复方鳖甲方对IPF大鼠血清IL-8和TNF-α含量的影响

目的 观察复方鳖甲方对肺纤维化(IPF)大鼠血清IL-8和TNF-α含量的影响.方法 采用BLM-A5致IPF动物模型,将大鼠随机分为6组,假手术组、模型对照组、阳性药物对照组、复方鳖甲方高、中、低剂量组,术后28 d,腹主动脉取血5 ml,应用双抗体夹心ELISA法检测血清中IL-8和TNF-α水平.结果 模型组血清中IL-8的含量明显高于假手术组(P＜0.05),复方鳖甲方高剂量组与低剂量组的含量明显低于模型组(P＜0.05).模型组大鼠血清中的TNF-α含量比假手术组高,差异无显著性,复方鳖甲方高、中、低剂量组的含量低于模型组,差异无显著性.结论 复方鳖甲方有明显降低IPF大鼠血清IL-8的作用,但无明显降低IPF大鼠血清TNF-α的作用.     

川芎嗪防治特发性肺纤维化的MMP表达

目的探讨川芎嗪对博来霉素诱导IPF模型的干预作用及相关机制。方法 80只SD大鼠随机分为4组：假手术组、模型组、阳性药物对照组和川芎嗪组。除假手术组外其余各组气管灌注博来霉素诱导肺纤维化,假手术组灌注生理盐水。术后第2天开始灌胃给药,阳性药物对照组灌胃醋酸强的松1.5mg.kg-1.d-1,川芎嗪组给予川芎嗪20mg.kg-1.d-1,模型组和假手术组给予相应体积的生理盐水。分别于第14天和第28天每组各取10只处死,取肺组织,HE染色和Mallory染色观察肺泡炎和纤维化程度,免疫组化法检测MMP-1的表达。结果川芎嗪可改善IPF模型大鼠肺泡炎和肺纤维化程度。川芎嗪组MMP-1表达较模型组降低。结论川芎嗪可减轻博来霉素诱导的IPF大鼠肺纤维化程度,减少MMP-1表达,可能是其抗IPF的机制之一。     

实验性大鼠肺纤维化病理形态及超微结构观察

目的 从形态学上研究肺纤维化的形成过程，为防治研究和客观地评价用药物治疗肺纤维化的疗效提供依据。方法 向大鼠气管内一次性注入博莱霉素(5mg／kg)，观察注药后各模型组的肺系数、肺组织定量分析、肺组织病理及超微结构的变化。结果 模型组肺系数从第7d开始呈逐渐升高趋势；定量分析：7d组肺泡炎最严重，28d组肺泡腔明显缩小，胶原纤维成分增加；光镜下7d组肺泡腔及肺泡间质内以炎细胞浸润为主，14d时肺泡间质增宽，成纤维细胞增多，28d时胶原纤维增生，部分肺泡腔萎缩消失；电镜下3d和7d时肺泡上皮线粒体肿胀，空泡化，核固缩或核染色质边集，肺毛细血管基膜水肿或增厚，14d时Ⅱ型肺泡上皮细胞增生，其内板层小体增多，成纤维细胞增多；28d时肺间质增宽，巨噬细胞及成纤维细胞增多，胶原纤维呈灶性沉集。结论 建立的大鼠肺纤维化模型符合肺泡炎一纤维化的早期演变过程。     

血管性痴呆大鼠模型中海马的组织病理学和超微结构变化

目的:通过光镜和电镜观察并探讨慢性脑血流灌注不足大鼠海马的组织病理学和超微结构的动态变化。方法:将60只SD大鼠随机分为模型组和假手术组,其中模型组50只,假手术组10只。模型组采用永久性双侧颈总动脉结扎术方法建立血管性痴呆大鼠模型后,再随机分为术后1、7、14、21 d组和28 d组,每组10只;假手术组麻醉后只分离双侧颈总动脉而不结扎。不同时间点断颈处死大鼠,取大脑,切片,分别在光镜和电镜下观察海马神经元的动态变化。结果:与假手术组相比,各模型组大鼠海马CA1区神经元数量均显著减少(P=0.000),其中术后14 d组海马CA1区神经元最少,超微结构显示神经元变性,核固缩,而后随着脑血流的恢复,海马神经元数量逐渐增加,神经元损伤有所改善。结论:在慢性脑血流灌注不足早期,海马神经元损伤是可逆的,为临床对慢性脑血流灌注不足患者进行早期治疗以预防血管性痴呆提供理论依据。     

血管性痴呆大鼠模型中海马的组织病理学和超微结构变化

目的：通过光镜和电镜观察并探讨慢性脑血流灌注不足大鼠海马的组织病理学和超微结构的动态变化。方法：将60只SD大鼠随机分为模型组和假手术组,其中模型组50只,假手术组10只。模型组采用永久性双侧颈总动脉结扎术方法建立血管性痴呆大鼠模型后,再随机分为术后1、7、14、21 d组和28 d组,每组10只;假手术组麻醉后只分离双侧颈总动脉而不结扎。不同时间点断颈处死大鼠,取大脑,切片,分别在光镜和电镜下观察海马神经元的动态变化。结果：与假手术组相比,各模型组大鼠海马CA1区神经元数量均显著减少（P=0.000）,其中术后14 d组海马CA1区神经元最少,超微结构显示神经元变性,核固缩,而后随着脑血流的恢复,海马神经元数量逐渐增加,神经元损伤有所改善。结论：在慢性脑血流灌注不足早期,海马神经元损伤是可逆的,为临床对慢性脑血流灌注不足患者进行早期治疗以预防血管性痴呆提供理论依据。     

钌红染色对大鼠特发性肺间质纤维化的超微结构分析

目的：观察钌红染色方法标记大鼠特发性肺间质纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）的超微结构的特点。方法：180只SD大鼠随机分为6组，盐酸博莱霉素气管内注射造模，复方鳖甲片高、中、低剂量治疗。分别于7d、14d、28d取材，钌红染色电镜观察。结果：钌红明显标记基底膜和表浅层细胞周围的胶原纤维。使细胞轮廓和内部结构更清晰。7d纵断面既可显示成束的胶原纤维，特别是基膜和细胞之间有成束的胶原纤维堆积。14d上皮细胞外基膜区域性折叠、扭曲或缺损。基板处钌红沉积，呼吸膜增厚。28d基膜厚薄不均匀，完整性破坏。Ⅱ型细胞在三阶段不同病理时期有不同改变。细胞内前胶原增多，粗面内质网扩张，胶原纤维在间质大量堆积，排列纵横交错。结论：钌红染色更清晰显示基底膜和表浅层细胞周围的胶原纤维，更利于观察IPF的纤维分布和厚度。     

红景天对大鼠肺纤维化治疗作用初探

目的探讨红景天对大鼠肺纤维化的治疗作用。方法采用SD大鼠进行博莱霉素（BLM）气管内滴注，建立肺纤维化动物模型。肺组织行苏木精伊红（HE）和胶原纤维染色，光镜下观察其病理变化，原位杂交检测转化生长因子β1受体ⅡmRNA（TβB．ⅡmRNA），图像分析技术对肺部炎症细胞核数、胶原纤维、T阻ⅡmRNA表达的积分光密度（IOD）值定量。结果通过对肺组织病理学观察、比较模型组和对照组炎症细胞核数（P〈0．05）及胶原纤维IOD值（P〈0．05），提示大鼠肺纤维化模型复制成功。红景天治疗组和模型组的肺组织病理学改变、炎症细胞核计数（P〈0．05）及胶原纤维IOD值（P〈0．05）比较，均有明显差异。TβR Ⅱ mRNA呈局灶性表达，TβR ⅡmRNA IOD值统计学上无明显差异（P〉0．05）。结论红景天对大鼠肺纤维化有一定治疗作用。     

复方愈疡散对糖尿病大鼠创面愈合影响的实验研究

[目的]观察复方愈疡散对糖尿病大鼠创面愈合的影响.[方法]选雄性SD大鼠72只,腹腔注射四氧嘧啶,造成高血糖状态,在大鼠背部造成直径约2 cm的创面,深至筋膜.随机分为模型组、阳性组、复方组、空白组,每组18只.模型组以生理盐水灌胃,阳性组以康复新液灌胃,复方组以复方愈疡散灌胃,正常组自由饮水不作任何干预.观察各组大鼠创面愈合时间及给药后第10、16、20天创面的愈合率,并采用电镜观察创面新生组织超微结构.[结果]复方组愈合时间与模型组相比有显著性差异（P〈0.01）,且电镜显示复方组第10、16天胶原纤维较其他组丰富,第20天复方组胶原纤维成束排列有序,成纤维细胞及细胞器未见明显增殖,与正常组相似.[结论]复方愈疡散能明显促进糖尿病大鼠创面愈合.     

复方鳖甲方对肺纤维化大鼠高分辨率CT影响的实验研究

目的　研究复方鳖甲方对盐酸博莱霉素致大鼠肺纤维化的治疗作用。方法　SD雄性大鼠 5 4只 ,其中 4 5只经气管滴注盐酸博莱霉素 ,9只经气管滴注等体积的生理盐水 ,于 80d后平行观察大鼠高分辨率CT(HRCT)征象 ,行HRCT—病理对照研究。结果　肺纤维化大鼠HRCT可见肺实变 ,肺小叶间隔、间质不同程度地增厚及小叶结构变形 ,结节影 ,血管支气管束异常 ,胸膜增厚 ,交界面不规则 ,磨玻璃样密度影等 ,部分可见蜂窝肺。病理切片对照显示 ,肺组织纤维性增生 ,肺间质出现明显纤维化。复方鳖甲方能改善肺纤维化大鼠的HRCT影像 ,降低肺组织纤维性病变。结论　复方鳖甲方可能是通过影响肺结构而对肺纤维化大鼠有一定程度的治疗作用     

博来霉素致肺纤维化大鼠形态学变化的实验研究

目的　观察博来霉素 (Bleomycin ,BLM)致大鼠肺纤维化模型的形态学及胶原含量的变化 ,探讨其发生机制。方法　健康SD大鼠 ,BLM 5mg (kg·bw)复制大鼠肺纤维化模型 ,于 1、3、7、14、2 8d ,观察肺纤维化形成的病理变化和肺匀浆羟脯氨酸 (HYP)的含量变化。结果　光镜所见 :给予BLM后 1- 7d肺部病变以肺泡炎为主 ,14d以后则进入慢性纤维化阶段。电镜所见 :模型组 3- 7dⅠ型细胞受损 ;Ⅱ型细胞增生 ,其内板层小体明显增多 ,线粒体嵴消失甚至出现空泡样变 ;14 - 2 8dⅡ型细胞数目减少 ,纤维组织增生。模型组肺组织匀浆HYP含量于 7d开始明显增加 ,2 8d达高峰。结论　博来霉素诱发大鼠肺纤维化早期以肺泡炎为主 ,7d开始出现肺纤维化 ,2 8d肺纤维化为主要病变     

肺纤方对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠肺系数与肺组织病理的影响

目的 观察肺纤方对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠肺系数和肺组织病理的影响,研究肺纤方对肺间质纤维化的治疗作用.方法 雄性Wistar大鼠经气管插管灌注博莱霉素(1 mg/kg)复制大鼠肺间质纤维化模型,分为假手术组、模型组、泼尼松组和肺纤方组.造模后24 h开始常规每日1次灌胃给药.造模后第14、28、45天取材,计算肺系数,检测肺组织病理,进行肺组织病理学肺泡炎与肺间质纤维化分级;对Masson染色切片进行胶原纤维的面密度和数密度分析.结果 肺纤方组28 d和45 d时肺系数显著低于14 d(P<0.05),而其他各组不同时间点比较没有统计学意义.模型组、泼尼松组、肺纤方组均有肺泡炎和肺间质纤维化改变,45 d时肺纤方组的肺间质纤维化程度较模型组和泼尼松组轻.28 d时,肺纤方组肺泡炎显著低于模型组(P<0.05).45 d时肺纤方组与模型组比较肺间质纤维化程度明显降低(P<0.05).定量分析显示胶原纤维的面密度和数密度在45 d时肺纤方组与模型组和泼尼松组比较均显著降低(P<0.05).结论 肺纤方有一定的减轻博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的作用,并能在较短时间内降低博莱霉素致肺间质纤维化大鼠的肺系数.     

肺纤方对博莱霉素肺纤维化大鼠血小板衍生因子、内皮素、血栓素-2的影响

目的 探讨活血化瘀药物肺纤方抑制肺间质纤维化大鼠肺组织血管生成和重构的作用机理.方法 气管内注入博莱霉素制造大鼠肺纤维化模型,造模后14、28、45 d检测模型组、假手术组、肺纤方组、泼尼松组血清中的血小板衍生因子、内皮素、血栓素.结果 肺纤方能够显著降低血清中的血小板衍生因子、内皮素、血栓素.结论 肺纤方抗肺纤维化的作用机理,可能与抑制肺间质纤维化大鼠肺组织血管生成和重构有关.     

肺纤方颗粒对盐酸平阳霉素致肺间质纤维化大鼠血清转化生长因子β1和血小板衍生生长因子的影响

目的：观察肺纤方颗粒抗大鼠肺间质纤维化的作用，及其对大鼠血清转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF—β1）和血小板衍生生长因子（platelet—derived growth factor，PDGF）的影响。方法：72只雄性Wistar大鼠经气管插管灌注盐酸平阳霉素1mg／kg复制大鼠肺间质纤维化模型，随机分入模型组、泼尼松组和肺纤方组，每组24只；15只雄性Wistar大鼠经气管插管灌注等体积生理盐水作为假手术组。造模后24h开始常规灌胃给药．泼尼松组给予醋酸泼尼松5mg／kg．肺纤方组给予肺纤方颗粒1．25g／kg，模型组和假手术组给予等体积生理盐水．1次／d。分别于第14、28、45天取材，假手术组每批5只，其余各组每批8只。检测其肺组织病理改变及血清中TGF-β1和PDGF的水平。结果：与模型组和泼尼松组比较，在第45天时病理检测显示肺纤方组肺间质纤维化的程度较轻；血清TGF—β1和PDGF检测结果显示，模型组大鼠两种因子水平升高。第45天时升高最明显，并高于假手术组（P〈0．05）。肺纤方组与泼尼松组的TGF-β1变化与模型组相似（P〉0．05），两组间TGF—β1变化比较差异无统计学意义（P〉0.05）。肺纤方组PDGF水平在第14天时与其余各组比较显著升高（P〈0．01）。然后持续下降，至第45天与假手术组接近（P=0．792）；而模型组和泼尼松组PDGF水平皆随时间延长逐渐上升，第45天时均显著高于假手术组（P〈0．01）。结论：肺纤方有一定的减轻盐酸平阳霉素致大鼠肺间质纤维化的作用，其作用机制可能与对血清PDGF水平的调节作用有关。     

TGF-β1/Smad3在博来霉素肺纤维化大鼠中的作用

目的 通过Smad3特异性抑制剂(specific inhibitor of Smad3,SIS3)干预博来霉素肺纤维化大鼠,观察转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3蛋白表达情况,探讨TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中的作用.方法 选取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为4组:生理盐水对照组(NS组),博来霉素组(BLM组),SIS3干预组(SIS3组),二甲基亚砜溶媒组(DMSO组),每组15只.BLM组、SIS3组和DMSO组气管内注射博来霉素溶液(5 mg/kg)建立大鼠肺纤维化模型;NS组以同样方法注入等量生理盐水;SIS3组大鼠腹腔内注射SIS3(2.5 μg/g)干预处理,BLM组注射等量生理盐水,DMSO组注射等量DMSO.各组于造模后第7、14、28天分别处死5只大鼠,行Masson染色观察各组肺组织胶原纤维差异.免疫组化检测各组TGF-β1、Smad3表达情况.结果 与NS组比较,BLM组、DMSO组大鼠肺组织出现明显纤维化,TGF-β1、Smad3表达明显增高;与BLM组、DMSO组相比,SIS3组大鼠肺纤维化程度减轻,TGF-β1、Smad3表达减少.结论 SIS3干预肺纤维化大鼠,能够减轻大鼠肺泡炎,降低肺纤维化程度;TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中可能起到重要作用.     

氯沙坦对大鼠实验性肺纤维化的治疗作用及其机制

目的:研究血管紧张素Ⅱ的1型受体拮抗剂氯沙坦对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的治疗作用及其可能机制。方法:45只大鼠随机分为3组,每组15只。①氯沙坦组,经气管插管灌注博莱霉素诱导肺纤维化,随后每日用氯沙坦10 mg/kg灌胃进行干预;②模型组,气管内灌注用博莱霉素,灌胃用生理盐水;③对照组,气管内灌注和灌胃均用生理盐水。各组动物于气管内灌注后第7,14,28天分别处死5只。取肺组织用Masson胶原染色法及检测羟脯氨酸来评价治疗效果。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子β(TGF-β)蛋白表达水平。结果:模型组肺纤维化程度和肺组织羟脯氨酸含量在各时间点均高于对照组,氯沙坦组肺纤维化程度在各时间点均低于同期模型组,其肺组织羟脯氨酸含量在第14和28天均低于同期模型组,差异有统计学意义(P均<0.05);模型组肺组织TGF-β蛋白水平在各时间点均高于对照组,该组HGF蛋白水平在第7天高于对照组,而第14和28天低于对照组,氯沙坦组在第14和28天肺组织TGF-β蛋白水平均低于同期模型组,而HGF蛋白水平均高于同期模型组(P均<0.05)。结论:氯沙坦对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有治疗作用,可能与抑制肺组织TGF-β表达和促进HGF表达有关。     

喘消雾化液对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化模型SOD和MDA水平的影响

目的:观察喘消雾化液(CXW)对博莱霉素(BLM)诱导大鼠肺纤维化模型的影响,为肺纤维化的防治提供实验依据。方法:90只雄性Wistar大鼠随机分为生理盐水(NS)组、模型组(BLM组)、CXW组。BLM、CXW组经腹腔注入15mg/kgBLM×10d制作肺纤维化动物模型,分别于第1、14、28天每组各处死10只,留取血液,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学计数及其分类;评价各组各时间点肺组织病理形态学变化,定量肺泡间隔宽度;检测肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)含量;检测血清和肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果:(1)与NS组比较,BLM组在第1、14、28天时的肺泡壁厚度、胸膜厚度和肺系数差异均有统计学意义(P均<0.05),CXW组肺泡壁厚度、胸膜厚度明显增加,与BLM组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。(2)与同期NS组比较,BLM组第14、28天的HYP含量,第1、14天的细胞总数及炎性细胞比例和肺组织匀浆中MDA含量均明显升高(P均<0.05),第1天肺组织匀浆中SOD活力明显降低(P<0.05)。同期CXW组改变不明显,与BLM组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:CXW可能通过提高大鼠肺纤维化模型中SOD活力,降低MDA含量,并在一定程度上阻止或延缓了胶原的沉积,起到了保护肺组织的作用。     

布地奈德干预肺纤维化JAK-1/STAT1途径的研究

目的观察吸入布地奈德(BUD)对肺纤维化大鼠肺组织细胞黏附因子-1(ICAM-1)、Janus激酶-1(JAK-1)、信号转导子与转录激活子1(STAT1)表达的影响,并探讨其作用机制。方法实验分为博莱霉素(BLM)组、生理盐水(NS)组和BUD组,每组15只。BLM组、BUD组气管内灌注BLM,NS组气管内灌注NS,继之第0~6天每天雾化1次,BUD组雾化吸入BUD,BLM组和NS组雾化吸入NS,第7、14、28天分别处死3组大鼠各5只。用HE、Masson染色观察肺泡炎症和纤维化改变;免疫组化法测定肺组织中ICAM-1、JAK-1及STAT1的表达。结果第7、14天,BLM组肺泡炎程度重于BUD组(P<0.05);第7、14、28天,BLM组肺纤维化程度重于BUD组(P<0.05)。第7、14天,BUD组肺组织中ICAM-1、JAK-1、STAT1表达明显低于BLM组(P<0.05)。结论 JAK-1/STAT1信号途径参与了肺纤维化的发生发展,而吸入型BUD可分别通过抑制肺组织ICAM-1、JAK-1、STAT1的表达加强对肺组织的保护作用。     

肺炎合剂对肺纤维化大鼠组织形态和胶原纤维的影响

目的观察肺炎合剂对肺纤维化大鼠病理学组织形态、胶原纤维的影响。方法将动物分成假手术组、模型组、氢化可地松组和肺炎合剂低、中、高剂量组6组,采用博莱霉素A5造模,于第7天和第28天行常规病理形态观察和苦味酸天狼猩红-偏光法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维变化。结果肺炎合剂能抑制博莱霉素A5造成的肺泡炎、肺纤维化的病变程度,抑制Ⅰ型胶原的增加,对抗Ⅲ/Ⅰ型胶原比例下降。结论肺炎合剂通过抑制肺泡炎的发展、抑制胶原纤维的沉积,特别是维持胶原沉积与降解动态平衡而抑制纤维化的发展。     

低分子肝素联合乌司他丁治疗急性百草枯中毒大鼠肺纤维化的实验研究

目的 探讨低分子肝素联合乌司他丁减轻急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺纤维化的可能作用机制.方法 55只雄性SD大鼠,随机分成正常对照组(A组)、模型组(B组)、治疗组(C组);B、C组禁食lh后经口一次灌胃百草枯75 mg/kg制作PQ大鼠肺纤维化模型,A组经口一次性注入等量生理盐水;C组造模后皮下注射低分子肝素钠1 000U/d,同时腹腔注射乌司他丁10万U,共14 d,A、B组给予0.2 ml/d生理盐水皮下注射.分别于造模后1、3、7、14、28 d测定血清转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量;并取肺组织做HE染色.结果 与A组比较,B组血清TGF-β1第3天始明显升高(P＜0.01),血清MMP-9于第7天逐渐上升(P＜0.05),第28天明显升高(P＜0.01);与B组各相同时间点比较,C组MMP-9水平下降,至第7天差异有统计学意义(P＜0.05),第28天出现明显下降(P＜0.01);而血清TGF-β1在第14天开始出现明显下降(P＜0.01).B组于造模后早期即出现肺泡壁增厚,炎症细胞浸润明显,毛细血管充血、水肿等,14 d肉眼可见肺表面溃疡形成,镜下可见肺泡间隔成纤维母细胞、肌纤维细胞增生,肺泡塌陷;C组于14 d时镜下可见有肺泡壁毛细血管充血,炎性细胞浸润较B组轻,肺纤维化程度也有所减轻.结论 低分子肝素联合乌司他丁可减少MMP-9的合成,从而减轻大鼠纤维化程度,其途径可能通过减少TGF-β1的合成.