长春花叶片中吲哚生物碱增产的研究

目的探讨乙烯利、乙酰水杨酸、色氨酸3种试剂对长春花植株中药用成分积累的影响。方法用不同质量浓度的3种试剂溶液分别处理温室盆栽长春花植株,2d后,测定叶片中的总吲哚生物碱含量,并采用RP-HPLC法测定长春碱和长春质碱的含量。结果3种试剂处理后吲哚总碱、长春碱、长春质碱的积累均有明显的提高,并确定了最适的处理质量浓度。结论3种试剂对长春花植物中吲哚生物碱的产生有明显的促进作用。     

EMS诱变的长春花细胞系突变研究

目的 通过化学诱变的手段筛选生长快且吲哚碱含量高的长春花突变细胞系。方法 用不同浓度的甲基磺酸乙酯(EMS)处理长春花愈伤组织，挑选成活愈伤组织块继代扩大培养，比较其与对照愈伤组织生长速率、吲哚总碱积累等方面的差异。结果 用EMS处理的长春花愈伤组织与对照相比，不仅生长快，并且吲哚总碱含量高。结论 EMS处理的愈伤组织发生了变异，变异种是所期望的比较理想的细胞系。     

盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响

目的 研究盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响。方法 用浓度为0、50、100、150 mmol/L的NaCl处理长春花愈伤组织,测定其鲜质量、干质量、丙二醛（MDA）量、光合速率、呼吸速率等生理指标和阿玛碱的量。结果 盐胁迫显著地降低了长春花愈伤组织的鲜质量和干质量,提高了MDA量、光合速率和呼吸速率;在含有不同浓度NaCl的培养基上生长30 d后,愈伤组织的阿玛碱量随NaCl浓度的增加而逐渐降低;用不同浓度的NaCl溶液喷洒生长27 d的愈伤组织,发现3 d后50 mmol/L处理的愈伤组织中阿玛碱量比对照高出近1倍。结论 长期盐胁迫能够抑制长春花愈伤组织的生长,同时引起阿玛碱积累的减少;低浓度NaCl喷洒处理则对长春花细胞中阿玛碱的积累有较大的促进作用。     

长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关酶的分析

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织发生的过程中,叶片中含量较高的文多灵（ｖｉｎｄｏｌｉｎｅ）和长春质碱（ｃａｔｈａｒａｎｔｈｉｎｅ）迅速降解至极低水平,而在叶片中含量较低的阿玛碱（ａｊ－ｍａｌｉｃｉｎｅ）和蛇根碱（ｓｅｒｐｅｎｔｉｎｅ）的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。光照和黑暗中的变化趋势基本一致,但光照可提高过氧化物酶的活性,对培养物的长春质碱、文多灵和蛇根碱的合成有利。不同的培养基对生物碱的合成影响较大,２,４－Ｄ显著抑制生物碱的合成,持续光照使愈伤组织的生长受到抑制,使阿玛碱向其蛇根碱转化。     

长春花突变细胞生理特征的研究

目的研究以秋水仙碱处理的长春花突变细胞在继代培养过程中的生长规律、吲哚生物碱积累的规律及营养成分的适宜浓度等方面的特征,期望得到适于工业化细胞培养的理想材料。方法将突变细胞培养于MS固体培养基上,定期称取其鲜质量,用有机溶剂萃取吲哚生物碱,应用RP-HPLC法检测药用成分阿玛碱和长春质碱。结果突变细胞培养至第30代时,生长速度和吲哚总碱积累得最快,培养至第45代时,两者均明显下降。而药用成分的量于第20代达到最高;在培养基中添加适量的色氨酸能提高药用成分的量;培养基中Ca2 和Zn2 的质量浓度分别为1760和12.6mg/L时,明显促进了药用成分的积累。结论长春花突变细胞可能是一种适于工业化细胞培养的理想材料。     

长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织的过过程中,叶片中含量较高的文多灵和长春质碱迅速降解有低水平,而叶片中含量较低的阿玛码和蛇根碱的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。     

阳离子交换树脂纯化长春花中文多灵和长春质碱的工艺优选

目的:考察阳离子交换树脂不同洗脱溶剂纯化长春花中文多灵和长春质碱的效果,优选最佳工艺条件。方法:采用LSD-001大孔型阳离子交换树脂对长春花中文多灵和长春质碱进行纯化,以两种生物碱含量为指标,考察以氨水、氨性乙醇、酸水、酸性乙醇、盐醇为洗脱剂纯化两种生物碱的效果。结果:经过优选,离子交换树脂的最佳洗脱条件为:以80%乙醇(含1%氯化钠)洗脱剂洗脱时,两种生物碱的洗脱率最高。结论:优选得到的工艺纯化长春花中文多灵和长春质碱效果好,节省溶剂,工艺简单,可用于长春花中两种生物碱的分离纯化。     

用长春花细胞悬浮培养物生产泻花碱和其它吲哚生物碱

长春花的细胞培养受到特别重视是因为期待它能产生具有生理活性的吲哚类生物碱。组织培养中生物碱的产生可以看作是一个受环境条件和研究对象的基因所控制的分化过程。本文介绍了连续培养的愈伤组织和非常均匀外植体的细胞即生长阶段相同的蓓蕾花药悬浮培养物的变异性,只有采用3种长春花培养物和用诱变剂处理蓓蕾才可能引起这些变异。将几百株长春花连续培养的细胞悬浮液     

苦豆子组织培养及有效成分分析

对苦豆子愈份组织诱导培养基及愈伤组织生物碱成分作了研究,结果 Ms+2,4-D2.0+6-BA1.0为最佳培养基,CS-930薄层扫描测得愈伤组织中槐果碱和槐定碱的含量分别为0.0105%和0.0045%。     

复合酶解法提取长春碱的新工艺

长春碱是从夹竹桃科植物长春花中提取的一种具有显著抗癌活性的二聚吲哚类生物碱,同时它也是合成其它长春碱类抗肿瘤药物的主要原料.长春碱主要是从长春花中提取,目前国内外多采用溶剂提取和超临界萃取2种方法.     

长春花化学成分和药理作用研究进展

长春花属植物是原产于非洲东海岸的野生花卉,现已广泛分布于世界各地。长春花含有萜类生物碱、二聚吲哚生物碱、单吲哚生物碱等多种生物碱类活性成分和黄酮类成分。近年来长春花中单体成分或结构修饰物作为药物被广泛用于治疗多种癌症、糖尿病、高血压及何杰金氏病。综述了近年来对长春花生物碱类和药理活性的研究进展,为更好地开发、利用长春花提供参考。     

提高长春花冠瘿细胞中吲哚生物碱含量的研究

研究了长春花冠瘿细胞接种物年龄与接种量对悬浮物培养细胞生物产量的影响,探讨了以大丽花轮枝孢菌的匀浆物为外源刺激物处理冠瘿细胞,对细胞生长和吲哚生物碱积累的作用,确立了外源刺激物产生效应的最适条件。     

长春花毛状根再生植株的获得及抗癌生物碱的产生

目的 建立长春花转基因毛状根再生植株快速繁育体系,获得生物碱量提高的长春花再生植株。方法 研究外源植物生长调节剂对长春花毛状根愈伤组织诱导、不定芽分化、不定根分化和再生植株移栽的影响,采用HPLC法测定长春花再生植株生物碱量,并采用定量PCR技术分析目的基因的表达情况。结果 转基因长春花毛状根愈伤组织诱导和不定芽诱导的最佳培养基均是MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.3 mg/L,不定根分化的最适培养基是1/2 MS＋NAA 0.3 mg/L。采用炼苗的改进方法可使长春花再生植株的移栽成活率达90%。HPLC分析结果表明,长春花再生植株中长春碱、长春新碱和阿吗碱量分别比对照提高4.0、5.8、1.8倍,其中,优良单株OG30-3的长春新碱和长春碱量比对照提高7倍和10倍。定量PCR分析结果表明,转基因植株orca3基因和g10h基因的表达量比非转基因植株的高。结论 转基因长春花毛状根再生植株可促进抗癌生物碱的产生。     

真菌诱导子对白鲜细胞产生白鲜碱能力的影响

目的：研究提高白鲜悬浮细胞产生白鲜碱能力的方法。方法：将7种真菌诱导子溶液各1mL分别在白鲜悬浮细胞培养的早、中、末期（第4d、第8d、第12d）加入,共培养至第15d,测定产生的白鲜碱的含量。结果：7种真菌诱导子均能提高白鲜悬浮细胞中白鲜碱的含量,在细胞培养的3个不同时期加入真菌诱导子,以末期加入促进白鲜碱产生的效果最显著,中期加入效果次之,早期加入效果最差。结论：加入真菌诱导子能有效地提高白鲜碱的产量,且与加入时间有关。     

Isolation and characterization of microorganisms from instruments used by pedicurists operating within Lagos metropolis, Nigeria

Eight bacterial and five fungal species were isolated from swab samples taken from instruments used by pedicurists operating at three different sites in Lagos, Nigeria. The bacterial isolates included Micrococcus luteus, Micrococcus roseus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Hafnia spp, Shigella spp, Bacillus subtilis and Bacillus spp. The five fungal isolates were identified as Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Mucor spp, Trichophyton spp and Candida albicans. The presence of these microorganisms, some of which are pathogenic, is an indication that pedicurists could be contributing towards the spread of skin and nail infections within the Lagos metropolis.     

诱导子对黄芩毛状根生长及黄芩苷合成的影响

目的 考察诱导子对黄芩毛状根生长和黄芩苷生物合成的影响。方法 用非生物诱导子(Ca²⁺、Mg²⁺和Co²⁺)和从黑曲霉Aspergillus niger、米曲霉A. oryzae、蜜环菌Armillaria mellea中提取的真菌诱导子,与黄芩毛状根共培养;HPLC法测黄芩苷的量。结果 各诱导子对黄芩毛状根生长和黄芩苷合成有不同影响：黑曲霉诱导子和米曲霉诱导子质量浓度为40和20 mg/L时,Co²⁺浓度为1.53×10^-4 mmol/L时,黄芩苷的量从7.64%分别增至9.18%、8.81%和8.62%。结论 诱导子对黄芩毛状根次生代谢产物具有特异性,可选择性地促进某一类次生代谢产物的合成。试验证实黑曲霉诱导子、米曲霉诱导子和Co²⁺是适合黄芩毛状根代谢黄芩苷调控的诱导子。