缺氧诱导因子-1α在去势前后大鼠腹叶前列腺中表达的变化

目的探讨与缺氧相关的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是否参与去势后前列腺萎缩过程.方法24只SD大鼠分为3组,其中A组(n=8)为假手术对照组,B组(n=8)为去势组,C组(n=8)为雄激素替代组(去势后肌注十一酸睾酮50mg/kg);术后3天处死,通过半定量RT-PCR检测与HIF-1α在去势前后前列腺表达变化.结果去势后大鼠前列腺的体积萎缩变小;雄激素替代组出现前列腺增生变大;对照组正常的大鼠前列腺有HIF-1 α mRNA低水平表达,去势组HIF-1α mRNA表达量增加,雄激素替代组HIF-1αmRNA表达量减少,与正常对照组比较,去势组的HIF-1α mRNA的表达量显著增加(P＜0.05),雄激素替代组的HIF-1αmRNA的表达量显著减少(P＜0.01).结论前列腺组织的缺氧参与去势后大鼠前列腺的早期萎缩过程.     

选择性雌激素受体调节剂-雷诺昔酚对去势后大鼠骨组织中TNF-α表达的影响

目的 了解选择性雌激素受体调节剂（SERM）对去卵巢大鼠骨组织形态计量学指标、骨密度及松质骨中TNF-α表达的影响.方法 将8月龄未经产雌性二级SD大鼠30只,随机分为假手术（SHAM）组、去势（OVX）组、去势＋雷诺昔酚（OVX＋RAL）组.OVX＋RAL组大鼠术后第2天开始给予雷诺昔酚灌胃.术后20 wk处死各组大鼠,对各组大鼠不同部位骨组织形态计量学指标、骨密度（BMD）进行检测,并利用免疫组织化学染色及图像分析方法对各组大鼠松质骨切片TNF-α表达图像进行分析,观察RAL对OVX大鼠腰椎松质骨中TNF-α表达的影响.结果 （1）与SHAM组相比,OVX组大鼠骨小梁体积、骨小梁平均厚度、皮质骨厚度等骨形态计量学指标明显下降（P＜0.01）,OVX＋RAL组大鼠骨形态计量学指标明显大于OVX组（P＜0.01）,接近SHAM组水平（P＞0.05）;（2）与SHAM组相比,OVX组股骨近端、股骨干、腰椎BMD明显降低（P＜0.01）;RAL治疗组各部位BMD高于OVX组（P＜0.01或P＜0.05）,接近SHAM组水平（P＞0.05）;（3）去势组与SHAM组相比较,TNF-α表达的灰度值明显降低（P＜0.01）;RAL组较OVX组灰度值明显升高（P＜0.01）,经RAL治疗后的去卵巢大鼠骨小梁周围及髓腔内TNF-α阳性表达明显减弱（P＜0.01）,接近SHAM组水平（P＞0.05）;结论 RAL可通过抑制破骨性因子TNF-α表达来抑制因雌激素缺乏引起的骨密度降低及骨形态结构退变.     

二丁二仙汤预防去势雌性大鼠泌尿道感染的作用与机制研究

目的：通过与雌激素比较,观察中药二丁二仙汤是否具有调节血清雌激素水平、膀胱雌激素受体表达,下调TNF-α蛋白、IKBα磷酸化表达,从而探讨二丁二仙汤预防泌尿道感染的作用机制。方法：取40只雌性SD大鼠随机分组：假手术组（Sham）8只,去势组（OVX）8只,模型组（Model）8只,雌激素组（Estrogen）8只,二丁二仙汤组（EDEX）8只,共5组,行双侧卵巢次切术,术后予药物灌胃8周,8周后予隔天膀胱内灌注大肠埃希氏菌2次。检测各组血清雌二醇水平,光镜下观察膀胱组织HE染色,运用Real Time-PCR方法检测膀胱雌激素受体α和雌激素受体β mRNA表达变化,运用Western Blot方法检测膀胱TNF-α、IΚBα、P- IΚBα蛋白表达变化。结果：光镜下观察膀胱HE染色情况,假手术组及去势组无炎症表现,模型组重度急性炎症表现,可见大量中性粒细胞浸润,两组药物组均为轻度炎症表现。二丁二仙汤组、雌激素组血清雌二醇水平较去势组明显上升（P＜0.05）。雌激素组膀胱雌激素受体βmRNA较模型组上升（P＜0.05）,二丁二仙汤组雌激素受体β mRNA较模型组有上升趋势。二丁二仙汤组、雌激素组膀胱TNF-α蛋白和磷酸化IΚBα蛋白表达,较模型组明显下降（P＜0.05）。结论：与雌激素比较,中药二丁二仙汤也能预防泌尿道感染发生,其机制可能为上调血清雌激素,局部激活膀胱雌激素受体β,调节NF-κB通路,抑制IΚBα磷酸化,下调TNF-α产生。     

绝经后骨质疏松症患者骨组织中SRC-3和PGC-1α的表达及意义

目的 探讨绝经后骨质疏松症患者骨组织中类固醇受体辅助激活因子3（steroid receptor coactivator-3, SRC-3)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ协同刺激因子-1α（peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α, PGC-1α）的表达及意义。方法 2012年6月~2013年9月,选择于广州军区广州总医院关节外科住院的行全髋关节置换患者20例,术前双能X线（DXA）骨密度仪测量患者腰椎1~4（L1-4）骨密度,根据WHO颁布的诊断标准,分为试验组（腰椎BMD T评分＜–2.5,10例）和对照组（T评分＞–1.0,10例）,术中取一侧开路器切除的粗隆部位松质骨。荧光实时定量RT-PCR和Western blotting分别检测骨组织中SRC-3和PGC-1α等mRNA和蛋白的表达。结果 与对照组相比,试验组骨组织中SRC-3, PGC-1α, CBP/P300, P/CAF mRNA表达水平均下降（P值分别为＜0.001, 0.036, 0.003, 0.027）,OPN mRNA表达水平升高（P=0.004）。Osteocalin mRNA表达在试验组和对照组中无统计学差异（P＞0.05）。试验组SRC-3和PGC-1α蛋白相对表达量较对照组明显下调,分别下调了（53.23±0.55）% （P=0.037）和（72.17±0.64）% （P=0.003）。结论 SRC-3和PGC-1α可能参与绝经后骨质疏松症发病的病理过程。     

补骨脂素对去势雌鼠E2、ERβ、TNF-α、IL-17的影响

目的观察补骨脂素对去势雌鼠E_2、ER_β、TNF-α、IL-17的影响,探讨补骨脂素防治绝经后骨质疏松的机理。方法选取3月龄雌性SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇对照组、壮骨止痛胶囊对照组、补骨脂素高剂量组、补骨脂素低剂量组,每组12只。除假手术组外,其它大鼠造成双侧去卵巢骨质疏松症病理模型,术后5d拆线后开始给药,连续13周。最后一次给药后次日取血标本采用ELISA检测血清中雌激素(E_2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)的含量。提取左股骨组织mRNA样本进行RT-PCR反应检测骨组织TNF-α、ER_β、IL-17基因的表达。取右股骨脱钙切片免疫组化检测ER_β表达。结果模型组去势雌鼠血清E_2水平显著低于假手术组(P0.01)。壮骨止痛胶囊显著升高血清E_2水平(P0.01),补骨脂素高剂量组血清E_2水平显著高于模型组(P0.01),补骨脂素低剂量组血清E_2水平与模型组相比无统计学差异(P0.05)。模型组血清TNF-α、IL-17水平及股骨TNF-α、IL-17mRNA表达显著高于假手术组(P0.01),股骨ER_β显著低于假手术组(P0.05)。戊酸雌二醇组血清TNF-α、IL-17水平及股骨TNF-α、IL-17mRNA表达显著低于模型组,股骨ER_β显著高于模型组(P0.05)。壮骨止痛胶囊组血清TNF-α、IL-17水平显著低于模型组(P0.05),股骨TNF-α、IL-17mRNA表达非常显著低于模型组(P0.01),而股骨ER_β显著高于模型组(P0.05)。补骨脂素高剂量组血清TNF-α水平及股骨TNF-αmRNA表达显著低于模型组(P0.05),而血清IL-17水平及股骨IL-17mRNA表达非常显著低于模型组(P0.01),股骨ER_β显著高于模型组(P0.05)。补骨脂素低剂量组血清TNF-α水平显著低于模型组(P0.05),但其股骨TNF-αmRNA表达与模型组相比无统计学差异,而血清IL-17水平及股骨IL-17mRNA表达显著低于模型组(P0.05),股骨ER_β与模型组相比没有统计学差异。结论补骨脂素可通过提高去势雌鼠血清E_2水平和股骨ER_β水平,降低去势雌鼠骨组织TNF-α、IL-17基因表达和血清TNF-α、IL-17水平发挥抗绝经后骨质疏松症作用。     

干预肾素- 血管紧张素- 醛固酮系统不同环节对肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子-α 的影响

目的 探究干预RAAS系统的不同环节对大鼠肝组织中肿瘤坏死因子-α的影响。方法 选取50 只SD大鼠，随机分为对照组、模型组以及3个治疗组（卡托普利组、氯沙坦组、螺内酯组），每组10只。 对照组腹壁皮下注射橄榄油，其余组别的大鼠给予40% CCL4腹壁皮下注射；第2天开始，3个治疗组分别 给予卡托普利60 mg/kg、氯沙坦10 mg/kg、螺内酯100 mg/kg治疗，模型组与对照组给予等量的生理盐水， 1次/d，第8周处死，取材后，通过Real Time-PCR检测大鼠肝组织肿瘤坏死因子-αmRNA表达；病理染 色，观察大鼠肝组织的病理学改变。结果 3个治疗组的肝纤维面积比较，差异有统计学意义（P ＜0.05）； 3个治疗组大鼠的肝纤维面积与模型组比较，差异有统计学意义（P ＜0.05）；对照组、3个治疗组的大鼠 肝纤维面积均低于模型组，差异有统计学意义（P ＜0.05）；3个治疗组肝组织中TNF-α mRNA的表达比 较，差异无统计学意义（P ＞0.05）；3个治疗组肝脏组织中TNF-α mRNA的表达低于模型组，差异有统 计学意义（P ＜0.05）；模型组、3个治疗组肝脏组织TNF-α mRNA的表达高于对照组，差异有统计学意 义（P ＜0.05）。结论 干预RAAS系统不同环节均可抑制肝纤维化形成，可能与抑制肿瘤坏死因子-α的表 达有关。     

缺氧诱导因子-1α在肾间质纤维化中的表达及意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）致肾间质纤维化的作用。方法：60只雄性SD大鼠随机分为假手术组（SOR）和单侧输尿管梗阻（UUO）模型组。术后第3天,第7天,第14天各处死大鼠10只,肾组织行HE染色并观察病理变化。采用免疫组织化学和荧光定量逆转录聚合酶链反应（Q-RT-PCR）法检测肾脏组织中HIF-1α、CTGF、TGF-β1蛋白和mRNA表达。结果：与假手术组相比,模型组大鼠肾脏病理损害进行性加重;HIF-1α、CTGF、TGF-β1蛋白表达随梗阻时间的延长逐渐增加;与假手术组相比HIF-lα、CTGF、TGF-β1mRNA表达明显增加（P〈0.05）;相关分析显示,模型组第3天HIF-lαmRNA表达与CTGFmRNA,TGF-β1mRNA表达分别呈正相关（r=0.748,0.659,P〈0.05）,模型组第7天组HIF-1αmRNA分别和CTGFmRNA、TGF-β1mRNA呈正相关（分别为r=0.663,0.645,P〈0.05）,模型组第14天组HIF-1αmRNA分别和CTGFmRNA、TGF-β1mRNA呈正相关（分别为r=0.515,0.752,P〈0.05）。结论：HIF-1α可能通过调节CTGF、TGF-β1的表达参与了肾间质纤维化发生和发展的过程。     

抗氧化剂对内毒素性休克大鼠α1-肾上腺素能受体mRNA表达的影响

目的评价抗氧化剂对内毒素性休克大鼠α1-肾上腺素能受体(α1-AR)mRNA表达的影响.方法雄性SD大鼠40只,随机分成5组(n=8)空白对照组(C组);内毒素休克组(LPS组,静脉注射LPS 15 mg·kg-1);异丙酚组(P组,注射LPS后1 h,静脉注射异丙酚10 mg·kg-1,继以10 mg·kg-1·h-1静脉持续泵注4 h);尿酸组(UA组,注射LPS后1 h,腹腔注射UA 200 mg·kg-1);N-乙酰5-甲氧基色胺组(MLT组,注射LPS后1 h,腹腔注射MLT 10 mg·kg-1).各组大鼠于注射LPS后6h处死,迅速取胸主动脉、下腔静脉、心脏、肝脏、肺脏、肾脏组织.提取各组织的总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组织α1A-AR、α1B-AR和α1D-AR mRNA的表达.结果与C组比较,LPS组α1-AR三种亚型mRNA在胸主动脉、肝脏、肺脏、肾脏组织表达均下降(P＜0.05),α1A-AR、α1B-AR mRNA在下腔静脉、心脏组织表达均下降(P＜0.05).与LPS组比较,P组α1A-AR mRNA在肺脏和肾脏组织表达增加(P＜0.05),α1B-AR、α1D-AR mRNA在胸主动脉、肝脏、肺脏、肾脏组织表达增加(P＜0.05),α1B-AR mRNA在下腔静脉和心脏组织表达增加(P＜0.05);UA组α1A-AR mRNA在肾脏组织表达增加(P＜0.05),α1B-AR mRNA在肺脏以外各组织表达均增加(P＜0.05),α1D-AR mRNA在胸主动脉、肝脏、肺脏、肾脏组织表达增加(P＜0.05);但MLT组α1-AR三种亚型mRNA表达水平变化无统计学意义(P＞0.05).结论内毒素性休克大鼠α1-AR的基因表达普遍下调,抗氧化剂的抗休克作用机制与α1-AR基因表达上调有关.     

急性重症胆管炎大鼠肝组织高迁移率族蛋白-1对肿瘤坏死因子-表达的影响

目的 探讨急性重症胆管炎(ACST)大鼠肝组织高迁移率族蛋白1(HMG-1)改变及其对肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的调节作用.方法 通过制作ACST大鼠模型,正丁酸钠干预,不同时相点检测肝组织HMG-1及TNF-α表达,同时观察肝功能及结构改变.结果 AGST组12～24 h肝组织HMG-1和TNF-a mRNA表达均显著增强(P＜0.05或0.01).正丁酸钠处理可显著抑制ACST后12～24 h肝组织HMG-1 mRNA表达(P＜0.01),并明显下调肝组织TNF-α mRNA表达及TNF-α水平(P＜0.05或0.01),同时血清谷丙转氨酶(ALT)水平显著降低(P＜0.05或0.01),肝脏的病理形态得到明显改善.结论 ACST大鼠肝组织HMG-1表达可促进局部TNF-α的合成与释放,从而诱导ACST大鼠急性肝功能损害.     

蜕皮甾酮对急性肺损伤大鼠肺组织中Toll样受体4及肺表面活性蛋白A表达的影响

目的：观察蜕皮甾酮（EDS）对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织中TNF-α、肺表面活性蛋白A（SP-A）、Toll样受体4（TLR4）表达的影响,并探讨其机制.方法：将40只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、LPS组、EDS低（20 mg/kg）、中（30 mg/kg）、高（40 mg/kg）剂量治疗组（n=8）.腹腔注射LPS（10 mg/kg）诱导大鼠ALI模型,3个EDS治疗组于建模1 h后予不同剂量的EDS腹腔注射,其余两组注射等体积生理盐水.24 h后,取肺组织,用光学显微镜观察各组肺组织病理学改变;用Western blot测定肺表面活性蛋白A（SP-A）、Toll样受体4（TLR4）的表达;用ELISA测定各组肺组织中TNF-α含量,RT-PCR检测TNF-α mRNA表达水平.结果：肺组织病理学观察显示：LPS组可见肺间质充血、水肿,大量炎性细胞浸润,而EDS治疗组肺损伤明显改善,效果随EDS剂量的增加而增加.与正常对照组比较,LPS组肺组织的SP-A蛋白表达明显降低（P〈0.05）,而TNF-α含量、TNF-α mRNA表达、TLR4蛋白表达明显增加 （P〈0.05）.与LPS组相比较,不同剂量EDS治疗组肺组织SP-A蛋白表达均增加（P〈0.05）,而TNF-α含量、TNF-α mRNA表达、TLR4蛋白表达明显降低（P〈0.05）,其中EDS高剂量组比中、低剂量组效果明显 （P〈0.05）.结论：蜕皮甾酮对LPS诱导大鼠急性肺损伤有保护作用,其机制可能与抑制TLR4通路来降低肺组织中TNF-α炎性因子的表达,并促进抗炎物质SP-A释放有关.     

慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α表达对线粒体合成的影响

目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠外周骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)与线粒体合成相关基因的表达,探讨COPD骨骼肌线粒体生物合成的变化及影响因素.方法 用2次气管内注入脂多糖(LPS)和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型.检测对照组和模型组大鼠外周血及骨骼肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分析方法检测骨骼肌PGC-1α、核呼吸因子1(NRF1)、线粒体转录因子A(Tfam)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ基因(COX Ⅳ)mRNA表达,Western blot检测骨骼肌PGC-1α、NRF1、Tfam、COXⅣ蛋白相对含量.结果 模型组大鼠外周血和骨骼肌TNF-α浓度(ng/L,378.09±26.34和330.56±23.79)较对照组升高(154.70±12.98和129.77士11.79);模型组PGC-1α(0.17±0.05)、NRF1(0.20士0.08)、Tfam(0.21 ±0.04)、COXⅣ(0.25±0.07) mRNA相对表达量较对照组PGC-1α(1.00 ±0.00)、NRF1 (1.00 ±0.00)、Tfam(1.00 ±0.00)、COX Ⅳ(1.00±0.00) mRNA相对表达量明显降低.骨骼肌TNF-α表达和PGC-1α mRNA呈负相关.结论 COPD大鼠骨骼肌PGC-1α及线粒体合成相关基因表达降低,其机制可能与TNF-α高表达有关.     

补肾活血方对去势骨质疏松大鼠循环Serotonin表达的 影响

目的探讨补肾活血方对去势大鼠循环5-羟色胺(Serotonin)表达水平的影响。方法 30只6月龄SD雌性大鼠去卵巢制作骨质疏松模型,另取10只行假手术,建立假手术组。3个月后,卵巢切除的大鼠随机分为三组,然后分别予补肾活血方(中药组),阿仑膦酸钠(西药组)和生理盐水(模型组)治疗,假手术组给予等量生理盐水。经过8周的治疗后处死大鼠,检测左侧股骨骨密度,ELISA检测血清Serotonin、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨转换指标P1NP、CTX水平。结果模型组骨密度低于假手术组(P0.001);中药组和西药组全段股骨骨密度高于模型组(P0.01和P0.001)。中药组和西药组血清P1NP低于模型组(P均0.001),而假手术组、中药组与西药组之间无统计学差异。中药组和西药组血清CTX低于模型组(P均0.001),高于假手术组(P均0.001)。中药组血清Serotonin水平低于西药组和模型组(P均0.001),假手术组与中药组之间无统计学差异。中药组和西药组血清RANKL低于模型组(P均0.001),假手术组、中药组与西药组之间无统计学差异。结论补肾活血方可能是通过降低去势大鼠循环Serotonin表达水平,进而抑制RANKL表达水平,从而提高去势大鼠骨密度。     

六味地黄丸对5/6肾切除大鼠肾组织中HIF-1α、PAI-1和TIMP-1表达的影响

目的：探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）在肾间质纤维化中的表达及作用,观察六味地黄丸对其表达的影响.方法：用5/6肾切除大鼠制作肾间质纤维化模型,分假手术组,模型组和六味地黄丸组.术后8周,常规HE染色观察肾脏组织病理变化,用Masson染色法检测胶原在肾脏的沉积;免疫组化法检测HIF-1α、PAI-1和TIMP-1在肾组织中的表达;Western blot法检测HIF-1α蛋白的表达.结果：与假手术组比较,模型组肾组织中HIF-1α、PAI-1和TIMP-1蛋白水平均明显升高（P＜0.01）.与模型组比较,六味地黄丸组肾组织中HIF-1α、PAI-1和TIMP-1蛋白水平均明显降低（P＜0.05或P＜0.01）.结论：HIF-1α通过调节PAI-1和TIMP-1的表达,抑制细胞外基质降解而导致肾间质纤维化,六味地黄丸可通过减少HIF-1α蛋白水平来减轻肾间质纤维化.     

化瘀解毒汤对TGF-β1及MMP1mRNA表达作用的探讨

目的：探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制。方法：采用单侧输尿管梗阻（UUO）法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分（Ⅰ、Ⅲ型胶原）、TGF－β1mRNA及MMP1mRNA表达,并作尿α1－MG检测以及相关肾组织学检查。结果：模型组和各治疗组大鼠肾组织Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA的面积比显增加（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比显降低（P＜0．05）;各治疗组大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比较模型组减少（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比较模型组增加（P＜0．05）;治疗组中以中药预防组鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比最低、MMP1mRNA面积比最高（P＜0．05）。经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善。结论：化瘀解毒汤通过下调TGF－β1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达、以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维。此外还可减轻肾小管病理性损伤。     

小分子RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α加重缺氧状态肾小管上皮细胞的生长抑制和坏死

目的 探讨沉默缺氧诱导因子1α （HIF-1α）对缺氧状态肾小管上皮细胞增殖、凋亡和坏死的影响。 方法 利用氯化钴模拟缺氧状态,并应用小分子RNA干扰（siRNA）技术沉默HIF-1α基因表达。将细胞分成5组,分别是正常培养组、缺氧培养组、转染试剂组、阴性对照组和HIF-1α siRNA组。用MTT试验检测细胞的生长抑制率;用TUNEL法、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（aspase）-3蛋白定量法检测细胞的凋亡率;检测细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）活力来测定细胞的坏死情况;用实时定量PCR法和Western印迹法检测细胞HIF-1α、HIF-2α、葡萄糖转运蛋白1（Glut-1）、血管内皮生长因子（VEGF） mRNA和蛋白表达水平。 结果 （1）siRNA的细胞转染效率为95%～100%。在常氧条件下,终浓度100 nmol/L 的HIF-1α siRNA沉默HIF-1α基因的效率为70%;在缺氧条件下,HIF-1α siRNA沉默HIF-1α基因的效率达到97%。（2）HIF-1α siRNA组细胞的生长抑制率显著高于其它组（P < 0.05）;细胞凋亡率在缺氧培养组、转染试剂组、阴性对照组和HIF-1α siRNA组4组间的差异无统计学意义（P > 0.05）;HIF-1α siRNA组细胞培养液中LDH水平显著高于缺氧培养组、转染试剂组和阴性对照组（P < 0.05）。（3）HIF-1α siRNA组细胞的HIF-1α、Glut-1、VEGF mRNA和蛋白表达量显著低于缺氧培养组、转染试剂组、阴性对照组（P < 0.05）;而HIF-2α mRNA和蛋白表达在缺氧培养组、转染试剂组、阴性对照组和HIF-1α siRNA组4组间的差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 siRNA沉默HIF-1α能显著抑制缺氧状态下肾小管上皮细胞Glut-1和VEGF表达,加重缺氧状态下肾小管上皮细胞的生长抑制和坏死。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α在乳腺癌患者中的表达及其与临床病理特征关系研究

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)与乳腺癌发生及发展的相关性。方法乳腺癌患者和同期非乳腺癌患者各86例,采用免疫组化检测组织中PGC-1α蛋白表达水平,分析PGC-1仅与乳腺癌发生的相关性,针对乳腺癌患者不同病理分期、淋巴结转移情况分组,观察PCC-1α与乳腺癌发生、发展的关系。结果乳腺癌患者PGC-1α表达水平高于非乳腺癌患者,Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌PGC-1α表达水平高于Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌患者,淋巴结转移阳性组PGC-1α的表达水平高于淋巴结转移阴性组,差异均有统计学意义(P0.05)。采用Logistic回归分析PGC-1α与乳腺癌发生、病理分期、淋巴结转移的相关性,差异均有统计学意义(P0.05),且各项指标最大似然估计值和OR值均0。结论 PGC-1α表达水平与乳腺癌的发生、病理分期、淋巴结转移呈正相关,有可能作为乳腺癌诊断和判断预后的指标。     

HCV核心蛋白通过LXRα核受体介导HepG2细胞甘油三酯合成增加

目的：观察丙型肝炎病毒（HCV）的核心蛋白（core）对肝细胞甘油三酯（TG）合成的影响。方法将HCV 1b基因型core表达载体pcDNA3.1-myc/his（-）-core1b和HCV 3a基因型core表达载体pcDNA3.1-myc/his（-）-core3a分别转染至HepG2细胞,利用定量测定法检测细胞内TG含量,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法（real time qPCR）、蛋白免疫印迹（Western blot）方法观察脂质合成相关基因肝X受体α（LXRα）、甾醇调节元件结合蛋白1c（SREBP1c）和脂肪酸合酶（FASN）的mRNA和蛋白的表达变化,并进行比较分析。结果 HepG2细胞转染两个基因型HCV core表达载体之后均能显著增加细胞内的TG含量（P＜0.05）,尤以基因型core3a组为差异更显著（P＜0.001）。Real-time PCR结果显示,两个基因型core均上调LXRα的mRNA水平（P＜0.05）,基因型core3a组差异更为显著（P＜0.01）;FASN的mRNA水平只在仅在基因型core3a组上调（P＜0.05）,而基因型core1b组差异无统计学意义。Western blot结果显示,HCV core表达可以明显上调表达可以显著上调SREBP1c的蛋白水平,尤其基因型core3a组更为显著。对FASN蛋白水平,基因型core3a上调其表达,但基因型core1b组无明显变化。结论 HCV可能通过LXRα介导肝细胞内的脂质合成诱导肝脂肪变,有待进一步研究。     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨组织Cbfal mRNA表达的影响

目的 观察成骨细胞转录因子Cbfal在去卵巢骨质疏松(Osteoporosis,OP)大鼠的表达,探讨骨碎补总黄酮调节骨代谢的作用机制.方法 36只Wistar雌性大鼠随机均分为假手术组、模型组和药物组,术后2、4、6、8周检测血液雌二醇(E2)水平,进行股骨和腰椎骨密度测量、组织学观察和Cbfal mRNA表达.结果 在每个时间点3组大鼠雌二醇水平均存在显著性差异(P＜0.05),假手术组＞模型组＞对照组;比较股骨及腰椎骨密度,假手术组＞模型组(P＜0.05)在每一个检测的时间点,药物组在术后2周和术后8周低于假手术组(P＜0.05),在术后6周和术后8周高于模型组(P＜0.05),其余时间点无显著性差异.组织学检查示模型组骨组织内骨小梁减少,稀疏,间隔增大,药物组该表现较少,而假手术组骨组织内未见该现象.模型组与药物组Cbfal mRNA表达在术后4周均低于假手术组(P＜0.05),在术后6周和术后8周,假手术组＞药物组＞模型组(P＜0.05).结论 实验结果表明雌激素减少能导致大鼠Cbfal表达降低,而骨碎补总黄酮能上调Cbfal表达水平,促使骨髓间质干细胞向成骨细胞分化发挥其防治OP作用.     

结直肠癌组织中p53、PTEN和VHL对缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的研究结直肠癌组织中p53、PTEN和VHL对缺氧诱导因子-1α（hypoxia—inducible fac—tor 1α）表达的影响及意义。方法采用组织芯片技术制作60例结直肠癌组织芯片,同时采用SP免疫组织化学法和原位分子杂交（cDNA—mRNA）方法检测结直肠癌组织芯片中p53、PTEN、VHL、HIF—1α和HIF-1α mRNA的表达。结果60例结直肠癌组织中,p53、PTEN、VHL、HIF-1α和HIF-1α mRNA的阳性率分别为55％、48．3％、41．7％、58．3％和71．7％。淋巴结转移组p53、HIF-1α和HIF-1α mRNA阳性率显著高于无淋巴结转移组（P〈0．01）。p53高表达、PTEN和VHL低表达与HIF-1α和HIF-1α mRNA高表达明显相关。结论p53、PTEN、VHL、HIF-1α和HIF-1α mRNA的表达水平可以作为评估结直肠癌预后的参考指标。     

合并高血压的前列腺增生组织中α1受体亚型含量的变化

目的 探讨合并高血压的前列腺增生组织中α1受体亚型含量的变化.方法 收集经尿道电切除的增生前列腺新鲜标本共47例,分为单纯BPH组23例和合并高血压(血压控制良好)BPH组24例,RT-PCR法测定前列腺组织中的α1受体亚型mRNA的表达.结果 α1A、α1B、α1D 3种α1受体亚型mRNA在47例BPH组织中的相对表达量分别为0.95±0.22、0.97±0.16、1.00±0.28 (P＞ 0.05),表达比例为32.4％∶33.1％∶34.5％,3种亚型的表达没有差别.α1受体总mRNA和α1B受体亚型mRNA的相对表达量在合并高血压BPH组与单纯BPH组无差别,但α1A和α1D受体亚型mRNA的相对表达量却发生了变化.在合并高血压BPH组中,3种受体亚型mRNA的相对表达量分别为1.06±0.16、0.95±0.14、0.84±0.17(P＜0.05),表达比例为37.1％∶33.4％∶29.5％,以α1A亚型的表达占优,且高于单纯BPH组(P＜0.05).在单纯BPH组中,3种受体亚型mRNA的相对表达量分别为0.83±0.22、0.98±0.18、1.19±0.27 (P＜ 0.05),表达比例为27.7％∶32.7％∶39.4％,以α1D亚型的表达占优,且高于合并高血压BPH组(P＜0.05).结论 相对于单纯BPH组,合并高血压BPH组的α1A型受体mRNA的表达显著增加,重点阻滞α1A型受体亚型的功能可能更有利于高血压合并BPH患者的临床治疗.