均进行大体观察和组织学检查.结果腱细胞数两组培养前为167±13,培养第9,8,7天对照组分别为80±7,5±10,12±14,实验组分别为237±16,02±16,88±10.对照组均明显少于实验组及培养前,差异有显著性意义(P＜0.01);实验组比培养前明显增多,差异有显著性意义(P＜0.01);但培养第18和27天时,实验组腱细胞数较培养第9天少(P＜0.01).结论屈肌腱损伤后肌腱中心区域组织有良好的愈合能力.     

氯沙坦干预早期动脉粥样硬化家兔内膜增生的相关因素

目的：探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦对加速性动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)早期家兔血管单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)及丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPK)蛋白表达的影响。方法：以家兔加速性动脉粥样硬化早期模型为研究对象，将24只家兔随机分成对照组、早期动脉粥样硬化组和氯沙坦干预组，每组8只，采用组织学、免疫细胞化学和生物化学方法评价加速性AS早期家兔血管组织学、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)、MAPK和MCP-1蛋白表达和组织胆固醇含量的改变。结果：早期动脉粥样硬化组血管内膜与中膜厚度比值、内膜PCNA阳性细胞数明显增加，MAPK与MCP-1蛋白表达平均光密度值均显著增加(P&;lt;0.001)，氯沙坦干预组内膜与中膜厚度比值较早期动脉粥样硬化组显著下降(0.92&;#177;0.10和0.23&;#177;0.04，t=30.086．P&;lt;0.001)．PC-NA阳性细胞数明显减少(t=23.944，P&;lt;0.001)，血管壁MAPK与MCP-1蛋白表达水平明显下降(0.025&;#177;0.006和0.054&;#177;0.007．0.057&;#177;0.006和0.205&;#177;0.019，F=265.14，410.55，P&;lt;0.001)，主动脉组织胆固醇含量明显降低(t=3.913，P&;lt;0.05)。结论：氯沙坦干预可抑制血管损伤时MCP-1及MAPK蛋白表达，减轻加速性AS病变血管内膜增生，减少胆固醇在血管壁沉积，从而可能在预防AS发生过程中起重要作用。     

复方鳖甲软肝方对离体肝星形细胞增殖的影响

目的：观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepatic stellate cells，HSC)增殖的影响，以探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法：将成年健康雄性SD大鼠75只，随机分为正常对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组，并制备各组血清。采用大鼠CCl4造模后肝星形细胞分离、培养，药物血清制备，MTT法检测法各组血清对HSC不同时相增殖的影响，酶标仪波长为450 nm。结果：培养24h，各组HSC增殖比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；培养48，72h，高、中、低剂量药物组HSCA值(0．47&;#177;0．02，0．55&;#177;0.07：0．46&;#177;0．02,0．58&;#177;0．08；0．51&;#177;0．03，0．69&;#177;0．07)与模型组(0．66&;#177;0．05和0．96&;#177;0.05)比较。差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；高、中剂量组药物组与对照组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：不同剂量的复方鳖甲软肝方药物血清作用48，72h后均能降低或抑制HSC的增殖，尤以高、中剂量作用明显。     

不同浓度氟对兔成骨细胞细胞周期及凋亡的影响

目的：建立成骨细胞体外培养模型，并观察不同浓度的氟对成骨细胞增殖行为的影响，为氟治疗骨质疏松的研究提供实验依据。方法：用幼兔肋骨培养成骨细胞，并纯化、鉴定。用不同浓度的氟化钠处理(20，160，240，400μmol／L)，MTT法测定氟对成骨细胞增殖活性的影响：流式细胞术测定细胞周期变化及凋亡的改变。结果：低浓度的氟(20μmol／L)在体外可显著促进成骨细胞增殖(作用24h后A值为：0．089&;#177;0．012，P&;lt;0．01)，不引起成骨细胞的凋亡，可使S期和G2／M期的细胞明显增多；高浓度的氟(160，240，400μmol／L)则抑制成骨细胞的增殖。(作用24h后的A值分别为：0．055&;#177;0．010，0．054&;#177;0．006，0．023&;#177;0.010，P&;lt;0．01)，引起成骨细胞的凋亡(9．53&;#177;2．10，24．43&;#177;3．03，P&;lt;0．01和32．63&;#177;1．17，P&;lt;0．05)，G2／M期细胞明显减少。结论：低浓度的氟可以促进成骨细胞的增殖；高浓度的氟抑制成骨细胞的增殖，诱导细胞的凋亡，抑制细胞由S期向G2／M期转化。低浓度的氟可用于对骨质疏松的治疗。     

HD02对新生大鼠海马神经干细胞增殖分化和细胞周期的影响

目的：观察HD02对新生大鼠体外培养神经干细胞(neural stem cell，NSC)增殖、分化和凋亡的影响。方法：分离、培养新生大鼠海马NSC，采用免疫荧光双标技术检测NSC增殖分化，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡变化。结果：HD02的中低剂量组BrdU阳性细胞数、BrdU+Nestin,BrdU+NeuroD，BrdU+NF200,BrdU+GFAR，BrdU+Oli阳性细胞数和S期细胞比率明显高于空白对照组和EGB761组(P&;lt;0．01)，G0／G1期比率(51．12&;#177;3．66)％明显低于正常对照组(68．23&;#177;3．30)％；细胞凋亡率(5．18&;#177;0．80)％与EGB761(4．98&;#177;0．40)％相比差异无显著性意义(P&;gt;0．05)，但却明显低于正常对照组(6．43&;#177;0．55)％(P&;lt;0．01)。结论：HD02能显著促进NSC增殖分化。其机制可能与缩短G0／G1期、减少凋亡、促进S期比率有关。     

兔血管内膜增生过程中核因子κB活性与氯沙坦的影响

背景：核因子κB可参与细胞增殖反应，其复杂的机制需深入研究。目的：研究氯沙坦对血管内膜增生及核因子κB活性的影响。设计：以实验动物为研究对象，完全随机分组设计，探索性实验研究。单位：一所大学医院心内科。对象：本实验于2001—11／2002-06在武汉大学人民医院实验室及实验动物中心完成。实验选用雄性日本大耳白兔24只，随机取8只作为正常组，始终饲以普通饲料；另外16只造成腹主动脉内皮损伤并以高脂饮食饲养8周后再随机分为对照组、氯沙坦组，每组8只。方法：术后氯沙坦组给予氯沙坦10mg／(b&;#183;d)口服，对照组喂生理盐水。4周后取腹主动脉行组织形态学观察及用免疫组织化学方法分析核因子κB、α-平滑肌肌动蛋白、巨噬细胞、细胞间黏附分子1。主要观察指标：3组动物经不同干预措施后血管内膜厚度、内膜面积、内膜核因子κB，细胞间黏附分子1的表达和平滑肌细胞、巨噬细胞数量比较。结果：对照组兔血管氯沙坦组血管内膜厚度、内膜厚度／中膜厚度、内膜面积、内膜面积／中膜面积明显大于正常组(P&;lt;0．01)。氯沙坦组兔血管内膜厚度、内膜厚度／中膜厚度、内膜面积．内膜面积／中膜面积[(0．42&;#177;0．08)mm，0．43&;#177;0．10，(3．18&;#177;0．83)mm。，0．54&;#177;0．11]均明显小于对照组[(1．35&;#177;0．35)mm，0．67&;#177;0．15，(5．30&;#177;1．71)mm^2，0．77&;#177;0．14](P均&;lt;0．01)。氯沙坦组新生内膜中巨噬细胞、平滑肌细胞数均明显少于对照组(P&;lt;0．01，0．05)。氯沙坦组兔血管核因子KB及其靶基因产物细胞间黏附分子1的水平也明显低于对照组(P&;lt;0．01，0．05)。结论：氯沙坦可阻断血管紧张素Ⅱ受体，进而抑制核因子κB，从而抑制平滑肌细胞迁移、增殖和新生内膜形成。     

大鼠自体骨骼肌卫星细胞移植治疗心肌梗死后血清血管内皮生长因子的改变及其意义

目的：了解自体骨骼肌卫星细胞移植治疗大鼠心肌梗死后血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的改变及临床意义。方法：30只Wistar大鼠随机分为移植组(n=15)及对照组(n=15)，所有大鼠经结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型。将体外培养2周的大鼠自体卫星细胞以注射的方式移植到梗死区周围，4周后病理观察移植细胞的生长、增殖情况及缺血心肌毛细血管密度的改变，并测定血清VEGF浓度及血流变参数的改变。结果：卫星细胞在梗死区中可增殖分化为横纹肌纤维，与对照组相比，移植组的缺血心肌毛细血管密度[(523．42&;#177;82．14)和(430、73&;#177;65．04)／mm^2，t=2．98，P&;lt;0．01]、血清VEGF质量浓度明显增高[(320．05&;#177;39．29)和(271．14&;#177;37．52)μg／L，t=2．37，P&;lt;0．05]，而某些血液流变参数明显改善[低切全血黏度：(11．09&;#177;1．52)和(13．02&;#177;1．56)mPa&;#183;s，t=2．22，P&;lt;0．05；红细胞聚集指数：7．59&;#177;0．81和8．56&;#177;0．59，t=3．25，P&;lt;0．01；卡松黏度：(1．64&;#177;0．41)和(2．26&;#177;0．41)mPa&;#183;s，t=3．66，P&;lt;0．0l；卡松屈服应力：(11．23&;#177;1．54)和(12．69&;#177;1．59)Pa，t=2．23，P&;lt;0．05]。结论：卫星细胞在心肌梗死区中可增殖分化为横纹肌样细胞，并通过自分泌和旁分泌的形式提高血清VEGF浓度，由此改善血流变参数及缺血心肌毛细血管密度。     

分米波防治屈肌腱粘连的机制研究

背景：肌腱损伤是手外科中的多发损伤，肌腱修复术后常因肌腱粘连影响患者术后手功能恢复，防治肌腱粘连特别是屈指肌腱损伤术后粘连一直是手外科康复工作中的重点。目的：研究分米波对肌腱粘连和愈合的影响。设计：以实验动物为研究对象的随机对照研究。单位：省级骨科研究所。材料：实验于2001—01／2003—06在河北省骨科研究所完成。选用Leghorn鸡28只，随机分为术后分米波治疗组、手术对照组。方法：将Leghorn鸡的趾深屈肌腱切断、修复后局部分米波照射，分别于术后3，6周处死动物进行大体和光镜、电镜观察及生物力学检测。主要观察指标：主要指标：两组肌腱的大体解剖、光镜及电镜观察的结果。生物力学检测结果。次要指标：肌腱粘连、愈合分级结果。结果：大体和组织学观察见分米波治疗组粘连明显减少，电镜检查分米波治疗组成纤维细胞蛋白合成代谢较对照组更旺盛。生物力学检测显示分米波治疗组肌腱滑动距离(mm)(3周为5.37&;#177;1．06，6周为6．76&;#177;1．52)、康复顺应性(3周为1．04&;#177;0.65)均大于手术对照组(分别为4．43&;#177;1．03，5.33&;#177;1.27；0.63&;#177;0.31)(P&;lt;0．05)，抗张力强度(N)(26.93&;#177;4.80，47.12&;#177;7．76)亦大于手术对照组(21．29&;#177;4.88，38.96&;#177;7．52)，差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：分米波可有效地促进肌腱愈合，减少肌腱粘连，为肌腱损伤修复术后的早期康复锻炼提供了必要的条件，是防治肌腱粘连理想的辅助措施。     

面神经端侧吻合与端端吻合后神经再生质量的比较

目的：比较面神经损伤后端侧吻合与端端吻合方法效果。方法：在解放军总医院动物中心．用24只新西兰大耳白兔进行实验。左侧上颊神经切断后作端端吻合。右侧上颊神经切断后，远断端与下颊支侧方，外膜开窗处作支间端侧吻合。分别于术后1，2，3个月时作肌电图后取材，作组织学检查。结果：术后1，2个月时，端侧吻合肌电图神经传导速度慢于端端吻合[1个月时(10．6&;#177;2、20)，(15．7&;#177;2．13)m／s．2个月时(14.4&;#177;1.80)．(20．80&;#177;3．10)m／s,P&;lt;0．05]，术后3个月时端侧吻合肌电图神经传导速度与端端吻合差异无显著性意义[(22．8&;#177;2．40)．(23．20&;#177;2．14)m／s，P&;gt;0．05]。术后1，2个月时，端侧吻合有髓神经纤维数少于端端吻合[1个月时(34．16&;#177;4．24)，(44．28&;#177;3．04)个／高倍视野，2个月时(43．64&;#177;3．20)，(52．84&;#177;2．16)个／高倍视野，P&;lt;0．05]，术后3个月时端侧吻合有髓神经纤维数与端端吻合差异无显著性意义[(64．66&;#177;2．48)，(66．12&;#177;1．96)个／高倍视野，P&;gt;0．05]。结论：面神经断伤作端侧吻合后，早期神经再生质量不及端端吻合优良，晚期效果比较接近。     

碱性成纤维细胞生长因子转染兔关节软骨细胞的研究

背景：软骨细胞体外培养困难和表型难以维持是软骨组织工程研究的一大难题。目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factor，bFGF)基因转染兔关节软骨细胞后对培养的关节软骨细胞形态、分裂增殖及代谢等方面的影响。设计：完全随机对照实验研究。地点和方法：实验在解放军第一军医大学热带军队卫生学系完成，对象为兔软骨细胞(3周龄新西兰新生兔购于第一军医大学实验动物中心)。干预：将bFGF基因克隆于真核表达载体pHβ0AP-1中，构建重组真核表达载体pHβ-bFGF，转染兔关节软骨细胞。G418筛选阳性克隆，检测阳性细胞bFGF基因的表达水平。测定培养软骨细胞的DNA含量、糖醛酸含量、软骨细胞增殖情况及进行细胞周期分析。主要观察指标：DNA含量、糖醛酸含量、软骨细胞增殖情况及细胞周期分析。结果：bFGF基因转染软骨细胞表型未见显著变化；bFGF基因转染组、载体对照组、空白对照组DNA含量分别为(77．37&;#177;6．21)，(40．39&;#177;4．33)，(33．77&;#177;4．25)μg／瓶(P&;lt;0．01)，糖醛酸含量分别为(308．8&;#177;10．2)，(77．9&;#177;8．7)，(80．2&;#177;10．5)μg／瓶(P&;lt;0．01)，软骨细胞G1期分别为59．3&;#177;2．1，69．5&;#177;4．0，73．1&;#177;3．9(P&;lt;0．05)。结论：bFGF转染关节软骨细胞后，可显著促进细胞分裂增殖并缩短细胞周期，为软骨组织工程研究提供新的技术路线及理论基础。     

鸸鹋油对大鼠浅Ⅱ度烧伤创面愈合中组织修复的影响

目的：应用聚维酮碘和鹂鹋油治疗大鼠浅吱烧伤，并比较两种药物对创面愈合过程中组织修复的影响。方法：实验于2003—01／04在南方医科大学南方医院完成。108只Wistar大鼠随机分为单纯烧伤组、聚维酮碘治疗组和鸸鹋油治疗组，每组36只。实验时将脱毛区置于70℃恒温水浴中15s，制成10％体表面积浅Ⅱ度烫伤模型(经病理切片证实，本文统称为烧伤)。各组创面分别用生理盐水纱布、聚维酮碘纱布、鸸鹋油纱布覆盖，无菌纱布包扎固定后放回笼中分笼饲养，换药1次／d。观察创面愈合率及愈合时间。各组动物分别于伤后1，3，5，10，14d取创面组织，常规苏木精-伊红染色，观察病理组织学变化；免疫组织化学链霉素-卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法检测创面组织增殖细胞核抗原的表达，以标记指数法测定增殖细胞核抗原阳性细胞数，以评估组织创面的修复情况。结果：108只大鼠全部进入结果分析。①创面愈合时间：鸸鹋油治疗组比单纯烧伤组、聚维酮碘治疗组明显缩短【(12．67&;#177;0．82)，(15．33&;#177;0．82)，(14．00&;#177;0．89)d，F=15．00，P&;lt;0．01】。②创面愈合率：鸸鹋油治疗组比单纯烧伤组、聚维酮碘治疗组明显升高【第7天：(73．94&;#177;4．46)％，(20．30&;#177;3．85)％，(30．71&;#177;4．90)％；第10天：(88．45&;#177;4．13)％，(40．10&;#177;3．14)％．(63．45&;#177;4．21)％；第14天：(98．93&;#177;1．68)％，(78．67&;#177;3．99)％，(90．41&;#177;3．09)％；F=443．96，P&;lt;0．01】。③病理切片显示鸸鹋油能减轻烧伤创面早期的炎症反应，组织学分析显示鸸鹋油可促进创面的再上皮化和表皮各层的分化。④增殖细胞核抗原在创面组织标本中的表达量：鸸鹋油治疗组比单纯烧伤组、聚维酮碘治疗组明显升高【第5天：(81．83&;#177;4．57)％，(32．50&;#177;3．08)％，(34．33&;#177;2．58)％；第10天：(78．00&;#177;3．00)％，(19．16&;#177;3．71)％，(21．83&;#177;4．53)％；第14天：(65．00&;#177;8．29)％，(11．16&;#177;2．63)％，(15．00&;#177;2．78)％；F=962．40，P&;lt;0．01】。随时间推移明显下降(F=95．63，P&;lt;0．01)。结论：鸸鹋油能加速大鼠烧伤创面组织修复细胞的增殖，加快创面再上皮化，促进创面愈合。     

幼鼠持续惊厥状态脑损伤时托吡酯的神经保护作用

目的：研究托吡酯对惊厥性脑损伤是否具有保护作用。方法：制作毛果芸香碱惊厥持续状态动物模型，给予托毗酯干预，检测海马区神经元坏死、凋亡、凋亡蛋白表达和胶质细胞增生变化情况。结果：毛果芸香碱惊厥持续状态模型鼠病理损伤特点为神经元坏死、细胞凋亡、凋亡蛋白表达增多，胶质细胞增生。托吡酯可减少海马区细胞坏死：CA3区坏死细胞百分比由(72．1&;#177;13．4)％降至(20．6&;#177;7．2)％(P&;lt;0．05)；CA1区由(67．1&;#177;9．3)％降至(18．3&;#177;4．8)％(P&;lt;0．05)；减少细胞凋亡：CA1区单位面积凋亡细胞数由9．4&;#177;6．1降至1．7&;#177;0．8(P&;lt;0．05)；减少凋亡蛋白表达：单位面积caspase-3阳性面积由1．49&;#177;0．25降至0．71&;#177;0．12(P&;lt;0．05)；缓解胶质细胞增生：单位面积胶质细胞数由47．3&;#177;3．6降至19．5&;#177;3．9(P&;lt;0．05)。结论：托吡酯对幼鼠惊厥性神经变性，可减少神经的死亡和凋亡，缓解胶质细胞增生。     

粉防己碱对兔髂动脉血管内皮细胞损伤致血管狭窄的干预作用

目的：探讨粉防己碱对髂动脉血管内膜损伤后血管狭窄的干预作用及其可能机制。方法：24只新西兰兔随机分为粉防己碱干预组、对照组和假手术组。粉防己碱干预组及对照组均以球囊损伤髂动脉内膜，粉防己碱干预组于术前3d至术后28d予粉防己碱45mg／(kg&;#183;d)腹腔注射，假手术组仅结扎一侧髂动脉。手术4周后处死动物，对成形术部位动脉进行病理形态学检查及胶原含量测定，通过免疫组化方法检测细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原蛋白。结果：球囊损伤后4周，兔血管壁明显增厚，Masson’S染色可见血管平滑肌(vascular smooth muscle cell，VSMC)增殖和以胶原蛋白为主的细胞外基质(extracellular matrix，ECM)大量沉积；计算机图像分析表明，与对照组相比，粉防己碱干预组内膜面积、内膜／中膜比和胶原面积／管壁面积均明显减少[(0．31&;#177;0．11)mm^2。和(0．23&;#177;0．07)mm^2。，(37．13&;#177;2．97)％和(25．77&;#177;3．74)％，(54、27&;#177;9．78)％和(29．32&;#177;7．33)％，P均&;lt;0．01]；粉防己碱干预组动脉胶原含量减少，其差异有显著性[(231．2&;#177;18．9)mg／g和(313．6&;#177;25．3)mg／g，P&;lt;0．01)]；免疫组化染色显示粉防己碱干预组Ⅰ型胶原表达指数明显减低[(31．2&;#177;4．7)和(23．5&;#177;5．2)，P&;lt;0．01]。结论：粉防己碱能有效抑制兔髂动脉球囊损伤术后VSMC增殖和胶原合成，减轻术后新生内膜增生程度，促进代偿性血管扩张，减轻狭窄的程度。     

冷冻保存的雪旺细胞对损伤后坐骨神经再生影响的实验研究

目的：比较原代培养雪旺细胞(Schwann cells，SCs)和冷冻保存的SCs移植对损伤后坐骨神经再生的作用。方法：原代培养和液氮保存的SCs分别移植到桥接缺损坐骨神经的硅胶管内。在移植后不同时间，硅胶管远端神经干内注射HRP，逆行追踪背根神经节和脊髓前角的标记神经元数量；测量再生神经纤维的复合动作电位传导速度；电镜观察再生神经纤维的髓鞘形成。结果：原代培养和冷冻保存SCs在移植后不同时间其背根神经节(术后6周：3967．41&;#177;305．91与3890．55&;#177;315．63，t=0.55，P&;gt;0.05；术后8周：4029．33&;#177;313．80与4184．90&;#177;305．75，t=1．11。P&;gt;0.05)和脊髓前角神经元HRP标记细胞数量(术后6周：404．87&;#177;40．05与429．77&;#177;43．40，t=1．33，P&;gt;0.05；术后8周：474．49&;#177;42．74与470．99&;#177;38．82，t=0.19。P&;gt;0.05)、再生神经纤维的复合动作电位传导速度(m／s)基本一致(术后6周：32．28&;#177;1．96与32．05&;#177;2．31，t=0.24，P&;gt;0.05；术后8周：43．60&;#177;1．88与43．84&;#177;2．19。t=0.26。P&;gt;0.05；术后12周：43．78&;#177;1．71与43．83&;#177;1．75，I=0.06，P&;gt;0.05)，再生神经纤维髓鞘的形成未见明显差别。结论：冷冻保存的SCs仍具有促进损伤后周围神经再生的能力。     

肿瘤的基因治疗前期研究：反转录病毒介导的肿瘤坏死因子α基因抗C6胶质瘤效应☆

目的：探讨反转录病毒介导的肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因对C6胶质瘤的抗瘤效应，从而为肿瘤的基因治疗提供基础研究数据。方法：将重组TNF-α反转录病毒载体PLJ+TNF转染大鼠C6胶质瘤细胞，ELISA法检测该细胞中目的基因的表达，MTT法检测体外增殖能力；将实验大鼠随机分为实验组和对照组，每组10只，实验组大鼠右股内侧接种转基因2&;#215;10^6C6细胞，对照组同法同部位接种未转基因C6细胞，常规饲养5周，每周测量肿瘤大小，绘制肿瘤生长曲线，比较两组皮下肿瘤大小并进行统计学分析。结果：C6胶质瘤细胞与C6细胞的体外增殖能力比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；转基因前后TNF-α分泌情况：1&;#215;10^6个C6细胞体外培养24h每毫升上清液分泌TNF-α(2．42&;#177;0．76)U；1&;#215;10^6个C6胶质瘤细胞体外培养24h每毫升上清液分泌TNF-α(1753&;#177;2．31)U，两者比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；动态TNF-α检测显示：转基因C6细胞能稳定地表达高水平的TNF-α；大鼠皮下接种肿瘤细胞5周后，实验组3只未见肿瘤生长，其余肿瘤直径为(15&;#177;0．3)cm，对照组肿瘤直径为(2．4&;#177;0．2)cm，两组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：TNF-α基因转染大鼠C6胶质瘤细胞后能持续分泌高水平的TNF-α，对大鼠C6胶质瘤皮下肿瘤具有明显的抗瘤效应。     

不同强度恒磁场对大鼠主动脉内皮细胞增殖的影响

目的：观察不同强度恒磁场对大鼠主动脉内皮细胞增殖的影响。方法：将体外培养3代的大鼠主动脉内皮细胞分为对照组及不同强度(0．5，1．0，5．0，10．0，100．0，500．0Gs)磁场组。磁场作用时间为48h，用四唑盐比色法测定细胞增殖。结果：与对照组相比，0．5，1．0，5．0Gs磁场组细胞增殖显著高于对照组(分别为0．301&;#177;0．023，0．308&;#177;0．042，0．294&;#177;0．025和0．230&;#177;0．026；t=11．20，8．65，7．92；P&;lt;0．05)；10．0Gs磁场组细胞增殖与对照组相比无明显差异(0．228&;#177;0．034和0．230&;#177;0．026；t=0．26；P&;gt;0．05)；100．0Gs和500．0Gs磁场组细胞增殖显著低于对照组(分别为0．173&;#177;0．022，0．166&;#177;0．015和0．230&;#177;0．026；t=9．17，11．68；P&;lt;0．05)。结论：0．5—5．0Gs的恒磁场可以促进大鼠主动脉内皮细胞的增殖，而100．0Gs以上恒磁场可抑制内皮细胞增殖。     

糖尿病大鼠椎间盘组织中戊糖甙素与细胞凋亡的关系

背景：细胞凋亡可能是引起椎间盘细胞减少的一个主要因素。但是关于诱导椎间盘细胞凋亡的生物学因素还不清楚。目的：通过观察糖尿病大鼠椎间盘细胞凋亡情况，探讨可能与凋亡有关的因素。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：实验地点在上海九院实验动物中心和上海第二医科大学生物物理教研室完成。36只雄性SD大鼠(4月龄)，购自中科院上海实验动物中心，平均体质量244go按随机数字表法分为2组，每组18只。千顶措施：处理组用腹腔单次注射链脲佐菌素溶液(streptozotocin，STZ，40mg／kg)造成糖尿病。正常对照组，仅给予等量的柠檬酸缓冲液。72h后测定大鼠的血糖，血糖在16．0mmol／L以上者确定为糖尿病。分别在第1，3，4个月时每组各取6只大鼠处死，取其腰椎间盘组织，进行测定。主要观察指标：用流式细胞术检测椎间盘细胞凋亡情况。用高效液相层析法测定椎间盘组织中戊糖甙素含量变化。结果：处理组大鼠在注射STZ溶液后，血糖水平均高于16．0mmol／L[(23．71&;#177;2．69)mmol／L]。在不同时期，糖尿病大鼠组椎间盘细胞凋亡率(％)分别是18．52&;#177;4．81，18．74&;#177;5．13，19．41&;#177;5．22，明显高于同期对照组4．59&;#177;2．24，9．38&;#177;2．37，10．78&;#177;3．86(P&;lt;0．05)，糖尿病大鼠椎间盘组织中戊糖甙素含量(nmol／g)分别是33．53&;#177;5．88，37．03&;#177;12．77，36．53&;#177;11．95，明显高于同期对照组13．87&;#177;3．30，13．60&;#177;2．56，15．33&;#177;4．04(P&;lt;0．05)。椎间盘组织中戊糖甙素含量与椎间盘细胞凋亡率之间呈正相关性(r=0．857-0．970，P&;lt;0．05)。结论：糖尿病大鼠椎间盘细胞凋亡明显增加。戊糖甙素等糖基化终末产物可能是促进椎间盘细胞凋亡的因素之一。     

不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1和PPAR-γ2 mRNA表达的影响

背量：绝经后骨质疏松的病理生理机制尚未完全阐明，研究表明骨丢失与雌激素缺乏相关，后者可导致多种细胞因子生成增加，继而引起成骨细胞和破骨细胞生成增多。骨吸收增强。雌二醇能否改变骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1和PPAR-γ2 mRNA的表达进而影响其向成骨细胞分化尚不清楚。目的：研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中，17β-雌二醇对其核结合因子a1(Cbfa1)及过氧化物酶增殖活化受体γ2(PPAR-γ2)mRNA表达的影响，探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。设计：非随机对照研究。地点和对象：所有实验均在成都军区总医院检验科和成都百奥生物技术有限公司完成，分离骨髓基质细胞所需大鼠由成都中医药大学实验动物研究中心提供。干预：1，25(OH)2D3和地塞米松诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化，用不同浓度[(O-1)&;#215;10^-6mol／L]雌二醇对细胞分化过程进行干预。主要观察指标：应用半定量RT-PCR及Northern blot技术，观察不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1及PPAR-γ2 mRNA表达的影响。结果：雌二醇能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Cbfa1 mRNA的表达，雌二醇浓度为[(O-1)&;#215;10^-6mol／L]时，Cbfa1 mRNA的表达量从(25．0&;#177;3．3)％降至(19．8&;#177;2．2)％(t=2．62，P&;lt;0．05)，(14．5&;#177;1．3)％(t=5．92,P&;lt;0．01)和(6．5&;#177;1．9)％(t=9．72，P&;lt;0．01)；雌二醇能明显促进骨髓基质细胞在分化介质中PPAR-γ2 mRNA的表达，在上述雌二醇浓度时。PPAR-γ2 mRNA的表达从(1．75&;#177;0．5)％增至(9．5&;#177;2．1)％(t=7．18，P&;lt;0．01)和(19．3&;#177;3．0)％(t=11．5，P&;lt;0．01)；Northern blot结果显示随着雌二醇浓度的增加，Cbfa1 mRNA的表达量从4．42&;#177;0．39降至1．88&;#177;0．16(t=12．0，P&;lt;0．01)和1．19&;#177;0．11(t=15．8，P&;lt;0．01)；PPAR-γ2 mRNA的表达量从1．31&;#177;0．12增至2．81&;#177;0．22(t=10．5,P&;lt;0．01)和4．02&;#177;0．36(t=14．2，P&;lt;0．01)。细胞ALP活性明显受雌二醇的抑制，在上述雌二醇浓度时ALP的活性从(42．6&;#177;2．5)降至(3．6&;#177;0．7)U／g蛋白(t=29，P&;lt;0．01)。Ⅰ型胶原含量均随雌二醇浓度增加而降低。结论：雌二醇抑制体外培养的骨髓基质细胞向成骨细胞分化而促进其向脂肪细胞分化。