庚型肝炎病毒的检测和临床研究

１庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）的检测１１ＲＴ－ＰＣＲ法ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ的检测，目前普遍采用的方法为ＲＴ－ＰＣＲ法，其敏感性、特异性均较好。但由于操作时间长，对人员、设备条件要求高，故大规模的流行病学研究还有待于可靠的ＥＬＩＳＡ检验抗体法的建...     

肝癌患者肝组织中丙型肝炎病毒的基因分型

肝癌患者肝组织中丙型肝炎病毒的基因分型［崔晓红等．中华医学杂志，１９９５；７５（２）：９２］用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例肝细胞癌患者肝组织中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，对其中１８例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本用ＨＣＶ非结构区－５（Ｎ...     

南京地区肝病患者丙型肝炎病毒基因型与乙型肝炎病毒亚 …

目的;了解南京地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）抗原亚型分布情况。方法：对１９９３－１９９５年住院肝病虱２１５７例,应用ＲＴ－ＰＣＲ,ＨＣＶ进行基因型,阳性克隆序列分析及ＨＢＶ亚型的检测。结果：ＨＣＶ ＲＮＡ阳笥率为８．７％。对１００例ＨＣＶ基因型分析,Ⅱ型占９１％,Ⅲ型占６％。ＨＢＶ亚型分析;ａｄｒ占５５．６％,ａｄｗ占３８．４％。     

系列PCR方法检测淋巴细胞白血病克隆性基因重排的选择应用

以１次、半巢式及多重ＰＣＲ方法扩增５８例淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ克隆性基因重排。结果显示：多重ＰＣＲ和１次ＰＣＲ的敏感度为１０￣（－４）～１０￣（－５）水平；半巢式ＰＣＲ敏感度可达１０￣（－５）～１０￣（－６）水平。ＩｇＨ和ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ重排阳性率为６７．２％和６２．０％；半巢式ＰＣＲ检测ＩｇＨ重排阳性率为７０．７％。上述结果表明：多重ＰＣＲ可同时检测两对目的基因，适于初治病例检测，而对缓解病例的检测则需采用敏感度较高的半巢式ＰＣＲ方法。     

长期血液透析患者庚型肝炎病毒检测100例分析

目的　研究血透患者中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）携带情况及影响因素。方法　应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，对我科血透中心１００ 例长期血透（＞ １ ａ）的患者及４００ 例非血透患者（对照组）血清中ＨＧＶ核糖核酸（ＨＧＶ－ＲＮＡ）进行测定。结果　血透组中２４％ ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性，明显高于正常人群的２％ （Ｐ＜ ０．０１）；ＨＧＶ阳性受血率明显增高，分别为７０．８％ 与５１．３％ （Ｐ＜ ０．０１），但均无临床症状；检测１９例ＨＧＶ 阳性血透患者干超滤液，其中均未发现ＨＧＶ－ＲＮＡ。结论　血透患者ＨＧＶ感染率高于普通人群，与输血量有一定相关，病毒不通过聚砜膜。     

用PTVS检测t（14；18）PCR产物的DNA序列

为确定聚合酶链反应（ＰＣＲ）和地高辛（ＤＩＧ）系统检测ｔ（１４；１８）的特异性，我们采用ＰＧＥＭ－Ｔｖｅｃｔｏｒ系统（ＰＴＶＳ）和双脱氧链终止技术克隆并测定了ＲＬ细胞系和一个ＮＨＬ患者－Ａｍｂｒｏｓｅｎ的ｔ（１４；１８）ＰＣＲ产物的ＤＮＡ序列。结果表明两者的ＰＣＲ扩增产物均为ｂｃｌ－２－ＪＨ融合基因片段，证实ＰＣＲ－ＤＩＧ系统是一种特异的检测ｔ（１４；１８）的方法。同时还表明用ＰＴＶＳ对ＰＣＲ。产物进行克隆测序优于直接用双脱氧法测序。     

一株庚型肝炎病毒NS3区和NS5区部分基因序列的分析

用ＲＴ－ＰＣＲ的方法从非甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病人血清中检测到一株庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）。其中扩增ＮＳ３区基因采用５６例循环周期减温ＰＣＲ方法；扩增ＮＳ５区基因采用３５个循环周期的正常ＰＣＲ方法。并对其ＰＣＲ产物进行了克隆测序。在ＮＳ３区，样品与ＧＢＶ－Ｃ和ＨＧＶ的核苷酸序列同源性分别为８４．２％和８９．９％；而在ＮＳ５区样品与ＨＢＶ－Ｖ和ＨＧＶ的核苷酸同源性分别为９４．９％和９８．     

国内外庚型肝炎病毒研究的新进展

国内外庚型肝炎病毒研究的新进展北京首都医科大学附属北京同仁医院超声波室（１００００５）范燕文关键词庚型肝炎病毒，国内外分类号Ｒ５１２．６继发现“甲、乙、丙、丁、戊”５种肝炎病毒后，尚有其它非肠道传播并引起人类致病的因子，ＨＧＶ／ＧＢＶ－Ｃ就是其中之一...     

非甲—戊型病毒性肝炎患者血清庚型肝炎病毒感染的研究

采用ＥＬＩＳＡ法及逆转录—ＰＣＲ（简称ＲＴ—ＰＣＲ）法检测３６例非甲—戊型肝炎患者血清庚型肝炎病毒抗体（简称抗ＨＧＶ）和庚型肝炎病毒（简称ＨＧＶＲＮＡ）。结果：７例（１９．４％）抗ＨＧＶ阳性，２例（５．４％）同时ＨＧＶＲＮＡ阳性；急性肝炎抗ＨＧＶ阳性者临床表现与抗ＨＧＶ阴性者无显著差异，慢性肝炎抗ＨＧＶ阳性者较抗ＨＧＶ阴性者轻。提示：ＨＧＶ可引起急、慢性肝炎，在非甲—戊型肝炎中占有一定比例，但不是主要原因。     

正常成人庚型肝炎病毒感染的血清学调查

正常成人庚型肝炎病毒感染的血清学调查袁锦丽（广西桂林医学院附属医院检验科桂林市５４１００１）关键词庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）；庚型肝炎病毒抗体（抗－ＨＧＶ）；感染；血清学１９９５年美国Ａｂｂｏｔ公司的Ｋｉｍ等及美国疾病控制中心（ＣＤＣ）的Ｂｒａｄｌｅｙ等...     

应用RT—PCR检测丙肝病毒246例分析

用ＲＴ－ＰＣＲ（逆转录聚合酶链反应）扩增丙型肝炎病毒５’端非编码（５’ＮＣＲ）序列，２４６例肝炎患者中ＨＣＶ ＲＮＡ（丙型肝炎病毒核糖核酸）阳性者４５例，阳性率１８．３％（４５／２４６），凡阳性者用酶联免疫法测定－ＨＣＶ（抗丙型肝炎病毒抗体），其中２４例测到抗－ＨＣＶ，阳性重叠率５３．３％（２４／４５），和ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ，能在抗－ＨＣＶ转阳以前检出ＨＣＶ ＲＮＡ，更早地确诊丙型肝     

应用RT－PCR检测丙肝病毒246例分析

用ＲＴ－ＰＣＲ（逆转录聚合酶链反应）扩增丙型肝炎病毒５′端非编码（５′ＮＣＲ）序列，２４６例肝炎患者中ＨＣＶＲＮＡ（丙型肝炎病毒核糖核酸）阳性者４５例，阳性率１８．３％（４５／２４６），凡阳性者用酶联免疫法测抗－ＨＣＶ（抗丙型肝炎病毒抗体），其中２４例测到抗－ＨＣＶ，阳性重叠率５３．３％（２４／４５），用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶＲＮＡ，能在抗－ＨＣＶ转阳以前检出ＨＣＶＲＮＡ，更早地确诊丙型肝炎。     

七株急性散发性戊型肝炎病毒部分核苷酸序列分析

比较我国流行性和散发性戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）的部分核苷酸和氨基酸序列及其与戊型肝炎流行的关系。方法应用逆转录套式聚合酶链反应法（ＲＴ－ｎＰＣＲ）从急性散发性戊型肝炎病人血清中扩增ＨＥＶ开放读码框架２（ＯＲＦ２）ｃＤＮＡ，并用ＳｅｑｕｅｎａｓｅＶｅｒｓｉｏｎ２．０ＤＮＡ序列分析试剂盒，经双脱氧核苷酸ＤＮＡ链末端终止直接测序法测定ＲＴ－ｎＰＣＲ扩增产物的核苷酸序列。结果从深圳、长春、杭州、西安、北京５个城市４１份急性散发性戊型肝炎病人血清中获得２８株ＨＥＶＯＲＦ２ｃＤＮＡ，对其中７株进行了核苷酸序列分析，表明它们与ＨＥＶ墨西哥株（Ｍ）的同源性为７８．９％～８０．２％；与ＨＥＶ缅甸（Ｂ）流行株（Ｅｐ）的同源性为９３．１％～９５．１％；与ＨＥＶ缅甸（Ｂ）散发株（Ｓｐ）的同源性为９２．３％～９４．２％；与ＨＥＶ中国新疆流行株ＣＨ１．１同源性为９６．５％～９８．９％；７株散发性ＨＥＶ间核苷酸序列的同源性为９５．７％～１００％。结论该７株散发性ＨＥＶ与ＨＥＶ（Ｂ）和ＨＥＶＣＨ１．１核苷酸序列的同源性较高，均属同一亚型。     

瘐型肝炎病毒的分子生物学研究

目的：了解瘐型肝炎病毒的国内外研究历史及在分子生物学特征和实验室诊断方面的最新研究进展。方法：以瘐型肝炎病毒（ＧＢｖｉｒｕｓ Ｃ／ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｇ ｖｉｒｕｓ）作为检索词，通过微机，在中国生物医学文献光盘数据库和ＭＥＤＬＩＮＥ光盘数据库中检索９５年以后庚型肝炎病毒研究方面的有关文献，并查阅原文，认真综合分析，结果：庚型肝病毒是１９９５年发现的一种新病毒，因其可能与人类肝炎相关，而引起生物医学界的广泛关注，目前，国内外已生并测定了不同庚型肝炎病毒株的全基因组序列，陆续开展了其分子生物学特征和实验室诊断方面的研究，并初步建立了检测ＨＧＶ感染的ＲＴ－ＰＣＲ法及酶联免疫法，结论：庚型肝炎病毒的有些基因结构与功能，基因变异与分型还不能完全定论，ＲＴ－ＰＣＲ检测方法和酶联免疫法的灵敏度或特异度还相对较低，尚需进一步研     

乙型肝炎病毒特异性核酶与丁型肝炎病毒重组体的构建

目的将重组丁型肝炎病毒基因组作为乙型肝炎病毒特异性核酶的载体,探讨解决核酶在实际应用中的保护性运载、靶向性和特异性问题。方法设计了乙型肝炎病毒特异性锤头型核酶结构,采用重组引物,结合“不对称ＰＣＲ”和“ＭｅｇａＰｒｉｍｅｒＰＣＲ”方法将所设计的锤头型核酶基因替代插入到了型肝炎病毒基因组５'端高变区,重组体经ＰＣＲ初步鉴定后,克隆到Ｔ载体（ｐＴＡｄｖ）Ｔ７启动子下游,经限制性内切酶酶切、序列测定分析。结果与结论证实该重组作为预期的乙型肝炎病毒特异性核酶－丁型肝炎病毒基因组重组体,为进一步的体外切割和细胞内与乙型肝炎病毒相互作用的研究提供了基础。     

正常人肝细胞中HBV—PHSA受体基因表达的研究

作者根据乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｄｒ型ＰｒｄＳ２基因序列设计合成一对聚合酶链反应（ＰＣＲ）引物，经特异性试验后，用于扩增正常人肝细胞中多聚人白蛋白受体（ＰＨＳＡｒ）基因转录产物。结果：ＲＴ－ＰＣＲ及ＲＮＡ－ＰＣＲ扩增结果均为阳性，而相应骨骼肌总ＲＮＡ扩增结果呈阴性，提示乙型肝炎病毒ＰｒｅＳ２区与ＰＨＳＡｒ基因外显子序列具有一定程度的同源性；同时表明ＰＨＳＡｒ基因在肝组织中处于表达状态，而对ＨＢＶ不     

用聚合酶链反应检测乙肝患者血清中的HBV－DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１１４例传染科门诊病人血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与ＨＢＶ有关的血清学标志（ＨＢＶＭ）进行了比较。结果表明：在９２和ＪＨＢｓＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者５０例，占５４．３４％；在２８例ＨＢｅＡｇ（＋）病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者２６例，占９２．８６％；在２０例ＨＢＶＭ均为阴性的病例中，ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者有６例，占３０．００％。证明ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ较用ＥＬＩＳＡ法检测抗原一抗体更加灵敏、可靠。     

丙型肝炎病毒山东分离侏核衣壳蛋白区cDNA的序列测定

①目的 通过核衣壳蛋白区（Ｃ区）基因序列分析，对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）山东分离株进行定型。②方法 应用反康 套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）方法，从山东省ＨＣＶ抗体阳性血清听主增出ＨＣＶ Ｃ区基因的一个片段（４３２ｂｐ），对其进行ＴＡ克隆及测序，并通过ＤＮＡＳＩＳ软件和Ｇｅｎｅｂａｎｋ进行序列分析。③结果此分离株与基因型１ｂ的ＨＣＶ分离株同源性最高，与４个已知１ｂ型分离株的核苷酸相应     

庚型肝炎病毒不同地理株5‘端非编码区序列的变异性分析

目的：为明确了解中国不同地区（广东，云南，香港）庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）株５‘端非编码区（ＮＣＲ）序列的差异。方法：采用逆转录巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，从广东省２例，云南省１例，香港３例共６例ＨＧＶ感染者血浆中扩增ＨＧＶ５’ＮＣＲ ｃＤＮＡ片段，为２３８ｂｐ，ＰＣＲ产物纯化后直接经对脱氧链末端终止法测定核苷酸序列。结果：中国ＨＧＶ株间５‘ＮＣＲ相应序列的同源性介乎９２．９３％￣９７．９８     

干扰素治疗丙型肝炎效果随访研究

目的：探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型与干扰素治疗后ＨＣＶＲＮＡ阴转远期效果的相关性。方法;采用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法。结果：干扰素治疗后,经过１８ｍｏ－２６ｍｏ的随访,Ⅱ－１ｂ型ＨＣＶＲＮＡ持续阴转率为２０．０％;Ⅲ／２ａ型为７０．０％,两型疗效相差非常显。结论;干扰素治疗丙型肝炎的疗效与丙型肝炎病毒基因型有关,对Ⅲ／２ａ型的疗效优于Ⅱ／１ｂ。