糖尿病大鼠皮肤损害及其机制研究

链脲佐菌素诱导的SD糖尿病大鼠4周时皮肤已开始变薄,8周时表皮厚度已明显低于正常大鼠[(0.016_+0.006对0.041±0.007)mm,P<0.01],各时间点G2/M期的表皮细胞比例显著减少.12周时在真皮层中微血管病变常见.与同时间点正常大鼠相比,血浆晚期糖基化终末产物(AGEs)和丙二醛含量明显升高,谷胱甘肽下降(均P<0.01),皮肤糖含量、AGEs水平均显著升高(P<0.01).提示局部高糖和AGEs的蓄积,可能是糖尿病皮肤损害的重要机制.     

雌二醇拮抗紫外线所致大鼠表皮角质形成细胞损伤作用的研究

目的 利用UVB照射体外培养的大鼠表皮角质细胞建立紫外线细胞损伤模型.探讨雌二醇(E2)在UVB导致的角质形成细胞损伤中作用.方法 原代培养Wistar大鼠幼鼠表皮角质细胞,将细胞随机分为4组:正常细胞组、U～13照射组(UVB组)、溶媒组、E2保护组.正常组细胞正常培养36 h;UVB组只接受1次UVB照射;E2组加入雌二醇24 h后接受UVB照射.溶媒组加入DMSO 24 h后接受UVB照射;UVB照射24h后,收集细胞测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GsH·Ix)、超氧阴离子自由基(O<'-><,2>)和羟自由基(·OH)的水平.利用吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色方法 检测细胞凋亡.结果 正常组细胞SOD、GSH-Px和GSH水平显著高于UVB组、溶媒组和E2组(P<0.05);E2组细胞的SOD、GSH-Px和GSH显著高于UYB组和溶媒组(P<0.05);溶媒组与UVB组无差异.正常细胞组细胞MDA、·OH和O<'-><,2>显著低于UYB组、E2组和溶媒组(P<0.05);E2组细胞的MDA、·OH和O<'-><,2>水平显著低于UVB组和溶媒组(P<0.05);溶媒组和UVB组的MDA、·OH和O<'-><,2>水平无差异.各组角质细胞经AO/EB染色,荧光显微镜下可明显观察到UVB组、溶媒组有大量凋亡细胞,E2组细胞凋亡率显著低于tlYB组(P<0.05).结论 10<'-6>mol/L的E2能够显著地拮抗UVB照射所引起的角质细胞氧化损伤和细胞凋亡.     

氨氯地平对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨苯磺酸氨氯地平对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡的影响.方法 21只SD雄性大鼠分为3组:正常对照组(对照组,n=6)喂以普通饲料;余15只大鼠高糖高脂膳食喂养6周后,一次性腹腔内注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)30 mg/kg;2周后血糖升高≥16 mmol/L者成模,共12只,再随机分为糖尿病组(糖尿病组,n=6)和糖尿病大鼠应用苯磺酸氨氯地平治疗组(治疗组,1 mg/kg·d, n=6).12周后光镜观察各组肾脏病理改变;流式细胞术检测大鼠肾组织细胞凋亡率;检测各组内生肌酐清除率(Ccr)和24 h尿白蛋白的排泄率(Uaer).结果 12周后,糖尿病组大鼠肾小球细胞外基质增生,部分肾小管轻度萎缩或管腔扩张,上皮细胞肿胀,胞浆内可见脂肪空泡变性,但治疗组较糖尿病组病变减轻;糖尿病大鼠较正常组的肾细胞凋亡率明显升高,氨氯地平能明显降低肾细胞凋亡率[对照组(13.8±1.3)% vs糖尿病组(26.5±2.7)% vs治疗组(20.0±2.0)%,P<0.05],增加肌酐清除率[对照组(0.110±0.020) vs糖尿病组(0.021±0.001) vs治疗组(0.065±0.004)mL/min,P<0.05],降低蛋白排泄率[对照组(0.081±0.001) vs糖尿病组(0.150±0.004) vs治疗组(0.07±0.01)mg/24 h,P<0.05].结论 苯磺酸氨氯地平可减轻糖尿病大鼠肾脏病理损害,减少糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡,可使Ccr下降减轻、Uaer排泄减少,以达肾脏的保护作用.     

荷负电气溶胶对大鼠烧伤创面表皮干细胞的影响

目的分析大鼠烧伤创面采用荷负电气溶胶对表皮干细胞的影响并分析作用机制。方法选取清洁级健康大鼠,在背部侧分别做烧伤创面,随机分为实验组和对照组,实验组采取荷负电气溶胶治疗,对照组大鼠不做任何治疗,分析两组大鼠创面愈合过程,通过免疫组织化学染色法分析干细胞含量,并分析表皮生长因子(EGF)、β1整合素表达变化。结果烧伤24 h后取创面组织染色观察为深Ⅱ度病理改变,第2天基底层细胞增殖,5 d表皮细胞增殖,排列紧密。对照大鼠第3天局部增殖,第7天增殖明显,分布稀疏。经过治疗,相同时间实验组组织切片内阳性单位含量显著大于对照组(P<0.05)。实验组平均愈合时间[(7.1±1.2)d]显著短于对照组[(9.5±1.2)d]。实验组大鼠在伤后EGF和β1整合素该表达;在伤后第3天表达明显增高,第7天仍然维持较高表达,对照组大鼠EGF和β1整合素在伤后第3天有所表达,第7天表达高峰,两组大鼠EGF和β1整合素随着治疗时间不同存在显著差异(P<0.05)。结论大鼠烧伤创面实施荷负电气溶胶治疗能够促进表皮干细胞的增殖,其机制可能与EGF、β1整合素表达上升有关。     

糖尿病大鼠阴茎组织糖基化终产物含量的变化和糖基化终产物受体的表达情况

目的研究糖尿病阴茎组织糖基化终产物(AGEs)含量的变化和糖基化终产物受体(RAGE)的表达情况。方法用葡萄糖和血红蛋白(Hb)在体外孵育形成Hb-AGEs,免疫新西兰兔,制备AGEs抗血清,建立竞争性ELISA法,测定大鼠阴茎组织AGEs含量。应用RT-PCR研究RAGEmRNA表达。结果各组糖尿病大鼠未经治疗时阴茎组织AGEs水平均较对照(NC)组明显升高(P<0.01),8周时糖尿病用胰岛素治疗(DMI)组及糖尿病用胰岛素和二氨基酚嗪(DAP)治疗(DMID)组的AGEs水平较糖尿病未治疗(DM)组降低(P<0.05～0.01),至16周DMID组上述指标较DMI组明显降低(P<0.01)。RAGEmRNA在DM组大鼠阴茎组织的表达明显高于NC组(P<0.01)。结论糖尿病大鼠阴茎组织AGEs水平明显升高,RAGEmRNA高表达,胰岛素和DAP治疗可降低AGEs水平。     

Wnt/β-catenin信号通路在糖尿病创面难愈中的作用

目的 探讨Wnt/β-catenin信号途径在糖尿病创面难愈中的作用.方法 在1型糖尿病大鼠制作背部皮肤缺损,分为对照组、糖尿病组、氯化锂组和表皮生长因子(EGF)组,观察背部创面愈合情况及β-catenin表达变化.结果 伤后各组大鼠创面未见感染征象.对照组、氯化锂组及EGF组大鼠与糖尿病组大鼠相比,创面愈合时间短,创面愈合率高,伤腔容积缩小显著,肉芽组织成熟,且β-catenin阳性细胞率高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 Wnt/β-catenin信号通路参与了糖尿病大鼠创面愈合过程.

Abstract：

Objective To investigate the role of Wnt/β-catenin signaling pathway in impaired wound healing of diabetes mellitus.Methods The back skin defect was produced in rats with type1diabetes.All of these rats were divided into normal group, diabetes group, lithium chloride group, and epidermal growth factor (EGF) group.The back wound healing and β-catenin expression were observed.Results There were no signs of infection in the wound of rats after injury.Compared with diabetic group, the wound healing time was shorter,wound healing rate was higher, wound cavity volume was smaller, granulation tissue was more mature, and β-catenin positive cell rate was higher in normal group, lithium chloride group, and EGF group(P＜0.05 or P＜0.01).Conclusions Wnt/beta-catenin signaling pathway is involved in the process of wound healing in diabetic rats.     

表皮生长因子纳米微粒对糖尿病大鼠皮肤创面愈合的影响

目的 观察表皮生长因子（EGF）纳米微粒对糖尿病大鼠皮肤创面的愈合作用,探讨EGF纳米微粒促进愈合的机制.方法 制备EGF纳米微粒,测定EGF纳米微粒载药率、包封率和释药行为.用打孔器制备糖尿病大鼠皮肤创面模型.分为4组：EGF纳米组（给予含1μg/d EGF的纳米微粒）,EGF组（给予1μg/d EGF）,空微粒组（给予不含EGF纳米微粒）,磷酸盐缓冲液（PBS）对照组,于3、7、14、21 d照相并取材,计算创面愈合率并比较创面病理学变化及EGF受体阳性细胞面积.结果 EGF纳米微粒平均粒径为193.5 nm,载药率为0.02％,包封率为85％.药物释放达24h.EGF纳米组创面愈合比EGF组快[14 d,（93.8±1.8）％比（89.3±2.3）％,P＜0.05;21 d（96.6±1.6）％比（92.1±4.3）％,P＜0.05].EGF纳米组创面内EGF受体阳性细胞面积高于EGF组[7d,（49.4±6.5）％比（35.1±2.8）％,P ＜0.05;14 d,（80.2±3.8）％比（73.4±1.7）％,P＜0.05].结论 EGF纳米微粒上调创面内细胞EGF受体表达,加速创面的愈合,效果优于EGF.     

AGEs对糖尿病大鼠骨质疏松的作用机制

目的 探讨AGEs对骨质疏松症的作用机制.方法 取SD大鼠腹腔内注射STZ诱导建立糖尿病骨质疏松动物模型,观察AGEs血清学、骨密度、骨组织中BMP-2基因、骨密度及骨代谢的变化.结果 糖尿病大鼠BMD、生物力学指标、骨组织形态计量学反映成骨活性的参数均降低,AGEs水平较正常对照组明显升高(P<0.05).糖尿病组BMP-2 mRNA和蛋白表达水平均较正常对照组明显降低.血清AGEs与BMP-2 mBNA和蛋白表达呈显著负相关,相关系数分别为-0.715(P<0.05)、-0.621(P<0.05).结论 糖尿病大鼠血清AGEs含量显著增高,与BMP-2 mBNA和蛋白表达呈显著负相关,AGEs和BMP-2均参与了糖尿病骨质疏松的发生发展.     

miRNA促进糖尿病足溃疡愈合的作用

糖尿病足溃疡(DFU)是DM慢性并发症之一,需有效治疗手段促进创面愈合,减少不良事件发生.DFU患者因创面组织血管生成受损、炎症反应异常、成纤维细胞及角质形成细胞的迁移增殖改变等,严重影响创面愈合.miRNA在生物体内表达高度保守稳定,是调节多种生物学过程的核心因子,可靶向调控影响DFU愈合的多种基因及信号转导分子表达...     

糖基化终产物对糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶2表达的调节

目的 观察糖基化终产物(AGEs)对糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)表达的调节和意义.方法 诱导糖尿病模型后,立即给予干预组糖尿病大鼠氨基胍.第12周末检测尿白蛋白排泄率(UAER)、肾脏系膜外基质增生(MME),测定肾内ACE2、ACE蛋白表达,计算ACE2/ACE比值,并检测肾脏ACE2mRNA水平.结果 与糖尿病对照组相比,氨基胍干预组UAER及MME降低(P< 0.05),肾脏ACE2表达及ACE2/ACE比值增加(P< 0.05).结论 AGEs可下调糖尿病大鼠肾脏ACE2表达,减少ACE2/ACE比值,可能是导致糖尿病肾病的重要原因之一.     

糖尿病大鼠甲状腺组织TG,TPO,TSHR与RAGE mRNA表达的实验研究

目的 探讨糖尿病大鼠甲状腺组织甲状腺球蛋白(TG)、甲状腺过氧化物酶(TPO)、促甲状腺激素受体(TSHR)与晚期糖基化终末产物受体(RAGF)mRNA表达的变化.方法 Wistar大鼠112只,随机分为糖尿病组(DM 组)27只、糖尿病氨基胍治疗组(AG组)28只、糖尿病胰岛素治疗组(INS组)32只和对照组(N组)25只,采用逆转录-聚合酶链反应检测造模后12和20周各组大鼠甲状腺组织TG、TPO、TSHR和RAGE mRNA的表达.结果 TG mRNA表达:12周各组之间无统计学差异(P>0.05).20周DM组低于AG组(P<0.01)、INS组(P<0.01)和N组(P<0.01).后3组间无统计学差异(P>0.05).TPO mRNA表达:12周DM组低于AG组(P<0.05)、INS组(P<0.001)和N组(P<0.001),AG组低于INS组(P<0.001)和N组(P<0.001),INS组低于N组(P<0.01).20周DM组低于INS组(P<0.01)和N组(P<0.001),与AG组无统计学差异,AG组低于INS组(P<0.05)和N组(P=0.001),INS组与N组无统计学差异.TSHR mRNA表达:12周DM组高于AG组(P<0.05)、INS组(P<0.05)和N组(P<0.01),后3组间无统计学差异(P>0.05).20周各组之间差别无统计学意义(P>0.05).RAGE mRNA表达:12周和20周均表现为DM组高于AG组(P<0.001)、INS组(P<0.01)和N组(P<0.001),INS组高于AG组(P<0.05)和N组(P<0.01),AG组与N组无统计学差异.结论 糖尿病大鼠甲状腺组织TG mRNA、TPO mRNA表达降低,TSHR mRNA表达增高,可能与高糖毒性所致甲状腺组织RAGE mRNA表达增高有关.     

糖基化终末产物和磷酸化肌球蛋白轻链在糖尿病结肠动力障碍中的作用

背景:结肠动力障碍是糖尿病(DM)的常见并发症。糖基化终末产物(AGEs)在DM患者体内显著升高,然而其在DM结肠动力障碍中的作用尚未完全明确。目的:探讨AGEs和磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)在DM结肠动力障碍中的作用。方法:将Sprague-Dawley大鼠随机分为DM组和正常对照组,以链脲菌素腹腔注射建立DM模型,8周后处死所有大鼠,取远端结肠组织。检测离体结肠肌条肌张力;以免疫组化染色检测结肠组织p-MLC表达;以蛋白质印迹法检测结肠组织p-MLC、总肌球蛋白轻链(t-MLC)表达。分离培养结肠平滑肌细胞(SMCs),以不同浓度、不同作用时间AGEs作用于SMCs,以蛋白质印迹法检测SMCs的p-MLC、t-MLC表达。结果:与正常对照组相比,DM组大鼠结肠平滑肌张力显著减弱[(0.89±0.09)g对(1.98±0.12)g,P0.05],DM组大鼠结肠组织pMLC/t-MLC/β-actin水平显著降低(0.98±0.10对1.61±0.12,P0.05)。SMCs经不同浓度、不同作用时间AGEs干预后,p-MLC/t-MLC/β-actin水平显著降低。结论:DM结肠动力障碍可能由AGEs抑制SMCs中MLC磷酸化所致。     

人组织激肽释放酶对糖尿病肾病大鼠的影响

目的：探讨基因重组人组织激肽释放酶（KLK）对大鼠糖尿病肾病的影响。方法：大鼠经链脲佐菌素诱导制成糖尿病（DM）模型于第8、12、16周留取尿标本。比色法检测大鼠血浆KLK变化，放射免疫技术、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫组化技术测定肾组织一氧化氮（NO）、环磷腺苷（cAMP）、血内皮素1（ET-1）变化及光镜电镜观察肾组织形态改变。结果：（1）DM组与正常对照组（C）组大鼠比较，体重（BW）、血浆KLK活性、肾组织中NO、cAMP含量下降（P〈0．01或P〈0．05）。而DM组的血糖（BG）、血肌酐、血尿素氮（BUN）、肾重（KW）体重比值、ET-1、尿白蛋白（Ualb）排泄率、24h尿蛋白定量均高于（NC）组（P〈0．01或P〈0．05）。（2）糖尿病KLK治疗组（DK）组与NC组大鼠比较，BW、血浆KLK活性、肾组织中NO、cAMP含量下降（P〈0．01或P〈0．05）；而BG、KW／BW、Ualb排泄率、24h尿蛋定量均高于c组（P〈0．01或P〈0．05）。DM组、DK组间BG、BUN、BW、KW／BW无显著性差异，血浆KLK活性、肾组织中NO、cAMP含量，DK组明显高于DM组（P〈0．01或P〈0．05）。而血肌酐、Ualb排泄率、24h尿蛋白定量则显著低于DM组（P〈0．01或P〈0．05）。（3）①16周时，DM组血浆KLK活性明显低于8周时的水平（P〈0．01），明显较NC组降低（P〈0．01）；而DK组血浆KLK活性明显高于8周时的水平（P〈0．05），该组病变较DM组轻。②DK组12周、16周尿白蛋白排泄率均低于8周时的水平（P〈0．05），16周时，DK和DM比较尿白蛋排泄率差异显著（P〈0．05）。③16周时，DM组肾组织中NO、cAMP含量则明显低于C组（P〈0．01），而与DM组相比，DK组肾组织中NO、cAMP含量较高（P〈0．01或P〈0．05）。结论：给予外源性人组织KLK可抑制糖尿病大鼠肾小球系膜细胞增殖、基质增多，可使尿蛋白排泄减少，延缓糖尿病肾病的发展。     

吡哆胺和替米沙坦对大鼠腹主动脉平滑肌细胞增生、凋亡及血清糖基化终末产物的影响

目的 观察应用吡哆胺和替米沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)腹主动脉平滑肌细胞增生、凋亡和血清糖基化终末产物(AGE)、活性氧(SOD)的影响,探讨血管重塑的可能机制.方法 选取22周龄雄性SHR,随机分为高血压对照组(n=12)、替米沙坦组(n=12)、吡哆胺组(n=12)、替米沙坦与吡哆胺联合治疗组(联合治疗组,n=12)和正常对照组(n=12).测定各实验组大鼠的血压,ELISA法检测血清AGE,化学发光法测定一氧化氮(NO)、SOD,免疫组化法测定增殖细胞核抗原和凋亡指数.HE染色观察各组实验动物腹主动脉形态学变化.结果 替米沙坦组和联合治疗组的收缩压均明显低于高血压对照组(P均<0.01),而吡哆胺组无明显改变(P>0.05).替米沙坦组、吡哆胺组和联合治疗组血清NO和SOD水平均显著高于高血压对照组(P均<0.01),而且联合治疗组明显高于两个单药治疗组(P均<0.05).替米沙坦组、吡哆胺组和联合治疗组血清AGE水平均显著低于高血压对照组(P均<0.01),而且联合治疗组明显低于两个单药治疗组(P均<0.05).腹主动脉HE染色形态学观察显示替米沙坦组、吡哆胺组和联合治疗组血管平滑肌细胞的排列、增生,血管壁内膜完整性,弹力板受压和胶原纤维增生情况均明显优于高血压对照组.替米沙坦组、吡哆胺组及联合治疗组增殖细胞核抗原的表达均显著低于高血压对照组(P均<0.01),且联合治疗组更低于各单药干预组(P均<0.05).替米沙坦组、吡哆胺组和联合治疗组细胞凋亡指数均显著高于高血压对照组(P均<0.01),联合治疗组干预后的细胞凋亡指数高于两个单药治疗组(P均<0.05).结论 吡哆胺和替米沙坦可部分协同改善SHR腹主动脉的血管重构,可能与抑制氧化应激和AGE生成,抑制细胞增生核抗原和调节细胞凋亡有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of telmisartan and pyridoxamine on vascular smooth muscle cells (VSMCs) proliferation and apoptosis as well as abdominal aorta vascular remodeling in spontaneously hypertensive rats (SHRs). Methods SHRs randomly received placebo, telmisartan(6 mg*kg-1*d-1), pyridoxamine(200 mg*kg-1*d-1) or telmisartan (6 mg*kg-1*d-1) plus pyridoxamine (200 mg*kg-1*d-1, n=12 each) for 16 weeks. Wistar-Kyoto (WKY, n=12) rats serve as normotensive contro1. The systolic blood pressure (SBP) of rat was measured before and weekly thereafter. The serum advanced glycation end-products (AGEs) were detected by competitive ELISA. The serum super oxide dismutase (SOD) and nitric oxide (NO) were measured. The abdominal aorta were assessed by image analysis in HE stained sections. The VSMCs apoptosis and proliferation in abdominal aorta were detected with in situ end labeling technique and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunohistoehemistry staining respectively. Results SBP were significantly lower in telmisartan and telmisartan plus pyridoxamine therapy group than in placebo treated hypertensive rats while not affected by pyridoxamine (P>0.05). Activity of SOD and NO were significantly higher and AGEs significantly lower in telmisartan, pyridoxamine and combination therapy treated SHRs than in placebo treated hypertensive rats(P<0.01). The elmisartan, pyridoxamine and combination therapy can significantly inhibit the PCNA expression and significantly enhance the apoptosis value in abdominal aorta(P<0.01). The efficacy of combined treatment was significantly higher than telmisartan and pyridoxamine alone(P<0.05). Conclusion Telmisartan and pyridoxamine could attenuate abdominal aorta vascular remodeling via reducing oxidative stress and AGEs production as well as restoring the balance of VSMCs proliferation and apoptosis in SHRs abdominal aorta.     

锌原卟啉对糖尿病大鼠结肠动力及Cajal细胞的影响

目的 探讨血红素氧合酶(HO)阻滞剂锌原卟啉(ZnPP)对糖尿病(DM)大鼠结肠动力和Cajal间质细胞(ICC)的影响.方法 雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ),3 d后选取成功造模大鼠24只作为DM组,另取正常大鼠16只作为对照组.饲养6周时,选取DM组大鼠和对照组大鼠各8只,行碳末推进实验,确认有无胃肠动力障碍.剩余DM组大鼠第6周起予以干预,DM未干预组(8只)0.1 mol/L磷酸盐缓冲液腹腔注射,隔日1次,连续3周;DM+ZnPP组(8只),ZnPP 10 μmol/kg腹腔注射,隔日1次,连续3周.对照组(8只)予以膜腔注射0.1 mmol/L磷酸盐缓冲液.Western印迹法检测结肠组织HO-1、HO-2和c-kit表达.免疫组化法测定结肠组织HO-1、HO-2和c-kit阳性细胞面积.结果 DM未干预组胃肠推进指数为(63.0±1.2)%,较对照组显著减低[(71.85:2.0)%,P<0.05];而DM+ZnPP组胃肠推进指数为(72.5±2.6)%,较DM未干预组明显改善(P<0.05),且与对照组差异无统计学意义(P>0.05).DM+ZnPP组近、远端结肠HO-1表达明显下降(P<0.05).DM未干预组和DM+ZnPP组近端结肠HO-2表达均较对照组显著减少(P<0.05).DM未干预组近、远端结肠组织c-kit较对照组显著减少(P<0.05);DM+ZnPP组c-kit的表达较DM未干预组明显改善(P<0.05),且与对照组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 ZnPP可能通过阻滞HO-1对DM大鼠结肠Cajal间质细胞有保护作用,并改善其结肠动力障碍.     

三七总皂苷联合氨基胍治疗对糖尿病大鼠肾脏氧化损伤的影响

目的 研究三七总皂苷联合氨基胍治疗对糖尿病大鼠肾组织氧化损伤的影响及其机制.方法 清洁级健康雄性SD大鼠48只,腹腔注射链脲佐菌素,建立糖尿病大鼠模型,按数字表法随机分为糖尿病模型组(n=12)、三七总皂苷治疗组(n=12)、氨基胍治疗组(n=12)和三七总皂苷+氨基胍联合治疗组(n=12);另设正常对照组(n=12).第4、8周应用比色法测定血清及肾皮质超氧化物歧化酶及丙二醛含量,采用荧光光谱法测定血清和肾皮质晚期糖基化终产物含量,行肾组织PAS染色并测定肾小球平均截面积,计算肾小球平均体积.采用单因素方差分析进行组间比较.结果 三七总皂苷+氨基胍联合治疗组血清及肾皮质晚期糖基化终产物(F=36.017,P<0.01;F=8.213,P<0.01)、丙二醛(F=8.683,P<0.01;F=14.615,P<0.01)、内生肌酐清除率(F=7.233,P<0.01)、肾小球平均截面积(F=24.317,P<0.01)、肾小球平均体积(F=26.145,P<0.01)、尿蛋白量(F=17.108,P<0.05)、肾脏重量(F=5.182,P<0.05)、肾脏肥大指数(F=50.169,P<0.01)低于糖尿病模型组,血清及肾皮质超氧化物歧化酶(F值分别为6.260、7.666,均P<0.01)、体重(F=10.449,P<0.05)高于糖尿病模型组.三七总皂苷+氨基胍联合治疗组血清丙二醛低于氨基胍治疗组(F=8.683,P<0.05),肾皮质丙二醛低于氨基胍治疗组和三七总皂苷治疗组(F=14.615,P<0.05),血清晚期糖基化终产物低于氨基胍治疗组和三七总皂苷治疗组(F=36.017,P<0.01或<0.05),肾皮质晚期糖基化终产物低于氨基胍治疗组和三七总皂苷治疗组(F=8.213,P<0.05).8周末时,三七总皂苷+氨基胍联合治疗组肾小球平均截面积、肾小球平均体积均低于三七总皂苷治疗组(F值分别为24.317、26.145,均P<0.05)和氨基胍治疗组(F值分别为24.317、26.145,均P<0.05).结论 三七总皂苷+氨基胍联合治疗可通过减轻肾组织氧化应激反应、减少肾组织晚期糖基化终产物的生成与蓄积对糖尿病大鼠肾脏起到保护作?     

葛根素降低糖尿病大鼠血清糖基化终产物水平和单核细胞趋化蛋白1含量

目的　研究葛根素对糖尿病大鼠糖基化终产物 (AGEs)水平和单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)表达的影响。方法　将大鼠随机分为正常对照组 (CON)、糖尿病组 (DM )、糖尿病氨基胍治疗组 (AG )和糖尿病葛根素治疗组 (PU )。腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型 ,检测血清中AGEs(荧光法 )和MCP 1(ELISA)水平 ;病理切片PAS染色及电镜观察肾组织的病理改变。免疫组化检测肾皮质MCP 1的蛋白表达水平。结果　DM组血清AGEs和MCP 1水平较PU组和AG组明显增高 (均P <0 .0 5 ) ;电镜发现两个治疗组的肾小球基底膜和心肌细胞病理改变程度比糖尿病组轻 ;肾小球内皮细胞和系膜区MCP 1免疫组化染色阳性细胞数明显比糖尿病组少。结论　葛根素能降低糖尿病大鼠血清AGEs和MCP 1水平 ,减少肾皮质中MCP 1的表达 ,减轻肾脏和心肌的病变程度     

糖尿病大鼠肾脏髓质水通道蛋白2的表达和意义

目的 检测链脲佐菌素诱导的糖尿病（DM）大鼠。肾脏髓质集合管水通道蛋白2（AQP-2）的变化。方法 实验大鼠分为正常对照组（Con组）和糖尿病组（DM组）。在成模12周后，分别用光学显微镜、电子显微镜等方法观察。肾脏形态变化，用免疫组织化学、核酸原位杂交和逆转录PCR方法检测DM大鼠肾髓质集合管AQP-2的表达。结果 （1）实验初DM组与Con组之间血糖、体重差异无统计学意义（P〉0．05），但12周时DM组血糖明显升高（P〈0．01），尿量高于Con组（P〈0．01），体重明显低于Con组（P〈0．01），DM组相对。肾重高于Con组（P〈0．01），二组间血肌酐无明显变化（P〉0．05）。（2）DM组尿渗透压低于Con组（P〈0．05），血渗透压高于Con组（P〈0．05）。（3）DM组大鼠血浆加压素水平比Con组明显升高（P〈0．05）。（4）光镜下。肾脏结构未见明显改变，电镜下可见。肾脏髓质集合管亮细胞和暗细胞结构改变。（5）DM大鼠肾脏髓质集合管AQP-2mRNA及蛋白质的表达增加。结论 DM大鼠肾脏髓质AQP-2mRNA及蛋白质的表达增加，并伴有早期。肾脏病理改变。尿AQP-2有望作为糖尿病。肾病早期诊断指标。     

银杏叶提取物对老龄大鼠心肌保护作用的研究

目的 探讨银杏叶提取物对老龄大鼠心肌的保护作用.方法 选择20月龄大鼠,分别给予银杏叶提取物(EGB)和非酶糖基化产物(AGEs)交联结裂解剂(ALT-711)灌胃,经16周治疗后,观察心肌内AGEs、血清内抗氧化活性物质超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)及氧化代谢产物丙二醛(MDA)的含量,观察心肌细胞内线粒体DNA的缺失率及心肌超微结构的改变.结果 老龄对照组大鼠和成年对照组比较.心肌细胞间质增生、肿大,线粒体和内质网膜受损,心肌组织内AGEs含量减少[分别为(33.5±1.3)AU/mgHYP和(18.1±1I 2)AU/mgHYP,t=7.18,P<0.05],血清中SOD和GSH-PX减少[分别为(138.4±3.8)U/ml和(1283.8±28.8)U/ml、(227.7±13.8)U/ml和(2114.1±135.9)U/ml,t分别为-19.59和-18.79,均P<0.01],MDA增多[分别为(6.7±0.6)mmol/ml与(4.1±1.O)mmol/ml,t=7.18,P<0.05],线粒体mtDNA缺失率增多[(0.1805±0.0718)%和(0.0060±0.0001)%,t=6.98,P<0.01],EGB和ALT-711治疗组与老年对照组比较,心肌内AGEs产物减少(P<0.05).血清内SOD、GSH-PX抗氧化物质增多(P<0.05),血清氧化代谢产物MDA减少(P<0.05),mtDNA缺失率减少(P<0.01).结论 老龄大鼠心肌老化和非酶糖基化及氧化应激相关,EGB和ALT-711同样具有抑制非酶糖基化和抑制氧化应激的作用,通过对心肌内线粒体mtDNA缺失率的抑制,具有抗衰老作用.     

罗格列酮对糖尿病合并高血压大鼠血压的影响及其机制

目的探索罗格列酮对糖尿病合并高血压大鼠血压的影响及其可能的机制。方法选择自发性高血压大鼠24只,采用链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病合并高血压模型,造模后,随机分为对照组12只,治疗组12只(罗格列酮灌胃),治疗4周,观察血压变化,检测血清NO和一氧化氮合成酶(NOS)含量,用免疫组织化学染色检测血管内皮素受体A(ETRA)和内皮素受体B(ETRB)表达变化。结果与对照组比较,治疗组大鼠血压明显降低(P<0.05);血清NO和NOS含量均明显增高[(29.98±4.86)μmol/L vs(38.68±4.57)μmol/L,P<0.01;(15.53±1.19)U/ml vs(17.51±1.48)U/ml,P<0.01];心肌ETRA水平无明显变化(P>0.05),而ETRB表达水平显著升高(P<0.01)。结论罗格列酮能明显降低糖尿病合并高血压大鼠的血压,产生降压现象的机制可能是通过选择性的上调ETRB表达,提高NOS活性,进而增加NO合成,促进血管舒张实现的。