创伤后关节软骨细胞凋亡及其预防的实验研究

目的探讨关节软骨创伤后软骨细胞凋亡情况及其预防方法。方法32只新西兰大白兔,4只行膝关节囊切开,不损伤软骨(正常组),另28只双侧膝关节钻孔造成软骨急性损伤,一侧关节腔在术毕和术后每周1次注射1％透明质酸钠1 mL(治疗组),另一侧不做处理作为损伤对照(损伤组);利用TUNEL、流式细胞仪两种方法检测软骨受损区软骨细胞凋亡情况。结果损伤后软骨细胞出现坏死和凋亡,至第4天软骨细胞凋亡率最大,凋亡细胞全层分布;透明质酸钠治疗组软骨细胞凋亡较损伤组明显减少,差异有极显著性意义(P<0．01)。结论创伤后关节软骨细胞发生凋亡会导致创伤后骨关节炎的发生。早期关节腔内注射透明质酸钠能有效抑制软骨细胞凋亡,可能对预防和降低创伤后骨关节炎的发生有重要意义。     

关节腔注射羧甲基壳聚糖预防膝骨关节炎软骨退变

目的观察羧甲基壳聚糖（CMCTS）关节腔注射对骨关节炎（OA）模型关节软骨退变及软骨基质金属蛋白酶（MMP-1，-3）及其组织抑制物（TIMP-1）mRNA表达的影响。方法32只大耳白兔行单膝前交叉韧带切断术，随机分为A～D组，A、B组分别于术后立即关节腔注射高、低分子量2％CMCTS0．3ml，每2周1次；C组术后立即关节腔注射1％透明质酸钠（SH）0．3ml，每周1次；D组术后不注射任何药物。术后6周处死动物，比较各组股骨内髁关节软骨的大体变化，采用逆转录聚合酶链反应（R-PCR）方法检测软骨MMP-1，-3及TIMP-1 mRNA的表达水平。结果大体评分显示不注射组软骨退变明显重于CMCTS和SH注射组MMP-1，-3在CMCTS注射组软骨中的表达明显低于SH注射组和不注射组，不同分子量CMCTS注射组MMP-1，-3的表达没有显著差异，SH注射组软骨中MMP-1，-3的表达与不注射组比较差异无统计学意义（P〉0．05），TIMP-1在各组中的表达没差异有统计学意义（P〉0．05）。结论CMCTS能明显下调软骨MMP-1，-3的mRNA表达．明显减轻软骨退变的程度。软骨具有保护作用。     

p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对大鼠骨性关节炎的影响

目的观察p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580对大鼠膝关节骨性关节炎关节软骨的影响。方法40只sD大鼠随机分为A、B、C、D4组。A、B、C组行单侧膝关节前交叉韧带切除术，A组于术后行关节腔内注射0．1mL浓度为100μm／L SB203580，B组注射等量生理盐水做为实验对照，C组不予任何处理为空白对照组，D组为正常对照组。术后8周处死动物。观察各组标本大体评分、Mankin评分、软骨细胞凋亡指数以及软骨Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果40只大鼠均纳入结果分析。大体评分及Mankin评分显示A组软骨退变明显轻于B、C组（P〈0．05）；各组均发现有凋亡的软骨细胞，A组软骨细胞凋亡指数低于B、C组（P〈0．05），D组软骨细胞凋亡指数明显低于其他3组（P〈0．05）；A组关节软骨Ⅱ型胶原染色吸光度值大于B、C组（P〈0．05）。结论p38MAPK抑制剂对关节软骨有一定的保护作用，可以延缓OA进程，对OA有一定的治疗作用。     

5氟脲嘧啶关节腔注射治疗兔膝骨性关节炎的实验研究

[目的]评价5氟脲嘧啶（5-Fluorouracil，5Fu）关节腔注射治疗兔膝骨性关节炎（osteoarthritis，OA）的疗效。[方法]24只兔子制成骨关节炎模型随机分成OA组、5Fu组和对照组，OA组立即处死，5Fu组按5Fu2ms／kg关节腔注射，每周1次连续4次，对照组注射等量生理盐水，最后1次治疗后1周处死。观察3组滑膜组织的光镜、电镜改变及软骨的光镜、MMP-1免疫组化改变，比较软骨Mankin＇s评分及关节液中IL-1的浓度。[结果]5Fu组可见软骨破坏减轻，滑膜炎症明显抑制，Mankin’s评分明显改善（P〈0．01）；关节液IL-1浓度降低（P〈0．05），关节软骨中MMP-1表达减弱。[结论]5Fu关节腔内注射能抑制滑膜炎症，缓解软骨的破坏。     

SH关节腔内注射治疗兔膝关节炎的实验研究

[目的]探讨透明质酸钠（sodium hyaluronate，SH）关节腔内注射治疗膝骨性关节炎（OA）的效果。[方法]24只兔子建立骨关节炎动物模型，随机分OA组、SH组、对照组，观察3组软骨、滑膜细胞病理切片及软骨MMP-1免疫组化，进行软骨Mankin＇s评分，以及检测血液和关节液的IL-1含量的效果。[结果]SH组可见软骨破坏减轻，滑膜纤维增生减少，Mankin＇s评分有明显改善（P〈0．05）；血、膝关节滑液IL-1浓度降低（P〈0．05），但关节软骨中MMP表达仍然活跃。[结论]SH能减少滑液中炎性介质IL-1的分泌，从而减轻滑膜炎症，缓解对软骨细胞的破坏，延缓OA进展，但仍阻止不了OA进展。     

吡咯喹啉醌对兔骨关节炎模型关节软骨的保护作用

目的 观察吡咯喹啉醌(PQQ)对兔骨关节炎模型关节软骨的保护作用.方法 Hulth法建立日本大耳白兔右侧膝关节骨关节炎模型;实验组兔术后给予关节腔内注射1×104 μmol/LPQQ,0.2 ml/kg,3d1次,连续6周;对照组兔行关节腔内等量生理盐水注射;伪手术组兔仅暴露关节,不进行药物处理.术后6周行膝关节前后位X线检查,并行Kellgren-Lawrance评分;观察股骨髁关节面大体形态并行软骨Pelletier JP评分;制备切片行苏木素-伊红(HE)染色,光镜观察、Mankin评分;行Ⅱ型胶原免疫组织化学染色;原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测软骨细胞凋亡;透射电镜下观察软骨细胞线粒体形态和数目的改变.结果 实验组、对照组和伪手术组Kellgren-Lawrance 评分为1.49±0.45、5.69±1.08、0.28±0.06;JP评分为1.46±0.42、2.75±0.60、0.08 ±0.04;膝关节组织学Mankin评分为2.68±0.86、6.95±1.46、0.25 ±0.06;凋亡软骨细胞所占总细胞数目的比例为(5.60±1.20)％、(35.30±4.90)％、(0.70±0.30)％;实验组、对照组和伪手术组电镜下软骨细胞线粒体数为3.40±0.68、1.24±0.45、6.40±1.20;上述各指标组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组免疫组织化学染色可见Ⅱ型胶原纤维组织结构良好,而对照组软骨Ⅱ型胶原缺失.结论 关节腔内注射PQQ可保护软骨细胞,减轻关节软骨结构及功能的破坏,减缓关节软骨退变.PQQ可能是通过保护软骨细胞线粒体而发挥作用.     

关节内骨折后受损软骨细胞凋亡的实验研究

目的：探讨关节内骨折后受损软骨的变化。方法：利用冲击在兔膝关节内造成骨折，利用TUNEL、流式细胞计数，透射电镜、DAPI染色等方法对受损软骨进行动态观察。结果：关节内骨折后2周，受损软骨细胞发生坏死及凋亡。1月后受损软骨细胞仍进行性凋亡。3－6月后，损伤软骨周围的细胞也发生凋亡，损伤部软骨细胞增生，其中部分增生细胞凋亡。结论：关节内骨折后软骨细胞进行性凋亡，可能是创伤后骨关节炎发生的原因之一。     

改良关节松解治疗股骨远端骨折术后膝关节强直

[目的]探讨创伤术后改良膝关节粘连松解结合透明质酸钠关节内注射对治疗膝关节粘连性强直的价值。[方法]对22例膝关节僵硬患者行膝关节改良粘连松解,18例患者行传统膝关节松解术,术后关节腔内均注射透明质酸钠,并早期CPM锻炼,观察术后膝关节伸屈活动度改善程度。[结果]2组术后关节功能依照HSS膝关节评分标准进行评价,改良组优良率高于对照组,且无发生髌骨骨折、伸膝无力、感染等并发症。[结论]膝关节创伤术后的改良粘连松解术处理膝关节僵硬是一项有效、可靠和安全的技术,结合透明质酸钠关节内注射能有效减轻或预防术后再粘连的形成,有助于膝关节功能康复。     

Caspase-1表达和软骨细胞凋亡在骨关节炎的意义

目的观察骨关节炎（osteoarthritis,OA）关节软骨标本的Caspase-1表达和软骨细胞凋亡的程度,初步探讨两者的相关性和与OA病变程度的关系。方法选取2007年3月至2007年11月进行关节置换的OA患者的关节软骨标本26例作为OA组,男8例,女18例;髋20例,膝6例;年龄52～81岁,平均60岁。选取截肢的正常关节软骨标本10例作为对照组,男7例,女3例;年龄16～45岁,平均40岁;均排除结构性破坏。按改良Mankin病理评分进行分级,将标本分成正常软骨组0～1分（A组）即对照组;OA软骨轻度退变组2～5分（B组）、OA软骨中度退变组6～9分（C组）和OA软骨重度退变组10～14分（D组）,B～D组即OA组。分别采用HE染色和番红O/固绿染色后,采用免疫组化和TUNEL检测法,检测软骨细胞中Caspase-1的表达和凋亡细胞阳性率。结果 （1）对照组Caspase-1表达低于OA组;Caspase-1的表达与Mankin评分呈正相关;（2）对照组的凋亡细胞阳性率低于OA组的凋亡细胞阳性率;软骨凋亡细胞阳性率与Mankin病理评分呈正相关;（3）A～D组Caspase-1的表达和凋亡细胞阳性率不存在相关性。结论 （1）Caspase-1与OA发生发展有关,能反应OA软骨的病变进展程度;（2）软骨细胞凋亡是OA的可能发病机理,其凋亡率可能影响OA病程进展。     

鹿茸多肽对实验性膝骨性关节炎软骨细胞凋亡及相关细胞因子的影响

目的:探讨鹿茸多肽对实验性膝骨性关节炎软骨细胞凋亡及相关细胞因子的影响。方法:6月龄新西兰大白兔64只,随机分为正常组(8只)和模型组(56只),模型组采用Hulth法造成兔膝骨性关节炎模型。造模成功后再将模型组随机分为鹿茸多肽组(24只)和对照组(24只),鹿茸多肽组予鹿茸多肽稀释液0.5ml关节腔注射每2日1次,对照组给予0.5ml生理盐水关节腔注射每2日1次。分别于干预后第7、15、30天分批取材,光镜观察各组关节软骨形态学变化,透射电镜观察软骨细胞凋亡的结构变化;TUNEL法检测软骨细胞凋亡,计算软骨细胞凋亡指数;酶联免疫吸附法检测关节液中白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α的水平。结果:随着时间的延长,鹿茸多肽组和对照组关节软骨退变进行性加重,软骨细胞凋亡明显增多。干预后第7、15、30天,鹿茸多肽组软骨细胞凋亡指数分别为(20.30±1.23)、(28.60±2.37)、(37.10±1.82),对照组软骨细胞凋亡指数分别为(31.50±2.44)、(34.40±1.77)、(42.30±2.33),差异有统计学意义(P<0.05);相同时间段内,鹿茸多肽组软骨细胞凋亡指数低于对照组。干预后第7、15、30天,鹿茸多肽组关节液中白细胞介素-1β水平分别为(15.81±1.26)、(12.59±1.42)、(9.57±0.92)μg/L,肿瘤坏死因子-α水平分别为(48.47±2.64)、(43.46±1.33)、(40.96±1.05)μg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组关节液中白细胞介素-1β水平分别为(18.92±1.83)、(20.25±2.76)、(22.13±2.24)μg/L;肿瘤坏死因子-α水平分别为(57.92±2.12)、(60.25±1.48)、(63.35±2.15)μg/L。相同时间段内,鹿茸多肽组白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:鹿茸多肽可抑制膝骨性关节炎过程中软骨细胞凋亡,降低关节液中白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α的水平,一定程度上延缓关节软骨的退变。     

Faculty of Anaesthetists of the Royal College of Surgeons of Ireland

The Faculty of Anaesthetists of the Royal College of Surgeons of England, 35–43 Lincoln's Inn Fields, London WC2A 3PN. Telephone: 01-405 3474.     

深圳市某两所小学流行性腮腺炎突发疫情的流行病学分析

目的：通过对深圳市某两所小学发生的流行性腮腺炎突发疫情的流行病学特点及差异性进行分析,为制定科学、高效的防控策略提供科学依据。方法2013年5～7月深圳市大鹏新区某两所小学爆发流行性腮腺炎,以学校为整体研究对象,分别标记为学校A（24个班,学生1210例）和学校B（27个班,学生1274例）,对比两所小学的疫情流行病学差异性。结果分析发现,学校A流行性腮腺炎发病率为4.30%,发病班级所占比54.17%,均较学校B1.73%和29.63%高,对比差异有统计学意义（P＜0.05）;分析显示学校A学生出现疫病平均年龄为（11.2±1.1）岁,较学校B（9.34±1.0）岁,对比差异明显（P＜0.05）;且两组疫病患儿在接种疫苗率对比上差异无统计学意义（P＞0.05）;但疫情发生时,学校B疫苗紧急接种率明显高于学校A,对比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论小学作为流行性腮腺炎爆发的主要场所之一,疫病爆发高峰季节前,针对易感染人群给予相应的疫苗接种等预防控制措施,同时加强流行性腮腺炎的监测,对于降低感染人群数量,减轻、遏制疫情有着积极的意义,值得相关防控部门重视。