黔产曼陀罗中东莨菪碱和莨菪碱的分布规律

目的:探索东莨菪碱和莨菪碱含量在曼陀罗植株中的动态变化规律,为合理、有效地开发曼陀罗资源提供理论依据。方法:利用HPLC检测不同时期曼陀罗再生植株各器官中东莨菪碱和莨菪碱的含量。结果:曼陀罗植株中东莨菪碱和莨菪碱的含量在不同时期和器官存在较大的差异,东莨菪碱在开花时期根中含量最高,达0.157mg/g,莨菪碱在种子中含量最高,达0.128 mg/g。结论:曼陀罗各器官中的东莨菪碱和莨菪碱的含量动态变化规律均为先增加后减少。     

白花曼陀罗毛状根的诱导及东莨菪碱和莨菪碱的合成

目的:建立白花曼陀罗毛状根诱导和培养体系并对毛状根中东莨菪碱和莨菪碱的动态合成进行初步研究。方法:以白花曼陀罗子叶为外植体,利用发根农杆菌C58C1诱导毛状根,测定白花曼陀罗毛状根的生长曲线及东莨菪碱和莨菪碱的动态合成曲线,利用HPLC测定不同毛状根单克隆系中东莨菪碱和莨菪碱的含量。结果:以野生白花曼陀罗的子叶为外植体,消毒后直接诱导毛状根,诱导率达70%,25 d液体悬浮培养的毛状根生物量积累及东莨菪碱和东莨胆碱含量达到最高。获得高产东莨菪碱的毛状根系M2和高产莨菪碱的毛状根系M1,毛状根中东莨菪碱和莨菪碱的积累效率分别是是野生白花曼陀罗叶片中含量的2.53,5.37倍。结论:白花曼陀罗毛状根诱导和培养体系的建立为实现东莨菪碱和莨菪碱的工业化大规模生产奠定基础。     

茉莉酸甲酯对曼陀罗毛状根中主要莨菪烷类生物碱成分积累和释放的影响

目的:研究茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MJ)对曼陀罗毛状根中主要次生代谢产物东莨菪碱和莨菪碱成分的积累和向培养基中的释放的影响.方法:1/2 MS液体培养C58C1农杆菌诱导的曼陀罗毛状根培养18 d后,液体培养基中加入化学诱导子——茉莉酸甲酯,采用HPLC测定MJ处理后不同浓度梯度及不同时间段(0,3,6,9,12 d)曼陀罗毛状根中东莨菪碱和莨菪碱的含量以及其在培养基中的含量.结果:曼陀罗毛状根经MJ处理后3,6,9,12 d的东莨菪碱的质量分数分别达0.419,0.439,0.431,0.374 mg·g-1,分别是同时期未经MJ处理的1.36,1.42,1.17,1.12倍;莨菪碱的质量分数达1.493,0.817,0.723,0.698 mg·g-1,分别是同时期未经MJ处理曼陀罗毛状根的2.28,1.11,0.63,0.70倍.结论:MJ能显著促进曼陀罗毛状根中东莨菪碱成分的积累并向培养基中释放;MJ能显著促进处理3d和6d后曼陀罗毛状根中莨菪碱成分的积累并向培养基中释放.     

天仙子与水蓑衣子的鉴别

<正> 天仙子,即《神农本草经》中的“莨菪子”,被列为下品,天仙子之名始见于《图经本草》。《药典》(一九七七年版)定为大毒药,系茄科植物莨菪Hyoscya-mus niqer的种子。功能为解痉、止痛、安神。主治胃痉挛疼痛,喘咳,癫狂。据《中药鉴别手册》记载,天仙子的化学成分含生物碱约0.2％,主要为莨菪碱Hyoscyami-ne C_(17)H_(23)O_3N、阿托品AtropineC_(17)H_(23)O_3N及东莨菪碱Scopolami-ne C_(17)H_(21)O_4N。此外尚含脂肪油。但济南不少医药单位却以爵床科植物水蓑衣Hyqrophila salicifolia(Vahl)Nees的种子误当天仙子药用。据《中药材手册》《中药大辞典》     

山莨菪根HPLC指纹图谱研究

目的:建立山莨菪根的HPLC指纹图谱,为其药材质量控制提供一种可靠的方法。方法:采用Ultimate AQ C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-10 mmol/L KH2PO4缓冲液(用H3PO4调节p H至3.0)为流动相梯度洗脱;流速1.0 m L/min;柱温30℃;检测波长210 nm;进样量10μL。并对测得指纹图谱进行相似度评价和主成分分析。结果:18批不同山莨菪根样品共确立了15个共有峰,建立了山莨菪根的HPLC对照指纹图谱,结合保留时间和紫外光谱,指认了樟柳碱、东莨菪碱、山莨菪碱、阿托品4个特征峰。18批野生山莨菪根的相似度在0.891~0.987之间。对15个共有峰进行主成分分析,综合评判得分在-0.85~0.89之间。结论:所建立的指纹图谱具有良好的精密度、重复性和稳定性,为山莨菪根的鉴别和质量控制提供了更全面的信息。     

离子对萃取比色法测定华山参片含量方法的改进

作者对溴甲酚绿法测定华山参片含量的方法进行了改进。本法在pH4.0时不经乙酰化处理对华山参片中三种莨菪类生物碱均呈良好的线性关系。方法简单,结果稳定,重现性好。并分别做了莨菪碱、山莨菪碱和东莨菪碱的回收率试验,以及本法与橙黄Ⅳ法作了比较。     

过表达莨菪h6h基因提高颠茄东莨菪碱含量的研究

文章采用代谢工程方法培育东莨菪碱高产转基因颠茄.根癌农杆菌遗传转化颠茄,过量表达东莨菪碱合成途径中限速酶基因h6h(Hnh6h),卡那霉素筛选获得转基因植株,快繁炼苗后,田间栽培至果期.基因组PCR鉴定转Hnh6h基因颠茄.SPSS软件分析转基因与非转基因颠茄株高、顶宽、主茎粗、叶长、叶宽、分支数和鲜重等性状的差异;HPLC测定其根、茎、叶、果中莨菪碱及东莨菪碱含量;采用qPCR技术测定各组织Hnh6h基因表达量.结果所获得的5个转基因颠茄株系(A8,All,A12,C8,C19)都能同时检测到Kanr和Hnh6h基因,在非转基因颠茄中没有检测到这2个基因;与非转基因颠茄比较,转基因颠茄株系的株高、顶宽、主茎粗、叶长、叶宽、分支数和鲜重等都没有降低,且部分性状优于对照.转基因颠茄叶片中东莨菪碱含量最高,且高于莨菪碱;不同转基因颠茄株系叶片中东莨菪碱含量依次为C8 ＞A12 ＞C19 ＞All ＞A8,C8的东莨菪碱质量分数(2.17 mg·g-l DW)比非转基因颠茄(0.42 mg·g-1 DW)提高4.2倍;在转基因颠茄根、茎、叶和果中都检测到Hnh6h基因表达,且在叶片中表达量最高,非转基因颠茄没有检测到Hnh6h基因表达.因此,过表达Hnh6h基因能够打破颠茄的东莨菪碱生物合成的限速反应,从而推动代谢流向东莨菪碱合成方向流动,提高了东莨菪碱合成能力,最终获得了东莨菪碱高含量的转基因颠茄.     

反相高效液相色谱法测定洋金花中东莨菪碱含量

建立了反相离子对色谱法测定洋金花中东莨菪碱含量的方法。用uporall—C_8柱(3.9×300mm),甲醇—水(76:24)含0.003mol/L十二烷基硫酸钠为流动相,紫外检测波长为210nm。东莨菪碱在0.5—2.5μg范围内呈良好的线性关系(γ=0.9991),测试样品的变异系数为0.52％—1.22％,平均回收率为101.3％(CV=1.12％,n=6)。     

莨菪浸膏片HPLC指纹图谱及莨菪烷类生物碱的定量分析研究

目的建立莨菪浸膏片的HPLC特征指纹图谱,并对其中阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱、樟柳碱4种莨菪烷类生物碱进行定量分析。方法采用GL Sciences Inc C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.05%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长218 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃,利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)"和SPSS 19.0建立莨菪浸膏片指纹图谱,并进行相似度评价及定量分析。结果标记共有峰14个,S1~S4以及S11与对照指纹图谱的相似度大于0.98,其他均大于0.995,表明12批莨菪浸膏片相似度良好。聚类分析结果显示,S1~S6聚为一类,其余样品聚为一类。定量分析结果显示不同批次的莨菪浸膏片中均含有阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱,但含量存在一定差异。结论该方法较好地反映了莨菪浸膏片中的生物碱组成信息,且操作简单,重复性好,为莨菪浸膏片的质量评价提供了更加全面、科学的数据。     

用新型HPLC法分析古柯叶中古豆碱

古豆碱(hygrine)是一种存在于许多植物如曼陀罗、莨菪、烟草和古柯中的生物碱。最近,发现该吡咯烷(pyrrolidine)生物碱是莨菪烷(tropane)生物碱莨菪碱和东莨菪碱的前体,这两种物质广泛用于许多药物制剂。植物组织中的古豆碱可用通用的色谱技术如薄层色谱(TLC)和毛细管气相色谱(CGC)进行常规分析。本文报道了提取古柯叶中古豆碱的改进方法和 HPLC 分析方法。     

HPLC法同时测定良姜胃疡胶囊中7种成分

目的建立HPLC法同时测定良姜胃疡胶囊(吴茱萸、高良姜、藿香等)中东莨菪苷、异嗪皮啶、东莨菪内酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸新碱、去氢吴茱萸碱的含有量。方法该药物70%甲醇提取液的分析采用Diamonsil C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长267、334 nm。结果 7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 7),平均加样回收率98.84%～102.63%,RSD 0.69%～2.00%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于良姜胃疡胶囊的质量控制。     

警惕茛菪中毒

我们在日常门诊工作中,常遇见这样的病例,有儿童在野外游玩或挖野菜时,误将莨菪幼苗当野菜,将莨菪根当野萝卜食用而中毒的,莨菪的生长,分布较广,其它地区也见有类似报道,宜广泛宣传提高警惕。莨菪,又名铃铛草、山烟等,为茄科植物,一年或二年生草本,具特殊臭味,(尸示)毒草类,在两千多年的《本草经》中将它列为下品(指莨荡子或横唐) 莨若的根、叶、花、均含有毒性很强的茛蓿碱东茛菪碱、阿托品等,误食其任何     

止咳平喘合剂中药用成分东莨菪碱的安全范围研究

目的测定止咳平喘合剂中东莨菪碱的含量,根据东莨菪碱的毒性用法用量判定是否符合药用量规定,并判定出止咳平喘合剂的用法用量是否在安全用量范围内。方法色谱柱采用ZORBAX SB-C18柱(4.6×250 mm 5-Micron),流动相为甲醇—水(40∶60∶含0.02 mol·L^-1醋酸钠、0.02%三乙胺、用冰醋酸调至pH为6),流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为205 nm,柱温是30℃。结果氢溴酸东莨菪碱在0.004~>0.016 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为100.1%,RSD=1.6。止咳平喘合剂成人每次口服量为50 mL,实验得到止咳平喘合剂中东莨菪碱含量为0.0075 mg·mL^-1,换算即得成人每次口服东莨菪碱量为0.375 mg。另《中国药典》2015年版一部规定洋金花内服用量为0.3~>0.6 g,洋金花原料以东莨菪碱计不得少于0.15%,折算东莨菪碱量为0.45~>0.9 mg,得知止咳平喘合剂中东莨菪碱的含量在相关规定的用药安全范围内。结论该方法可用于止咳平喘合剂中东莨菪碱的含量测定,本方法简单便捷、准确度高。     

柴达木枸杞化学成分的测定

目的测定柴达木枸杞Lycii Fructus化学成分的含有量。方法分光光度法测定多糖、总黄酮、类胡萝卜素含有量,HPLC法测定甜菜碱和东莨菪内酯含有量,凯氏定氮法测定蛋白质含有量,再进行主成分分析。结果 6个产地样品中类胡萝卜素、甜菜碱、东莨菪内酯含有量有显著差异(P0.05),而多糖、总黄酮、蛋白质含有量无显著差异(P0.05)。3个采摘期样品中各成分含有量也均无显著差异(P0.05)。德令哈市产样品的主成分综合得分最高,乌兰县产者次之。结论德令哈市产柴达木枸杞的质量最优。     

HPLC法测定止喘灵注射液中东莨菪碱的含量

目的采用高效液相色谱法测定止喘灵注射液中东茛菪碱的含量.方法采用Spheri sorb-C18柱(4.6mm×200mm);柱温25℃;流动相:甲醇-水(78:22),含0.005%十二烷基硫酸钠;流速1.0mL/min;检测波长210 nm.结果线性范围为0.6～4.2 μg,回归方程为:Y=173305X 2108,r=0.9978,平均回收率为98.94%,RSD=1.03(n=6).结论此方法准确、可靠,可用于该制剂中东莨菪碱的含量测定.     

茉莉酸甲酯对颠茄托品烷类生物碱代谢及相关基因表达的影响

莨菪碱和东莨菪碱是颠茄中重要的托品烷类生物碱次生代谢产物,具有多方面药理价值。该研究采用土培法种植颠茄实生苗,设置不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)处理,分析不同浓度MeJA对颠茄莨菪碱和东莨菪碱的含量、生物碱合成的上游物质以及关键酶基因表达量的影响。结果表明,MeJA浓度为200μmol·L-1时更有利于颠茄生物碱的积累;对腐胺(Put)及其合成的关键酶活性的测定发现,Put的含量与其合成的关键酶活性的变化基本一致,都随MeJA浓度升高先增加后降低,Put含量在MeJA浓度为200μmol·L-1时达到最高;对PMT,TRⅠ,H6H表达量的检测发现,200μmol·L-1MeJA处理下叶片和根部TRⅠ,H6H基因均有较高的表达水平,PMT基因表达量无明显变化趋势。以上结果说明,MeJA对颠茄莨菪碱和东莨菪碱合成的调控主要依靠影响关键酶基因的表达量发挥效用,适宜浓度茉莉酸甲酯提高了颠茄叶片TRⅠ和根部TRⅠ与H6H表达量,从而促进莨菪碱的合成和莨菪碱向东莨菪碱的转化,提高颠茄体内莨菪碱和东莨菪碱的积累。     

酵母提取物对颠茄毛状根氮代谢及次生代谢影响的机制探究

以颠茄毛状根为试验材料,向培养基中添加酵母提取物(yeast extract,YE),测定颠茄毛状根氮代谢关键酶的活性,各形态氮的含量,次生代谢前体物质含量,次生代谢途径中关键酶基因相对表达量以及主要托品烷类生物碱(tropane alkaloids,TAs)莨菪碱和东莨菪碱的产量,初步探究YE诱导合成颠茄毛状根次生代谢产物的机制。结果表明:较对照组而言,氮代谢关键酶硝酸还原酶(NR)和谷氨酰胺合成酶(GS)活性显著升高,谷氨酸脱氢酶(GDH)活性变化不显著。硝态氮,铵态氮含量显著下降,而可溶性蛋白,游离氨基酸,总氮含量均显著升高。此外,YE处理颠茄毛状根提高了次生代谢途径中的前体氨基酸(鸟氨酸和精氨酸)的含量以及代谢前体腐胺的含量,3个关键酶基因1,4-丁二氨-氮-甲基转移酶基因(putrescine N-methyl transferase,pmt)、托品酮还原酶-Ⅰ基因(tropinone reductase-Ⅰ,tr I)和莨菪碱6-β-羟化酶基因(hyoscyamine 6-β-hydroxylase,h6h)的相对表达量也呈现不同幅度的上升,最终导致莨菪碱和东莨菪碱产量的增多,在处理16 d后分别是对照组的3.09,1.85倍。这说明YE诱导氮代谢关键酶活性升高使氮代谢加速,为次生代谢中含氮化合物的合成提供更多原料,同时通过调控次生代谢途径中关键酶基因的表达,使莨菪碱和东莨菪碱产量提高。     

高压酒蒸黄连质量标准研究

目的:制定高压酒蒸黄连饮片的质量标准。方法:分别对高压酒蒸黄连饮片进行性状、薄层鉴别、显微鉴别、水分、总灰分和醇溶性浸出物测定;采用高效液相色谱法对酒蒸黄连饮片中的生物碱进行含量测定。结果:本品表面棕黄色至深棕色,微带焦斑,断面淡黄色至棕黄色,质硬,易折断;薄层鉴别与供试品和对照药材在相同位置有相同颜色的斑点;拟定酒蒸黄连饮片水分不得超过12.0%,总灰分不得超过3.5%,醇溶性浸出物不得少于15.0%;本品按干燥品计算,以盐酸小檗碱(C_(20)H_(18)ClNO_4)计,含小檗碱(C_(20)H_(17)NO_4)不得少于5.0%,含表小檗碱(C_(20)H_(17)NO_4)、黄连碱(C_(19)H_(13)NO_4)和巴马汀(C_(21)H_(21)NO_4)的总量不得少于3.3%。结论:初步建立了高压酒蒸黄连质量标准。     

高效液相色谱法测定喘平滴丸中东莨菪碱的含量

目的 建立测定喘平滴丸中东莨菪碱含量的高效液相色谱法.方法 采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)为色谱柱,以甲醇-0.001 mol·L-1磷酸(70:30)(流动相含0.02 mol· L-1十二烷基硫酸钠)为流动相,检测波长:216 nm,流速:1.0 ml·min-1,外标法定量.结果 东莨菪碱在0.028 5～0.285 μg范围内呈线性关系,方法回收率为98.86%(n=6),RSD为2.54%.结论 此法简便、准确,重复性好,可用于喘平滴丸中东莨菪碱含量测定.     

体外培养曼陀萝和天仙子毛发根中的莨菪烷衍生物的光谱研究

茄科植物含有丰富的生物碱,尤其是有解痉和麻醉作用的莨菪烷衍生物莨菪碱和东莨菪碱,它们是在茄科植物的根部合成的。近年,通过根器官生产象莨菪烷生物碱这样的天然产物的报道在增多,有希望的结果是通过发生根病土壤杆菌形成毛发根(hairy