转录因子核因子E2相关因子2对长期中波紫外线照射诱导皮肤肿瘤的影响☆○

背景:紫外线照射是引起皮肤肿瘤的重要环境因素,与其诱导氧化应激反应有关.核因子E2相关因子2是调节细胞内抗氧化应激反应的重要转录因子,胞浆蛋白Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1为其特异性受体,目前核因子E2相关因子2-胞浆蛋白Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1抗氧化系统与皮肤紫外线损伤的关系受到密切关注. 目的:观察中波紫外线照射所致皮肤DNA氧化损伤及光致癌作用,研究转录因子核因子E2相关因子2对长期中波紫外线照射诱导小鼠皮肤肿瘤形成的影响. 方法:取8周龄雌性核因子E2相关因子2基因敲除(Nrf2-/-) BALB/c小鼠和野生型(Nrf2+/+)BALB/c小鼠,以100 mJ/cm2剂量的中波紫外线照射小鼠背部4 h.另取Nrf2-/-小鼠和Nrf2+/+小鼠以300 mJ/cm2剂量的中波紫外线对小鼠背部进行长期照射,每周3次,连续36周. 结果与结论:Nrf2-/-小鼠表皮内8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷阳性细胞数量显著高于Nrf2+/+小鼠(P <0.05),Nrf2-/-和Nrf2+/+小鼠中波紫外线长期照射诱导皮肤肿瘤数目和发生率接近(P >0.05),且皮肤肿瘤组织病理学改变相似,提示核因子E2相关因子2对急性中波紫外线照射所致的DNA损伤具有抗氧化防护作用,在长期中波紫外线照射致癌过程中,转录因子核因子E2相关因子2的活性可能受到多种因素的调节,其具体机制有待于进一步研究.     

Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1-核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件抗氧化应激通路在多发性硬化中作用的研究进展

多发性硬化(MS)是一种慢性炎症性疾病,主要是由T淋巴细胞引起,可使中枢神经系统产生氧化应激反应,导致脱髓鞘等病理改变。Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1 (Keap1)-核因子E2相关因子2 (Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)抗氧化应激通路是体内最重要的内源性抗氧化应激通路,激活该通路可启动下游解毒酶、抗氧化蛋白,参与清除氧自由基,维持细胞内氧化还原系统平衡,从而对神经退行性疾病起保护作用。通过药物或各种康复治疗手段激活该Keap1-Nrf2/ARE通路,减轻MS疾病进展的作用及未来MS治疗靶点是目前研究热点。     

Nrf2信号通路在肾脏疾病的研究进展

<正>NF-E2相关因子2(Nrf2)是一种能够激活内源性抗氧化应答通路的核心转录因子,在受到活性氧(ROS)或亲电试剂的刺激后,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keapl)与Nrf2解耦联,Nrf2磷酸化后转移入核,与巨噬细胞活化因子(Maf)蛋白结合成杂化二聚体后识别并结合抗氧化反应元件(ARE),从而诱导下游保护性Ⅱ相解毒酶和抗氧化酶的表达,提高细胞抗氧化应激能力,达到细胞保     

核转录因子Nrf2最新研究进展

背景:核转录因子Nrf2属于CNC亮氨酸拉链转录激活因子家族,与抗氧化反应、抗炎反应及细胞保护作用等有关。目的:总结核转录因子Nrf2的功能,与肿瘤的转归和抗肿瘤药物性,以及与全身各个系统其他疾病的相关性。方法:应用计算机检索1990-01/2011-07PubMed数据库,检索词为"Nrf2,Keap1"。选择核转录因子Nrf2的基础研究与临床应用方面的文献,排除陈旧及重复试验文章,最终纳入50篇符合标准的文献。结果与结论:Nrf2不仅与抗氧化应激有关,而且与肿瘤的发生发展及转移、抗肿瘤药物性相关,同时发现除与氧化应激性疾病有关,还与全身各个系统其他疾病的发生及中毒有关。Nrf2诱导物有可能成为有潜力的基因靶向治疗药物。     

核因子E2相关因子在氧化应激中的作用

核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid-derived factor 2-related factor,Nrf2或NFE2L2)在人类中是一种由NFE2L2基因编码的转录因子[1]。Nrf2诱导不同基因的表达编码多种抗氧化酶,在氧化应激的调控中发挥重要的生理作用。目前以Nrf2为新靶点作为干预氧化应激生理过程的研究引起了广大研究者的兴趣。本文就Nrf2结构、信号通路、调控机制及其功能做一综述。     

Keap1-Nrf2-ARE信号通路在多器官疾病中的研究进展

<正>Nrf2作为细胞抗氧化应激反应的核心转录因子,能够激活内源性抗氧化应答。在生理状态下,Nrf2分子与胞浆中的Keap1蛋白分子结合而处于非活性状态,通过泛素化-蛋白酶体途径进行降解,无法进入细胞核发挥转录活性。当机体受到亲电试剂刺激或处于氧化应激状态时,Nrf2与Keap1解偶联,Nrf2磷酸化后转移入核并与抗氧化反应原件(antioxidant response element,ARE)上的相应位     

核转录因子-κB和核转录因子E2相关因子2的激活机制及两者间的交互作用

炎症及氧化应激是常见的病理过程,可导致DNA链的破坏、蛋白质或酶失活,干扰体内多种生理过程,进而导致肿瘤、急性肺损伤（ALI）［1］、慢性阻塞性肺疾病（COPD）,脓毒症［2-3］等疾病的产生。人体内存在多种抵抗有害因素的信号通路,其中转录因子是细胞内基因表达/调控必不可少的,最重要的因子包括核转录因子-κB（NF-κB）和核转录因子E2相关因子2（Nrf2）。本篇综述中我们将简要介绍NF-κB和Nrf2激活过程以及两者之间的交互作用。     

Nrf2-Keap1信号通路与糖尿病肾病

核因子E2相关因子2(Nrf2)-Kelch like ECH-associatedprotein1(Keap1)信号通路是机体抗氧化应激反应的重要应答机制之一。Nrf2可激活多种与氧化还原和解毒相关的基因来保护细胞,其活性受到锚定蛋白Keap1的调控。Nrf2在健康细胞中能够被Keap1捕获,通过泛素-蛋白酶体途径降解。当机体在氧化应激状态下,Nrf2与Keap1解聚后在细胞核中积累,与下游元件结合,可起到细胞抵抗氧化应激作用。Nrf2-Keap1信号通路是治疗糖尿病肾病中的重要靶点之一,且Nrf2/Keap1系统对糖尿病肾病有保护作用。     

Nrf2及其信号通路在脓毒症相关脏器损伤中的研究进展

脓毒症(sepsis)是重症监护病房(ICU)患者死亡的常见病因,治疗难度大,且预后较差,给全球医疗卫生系统造成巨大经济负担。然而针对脓毒症的治疗仍缺乏有效的防治手段。核转录因子-E2相关因子2(Nrf2)是抗氧化应激体系中的关键转录因子,它通过调节抗氧化反应原(ARE)介导的抗氧化酶和Ⅱ相解毒酶等的表达,在脓毒症治疗中发挥关键作用。本文总结了Nrf2相关信号通路及其在脓毒症器官损伤中的最新研究进展,以期为临床治疗脓毒症提供新的治疗策略。     

核因子E2相关因子2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1在结直肠癌中表达及临床意义

目的探讨核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)在结直肠癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测Nrf2和Keap1在60例结直肠癌患者的癌组织(结直肠癌组)及癌旁组织(对照组)中表达水平,分析Nrf2和Keap1与结直肠癌临床病理特征的关系及两者表达的相关性。结果结直肠癌组组织中Nrf2、Keap1阳性率(76.67%、70.00%)均高于对照组(31.67%、26.67%)(P0.05);不同性别、年龄、肿瘤部位、分化程度结直肠癌患者组织中Nrf2、Keap1阳性率比较差异均无统计学意义(P0.05),临床分期Ⅰ～Ⅱ期结直肠癌患者组织中Nrf2、Keap1阳性率(64.71%、58.82%)均低于Ⅲ～Ⅳ期患者(92.31%、84.62%)(P0.05);Spearman相关性分析显示,结直肠癌组织中Nrf2和Keap1表达无相关性(r=0.155,P=0.238)。结论 Nrf2和Keap1异常表达可能参与结直肠癌的发生、发展。     

同基因造血干细胞移植免疫重建诱导小鼠皮肤移植耐受

背景：器官移植耐受的最佳效果是能够诱导对移植抗原的特异性免疫耐受。目的：探讨小鼠异基因皮肤移植后,通过受体同基因造血干细胞移植重建免疫系统诱导移植皮肤免疫耐受的可行性。方法：取BALB/c小鼠骨髓。以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体,进行异基因皮肤移植;32只受体鼠随机均分为4组：移植对照组、环孢素A组、照射组和骨髓移植组。结果与结论：照射组小鼠10d内全部死亡,外周血白细胞数呈持续性降低;而骨髓移植组小鼠长期存活,白细胞数全身照射后6d降到最低,之后持续性增高,照射后21d与环孢素A组比较差异无显著性意义（P〉0.05）,移植皮肤存活时间显著长于其他各组（P〈0.01）,其淋巴细胞浸润及组织结构破坏明显减少,小鼠脾细胞对供体小鼠脾细胞增殖反应显著降低。说明同基因骨髓细胞移植重建免疫系统可显著延长小鼠移植皮肤存活时间,可诱导供者特异性免疫耐受。     

长波紫外线照射皮肤成纤维细胞表皮生长因子受体的表达术

背景：长波紫外线与人体皮肤老化关系密切,主要作用于表皮和真皮全层。目的：观察长波紫外线照射对体外培养的皮肤成纤维细胞的表皮生长因子受体表达的影响。方法：体外培养人成纤维细胞。将细胞分为对照组、长波紫外线照射5,10,20J／cm^2。组。照射24h后,分别用实时PCR和Westernblot检测表皮生长因子受体mRNA和蛋白的表达情况。结果与结论：体外培养的皮肤成纤维细胞随着长波紫外线照射剂量的增加,表皮生长因子受体的mRNA与蛋白水平均显著增加,提示长波紫外线可以诱导成纤维细胞星的表皮生长因子的表达。     

BALB/c裸鼠与SCID小鼠皮下种植人肝癌模型的比较

背景：建立良好的肝癌模型是进一步研究肝癌诊断、治疗的基础,目前各种模型较多,但是进行评价的很少。目的：比较两种免疫缺陷小鼠种植性肝癌的成瘤情况。方法：免疫磁珠法从Huh7肝癌细胞中分选出CD133＋肝癌干细胞,取1×106个细胞分别种植于BALB/c祼鼠及SCID小鼠颈背部皮下,观察两组20d的成瘤及死亡情况,游标卡尺分别测量种植性肝癌的直径,以大于0.5cm为成瘤成功。结果与结论：24只BALB/c裸鼠中18只成瘤成功;24只SCID小鼠中16只成瘤成功。行χ2检验,两组成瘤效果差异无显著性意义（P〉0.05）,两组死亡情况比较,差异有显著性意义（P〈0.05）。结果提示BALB/c组死亡率低,且价格低廉,更适合建立肝癌皮下种植模型。     

Cytoprotective effects of a tripeptide from Chinese Baijiu against AAPH-induced oxidative stress in HepG2 cells via Nrf2 signaling

Antioxidant peptides have been widely reported, whereas the intracellular antioxidant activity of a tripeptide (Pro-His-Pro, PHP), which was newly isolated and identified from Chinese Baijiu in our previous study, are still poorly understood. This study investigated the protective effects of PHP on 2,2′-azobis (2-methyl-propanimidamidine) dihydrochloride (AAPH)-induced oxidative stress in HepG2 cells and the involved molecular mechanisms. Pretreatment with PHP suppressed the generations of reactive oxygen species (ROS), malondialdehyde (MDA) and oxidized glutathione (GSSG), prevented a decrease in reduced glutathione (GSH), and up-regulated the activities of cellular antioxidant enzymes. Moreover, PHP treatment stimulated the mRNA and protein expression levels of antioxidant enzymes and nuclear factor E2 related factor 2 (Nrf2). Meanwhile, PHP markedly reduced the level of Kelch-like ECH-associated protein 1 (Keap1), suggesting that PHP effectively activated Nrf2/antioxidant response element (ARE)-mediated activity. These findings provide the first molecular basis for the health-promoting effects of PHP to prevent AAPH-induced oxidative stress.

PHP up-regulated gene and protein expression levels of intracellular antioxidant enzymes by activation of the Nrf2/ARE pathway in HepG2 cells.     

过氧化氢对金属硫蛋白Ⅰ／Ⅱ敲除小鼠脾细胞的氧化应激

背景：脑缺血再灌注早期,由于脾脏中有大量炎症因子浸润引发氧化应激损伤,导致脑缺血再灌注后脾细胞出现大量凋亡。目的：观察外源性过氧化氢对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除小鼠脾细胞活力的影响及N-乙酰-L-半胱氨酸对过氧化氢诱导的脾细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：制备金属硫蛋白敲除小鼠脾细胞悬液,分别用不同浓度（0．1,0．2,0．5,1,2mmol／L）过氧化氢处理2h后,MTT比色法检测细胞活力。根据MTT结果选择不同浓度过氧化氢（0．5,1mmol／L）诱导脾细胞凋亡,实验分为6组：对照组、N-乙酰-L-半胱氨酸组、0．5mmol／L过氧化氢组、1mmol／L过氧化氢组、N-乙酰-L-半胱氨酸＋O.5mmoI／L过氧化氢组、N-乙酰-L-半胱氨酸＋1mmol／L过氧化氢组,2h后MTT比色法检测细胞活力,酶标仪法检测乳酸脱氢酶活力及紫外分光光度仪检测线粒体通透性转换孔的开放情况。结果与结论：随过氧化氢浓度增加脾细胞活力呈明显下降趋势（P〈0．01）,且0．2,0．5,1,2mmol／L过氧化氢组脾细胞活力下降幅度最大。与对照组相比,N-乙酰-L-半胱氨酸组脾细胞活力明显提高（P〈O．01）,且乳酸脱氢酶活力降低（P〈0．01）,线粒体通透性转换孔开放减少（P〈0．01）;分别于0．5,1mmol／L过氧化氢组相比,N-乙酰-L-半胱氨酸＋O．5mmol／L过氧化氢组、N-乙酰-L-半胱氨酸＋1mmol／L过氧化氢组脾细胞活力也明显提高（P〈0．01）,乳酸脱氢酶活力降低（P〈0．01）,线粒体通透性转换孔开放减少（P〈0．01）。结果表明,金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除小鼠随着过氧化氢浓度的升高,脾细胞活力逐渐下降,呈浓度依赖性,尤其对0．2,0．5,1,2mmol／L过氧化氢刺激最为敏感。N-乙酰-L-半胱氨酸使乳酸脱氢酶释放和线粒体通透性转换孔的开放减少,脾细胞活力增强,以此减轻过氧化氢诱导的金属硫蛋白Ⅰ/Ⅱ敲除鼠脾细胞的氧化应激损伤。     

Nrf2信号通路在各系统肿瘤中的研究进展

活性氧自由基(ROS)可以损伤细胞DNA和蛋白质,具有致癌作用。Nrf2可以激活人体内多种Ⅱ相解毒酶的表达,其活性主要由Keap1负性调节,当机体受到外界药物、射线等刺激时,Nrf2可激活ARE区域,介导氧化应激反应,起到保护细胞的作用,目前已有部分研究表明某些植物与药物通过Nrf2信号通路发挥抗癌作用。近期,大量的细胞及动物实验表明Nrf2同样具有致癌作用,肿瘤细胞通过Nrf2或Keap1突变与基因杂合性丢失,使Nrf2和Keap1不能正常结合,导致Nrf2在胞内积累,激活下游基因,增加肿瘤细胞内的解毒酶,从而增强细胞对放化疗的抵抗性。同时,研究发现Nrf2在人体的大部分消化系统、呼吸系统、生殖系统及神经系统肿瘤中均呈高表达,并与多种致癌基因如Ki67、K-Ras、B-Raf、Myc、BRCA1等基因表达相关,阻断Nrf2信号通路的抗癌药物研究已表明其能够减少肿瘤复发率并增加肿瘤对放化疗药物的敏感性。Nrf2参与着各个系统众多肿瘤的发生与发展,将成为未来肿瘤靶向治疗的重点目标。