灯盏花素抑制去甲肾上腺素而增强高钾缩血管反应

目的　观察灯盏花素 (Bre)对去甲肾上腺素 (NA)和高钾所致缩血管反应的影响 ,研究其效应与细胞内游离钙浓度([Ca2 + ]i)变化的关系。方法　采用兔胸主动脉条 ,观察Bre对NA及高钾缩血管量效曲线、对NA和咖啡因在无钙液中所致短暂收缩及复钙后NA缩血管反应的影响 ;利用Fura 2 /AM负载的兔血管平滑肌细胞 ,观察在Bre存在下 ,由NA及高钾所增加的 [Ca2 + ]i的变化。结果　Bre呈剂量依赖性地使NA缩血管量效曲线非平行右移 ,最大反应压低 ,对高钾的量效曲线却呈增强作用 ;该药抑制NA及咖啡因在无Ca2 + 液中所诱发的短暂收缩及复Ca2 + 后NA所致缩血管反应 ;Bre抑制NA所致平滑肌 [Ca2 + ]i 的升高 ,而增强高钾升高 [Ca2 + ]i 的作用。结论　Bre通过抑制Ca2 + 内流和Ca2 +释放而抑制NA所致血管平滑肌的收缩 ,通过增强高钾所致Ca2 + 内流而增强其缩血管效应 ,但Bre增强高钾升高[Ca2 + ]i 的作用原理尚有待探讨     

萘哌地尔衍生物BWYJ扩张血管效应及其机理研究

目的 :观察萘哌地尔衍生物BWYJ对家兔血管活动的影响 ,并探讨其血管活性机理 ,为该药的开发研究提供基础资料。方法 :采用家兔主动脉收缩的方法 ,观察BWYJ对去甲肾上腺素 (NA)、5 羟色胺(5 HT)和高钾量效曲线的影响 ;应用无Ca2 复Ca2 的实验法 ,以NA和咖啡因为血管收缩剂 ,间接观察BWYJ对细胞内游离钙浓度 ([Ca2 ]i)的影响 ,并分析其可能作用机理。结果 :BWYJ 10 -7、3×10 -7、10 -6mol·L-1使NA量效曲线明显平行右移 ,而最大反应不变 ,pA2 值为 7.6 1。本品 10 -6、10 -5mol·L-1对 5 HT量效曲线也有同样的效应 ,pA2值为 6 .5 6。而当剂量为 3× 10 -6、10 -5mol·L-1时 ,对氯化钾 (KCl)量效曲线没有明显影响。在无钙Krebs液中 ,BWYJ 10 -7、 3× 10 -7、 10 -6和10 -5mol·L-1呈浓度依赖性抑制NA所致血管条的短暂收缩 ,对复Ca2 后NA所诱发的持续收缩也呈剂量依赖性抑制作用 ,但其剂量达 10 -5mol·L-1时尚不能抑制咖啡因在无Ca2 液中所致收缩。结论 :BWYJ可能是一种α受体阻断剂 ,兼有拮抗 5 HT受体的作用。其扩血管的机理可能是通过阻断细胞膜上的α受体或 5 HT受体 ,从而抑制这些受体中介的Ca2 内流和Ca2 释放所致。     

马齿苋总黄酮对缺血缺氧刺激下血管平滑肌细胞蛋白激酶C活性的影响

目的观测马齿苋总黄酮(PTF)对缺血缺氧刺激下血管平滑肌细胞钙超载及蛋白激酶C(PKC)的影响。方法用Fura-2/AM作Ca2+指示剂,检测PTF对正常培养及缺血缺氧作用下家兔主动脉血管平滑肌细胞Ca2+浓度及PKC的活性的改变。结果 PTF对正常培养家兔主动脉血管平滑肌细胞[Ca2+]i浓度无明显影响;PTF(8,16,32,64 mg·L-1)剂量依赖性抑制缺血缺氧缺氧致血管平滑肌细胞[Ca2+]i升高;PTF对正常培养家兔主动脉血管平滑肌细胞胞浆、胞膜PKC活性均升高;PTF处理后胞浆PKC活性下降,胞膜PKC活性上升。结论PTF可能抑制缺氧致血管平滑肌细胞钙超载,调节缺氧条件下血管平滑肌细胞PKC活性。     

家兔主动脉血管平滑肌细胞内钙动员及小檗胺作用的共聚焦研究(英文)

观察小檗胺 ( Ber)对高钾除极 ,Bay K8644,5-羟色胺 ( 5- HT)及咖啡因升高细胞内钙水平( [Ca2 + ]i)的影响。以 Fluo- 3/AM负载家兔培养的主动脉平滑肌细胞 ( VSMC) ,共聚焦显微术测定[Ca2 + ]i,结果以荧光强度 ( FI)表示 .结果 :( 1 )在细胞外钙为 1 .3mmol· L-1时 ,VSMC胞浆静息 FI明显高于核区 ,且不受 Ber的影响 . ( 2 ) Ber 1 0 -1 0 0 μmol·L-1预处理可抑制 KCl60 mmol·L-1或Bay K86441 0 0 μmol·L-1升高的 [Ca2 + ]i,抑制 5-HT 1μmol· L-1升高 [Ca2 + ]i 的持续相 ,但不影响[Ca2 + ]i 的一过性升高。维拉帕米 1 0 μmol· L-1具有相似作用 . ( 3)在无钙 Hanks液中 ,Ber预处理对咖啡因 1 0 0 mmol·L-1升高的 [Ca2 + ]i 无明显抑制作用。结果表明 ,Ber可阻断外钙内流 ,但不抑制内钙释放 ,这可能与 Ber阻断电压依赖性钙通道和受体依赖性钙通道的作用有关 .     

小檗胺对ROCC介导的血管平滑肌细胞内游离钙的影响

目的　研究小檗胺 (BA)对受体调控性Ca2 +通道介导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响。方法　家兔主动脉血管平滑肌以Fluo 3/AM负载 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM )测定 [Ca2 +]i。结果　在细胞外Ca2 +存在的条件下 ,BA 30 μmol·L-1不影响静息[Ca2 +]i;但对去甲肾上腺素 (NE) 30mmol·L-1、5 羟色胺 (5 HT) 1μmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高有明显的抑制作用。在无胞外钙时 ,对咖啡因 40mmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高没有作用。结论　BA对ROCC激活后的外钙内流有明显的抑制作用 ,对内钙释放没有影响。其作用与维拉帕米相似     

醋柳黄酮对血管平滑肌细胞胞内游离钙浓度的影响

目的 :探讨醋柳总黄酮 (TFH)对血管平滑肌细胞胞内游离钙浓度 ([Ca2 ]i)的影响。方法 :采用新一代钙荧光探针Fluo 3 AM检测在高钾、去甲肾上腺素 (NE)、血管紧张素II(AngⅡ )刺激下单层兔主动脉平滑肌细胞内游离钙水平的改变 ,并与传统的钙拮抗剂Verapamil(Ver)进行对照研究。结果 :TFH(10 0mg·L-1)对静息状态的血管平滑肌细胞[Ca2 ]i 无明显影响 ;TFH(6 0～ 10 0mg·L-1)呈剂量依赖性抑制高K 去极化引起的 [Ca2 ]i 升高 ,与Ver作用相似 ,但弱于Ver ;TFH (80、10 0mg·L-1)对NE、AngⅡ通过受体介导引起 [Ca2 ]i 升高均具有明显的抑制作用 ;在无细胞外Ca2 存在下 ,TFH (80、10 0mg·L-1)对NE引起的 [Ca2 ]i 升高也具有一定程度的抑制效应。结论 :醋柳总黄酮通过对电压依赖性钙通道和受体操纵型钙通道双重抑制降低血管平滑肌细胞内游离钙水平 ,这可能是醋柳黄酮产生舒血管降压作用机制之一。     

吸烟、硝酸甘油对动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞钙浓度的影响

目的研究吸烟、硝酸甘油对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞胞内游离钙浓度([Ca2+]i)的影响,探讨吸烟对动脉粥样硬化形成及硝酸甘油的生物效应的作用。方法复制家兔动脉粥样硬化模型,分离血管平滑肌细胞。Fluo-3/AM负载细胞,应用流式细胞仪检测血管平滑肌细胞[Ca2+]i,激光扫描共聚焦显微系统测定单个血管平滑肌细胞内Ca2+的时空变化。结果各组动物主动脉壁均见到程度不同的动脉粥样硬化斑块形成。动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞[Ca2+]i明显升高(48.45±5.31,与生理盐水对照组38.09±2.57比较,P<0.01);吸烟能增加动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞[Ca2+]i(56.48±2.99,与单纯动脉粥样硬化组48.45±5.31比较,P<0.01);硝酸甘油则能明显降低动脉粥样硬化家兔血管平滑肌细胞[Ca2+]i(41.91±3.16,与单纯动脉粥样硬化组48.45±5.31比较,P<0.05);吸烟能明显抑制硝酸甘油降低血管平滑肌细胞[Ca2+]i的作用(47.99±5.10,与硝酸甘油组41.91±3.16比较,P<0.05)。结论吸烟能明显增加动脉粥样硬化血管平滑肌细胞[Ca2+]i,硝酸甘油则能明显降低动脉粥样硬化血管平滑肌细胞[Ca2+]i,吸烟能抑制硝酸甘油的生物学效应。     

小檗胺对血管平滑肌细胞钙动力学影响

本文以Fluo-3/AM 荧光技术和激光扫描共聚焦显微镜检查法, 研究小檗胺 (Ber) 对培养家兔胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)内游离钙 ([Ca 2 ]i ) 的影响结果表明：在胞外钙 ([Ca 2 ]o ) 为?.0 mmol·L -1 条件下，Ber 抑制60 mmol·L -1 KCL1 mmol·L -1 哇巴因Ouabain 30 mmol·L -1 去甲肾上腺素 ( NE ) 1 mmol·L -1 5-羟色胺5-HT 和30 mmol·L -1 三磷酸腺苷 (ATP)引起的 [Ca 2 ]i 升高，而且荧光强度达峰时间亦延长。在无胞外钙条件下，Ber 对咖啡因 (Caffeine)引起的[Ca 2 ]i 升高没有作用。结论：Ber 抑制电压依赖性钙通道 (VDCC) 和受体调控性钙通道 (ROCC) 激活引起的外钙内流，对Caffeine 引起的内钙释放没有影响。Ber 可抑制Ouabain 诱导的细胞内钙升高。     

大鼠胃底平滑肌细胞5-HT受体的信号转导通路的研究

目的　以 5 HT引起胞内Ca2 + 变化为指标 ,研究大鼠胃底平滑肌细胞 5 HT受体的信号转导机制。方法　采用Ca2 + 指示剂Fluo - 3/AM负载培养的胃底平滑肌细胞 (SF SMC) ,共聚焦显微术检测细胞内钙荧光强度的变化。结果　基础状态下SFSMC[Ca2 + ]i 荧光强度 (fluorescenceintensi ty ,FI)为 2 6 4± 1 5 ,5 HT 10 μmol·L-1使荧光强度缓慢升高 ;这一作用与细胞外钙内流和内钙释放有关 ;10 μmol·L-1米安舍林 (mianserin)可部分拮抗 5 HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 ,钙拮抗剂拉西地平 (lacidipine)、G蛋白拮抗剂NEM均能完全抑制 5 HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 ;5 HT引起 [Ca2 + ]i的升高被PLC抑制剂部分地取消 ;PKC激动剂拮抗了 5 HT引起的钙动员 ,而PKC特异性抑制剂D 鞘氨醇取消了这一抑制作用。结论　 5 HT部分通过激动了胃底平滑肌细胞的G 蛋白偶联的 5 HT2B受体引起细胞去极化 ,从而激发L型钙通道使外Ca2 + 内流 ,并促进SR上的ryanodine受体的开放 ,引起 [Ca2 + ]i 升高。而这一升高 [Ca2 + ]i 的作用又受到PLC和PKC的调控     

肺动脉高压模型大鼠肺动脉平滑肌细胞内钙的改变

目的分析肺动脉高压时肺动脉平滑肌细胞Ryanod-ine受体[Ca2+]i释放功能的改变。方法腹腔注射野百合碱建立大鼠肺动脉高压模型,原代培养肺动脉平滑肌细胞,Fura-2/AM负载培养细胞,荧光测钙技术测量Ryanodine受体激动剂对[Ca2+]i变化的影响。结果10nmol.L-1Ry-anodine使对照组[Ca2+]i平均增加(93.31±12.41)nmol.L-1,使PAH组[Ca2+]i平均增加(141.71±13.59)nmol.L-1。两组样本[Ca2+]i增加的数值差异有显著性(P<0.01);10mmol.L-1Caffine使对照组[Ca2+]i平均增加(149.02±13.02)nmol.L-1,使PAH大鼠PASMC的[Ca2+]i平均增加(191.2±21.26)nmol.L-1,两组样本[Ca2+]i数值的变化差异有显著性(P<0.01)。结论肺动脉高压大鼠原代培养的肺动脉平滑肌细胞对Ryanodine受体激动剂的敏感性增强,提示肺动脉高压时Ryanodine受体释放[Ca2+]i的功能发生了异常改变。     

乌贼墨对H_(22)癌细胞内Ca~(2 )、ATP浓度及线粒体Ca~(2 )/Mg~(2 )-ATP酶活性的影响

利用荧光探针和荧光素,研究了乌贼墨对Ｈ_(２２)癌细胞内 Ｃａ~（２＋）、ＡＴＰ浓度及线粒体Ｃａ~（２＋）／Ｍｇ~（２＋）－ＡＴＰ酶活性的影响。结果发现,乌贼墨使Ｈ_(２２)癌细胞内Ｃａ~（２＋）浓度降低了２．３和３．７倍,线粒体Ｃａ~（２＋）／Ｍｇ~（２＋）－ＡＴＰ酶活性降低了 ２８％和 ５８％,ＡＴＰ浓度升高 Ｔ ７７％和 ８３％。结果提示乌浓墨可能通过降低细胞内Ｃａ~（２＋）浓度,继而影响到线粒体上Ｃａ~（２＋）依赖性Ｃａ~（２＋）／Ｍｇ~（２＋）-ＡＴＰ酶活性,减少了Ｃａ~（２＋）向线粒体内的转运,减轻甚至消除了Ｃａ~（２＋）对ＡＴＰ合成的抑制作用。这可能是乌贼墨抑制肿瘤生长的机制之一。     

萘甲异喹对大鼠心肌细胞Ca~(2+)内流的影响

目的研究萘甲异喹（NI）对大鼠心肌细胞外Ca(2+)内流的影响。方法：应用钙离子荧光指示剂Fura－2检测。结果：NI（3，10μmol·L(-1)）和维拉帕米（0．3μmol·L(－1)）对静息状态下心肌细胞内Ca(2+)浓度无影响，但可浓度依赖地抑制高钾（60mmol·L(-1)）和异丙肾上腺素（lμmol·L(－1)）引起的心肌细胞内Ca(2+)浓度的升高，抑制率分别为29％±6％、49％±9％和26％±6％、40％±8％；NI对两种激动剂作用的抑制百分率无明显差异，而维拉帕米对高钾作用的抑制大于对异丙肾上腺素作用的抑制。结论：NI对心肌细胞电压依赖性钙通道以及和β受体有关的钙通道有阻断作用，NI可能是非选择性钙通道阻滞剂。     

赛庚啶对离体犬心肌肌质网Ca~(2+),Mg~(2+)—ATP酶活性和~(45)Ca~(2+)摄取功能的影响

当赛庚啶浓度在8×10~(-6)mol/L～2×10~(-4)mol/L之间时,该药对正常犬心肌肌质网Ca~(2+),Mg~(2+)—ATP酶活性几乎没有影响,仅在10~(-3)mol/L时对该酶活性才有一定的抑制作用(抑制率为39.85%,P<0.01)。正常犬心肌肌质网的~(45)Ca~(2+)摄取过程有明显的时间依赖性,至第30 min,其~(45)Ca~(2+)摄取量可达312.79±22.25 nmol/mg protein.赛庚啶对心肌肌质网的~(45)Ca~(2+)摄取有一定的抑制作用,其IC_(50)为1.94×10~(-4)mol/L。     

蝙蝠葛苏林碱对PC12细胞内游离钙浓度的影响

目的进一步探讨蝙蝠葛苏林碱（Dau）的抗脑缺血／缺氧损伤与其钙拮抗作用间的关系。方法：培养的PC12细胞用Fura－2／AM负载，用AR－CM－MIC阳离子测定系统观测Dau对单细胞内游离钙（[Ca(2+)]_i）升高的影响。结果：Dau（0．1～100μmol·L(－1)）可浓度依赖性抑制高钾和caffeine引起的[Ca(2+)］_i增加，对肌浆网钙泵抑制剂cy－clopiszonicacid引起的[Ca(2+)]_i升高也有抑制作用。结论：Dau不仅抑制电压依赖性钙通道开放引起的细胞外钙内流和caffeine引起的内钙释放．而且对钙泵也可能有影响，这可能是其抗脑缺血／缺氧损伤的重要机制。     

钙离子跨膜转运与血小板聚集阈值

钙离子作为第二信使物质,调节着众多的生理反映。本文从钙离子的跨膜转运对血小板聚集的影响出发,提出一种数学模型方法,力图以胞浆内游离钙浓度作为指标去研究和标志血小板的聚集特性,它从一个侧面去反映血小板的老化程度或病态程度。     

杏花雨对外源性高钙致大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的探讨杏花雨注射液对外源性高钙所致线粒体损伤的保护作用.观察杏花雨对离体线粒体是否具有保护作用,从而进一步完善银杏叶提取物抗脑缺血损伤的机制.方法新鲜制备的大鼠脑线粒体悬液,分别与不同浓度Ca2 以及不同浓度的杏花雨注射液进行孵育,观察线粒体基质游离钙、线粒体活性以及线粒体膜肿胀度的变化.结果与正常对照组比较外源性高钙导致大鼠脑线粒体严重钙超载(P＜0.01),线粒体活性下降(P＜0.01),540 nm处线粒体悬液吸光度值显著下降,线粒体明显肿胀(P＜0.01);于钙离子损伤前给予杏花雨孵育,线粒体基质游离钙浓度明显降低(P＜0.01),线粒体活性显著升高(P＜0.01),吸光度值有明显升高,显示线粒体肿胀度减轻(P＜0.01).结论外源性高钙可使线粒体基质游离钙含量升高,产生线粒体通透性转换(mitochondria permeability transition,MPT),使线粒体活性降低,功能障碍.杏花雨通过缓解线粒体钙超载,防止产生MPT,从而恢复线粒体功能.提示杏花雨抑制线粒体钙超载可能是其对缺血再灌注脑损伤的保护作用机制.     

糖尿病发病过程中大鼠主动脉血管平滑肌细胞钙泵活性以及血流动力学变化的研究

目的探讨糖尿病发病过程中大鼠主动脉平滑肌细胞钙泵活性变化与血流动力学变化之间的联系以及对糖尿病大血管病变产生和发展的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,第4、8、12、16周用彩色多普勒对各组主动脉进行血流参数测量。然后处死各组动物取其主动脉并分离得到肌浆网蛋白和胞膜蛋白,分别测定SERCA和PMCA的活性。结果4wk开始随着病程延长糖尿病组大鼠腹主动脉峰值血流速度、平均血流速度较对照组明显降低(P<0.05),而搏动指数和阻力指数则明显增高(P<0.05);12wk开始血管内径逐渐减小(P<0.05),16wk时内膜中膜厚度明显增加(P<0.05);PMCA的活性在早期(4wk)轻度增高,从12wk开始明显降低(P<0.05);SERCA活性在8wk起较对照组明显降低(P<0.05)。结论随着糖尿病病程逐渐延长,糖尿病大鼠主动脉血管结构发生改变,功能损坏;PMCA和SERCA活性改变导致的胞内钙离子调控紊乱参与了糖尿病大血管病变的发生和发展。     

山豆根碱对大鼠血小板摄取~（45）Ca~（2＋）的影响

用４５Ｃａ２＋摄入法测定了大鼠血小板摄取细胞外Ｃ２＋，观察山豆根碱对血小板摄取Ｃａ２＋的影响、结果表明，静息血小板可迅速摄取细胞外Ｃａ２＋，呈时间和浓度依赖性；ＡＤＰ促进血小板摄取Ｃａ２＋；山豆根碱以浓度依赖方式抑制静息的和ＡＤＰ诱导的血小板摄取细胞外Ｃａ２＋。这提示山豆根碱抑制血小板聚集的作用机制之一与阻止细胞外Ｃａ２＋内流入血小板，降低血小板胞浆内Ｃａ２＋浓度有关。     

植物雌激素α-玉米赤霉醇对(-)BayK8644诱发的兔主动脉平滑肌细胞胞内游离钙离子浓度升高的抑制作用

α-玉米赤霉醇（α-Zearalanol，α-ZAL）是冬小麦春化的关键物质并是植物中普遍存在的内源性激素玉米赤霉烯酮（zearanone，ZEN）的还原产物，具有类雌激素样效应，并比雌激素安全。本课题组于1996年首次将其作为植物雌激素引进医学研究领域并开始α-ZAL防治动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）的研究。     

铅对大鼠脑突触体钙调素的抑制作用

用体外法,将大鼠脑突触体膜,在不同浓度的Pb~(2+)作用下分别测定CaM依赖的Ca~(2+)-ATP酶和CaM活性的IC_(50)值。结果表明,Pb~(2+)对Ca~(2+)-ATP酶活性IC_(50)为 1.62mM;对CaM活性IC_(50)为3.85mM。当向不含CaM的脑突触体加入3.0～10.0μg的外源性CaM后,被Pb~(2+)抑制的Ca~(2+)-ATP酶活性均有显著的逆转而恢复或接近正常水平。推测Pb~(2+)主要直接作用在脑突触体膜的CaM,通过CaM分子构象改变,抑制Ca~(2+)-ATP酶,这可能是铅神经毒性的分子基础。