短程免疫制备实验用溶血素方法探讨

目的寻求采用短程免疫制备实验用溶血素（兔抗绵羊红细胞抗体）的较佳方法。方法采用3％的脱纤维绵羊红细胞（SRBC）,分别用连续5次注射的短程免疫和间隔一周注射的长程免疫方法,经耳缘静脉免疫家兔,用补体溶血实验检测两种免疫方法所制备溶血素的效价。结果短程免疫组溶血素效价为1：200,长程免疫组溶血素效价为1：800。结论采用高浓度的SRBC及合理搭配免疫间隔时间和次数的短程免疫程序是制备实验用溶血素的较佳方法。     

绵羊红细胞与鸡红细胞制备溶血素在免疫学溶血反应中的运用比较

目的比较并检测两种动物红细胞（RBC）免疫家兔制备溶血素的效价,且在免疫学溶血反应中的效果比较,寻求获取符合医学免疫学实验教学需求的高效价溶血素的较佳方法。方法选择两种免疫抗原—绵羊红细胞（SRBC）和鸡红细胞（CRBC）腹腔多点注射家兔制备溶血素,用血球凝集法和补体溶血试验检测并比较两种不同免疫抗原所制备抗血清的效价,且通过在免疫学溶血反应中的溶血素运用效果,比较两种动物RBC作为免疫原获取溶血素是否能得到满意的结果。结果免疫后获得的溶血素效价几何平均滴度（GMT）抗-SRBC为1：333.44（血球凝集法）和1：267.77（补体溶血试验）,抗-CRBC为1：286.22（血球凝集法）和1：154.48（补体溶血试验）。结论以CRBC免疫家兔所制备的溶血素效价低于SRBC,两种血清溶血素应用于溶血反应时,抗-SRBC溶血素可产生较好的溶血效果,而抗-CRBC溶血素不能产生完全透明溶血现象。故不能替代SRBC用作免疫学溶血反应实验的红细胞抗原。     

绵羊红细胞与猪红细胞制备溶血素在医学免疫学实验教学中的应用比较

目的检测2种动物红细胞(绵羊红细胞SRBC和猪红细胞PRBC)免疫家兔所制得溶血素的效价,比较其在医学免疫学实验中的应用效果,以寻求制备符合免疫学实验及教学需求的高效价溶血素的较好方法.方法分别选择绵羊红细胞(SRBC)和猪红细胞(PRBC)经皮内多点注射、耳缘静脉注射家兔以制备溶血素,再用补体溶血试验检测2种溶血素效价的高低,并比较二者在免疫学溶血实验及教学中的运用效果.结果经补体溶血试验测得2种溶血素效价分别是:抗-SRBC为1:4 800;抗-PRBC为1:1 200.结论抗-PRBC溶血素效价低于抗-SRBC溶血素,但2种溶血素在溶血反应中均可产生较好的溶血效果,故PRBC能替代SRBC制备溶血素,并成功用于免疫学溶血实验及教学中.     

不同免疫程序制备伤寒抗血清的效价比较

目的 比较两种免疫程序制备伤寒杆菌抗血清的效价,寻求获取符合实验教学需要的高效价伤寒抗血清的较佳方法.方法 采用2天短期间隔的免疫程序和常规2周间隔的免疫程序,分别以伤寒沙门菌O、H菌液免疫家兔,用试管凝集法检测并比较其血清抗体效价.结果 免疫后获取的伤寒沙门菌O抗原和H抗原抗血清的几何平均滴度(GMT),2天间隔免疫程序分别为1∶22807和1∶25600,2周间隔免疫程序分别为1∶2691和1∶5702.结论 2天短间隔免疫程序所制备的伤寒杆菌抗血清效价较高,不失为获取实验教学用抗血清的较佳免疫程序.     

不同免疫程序制备兔抗牛血清白蛋白抗血清的效价比较

目的比较两种免疫程序制备牛血清白蛋白（BSA）抗血清的效价,以获取能满足实验教学需要的高效价可溶性抗血清。方法采用2天短期间隔免疫程序和1周间隔免疫程序,以牛血清白蛋白（BSA）免疫家兔,对流免疫电泳和双向琼脂扩散试验检测并比较其血清抗体效价。结果BSA浓度在5mg／mL时,双向琼脂扩散试验和对流免疫电泳测得的2天间隔免疫程序所制备的BSA抗血清几何平均滴度（GMT）分别为1：6．50和1：4．2,1周间隔免疫程序的BSA抗血清GMT分别为1：10．56和1：8．00。结论1周间隔免疫程序所制备的牛BSA抗血清效价高于2天短周期间隔的免疫程序所制备抗血清效价,BSA短周期免疫家兔可获取符合教学实验要求的抗血清效价。     

快速制备免疫血清方法研究

目的探讨快速制备免疫血清的方法和效果,以适应其在实验教学中的需要。方法对家兔分组,采用短程免疫法,用绵羊红细胞（SRBC）抗原和鸡蛋黄抗原小剂量连续多次接种后,收集免疫血清,对其效价进行测定,并与传统免疫血清制备方法进行比较。结果经绵羊红细胞（SRBC）抗原和鸡蛋黄抗原短程免疫后的免疫血清最终分别达到1∶1200和1∶10240的高效价;经绵羊红细胞（SRBC）抗原和鸡蛋黄抗原长程免疫后的免疫血清最终分别达到1∶2400和1∶10240的效价。结论短程免疫法制备免疫血清所用时间短,效价高,亲和力强,适用于实验教学。     

实验教学中颗粒性抗原与可溶性抗原制备抗血清的方法及其应用

目的比较颗粒性抗原与可溶性抗原制备抗血清的效价,寻求获取符合实验教学需要的高效价抗血清的较佳方法。方法牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）作为可溶性抗原,伤寒“H”菌液作为颗粒性抗原,采用1周间隔的免疫程序,以BSA和伤寒杆菌“H”菌液免疫家兔,用对流免疫电泳和双向琼脂扩散试验、肥达试验检测并比较其血清抗体效价。结果浓度为7×109个/ml伤寒杆菌“H”菌液免疫家兔后获取的伤寒“H”抗血清几何平均滴度（geometry mean titer,GMT）为1∶9051.07,浓度为5mg/ml BSA免疫家兔后测得抗血清GMT分别为1∶3.668和1∶6.17。结论颗粒性抗原与可溶性抗原1周间隔免疫程序制备的抗血清可获取符合实验教学的抗血清效价。     

短程免疫法制备抗血清效果比较

目的探讨快速制备抗血清的方法和效果,以适应其在实验教学中的需要。方法采用短程免疫法,对家兔分组,用大肠杆菌抗原菌液、绵羊红细胞(SRBC)抗原和鸡蛋黄抗原小剂量连续多次接种后,收集抗血清,对其效价进行测定,并与传统抗血清制备方法进行比较。结果经大肠杆菌抗原、绵羊红细胞(SRBC)抗原和鸡蛋黄抗原免疫后的抗血清最终分别达到1∶10240、1∶1200和1∶10240的高效价。结论此方案制备抗血清所用时间短,效价高,亲和力强,适用于实验教学。     

免疫血清制备方法改良初探

目的探讨如何缩短制备免疫血清时间的方法,以适应其在实验教学中的需要。方法对家兔用伤寒“O”抗原菌液、绵羊红细胞(SRBC)连续接种5天后对其血清效价进行测定,并与传统免疫血清制备方法进行比较。结果伤寒“O”抗原菌液免疫血清效价为1∶1280,SRBC免疫血清效价为1∶1200。结论此免疫血清制备的方案所用时间短,效价高,适用于实验教学。     

绵羊红细胞与鸡红细胞对小白鼠溶血素的影响的探讨

绵羊红细胞 (SRBC)是一种比较好的红细胞性抗原。近年我们做免疫功能测定仍用SRBC作为免疫原。由于SRBC来源比较困难 ,为了探索红细胞抗原问题 ,我们应用绵羊红细胞 (SRBC)与鸡红细胞(CRBC)分别免疫小白鼠 ,进行其血清溶血素 (抗体积数 )测定的比较。现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　实验动物 :选用健康昆明种雄性小白鼠 (清洁级 ) ,体重 (2 0± 1 5g) ,由广西医科大学医学实验动物中心 (桂动许字〈2 0 0 0〉第 0 0 1号 )提供。1 2　SRBC悬液的制备 :选用健康绵羊 ,由广西军区30 3医院动物室提供。从绵羊颈静脉无菌取血 ,…     

水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT经黏膜途径免疫兔的实验研究

目的观察水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT经黏膜途径免疫兔的免疫效果及其目的蛋白在免疫部位的表达。方法 20只新西兰大白兔随机分为5组,每组4只。A组：pVAX1-gtfB/CAT口服组,B组：pVAX1-gtfB/CAT鼻腔黏膜滴注组,C组：空载体pVAX1质粒口服组,D组：空载体pVAX1＋水凝胶口服组,E组：生理盐水鼻腔黏膜滴注组。每间隔1周免疫1次,共免疫3次。每次免疫剂量为200μg/只。于免疫前和免疫后第1、2、3、4、6、8、10、12、14、16周采集血液及唾液标本,ELISA法检测血清及唾液中特异性抗体水平。第3次免疫后每组处死1只动物,取免疫部位组织,免疫组织化学检测目的蛋白表达。结果 1水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT免疫兔后,诱导了特异性IgG和SIgA抗体产生,在第6和第8周口服免疫诱导的特异性IgG抗体水平高于鼻腔黏膜滴注,其余时间点两种黏膜途径诱导的SIgA和IgG抗体水平差异无统计学意义;2在小肠黏膜和鼻黏膜均检查到了目的蛋白的表达。结论水凝胶型防龋基因疫苗pVAX1-gtfB/CAT经黏膜途径免疫后,目的蛋白能够在免疫部位表达,均能有效诱导兔的系统免疫和黏膜免疫应答。     

小鼠腹腔注射苯并(a)芘对免疫功能的影响

小鼠经腹腔注射200、100、50mg/kg苯并(a)芘后5天,可见脾抗体形成细胞数明显减少,对TI抗原——TNP-Ficoll反应的抑制率为57～94％,对TD抗原——TNP-KLH反应的抑制率为57～79％。在注射同样剂量的B(a)P后13天,对SRBC的二次免疫反应IgM、IgG的抗体滴度明显降低,尤以lgG抗体滴度下降最多。400mg/kgB(a)P染毒后6天,对ConA及LPS刺激的淋巴细胞转化受到明显抑制,在染毒剂量范围内未观察到B(a)P对巨噬细胞碳粒廓清能力的影响。     

短程免疫法制备高效价抗血清研究

目的:探索快速制备免疫血清的方法和效果。方法:采用短程免疫法,分别以伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原分组小剂量连续多次免疫家兔后,收集抗血清,用ELISA间接法测定抗体效价。结果:ELISA结果显示伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原抗血清最终分别达到1∶20 480和1∶10 240的高效价。结论:短程免疫法所制备抗血清效价高,亲和力强。     

Immunization with β1-adrenoreceptor peptide induces cardiomyopathy-like changes in rabbit hearts

Objective To investigate the importance of autoimmunity against β(1)-adrenoreceptor in the pathogenesis of dilated cardiomyopathy (DCM). Methods Fourteen rabbits were divided equally into two groups. Rabbits in the immunized group (n=7) were immunized monthly for one year with synthetic peptide corresponding to the second extracellular loop of the β(1)-adrenoreceptor and adjuvant. Control rabbits received the mixture with the same procedure as described except with a substitution of saline for the corresponding peptide. During the study period, all rabbits were bled to assay the titers of antipeptide antibody and left ventricular ejection fractions (LVEFs) were measured by emission computed tomography. At the end of experiment, invasive cardiac function was measured and morphologic examinations were done.Results High titers of antipeptide antibody were found in the sera from immunized rabbits throughout the study period in contrast to those from control rabbits. LVEFs were significantly higher in immunized rabbits than those of the control group at the 4th and 6th month. At the end of the experiment, the maximal rates of rise and decline of ventricular pressure of the immunized group were significantly lower than those of the control group. Morphological changes were found in immunized rabbits such as the enlargement of ventricles, myofibrillar lysis and necrosis, mitochondria swelling and condensation. No obvious alterations were noted in hearts of control rabbits.Conclusion Autoimmunity against the β(1)-adrenoreceptor may be involved in the pathogenesis of dilated cardiomyopathy and β(1)-adrenoreceptor antibody may play a role in the process.     

不同免疫方案制备肠道病毒71型抗血清的免疫效果比较

目的比较不同免疫方案制备肠道病毒71型(EV71)抗血清的免疫效果,选择最佳免疫方案。方法制备EV71,并对病毒进行滴定和灭活。将BALB/c鼠随机分为5组,每组9只。1、2组以灭活病毒免疫,3、4组以活病毒免疫,1、3组的免疫间隔时间为2周,2、4组为3周,第5组为对照组,用磷酸盐缓冲液(PBS)免疫,免疫间隔2周。免疫4次后用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠血清抗体滴度。结果 4个实验组均产生阳性抗体(A/A0≥2.1),对照组抗体阴性(A/A0<2.1),1～5组吸光度值依次为1.081 7±0.289 7、1.029 6±0.3719、1.074 8±0.374 9、1.492 9±0.215 9、0.168 7±0.021 8。对其进行单因素方差分析,F=23.449,P<0.05,差异有统计学意义,LSD-t检验结果,第4组与1、2、3组差异均有统计学意义(P<0.05),而1、2、3组两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论各组抗体滴度不完全相同,其中第4组即活病毒间隔3周免疫组抗体滴度最高,所以活病毒间隔3周免疫方案可作为制得高滴度EV71抗血清的理想选择。     

低剂量X线全身照射对小鼠甲状腺和肾上腺皮质功能的影响

本文报道,75mGyX线全身照射后4天,引起正常小鼠、SRBC免疫小鼠血浆中皮质酮含量降低,而血浆中 T_3、T_4的含量在照射后4天、7天均未见明显变化。提示75mGy照射后肾上腺皮质功能下调,而甲状腺功能未受影响。     

局部使用TNP-470后兔眼房水中药物分布及对兔高危角膜移植术后新生血管的影响

探讨局部使用TNP-470[O-(氯乙酰氨甲酰基)烟曲霉醇]后兔眼房水中的药物质量浓度,观察其对兔眼高危角膜移植术后新生血管增殖的影响。方法健康新西兰白兔30只,其中10只兔角膜作为供体、20只兔进行高危角膜移植受体动物模型的制备。将成功建立高危角膜移植动物模型的16只兔按随机数字表法分为4组,每组4只:A组术后不用药,术后第1天B、C、D组分别予质量浓度为100、500、1 000ng.mL-1的TNP-470滴眼液,6次.d-1,1滴.次-1,共观察90d。用药后1、2、7、14、28、56d用高效液相色谱法(HPLC)检测4组兔眼房水中TNP-470的质量浓度;术后第2天开始隔日观察术眼新生血管长入情况,并在术后2、6、9、12周记录新生血管指数(NI)。结果 3组各时间点兔眼房水中均可检测到TNP-470,且各组药物质量浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后2周A组NI一直呈上升趋势,6周后维持在较高水平;B、C、D组在术后6、9、12周一直维持在较低水平,与A组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论局部用TNP-470具有抑制兔眼高危角膜移植后新生血管增殖的作用。     

特异性RBBP10多克隆抗体的制备

目的：制备RBBP10多克隆抗体。方法：用纯化的RBBP10蛋白为抗原免疫家兔制备多克隆抗体，间接ELISA法检测抗体效价，Western印迹检测抗体特异性。结果：抗血清效价可达1：1000以上。结论：经Western印迹检测证明抗体效价高，特异性强．此抗体可通过免疫组化方法检测RBBP10蛋白在各种肿瘤中的表达。具有一定的应用价值。