心肌营养素-1在心血管系统的作用

心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)是一个新发现的白介素-6(IL-6)家族细胞因子.它可促使心肌细胞肥大,同时也有促使心肌细胞存活的作用.在缺血性心脏病、心瓣膜病及心力衰竭等疾病时CT-1水平均有升高.本文就CT-1研究进展、在心血管领域的作用及其机理作一综述.     

心肌营养素—1在心血管系统的作用

心肌营养素－1（cardiotrophin-1,CT-1）中一个新发现的白介素－6（IL－6）家族细胞因子，它可促使心肌细胞肥大，同时也有促使心肌细胞存活的作用。在缺血性心脏病、心瓣膜病及心力衰竭等疾病时CT-1水平均有升高，本文就CT－1研究进展、在心血管领域的作用及其机理作一综述。     

心肌营养素-1在血管紧张素Ⅱ促心肌细胞肥大、损伤时的作用及意义

目的研究心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)在血管紧张素II(AngⅡ)刺激心肌细胞造成肥大、损伤时的作用及意义。方法利用AngⅡ刺激心肌细胞造成细胞肥大,光、电镜下观察细胞形态变化,免疫组化法检测CT-1蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CT-1、β-肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA表达,酶联免疫法(ELISA)定量检测心肌细胞凋亡。结果经AngⅡ刺激后心肌细胞形态变大,β-MHCmRNA表达增加,心肌细胞凋亡增多;CT-1mRNA、蛋白表达均增加;苯亚甲基丙二腈的脂类衍生物(AG490)能部分抑制CT-1引起的心肌细胞肥大,并减少心肌细胞凋亡。结论CT-1参与心肌细胞肥大的过程;AG490能够抑制CT-1促心肌细胞肥大的作用,而不降低CT-1对心肌的保护作用。     

心肌营养素-1对三个主要心肌转录因子转录表达的选择性的研究

目的研究心肌营养素-1（cardiotrophin-1,CT-1）对三大主要心肌转录因子的选择性作用,在转录因子水平探讨CT-1肥大刺激作用的特殊机制。方法应用半定量RT-PCR及免疫组化技术,鉴定CT-1对心肌细胞形态学影响。测定CT-1对大鼠心肌细胞GATA4、MEF2以及NKX2-5基因转录的时间、剂量依赖影响。结果GATA4与NKX2-5的表达均与CT-1具有时间、剂量依赖关系,而CT-1则未对MEF2的表达产生影响。从作用时间上看,NKX2-5的表达在1×10-10mol/L的CT-1刺激1h时即开始明显增加,而GATA4的表达则在3h时显著性增加,NKX2-5的表达增强的时间较GATA4略早。结论CT-1以时间和剂量依赖性的方式上调大鼠心肌细胞GATA4及NKX2-5mRNA表达,对大鼠心肌细胞MEF2mRNA表达没有明显影响。     

辛伐他汀调控心肌营养素-1诱导心肌细胞肥大及其与JAK-STAT信号通路的关系

目的观察辛伐他汀对心肌营养素-1(CT-1)诱导的大鼠心肌细胞肥大效应的影响,探讨Jak激酶/信号转导转录活化因子(JAK-STAT)信号通路与心肌细胞肥大的关系.方法以培养的新生SD大鼠心肌细胞为实验模型,应用图像分析系统测定心肌细胞表面积[3H]-亮氨酸,掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心钠素(ANP)mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK-STAT的表达水平.结果①CT-1(10ng/L)刺激后心肌细胞表面积明显增加,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);心肌细胞表面积在给予辛伐他汀干预后逐渐减小,其在10-6和10-5mol/L辛伐他汀组明显小于CT-1组(P＜0.01).②CT-1刺激后心肌细胞[3H]-亮氨酸掺入率与对照组相比显著增高(P＜0.01),辛伐他汀干预后,在10-6和10-5 mol/L组[3H]-亮氨酸掺入率均显著低于CT-1组,差异有统计学意义(P＜0.01).③随着辛伐他汀干预浓度的增加,心肌细胞ANP mRNA表达水平逐渐降低,其中在10-6和10-5mol/L辛伐他汀组显著低于CT-1组(P＜0.01).④甲羟戊酸(MVA)能够明显地拮抗辛伐他汀对心肌细胞表面积、[3H]-亮氨酸掺入率、ANP mRNA表达水平的抑制作用,差异有统计学意义(P＜0.01).⑤CT-1作用后心肌细胞JAK-sTAT的蛋白表达水平显著增强,辛伐他汀(10-6mol/L)可明显抑制CT-1诱导心肌细胞JAK-STAT蛋白表达水平(P＜0.01),而MVA减弱辛伐他汀对JAK-STAT蛋白表达的抑制效应(P＜0.01).结论辛伐他汀能够逆转CT-1诱导心肌细胞肥大效应,细胞因子信号通路JAK-STAT活化介导了这一过程并可能是其分子生物学机制.     

心肌营养素-1诱导心肌细胞肥大及辛伐他汀的干预作用

目的 观察细胞因子心肌营养素-1(CT-1)诱导大鼠心肌细胞的肥大效应,探讨辛伐他汀(Sim)对这一过程的干预作用及其信号转导机制.方法 以培养的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞为实验模型,分为对照组,CT-1诱导组,CT-1 Sim组,CT-1 Sim 甲羟戊酸(MVA)组,CT-1 AG490(JAK2拮抗剂)组.应用图像分析系统测定心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心钠素(ANP)mRNA表达,RT-PCR检测细胞因子信号通路JAK/STAT的mRNA表达水平.结果 (1)与对照组相比,CT-1组心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入率,ANP mRNA表达水平均明显增高(P＜0.01),JAK2拮抗剂AG490可显著的抑制CT-1的作用(P＜0.01).(2)与CT-1组相比,辛伐他汀共培养后心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入率,ANP mRNA表达水平明显减小(P＜0.01),外源性甲羟戊酸可显著的抑制辛伐他汀的作用(P＜0.01);(3)CT-1可使心肌细胞JAK-STAT的mRNA表达水平显著增强,辛伐他汀显著抑制CT-1诱导心肌细胞JAK-STAT mRNA表达水平增高(P＜0.01),而MVA和AG490可部分阻断辛伐他汀的效应(P＜0.01).结论 心肌营养素-1能够诱导心肌细胞肥大,辛伐他汀可抑制其这一过程并可能与细胞因子信号通路JAK-STAT活化有关.     

PKC上调心脏营养素-1促进心肌细胞的存活率

目的观察心脏营养素-1（CT-1）对培养乳鼠心肌细胞存活率的影响以及蛋白激酶C（PKC）信号转导通路在调控CT-1诱导心肌细胞存活中的作用。方法分离、纯化并差速贴壁培养新生大鼠心肌细胞,MTT比色法测定各孔心肌细胞存活率。结果①无血清DMEM培养心肌细胞24 h后加入4个剂量组CT-1（0.110 nmol/L）,随着剂量的增加MTT计数随之增高,呈明显的剂量依赖性;②在培养介质中预先加入蛋白激酶C（PKC）激动剂佛波酯（PMA）,30 m in后再加入CT-1,MTT计数明显增加,而用PKC抑制剂Calphostin C（Cal）则使MTT计数明显降低;③用丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）亚型细胞外信号调节激酶（ERK）选择性抑制剂PD098059进行预处理,再加入CT-1,心肌细胞存活率明显降低,与单纯CT-1组相比有显著性差异;单纯用ERK抑制剂PD098059对心肌细胞存活率无明显影响;预先加入ERK抑制剂PD098059,再加入PMA和CT-1,MTT计数明显降低,与（PMA+CT-1）组相比有极显著性差异。结论CT-1对心肌细胞存活率具有明显的剂量依赖性;PKC可上调CT-1促进的心肌细胞存活率,PKC可能成为CT-1促进心肌细胞存活率的信号转导通路之一;CT-1诱导心肌细胞存活率的胞内信号转导通路可能是先激活PKC,然后诱导MAPK亚型ERK的激活。     

辛伐他汀对心肌细胞肥大的防治作用

目的:在原代培养的新生大鼠心肌细胞上观察辛伐他汀对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及心肌营养素-1(CT-1)致心肌细胞肥大的防治作用。方法:应用改进的Simpson方法进行原代SD大鼠心肌细胞培养,制备全细胞提取液;通过改良Lowry法测定心肌细胞总蛋白含量;采用相差显微镜和HJ2000通用图像分析系统测定心肌细胞表面积,并为卡托普利作阳性对照。结果:①剂量为10-6mol/L的辛伐他汀能安全有效地抑制AngⅡ诱导的心肌细胞总蛋白含量的增加和心肌细胞表面积的增大,其效果与血管紧张素转化酶抑制——卡托普利作用相似。②CT-1呈剂量依赖性诱导心肌细胞总蛋白含量增加;辛伐他汀能明显抑制CT-1诱导的心肌细胞总蛋白含量的增加和心肌细胞表面积的增大。结论:辛伐他汀能明显抑制AngⅡ及CT-1诱导的心肌细胞总蛋白含量的增加和心肌细胞表面积的增大,具有防治心肌细胞肥大的作用。     

心肌营养素-1对心肌梗死大鼠心功能和心肌细胞凋亡的影响

心肌梗死时心肌细胞不仅发生坏死，也可发生凋亡。心肌营养素-1(CT-1)是白介素-6家族的新成员，可促进心肌细胞的存活、增殖和诱导肥大。此外，在体外还能减轻心肌的缺血-再灌注损伤和缺氧诱发的心肌细胞凋亡。本研究观察了CT-1对急性心肌梗死大鼠心功能和心肌细胞凋亡的影响。     

心肌营养素-1在血管紧张素Ⅱ致心肌细胞肥大中的表达

目的利用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激心肌细胞造成肥大,观察心肌细胞肥大过程中心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)的表达情况。方法培养原代心肌细胞,给予AngⅡ刺激心肌细胞造成肥大,在不同时间取细胞进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察CT-1 mRNA表达,免疫组化法检测CT-1蛋白表达,相差显微镜下观察细胞形态变化。结果经AngⅡ刺激后在相差显微镜下可见心肌细胞面积变大。CT-1 mRNA水平随着AngⅡ刺激时间延长而有增高的趋势,CT-1蛋白表达亦增加。结论AngⅡ致心肌细胞肥大过程中伴有CT-1表达增加,CT-1有可能参与心肌细胞的肥大机制。     

心肌营养素-1诱导心肌细胞肥大及辛伐他汀的干预作用

目的观察细胞因子心肌营养素1(CT-1)诱导大鼠心肌细胞的肥大效应,探讨辛伐他汀(Sim)对这一过程的干预作用及其信号转导机制。方法以培养的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞为实验模型,分为对照组,CT-1诱导组,CT-1 Sim组,CT-1 Sim 甲羟戊酸(MVA)组,CT-1 AG490(JAK2拮抗剂)组。应用图像分析系统测定心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心钠素(ANP)mRNA表达,RT-PCR检测细胞因子信号通路JAK/STAT的mRNA表达水平。结果(1)与对照组相比,CT-1组心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入率,ANPmRNA表达水平均明显增高(P<0.01),JAK2拮抗剂AG490可显著的抑制CT-1的作用(P<0.01)。(2)与CT-1组相比,辛伐他汀共培养后心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入率,ANPmRNA表达水平明显减小(P<0.01),外源性甲羟戊酸可显著的抑制辛伐他汀的作用(P<0.01);(3)CT-1可使心肌细胞JAK-STAT的mRNA表达水平显著增强,辛伐他汀显著抑制CT-1诱导心肌细胞JAK-STATmR-NA表达水平增高(P<0.01),而MVA和AG490可部分阻断辛伐他汀的效应(P<0.01)。结论心肌营养素1能够诱导心肌细胞肥大,辛伐他汀可抑制其这一过程并可能与细胞因子信号通路JAK-STAT活化有关。     

AG490对心肌营养素-1致心肌细胞肥大的影响

目的:研究AG490(一种酪氨酸酶抑制剂)对心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)诱导的心肌细胞肥大的影响。方法:利用CT-1刺激心肌细胞造成细胞肥大,同时用AG490进行干预;检测心肌细胞大小、3H-亮氨酸掺入率和β-肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA的表达。结果:经CT-1刺激后心肌细胞形态变大(q=16.47,P<0.01),3H-亮氨酸掺入率和β-MHCmRNA表达增加(P<0.01);AG490能抑制CT-1引起的心肌细胞肥大(q=10.37,P<0.01)、3H-亮氨酸掺入率和β-MHCmRNA表达的增高(P<0.01)。结论:AG490能够部分抑制CT-1所诱导的心肌细胞肥大。     

心肌营养素-1对血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大的影响

目的:研究心肌营养素-1(CT-1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的影响。方法:利用AngⅡ刺激心肌细胞,导致细胞肥大,应用CT-1反义脱氧寡核苷酸进行干预。检测心肌细胞大小及3H-亮氨酸掺入率的变化;以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CT-1 mRNA及β-肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA表达,免疫组织化学法检测心肌细胞CT-1蛋白的表达。结果:经AngⅡ刺激后,在相差显微镜下可见心肌细胞面积变大,3H-亮氨酸掺入率、CT-1蛋白的表达增高;CT-1和β-MHC mRNA水平的表达增加。利用Fugene6可将CT-1反义脱氧寡核苷酸转染入心肌细胞。CT-1反义脱氧寡核苷酸组心肌细胞面积较肥大组明显减小[(81.257±3.995)mm2∶(127.214±5.693)mm2],3H-亮氨酸掺入量[(1653.33±17.91)cpm∶(1971.50±42.16)cpm]及CT-1蛋白[(3.16±0.17)%∶(3.51±0.29)%]明显减少;CT-1[(0.2137±0.0227)∶(0.4023±0.0160)]和β-MHC mRNA[(0.5032±0.0261)∶(0.773 4±0.0486)]表达亦显著减少(P0.05~0.01)。各指标Fugene 6组、错义组与肥大组无明显差异。结论:AngⅡ致心肌细胞肥大过程中伴有CT-1表达增加,应用CT-1反义脱氧寡核苷酸后可使之下降,说明CT-1参与了心肌细胞的肥大机制。     

心肌营养素-1诱导大鼠心肌细胞肥大与JAK激酶/信号转导转录活化因子信号通路的关系

目的研究心肌营养素-1(CT-1)对培养大鼠心肌细胞肥大的诱导作用,探讨细胞因子信号途径JAK激酶/信号转导转录活化因子(JAK-STAT)与CT-1诱导心肌细胞肥大的关系.方法以培养的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞为实验模型,分为对照组、CT-1刺激组(10 ng/mL)、JAK2拮抗剂AG490(10 μmol/L)干预组.应用图像分析系统测定心肌细胞表面积,[3H]亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心钠素(ANP)mRNA表达,RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK-STAT的mRNA和蛋白表达水平.结果 (1)CT-1组心肌细胞表面积(1664.7±152.3)μm2明显高于对照组(621.1±90.2)μm2,P<0.01,AG490干预后心肌细胞面积(862.9±158.1)μm2明显减小,与CT-1组比较,P<0.01.(2)CT-1组心肌细胞[3H]亮氨酸掺入率(2388±72)计数/(min·孔)高于对照组(1353±81)计数/(min·孔),P<0.01,AG490组[3H]亮氨酸掺入率(1693±59 )计数/(min·孔)明显下降,与CT-1组比较,P<0.01.(3)CT-1组心肌细胞ANP的mRNA表达水平(0.61±0.03)明显增强,与对照组(0.23±0.02)比较,P<0.01,经AG490干预后ANP的mRNA表达水平(0.29±0.02)明显下降,和CT-1组相比,P<0.01.(4)CT-1刺激后心肌细胞JAK-STAT的mRNA和蛋白表达水平显著增强(P<0.01),在AG490干预后JAK-STAT的mRNA和蛋白表达明显减弱,与CT-1组比较,P<0.05.结论 CT-1有明显的促心肌细胞肥大效应,细胞因子信号通路JAK-STAT活化参与了这一过程,并可能是心肌细胞肥大的分子生物学机制之一.     

SOCS1介导CT-1对心肌细胞急性缺氧复氧损伤的保护作用

目的通过使用细胞因子信号抑制物1（SOCS1））反义寡核苷酸（ASODN）干预,从细胞和分子水平阐明SOCS1如何介导心肌营养素-1（CT-1）对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法用改良的方法培养出生1～3d的乳鼠心肌细胞,分为对照组：DMEM液培养6 h;缺氧复氧组;CT-1组：缺氧复氧＋CT-1;ASODN组1：缺氧复氧＋CT-1＋ASODN（终浓度为20μmol/L）;ASODN组2;SODN组：缺氧复氧＋CT-1＋SODN;ScODN组：缺氧复氧＋CT-1＋ScODN。测定心肌细胞的存活率、线粒体膜电位（Δψm）、细胞活性氧（ROS）、细胞凋亡率及SOCS1水平。结果缺氧复氧组较对照组心肌细胞凋亡率增加、ROS水平升高、心肌细胞存活率降低、Δψm下降,P均〈0.05;而CT-1组较缺氧复氧组心肌细胞存活率上升、凋亡率减少、Δψm增加。SOCS1 ASODN干预后,心肌细胞凋亡率和ROS水平明显升高,Δψm水平下降。缺氧复氧组SOCS1 mRNA和蛋白较对照组有所增加;CT-1组SOCS1 mRNA和蛋白均较缺氧复氧组升高,SOCS1 ASODN干预后下降。结论 SOCS1介导了CT-1减轻缺氧复氧引起的心肌细胞损伤。     

心肌营养素-1和心血管疾病

心肌营养素(CT-1)是一种新近发现的细胞因子，属于白介素6(IL-6)超家族。它可以使心肌细胞肥大，也可以维持心肌细胞的存活，保护心肌细胞。近来研究表明，CT-1与心血管疾病的发生、发展密切相关。     

心肌营养素-1与心血管系统关系的研究进展

<正>心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)是1995年Penni-ca等从小鼠心脏发育的胚胎干细胞中克隆表达出的一种蛋白质因子,为白细胞介素-6(IL-6)细胞因子家族的新成员,因其在体外能够导致心肌细胞肥大而得名。CT-1存在于多种组织中,在心肌组织表达最高,除参与心脏正常的生     

心肌营养素-1诱导小鼠诱导性多能干细胞心肌细胞定向分化的实验研究

目的:观察心肌营养素-1(CT-1)对小鼠诱导性多能干细胞(miPSCs)心肌细胞定向分化的诱导作用。方法:实验分为对照组与CT-1处理组。miPSCs经悬滴法诱导形成拟胚体,第3天培养基中加入1μmol/ml CT-1(CT-1组),对照组采用普通培养基。于第4、7、10和14天,收取细胞样本,采用实时PCR检测心脏特异标志物基因的表达。用免疫荧光染色及流式细胞术检测干细胞标志物Oct4和心肌特异性分化标志物肌钙蛋白I(cTnI)的表达。用透射电镜观察心肌样细胞的超微结构。结果:CT-1组第10天,样本中心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)基因表达的水平为同期对照组的1.75倍,有显著性差异(P<0.05)。免疫荧光染色法检测显示,两组均有cTnI表达。流式细胞术鉴定的结果显示,对照组与CT-1组cTnI的阳性率分别为28.5%和56.4%,有显著性差异(P<0.05)。电镜观察显示,CT-1组肌原纤维及胞内线粒体明显增多,肌纤维排列规则,可见细胞间桥粒连接和缝隙连接。结论:CT-1可显著提高miPSC向心肌细胞定向分化的效率。     

心肌营养素-1与糖尿病心肌病

心肌营养素-1(CT-1)是从小鼠胚胎干细胞中克隆出的一种细胞因子,为白细胞介素石细胞因子家族的新成员.CT-1可通过促进心肌细胞肥大、成纤维细胞的生长及胶原的合成,参与和调节心室肥厚及重构.糖尿病心肌病的病理生理过程中存在心肌重构,且2型糖尿病患者血浆中CT-1水平升高,表明CT-1可能在糖尿病心肌病的发生、发展中起重要的调节作用.确切的机制尚不清楚,可能与促进心肌重构有关.     

心肌营养素-1与糖尿病心肌病

心肌营养素-1(CT-1)是从小鼠胚胎干细胞中克隆出的一种细胞因子,为白细胞介素石细胞因子家族的新成员.CT-1可通过促进心肌细胞肥大、成纤维细胞的生长及胶原的合成,参与和调节心室肥厚及重构.糖尿病心肌病的病理生理过程中存在心肌重构,且2型糖尿病患者血浆中CT-1水平升高,表明CT-1可能在糖尿病心肌病的发生、发展中起重要的调节作用.确切的机制尚不清楚,可能与促进心肌重构有关.