肥胖大鼠形成过程中血清瘦素、血浆Ghrelin及下丘脑神经肽Y水平的变化

目的 观察在食源性肥胖（DIO）大鼠模型形成过程中,血清瘦素（Leptin）、血浆Ghrelin及下丘脑神经肽Y（NPY）的变化. 方法 取模型形成过程中2个时间点,分为正常对照（NC）组、DIO4周组（高脂饮食喂养4周）和DIO 8周组（高脂饮食喂养8周）.测量血清Leptin、血浆Ghrelin水平及下丘脑NPY浓度和mRNA的表达. 结果 在DIO大鼠模型形成过程中,DIO 4周和DIO 8周组空腹血清Leptin浓度明显高于NC组[（0.34±0.05）,（0.49±0.03） vs （0.24±0.03） ng/ml]（P＜0.05）;空腹血浆Ghrelin浓度明显低于NC组[（1.84±0.21）,（1.62±0.23） vs （2.01±0.20） ng/ml]（P＜0.05）;下丘脑NPY浓度及mRNA表达均明显高于NC组[NPY浓度：（162.8±20.1）,（196.2±19.9）vs（134.3±17.2）pg/ml;NPY mRNA：（1.16±0.13）,（1.55±0.16）vs（0.87±0.16）]（P均＜0.05）.下丘脑NPY浓度及mRNA表达与血清Leptin浓度呈正相关（r分别为0.950、0.914,P＜0.05）,与血浆Ghrelin浓度呈负相关（r分别为-0.889、-0.908,P＜0.05）. 结论 随着DIO大鼠肥胖动物模型的形成,下丘脑NPY表达逐渐增强,与空腹血清Leptin浓度正相关,与空腹血浆Ghrelin浓度负相关.     

胃旁路手术对高脂饮食诱导肥胖大鼠血浆ghrelin、GLP-1、PYY的影响

目的探讨胃旁路手术对高脂饮食诱导的肥胖大鼠血浆生长激素释放肽(ghrelin)、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、胃肠激素肽(PYY)的影响。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为正常饮食组(ND组)10只、高脂饮食组20只,分别给予正常饮食及高脂饮食喂养,喂养12周后,高脂饮食组成功建模肥胖大鼠16只,随机分为高脂饮食假手术组(HFD组)8只,高脂饮食+Roux-en-Y胃旁路手术(RYGB)组(HFD+RYGB组)8只,HFD+RYGB组大鼠行RYGB,ND组及HFD组行假手术。4周后处死全部大鼠,收集血样采用ELISA法测定血浆生长激素释放肽、胰高血糖素样肽-1、胃肠激素肽浓度。结果与ND组比较,HFD组大鼠体重增加,HFD+RYGB组大鼠体重低于HFD组,3组大鼠的摄食量比较差异无统计学意义;与ND组比较,HFD组大鼠空腹血糖与胰岛素水平升高,HFD+RYGB组大鼠空腹血糖与胰岛素水平较HFD组下降,但差异无统计学意义;HFD组大鼠血浆ghrelin、PYY浓度高于ND组,HFD+RYGB组大鼠血浆ghrelin、GLP-1浓度高于HFD组,PYY浓度低于HFD组,差异有统计学意义(P0.05)。结论肥胖大鼠RYGB术后体重减轻,血浆GLP-1、PYY、ghrelin循环水平改变。     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠下丘脑组织氧化应激及TRX-1、TXNIP的影响

目的探讨α-硫辛酸(LA)对糖尿病(DM)大鼠下丘脑组织氧化应激及TRX-1、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的影响。方法将30只Wistar大鼠随机分为对照组10只、实验组20只。实验组20只用链脲佐菌素制备DM模型,建模成功后分为DM对照组(DC组)、LA干预组(LA组)各10只。对照组给予基础饲料喂养;D组、LA组给予高脂饮食,LA组给予LA干预4周。4周后用RT-PCR法检测各组下丘脑组织TRX-1、TXNIP mRNA表达;比色法检测丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)。结果与对照组比较,DC组、LA组MDA、TRX-1mRNA、TXNIPmRNA明显升高,T-AOC明显降低(P<0.01或<0.05);与DC组比较,LA组MDA明显下降,T-AOC、TRX-1mRNA、TXNIP mRNA明显升高(P<0.01或<0.05)。结论 LA可改善DM大鼠的下丘脑氧化应激水平,提高其TRX-1、TXNIP mRNA表达水平。     

限食后追赶生长性肥胖与大鼠血浆葡萄糖依赖性胰岛素释放肽水平的关系

目的 探讨限食后追赶生长性肥胖与大鼠血浆葡萄糖依赖性胰岛素释放肽(GIP)水平的相关性.方法 6周龄健康雄性SD大鼠60只按随机数字表法随机分为普通饮食组(n=15,给予普通饮食)、普通饮食追赶生长组(n=15,给予同体重普通饮食组大鼠60%普通饲料限食喂养4周后饲以普通饲料)、高脂饮食组(n=15,给予高脂饮食)和高脂饮食追赶生长组(n=15,给予同体重普通饮食组大鼠60%普通饲料限食喂养4周后饲以高脂饲料),观察大鼠体重及进食量变化.分别于4、6、8周处死部分动物,检测体脂含量及血浆GIP浓度.采用配对t检验和单因素方差分析以及一元线性相关分析进行数据统计.结果 与普通饮食组相比,高脂饮食组、普通饮食追赶生长组和高脂饮食追赶生长组体脂含量[分别为(3.6±0.6)、(7.9±1.5)、(4.6±1.1)、(7.0±1.0)g;t值分别为-2.601、-2.305、-2.501,均P＜0.05]、血浆GIP水平升高[分别为(41±9)、(61±7)、(51±8)、(59±8)pmol/L;t值分别为-6.061、-3.452、-4.651,均P＜0.05].相关分析显示,体脂含量与血浆GIP水平显著相关(r2=0.9407).结论 限食后追赶生长性肥胖与大鼠血浆GIP水平高度相关,可能与追赶生长所引发的病理生理学变化有关.     

胰岛素和二甲双胍对2型糖尿病大鼠胃促生长素和胰岛素敏感性的影响

采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病(T2DM)大鼠模型,将成模大鼠随机分为T2DM对照组、胰岛素治疗组(INS组)和二甲双胍治疗组(MET组),干预治疗8周,用酶联免疫吸附法检测血浆胃促生长素.结果显示,与T2DM对照组比较,INS组胃促生长素升高而无统计学差异,MET组显著升高(P<0.01).相关分析显示,T2DM对照组、MET组胃促生长素与空腹胰岛素(FINS)呈负相关(r分别为-0.427、-0.265,P<0.05),与胰岛素敏感指数(ISI)呈正相关(r分别为0.392、0.563,P<0.05);多元线性回归分析表明,FINS、ISI与胃促生长素独立相关.提示MET可升高T2DM大鼠的血浆胃促生长素水平,提高其胰岛素敏感性.     

罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶α表达及活性的影响

目的 探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪酸代谢及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)α表达和活性的影响.方法 根据随机数字表将40只4～5月龄雄性Wistar大鼠随机分至健康对照组(n=16;给予基础饲料)和高脂喂养组(n=24;给予高脂饲料).喂养4周末,两组各取8只大鼠行高胰岛素.正葡萄糖钳夹实验,评价高脂喂养组胰岛素抵抗状态.造模成功后根据随机数字表将高脂喂养组(n=16)随机分至高脂喂养亚组(n=8)和罗格列酮干预亚组(n=8),继续喂以高脂饲料4周,罗格列酮干预亚组同时给予3 mg·kg-1·d-1罗格列酮灌胃.骨骼肌甘油三酯经氯仿-甲醇抽提后采用全自动生化分析仪测定.运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法 测定骨骼肌AMPKα1及AMPKα2 mRNA表达水平;运用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot方法 测定骨骼肌AMPKα1、AMPKα2及P-AMPKα蛋白表达水平.组间比较采用完伞随机设计的单因素方差分析.结果 第8周末,高脂喂养亚组葡萄糖输注率低于健康对照组[分别为(19.3±3.7)和(30.4±4.2)mg·kg-1·min-1,P<0.01],罗格列酮干预亚组葡萄糖输注率高于高脂喂养亚组[分别为(25.8±1.6)和(19.3±3.7)mg·kg-1·min-1,P<0.05].高脂喂养亚组骨骼肌甘油三酯含量高于健康对照组[分别为(4.4±1.2)和(2.0±0.5)μmol/g,P<0.01],罗格列酮干预亚组骨骼肌甘油三酯含量低于高脂喂养亚组[分别为(3.3±1.1)和(4.4±1.2)μmol/g,P<0.05].骨骼肌AMPKαl mRNA及蛋白表达无组问差异(P>0.05);骨骼肌AMPKα2 mRNA、蛋白表达和P-AMPKα蛋白表达高脂喂养亚组低于健康对照组,而罗格列酮干预亚组高于高脂喂养亚组(均P<0.05).结论 高脂饮食可导致大鼠骨骼肌脂质堆积及胰岛素抵抗.罗格列酮干预可增加胰岛素抵抗大鼠骨骼肌AMPKα2表达和AMPKα活性,降低骨骼肌脂质含量,提高胰岛素敏感性.     

血管生成素样蛋白2在糖尿病大鼠肾脏中的表达及其干预研究

目的观察厄贝沙坦对血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)在糖尿病大鼠肾脏中表达的影响及作用机制。方法 50只SD雄性大鼠随机分为正常对照(NC)组10只和实验组40只。实验组给予高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素建立T2DM大鼠模型,最终建模成功30只,随机分为糖尿病(DM)组15只和厄贝沙坦(DI)组15只。分别检测8周和12周时体重(BW)、BP、肾重(KW)、血糖、血肌酐(Scr)、BUN、24hUAlb水平。镜下观察肾组织病理改变,免疫组织化学染色法、RT-PCR检测肾组织ANGPTL2mRNA及蛋白表达的变化。结果 DM组24hUAlb水平高于DI组和NC组[8周:(7.43±0.36)vs(5.27±0.22)vs(0.74±0.06)mg/24h;12周:(7.84±0.32)vs(5.11±0.14)vs(0.74±0.08)mg/24h,P<0.05];DM组8周和12周ANGPTL2mRNA的表达水平较NC和DI组升高(P<0.05)。结论 ANGPTL2在糖尿病大鼠肾脏的表达量逐渐升高,而厄贝沙坦可降低其表达。     

己酮可可碱对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织线粒体解耦联蛋白表达的影响

目的 探讨己酮可可碱(PTX)对非酒精性脂肪肝性肝病(NAFLD)大鼠线粒体解耦联蛋白(UCP)-2 mRNA表达的影响. 方法 SD大鼠60只,正常喂养1周后随机分为3组,每组20只.其中对照组20只,以普通饲料喂养,实验组和干预组各20只,以高脂饲料喂养,干预组高脂饮食4周后,在饮水中加用已酮可可碱(PTX)(100 mg·Kg-1·d-1),于第24周处死,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肝脏UCP-2mRNA的表达. 结果 对照组大鼠肝脏UCP2mRNA呈微量表达(1.2±0.1),实验组大鼠肝脏UCP2mRNA呈强表达(4.0±0.3),干预组大鼠肝脏UCP2mRNA呈弱表达(3.0±0.2),3组间UCP-2mRNA表达差异有统计学意义(F=160.67,P＜0.01). 结论 己酮可可碱可下调NAFLD大鼠肝细胞UCP-2mRNA的表达.     

绞股蓝皂甙对2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞核因子-1α的影响

目的观察绞股蓝皂甙(GPS)对2型糖尿病(T2DM)并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织肝细胞核因子(HNF)-1α的影响。方法 65只SPF级雄性SD大鼠,体质量220²50 g,随机分为空白对照组(7只,N组),NAFLD模型组(NM组,7只),T2DM并NAFLD模型组(模型组,51只)。N组给予普通饲料喂养。NM组给予高脂饲料喂养。模型组先给予高糖高脂饲料喂养4周;隔夜空腹腹腔注射链尿佐菌素(STZ)40 mg/kg,继续给予高糖高脂饲料喂养至8周,建立T2DM并NAFLD大鼠模型;将大鼠模型分为GPS大剂量干预组(9只,JH组),给予GPS 1g·kg-1·d-1灌胃;GPS小剂量干预组(9只,JL组),给予GPS 0.5g·kg-1·d-1灌胃;T2DM并NAFLD模型对照组(9只,M组),同等体积纯净水灌胃;继续给予高糖高脂饲料;治疗周期为6周。实验周期14周。定量PCR技术检测肝组织HNF-1α,肝脏病理学。结果 1肝组织HNF-1α:以N组扩增倍数为1计算,NM组肝细胞核因子表达为0.85,与N组比较有显著差异(P<0.05);M组为0.62,与N组比较有显著差异(P<0.01);治疗后,JH组HNF-1α升至0.80,与M组比较有非常显著差异(P<0.01);JL组HNF升至0.68,与M组比较有非常显著差异(P<0.05)。2肝脏病理学:NM组、M组重度NAFLD,JH组、JL组中度至重度NAFLD。结论 GPS能够抑制T2DM并NAFLD大鼠肝脏HNF-1α表达的下降。     

雷公藤甲素对2型糖尿病大鼠肾组织足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达的影响及机制

目的 观察雷公藤甲素对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾组织足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达的影响及其机制探讨.方法 SPF级雄性8周龄Wistar大鼠50只,体重(200±20)g,按随机数字表法分为2组:对照组10只、模型组40只.模型组高脂高糖喂养8周联合小剂量链脲佐菌素(STZ)30mg/kg建立T2DM模型鼠,正常组大鼠喂养常规饲料.将造模成功的T2DM大鼠(28只)随机分成2组:糖尿病组(14只)和雷公藤甲素治疗组(14只),雷公藤甲素治疗8周后,检测大鼠生化指标、肾重/体重和尿白蛋白.利用光镜、电镜观察肾脏病理改变.采用实时定量PCR、免疫组化及Western blot法检测肾组织Nephrin及Podocin蛋白、骨桥蛋白、转化生长因子-β1(TGF-β1)及单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)的mRNA和蛋白表达分布.采用单因素方差分析法进行统计学分析.结果 糖尿病大鼠尿白蛋白明显高于对照组(F=181.51,P＜0.01),治疗组尿白蛋白明显低于DM组(F=181.51,P＜0.01).与对照组比较,糖尿病大鼠肾组织Nephrin(F=36.82,P＜0.05)和Podocin(F=32.57,P＜0.05)蛋白表达下调,Nephrin(F=88.45,P＜0.01)、Podocin(F=55.43,P＜0.01)mRNA表达下调;雷公藤甲素组干预8周后Nephrin[(1.82±0.06)和(1.63±0.06),P＜0.05]和Podocin[(1.80±0.06)和(1.60±0.06),P＜0.05]蛋白质表达上调,肾脏组织Nephrin[(0.73±0.12)和(0.19±0.08),P＜0.01]和Podocin[(0.60±0.12)和(0.26±0.07),P＜0.01]mRNA表达上调.与对照组比较,T2DM大鼠肾组织骨桥蛋白(F=40.06,P＜0.05)和TGF-β1的(F=28.84,P＜0.05)蛋白质表达上调,肾组织骨桥蛋白(F=177.46,P＜0.01)和TGF-β1(F=161.27,P＜0.01)mRNA表达上调,雷公藤甲素治疗后肾组织骨桥蛋白[(1.27±0.03)和(1.39±0.05),P＜0.05]和TGF-β1[(1.23±0.03)和(1.44±0.02),P＜0.05]的蛋白表达下调,肾组织骨桥蛋白[(2.05±0.16)和(3.26±0.26),P＜0.01]和TGF-β1[(4.0±0.70)和(6.5±0.71),P＜0.01]mRNA表达下调.结论 雷公藤甲素对T2DM大鼠足细胞有保护作用,其机制可能与其?