生化汤的提取工艺及药理实验研究

目的研究生化汤的提取工艺和药理作用。方法1.按生化汤处方当归和川芎的比例取药材512g(其中当归372g,川芎140g),按《中国药典》挥发油测定法测定挥发油含量。2.按生化汤处方各药材比例共取药材403g,加水煮二小时、滤过、定量1000ml。按《中国药典》高效液相色谱法测定阿魏酸含量。3.口服"生化汤液"对小鼠子宫重量的影响:取雌性小鼠按体重均匀分成4组,每组10只。按每10g体重皮下注射已烯雌酚注射液0.016ml(含16微克),每日一次,连给3日。阴性对照组、阳性对照组与生化汤组从注已烯雌酚的当日分别灌服生理盐水、生化汤液,连续灌胃8日,在最后一次给药后的2h,处死小鼠,取出子宫在电子天平上称重,再换算成每100g的子宫重量(mg/100g),t检验统计结果。4.口服"生化汤液"的镇痛试验(小鼠扭体法):取NIH小鼠60只,体重18～22g,雌雄各半,按体重及性别均匀分成5组,每组12只。灌胃给药后45分,腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml/只,观察注射醋酸溶液后10分钟内的扭体次数。T检验统计结果。结果1.挥发油的平均收率为85%,2.阿魏酸的平均收率为84.8%。3.小鼠口服生化汤液剂量组(50g/kg)中剂量组(20g/kg)均使雌激素增重之子宫重量减轻(P<0.01),均可对抗雌激素引起的子宫充血,增生肥厚,使子宫重量明显减轻。4.小鼠一次口服大剂量生化汤液(50g/kg)显著抑制腹腔注射醋酸引起的扭体反应,说明生化汤具有一定的镇痛作用。结论生化汤采用挥发油提取工艺和水提工艺可使有效成分平均收率达85%。说明生化汤的传统煎煮方法具有合理性。生化汤可对抗雌激素引起的子宫充血,增生肥厚,使子宫重量明显减轻和显著抑制腹腔注射醋酸引起的扭体反应,具有一定的镇痛作用。本药理实验为生化汤传统医学临床治疗产后血虚受寒恶露不净,小腹冷痛提供了作用原理的依据。     

静脉注射士的宁对氯胺酮镇痛作用的影响

[目的]探讨甘氨酸受体与氯胺酮镇痛作用的关系。[方法]在热板、扭体法实验中,观察不同剂量的士的宁对氯胺酮小鼠痛阈及扭体次数的影响。[结果]腹腔注射氯胺酮10mg/kg对小鼠热板法痛阈无影响（P﹥0.05）,20、40mg/kg可使小鼠痛阈增加（P﹤0.05）;腹腔注射氯胺酮10mg/kg对小鼠扭体次数无影响（P﹥0.05）,20、40mg/kg均可使小鼠扭体次数减少﹙P﹤0.05）;静脉注射士的宁0.25μg对腹腔注射氯胺酮（40mg/kg）小鼠痛阈无影响﹙P﹥0.05）;0.5、0.75、1.0μg可使氯胺酮小鼠痛阈减少﹙P﹤0.05）;士的宁（0.25、0.5、0.75、1.0μg）静脉注射对氯胺酮（40mg/kg）小鼠的扭体次数无影响﹙P﹥0.05）。[结论]氯胺酮在热板法和扭体法中产生的镇痛作用是不相同的,提示前者可能涉及甘氨酸受体,而后者与甘氨酸受体关系不大。     

头顶一颗珠水煎液对中枢神经系统的影响

目的 观察头顶一颗珠水煎液对小鼠中枢神经系统功能的影响.方法 将50只小鼠随机分为5组,模型组接1g/kg体重腹腔注射氟哌啶醇注射液,头顶一颗株水煎液高、中、低剂量组分别在注射氟哌啶醇的同时,按60、30、10ml/kg剂量腹腔注射头顶一颗株水煎液,对照组注射生理盐水(30 ml/kg),连续用药7d,观察头顶一颗珠水煎液对小鼠学习记忆功能的影响;将40只小鼠随机分为2组,分别腹腔注射头顶一颗珠水煎液(30 ml/kg)和生理盐水(30 ml/kg),连续用药7d后,观察皮下注射5％尼可刹米0.1 ml/10 g后小鼠惊厥发生次数和惊厥发生率;取160只小鼠,进行4项实验,每项实验取40只小鼠随机分为4组,分别腹腔注射头顶一颗珠水煎液(60、30、10 ml/kg)和生理盐水(30ml/kg),连续用药7d后:实验一测定小鼠15 min内的活动次数、实验二观察腹腔注射戊巴比妥钠(40 mg/kg)后小鼠入睡潜伏期和睡眠持续时间的变化、实验三观察腹腔注射0.7％醋酸溶液0.2 ml/10g后,10 min内小鼠扭体反应次数、实验四观察尾悬挂小鼠6 min内累积不动的时间.结果 用头顶一颗珠水煎液处理后的小鼠,自主活动明显受到抑制,能缩短戊巴比妥钠处理后的小鼠入睡潜伏期,延长入睡时间;可减少醋酸致小鼠扭体反应次数;能抑制尼可刹米致惊厥作用;能减少6 min内尾悬挂小鼠活动次数.结论 头顶一颗珠水煎液对中枢神经系统具有明显的抑制作用.     

氯胺酮的镇痛作用与阿片受体的关系

[目的]探讨氯胺酮的镇痛作用与阿片受体的关系。[方法]120只小鼠随机分成热扳法和扭体法2组。每组再分为2小组：对照组与氯胺酮组。对照组分别腹腔注射生理盐水和不同浓度的纳络酮；氯胺酮组腹腔注射氯胺酮20mg/kg，5min后分别注射生理盐水和不同浓度的纳络酮。在热板、扭体实验中，观察腹腔注射纳络酮对氯胺酮热板法痛阈及扭体次数的影响。[结果]纳络酮对氯胺酮小鼠的扭体次数无显著影响（P﹥0.01），但可减小其热板法的痛阈（P﹤0.01）。[结论]氯胺酮对热刺激的镇痛作用与阿片受体有关，而对化学刺激镇痛作用与阿片受体关系不大。     

南瓜脱糖发酵滤液急性毒性和防治小鼠糖尿病作用的研究

目的探讨南瓜脱糖发酵滤液的急性毒性和防治小鼠四氧嘧啶糖尿病的作用。方法急性毒性按GB15193—94方法。小鼠分组每天按剂量灌胃一次，然后腹腔注射四氧嘧啶生理盐水液进行预防高血糖试验。小鼠腹腔注射四氧嘧啶生理盐水液，制成糖尿病模型，分组进行降血糖实验。结果急性毒性实验，南瓜脱糖发酵滤液20-ml/kg体重剂量组和对照组，雌、雄小鼠均未见明显症状和体征，也无死亡。预防高血糖实验，南瓜脱糖发酵滤液20nd／kg体重剂量组，雌、雄小鼠空腹血糖值均明显低于对照组，分别P〈0．05或P〈0．01；并且体重也均明显高于对照组（P〈0．01）。降血糖实验，南瓜脱糖发酵滤液20ml/kg体重剂量组小鼠在实验末期血糖值明显降低，并且也明显低于对照组（P〈0．01）；并且其小鼠体重均明显高于对照组（P〈0．01），而饮水量明显低于对照组（P〈0．01）。结论南瓜脱糖发酵滤液对雌、雄小鼠经口LD50均大于20ml/kg体重，属无毒级。南瓜脱糖发酵滤液具有明显预防四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖值升高、体重减轻的作用；并且具有明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖值、促进其体重恢复、控制其饮水量、缓解烦渴症状的作用。     

一氧化氮对小鼠胚胎种植的影响

目的：评价一氧化氮对小鼠胚胎种植的影响。方法：受试昆明小鼠于妊娠第d3～d5分别腹腔注射NO供体硝普钠（SNP）1．0mg／kg、5．0mg／kg和10．0mg／kg，对照组小鼠注射等量的生理盐水；妊娠第6d颈椎脱臼法处死小鼠，肉眼观察每一侧子宫角孕囊数，形态计量学方法分析子宫内膜组织学变化，明胶酶谱法检测子宫内膜基质金属蛋白酶的表达。结果：①1．0mg／kgSNP组小鼠子宫角孕囊数与对照组比较无显著性差异（P〉0．05），5．0mg／kgSNP组小鼠宫角未观察到孕囊（P〈0．001），10．0mg/kg SNP组小鼠在注射药物20min后全部死亡；②1．0mg／kgSNP组与对照组小鼠子宫内膜均观察到明显的蜕膜样改变，丽组间腺体面积和间质面积比较无显著性差异（P〉0．05），5．0mg／kgSNP组小鼠子宫内膜未观察到蜕膜样改变，子宫内膜腺体面积明显低于对照组和1．0mg／kgSNP组（P〈0．001），间质面积明显高于对照组和1．0mg／kgSNP组（P〈0．001）；③1．0mg／kgSNP组与对照组小鼠子宫内膜均检测到酶原型MMP-2、激活型MMP-2和酶原型MMP-9的表达，5．0mg／kgSNP组小鼠子宫内膜仅检测到酶原型MMP-2的表达。结论：子宫内膜较高浓度的NO对胚胎种植具有明显的抑制效应，这种作用可能是通过影响MMP-2和MMP-9的表达及其活化以及干扰子宫内膜的蜕膜化实现的。     

用彗星试验检测苯并(a)芘致小鼠体细胞DNA的损伤

[目的]建立彗星试验检测苯并（a）芘腹腔染毒小鼠体细胞DNA损伤的方法。[方法]雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组和高、中、低剂量3个染毒组，每组4只。3个染毒组和溶剂对照组分别腹腔注射二甲基亚砜（0．01ml／g体重）和苯并（a）芘（250、125、62．50mg／g体重）。染毒3h后，处死小鼠，取出肝、肾和小肠组织制备单细胞悬液用于彗星试验。IMI彗星分析软件分析彗星尾距（oliver tail moment，TM）评价细胞DNA损伤的程度。[结果]高剂量组小鼠肝、肾和小肠细胞的彗星尾距值均增加，中、高剂量组小肠细胞的彗星尾距值均是溶剂对照组的5．22倍（P〈0．05）；中、高剂量组小鼠肾细胞的尾距值分别是溶剂对照组的8．27和7．16倍（P〈0．05）。高剂量组肝细胞的彗星尾距值是溶剂对照组的3．99倍。低剂量组仅小肠细胞的彗星尾距均值（1．285μm）增加（P〈0．05）。[结论]彗星试验可检测苯并（a）芘腹腔染毒小鼠肝、肾和小肠细胞的DNA损伤。     

几种螯合剂对锰致小鼠肺脏和睾丸毒性的解毒作用比较

[目的]寻找理想的锰中毒解毒剂。[方法]小鼠一次性腹腔注射MnCl2（100mg MnCl2／kg）24h后分别给予L组氨酸（L—His）、乙二胺四乙酸（EDTA）、二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC）、meso-2,3-二巯基丁二酸（DMSA）及N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）等五种螯合剂（2mmol／kg,腹腔注射）,观察小鼠肺脏、睾丸脂质过氧化物值（LPO）和组织中锰、钙、锌浓度的变化。[结果]小鼠一次性腹腔注射MnCl2（100mgMnCl2／kg）2d后,小鼠肺脏和睾丸中LPO值分别为（2．42±0．29）和（2．74±0．33）μmol／g．prot,锰浓度分别为（2．60±0．33）和（2．41±0．68）μg／g,均明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）.分别染锰24h后腹腔注射各螯合剂,治疗24h后L—His对锰引起的肺脏、睾丸LPO值和锰浓度的升高有显著的抑制作用。[结论]L-His对锰致小鼠肺脏和睾丸毒性有较好的解毒作用,且自身毒性小,有望成为理想的锰解毒剂。     

痛经宁胶囊对雌性幼鼠生殖器官发育的影响及其镇痛抗炎作用

目的:观察痛经宁胶囊(当归、川芎、香附等)对♀幼鼠生殖器官发育的影响及其镇痛抗炎作用.方法:对小鼠子宫、卵巢重量测定,记录小鼠扭体次数和热刺激痛阈,二甲苯致小鼠耳壳肿胀法,大鼠肉芽肿模型法及蛋清致大鼠足趾肿胀法.结果:痛经宁胶囊能明显增加♀幼鼠卵巢和子宫重量,减少醋酸所致小鼠扭体次数,延长小鼠热刺激痛阈,显著抑制二甲苯所致的小鼠耳壳肿胀度和肿胀百分率,显著抑制大鼠肉芽肿胀和蛋清所致大鼠足趾肿胀值及足趾肿胀百分率.结论:痛经宁胶囊能促进♀幼鼠生殖器官的发育,有镇痛抗炎作用.     

牡蛎提取物对高血糖小鼠保护作用

目的探讨牡蛎提取物对四氧嘧啶诱发的小鼠高血糖的保护作用。方法预先给小鼠牡蛎提取物灌胃，连续4周，然后腹腔注射四氧嘧啶，观察牡蛎提取物对小鼠血糖、体重、胸腺、脾脏重量的影响。结果牡蛎提取物可显著减低由四氧嘧啶所致的小鼠血糖升高的幅度（P〈0．01），增加小鼠免疫器官的重量（P〈0．05）；对正常小鼠血糖无明显影响。结论牡蛎提取物对四氧嘧啶所致小鼠血糖升高有显著的保护作用。     

谷胱甘肽对汞致肾细胞凋亡影响的实验研究

目的 探讨谷胱甘肽（GSH）对汞致肾细胞凋亡的影响，进一步阐明无机汞肾损伤的分子机制。方法 昆明种小鼠24只随机分成3组，即对照组、单纯汞染毒组和GSH干预组。单纯汞染毒组小鼠腹腔注射3．0mg／kg氯化汞（HgCl2）溶液，对照组腹腔注射0．9％的氯化钠溶液，注射量为每10g体重注射0．2ml。GSH干预组于注射3．0mg／kg，HgCl2溶液前2h腹腔注射3mmol／kg谷胱甘肽溶液。24h后将小鼠颈椎错位处死，制备透射电镜标本，观察凋亡细胞形态；免疫组化法检测凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白表达。制备单细胞悬液，用流式细胞仪进行凋亡细胞百分数分析。结果 对照组小鼠肾近曲小管细胞形态规则；单纯汞染毒组表现微绒毛排列紊乱，染色质聚集成块，核破碎释放出凋亡小体，凋亡小体被邻近细胞吞噬等典型细胞凋亡形态；GSH干预组显示接近正常的肾小管上皮细胞的形态。凋亡细胞百分数汞染毒组明显高于对照组（P〈0．01），GSH干预组明显低于汞染毒组（P〈0．01）。免疫组化检测GSH干预组bcl-2蛋白的表达明显高于汞染毒组（P〈0．01）；bax蛋白的表达显著低于汞染毒组（P〈0．01）。结论 GSH可以抵抗汞所致的肾细胞凋亡，使凋亡相关基因bcl-2蛋白的表达上调，bax蛋白的表达下调。     

口服二巯基丙磺酸钠对亚急性汞中毒大鼠防治效果的实验研究

给大鼠腹腔注射氯化汞溶液（０．５μｍｏｌＨｇ／ｋｇ体重），并同时经口投与０．１ｍｍｏｌ／ｋｇ的ＤＭＰＳ，每天一次，连续５天；或给大鼠腹腔注射氯化汞溶液（２．０μｍｏｌＨｇ／ｋｇ体重），每天一次，连续５天后再经口投与３次０．２ｍｍｏｌ／ｋｇ的ＤＭＰＳ，观察口服ＤＭＰＳ对尿汞和肝肾汞含量以及尿ＡＬＰ和尿ＮＡＧ酶活性的影响。实验结果显示口服ＤＭＰＳ能够促进染汞大鼠的尿汞排泄，降低肝脏、肾皮质的汞含量，减     

硒与铬对糖尿病小鼠糖代谢及抗氧化影响

目的观察硒、铬对实验性糖尿病小鼠糖代谢和抗氧化作用的影响。方法选取键康雄性昆明种小鼠，按200mg／kg剂量左下腹腔内1次性注射四氧嘧啶，制成糖尿病小鼠模型，分别按每天80和40μg／kg灌服亚硒酸钠和三氯化铬（Se^4＋和Cr^3＋），同时设正常对照组和模型对照组。记录各组每天饮水与食量，隔天称量体重1次，观察4周后禁食24h，眼眶采血，测定血糖及肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力及总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）水平。结果与模型对照组比较，硒、铬干预组的血糖水平均明显降低（P〈0．01），SOD、GSH-Px活性及T-AOC水平均明显升高（P〈0．05或P〈0．01），MDA水平明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论硒、铬具有降低实验性糖尿病小鼠血糖，增强其抗氧化能力的作用。     

用细胞转移法研究苯并（a）芘损伤机理

ＢＡＬＡ／Ｃ雌性小鼠一次腹腔注射２００ｍｇ／ｋｇ体重的苯并（ａ）芘（Ｂ（ａ）ｐ）．体液免疫功能受到明显的抑制，脾ＩｇＭ—ＰＦＣ和ＩｇＧ－ＰＦＣ抑制率分别为４４％和６４％．如果给Ｂ（ａ）ｐ染毒小鼠输入正常小鼠的Ｔ细胞或Ｂ细胞，可使受Ｂ（ａ）ｐ抑制的小鼠免疫功能恢复到接近对照组的水平．说明Ｂ（ａ）Ｐ可同时作用于Ｔ细胞和Ｂ细胞．     

汽油车尾气颗粒物对小鼠免疫功能的影响

运用大流量空气采样器采集汽油车尾气颗粒物,用其有机提取物注射小鼠,测定小鼠外周血白细胞分类、小鼠体重增长及脏器重量、抗体形成细胞试验及腹腔巨噬细胞吞噬功能试验４ 个指标。结果表明：小鼠腹腔染毒尾气颗粒物有机提取物（１０ｍｇ／ｋｇ 、４０ｍｇ／ｋｇ 、１６０ｍｇ／ｋｇ） 均可引起外周血白细胞中淋巴细胞比例降低、小鼠体重增长缓慢、脾脏与胸腺萎缩、抗体生成细胞分泌抗体减少、巨噬细胞吞噬功能受到抑制,并且均具有剂量反应关系。表明尾气颗粒物有机提取物对小鼠的免疫功能损伤是多方面的、广泛的。     

小鼠腹腔注射链脲佐菌素高血糖模型实验观察

目的：本实验采用小鼠腹腔注射链脲佐菌素，对形成的高血糖模型进行实验观察。方法：以150mg／kg体重剂量腹腔注射链脲佐菌素生理盐水溶液，观察成模率、6d、30d、45d血糖、体重变化。结果：造模后6d模型复制成功率为83．3％，体重变化与造模后血糖高低有关。结论：以150mg／kg体重剂量，小鼠腹腔注射链脲佐菌素生理盐水溶液，通过45d的饲养观察，空腹血糖值10～25mmol／L之间小鼠可以作为成功高血糖模型。     

康妇炎胶囊抗炎镇痛的药效学研究

目的研究康妇炎胶囊的抗炎、镇痛作用。方法通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性和琼脂致小鼠皮下肉芽肿实验观察康妇炎胶囊的抗炎作用,采用热板法和扭体法观察其镇痛作用。结果康妇炎胶囊能够显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀,显著降低小鼠腹腔毛细血管通透性,抑制小鼠皮下肉芽肿的形成;并明显降低热刺激所致的小鼠痛阈值,减少小鼠的扭体次数。结论康妇炎胶囊对炎症有明显的抑制作用,且有一定的镇痛效果。     

三甲基氯化锡对大鼠、小鼠和兔急性毒性及血清离子的影响

目的探讨三甲基氯化锡（TMT）对大鼠、小鼠和兔的急性毒性及其对血清钾、钠和氯等离子的影响。方法采用霍恩法测定TMT在大鼠、小鼠和兔的腹腔注射和经口途径LD50的染毒剂量，同时对染毒后的大鼠、小鼠和兔进行血清学离子（钾、钠、氯）分析。结果TMT的雌雄大鼠经口途径LD50均为14．7mg／kg，雌性小鼠的腹腔注射LD50为3．16mg／kg，经口LD50为4．64mg／kg，雄性小鼠腹腔注射LD50为3．83mg／kg，经口LD50为3．16mg／kg，雌性兔腹腔注射LD50为3．16mg／kg，经口为2．61mg／kg，雄性兔腹腔注射LD50为2．61mg／kg，经口为3．16mg／kg。通过对染毒组大鼠、小鼠和兔的血清进行离子分析，与对照组进行比较发现血清钾有明显的下降，血钠和血氯变化不明显。结论TMT对不同种属动物的急性毒性不同，但均可引起血钾下降。     

环磷酰胺对小鼠免疫抑制的动物模型建立

[目的]建立肿瘤化疗免疫抑制动物模型，为建立保健食品减轻化疗毒副作用功能的评价方法提供科学依：活。[方法]给予C57BL／6J正常小鼠和荷瘤小鼠腹腔内注射不同剂量的环磷酰胺(CP)，隔日连续腹腔注射4—5次，观察：对小鼠免疫学指标及肝肾功能的影响。[结果]正常小鼠和荷瘤小鼠腹腔注射20、50、100me／kg体重的CP后，各剂量组均出现不同程度的免疫抑制和肝肾功能损伤。①正常小鼠20mg／kg体重以上剂量组，白细胞计数、抗体生成细胞以及巨噬细胞功能显著下降，谷草转氨酶(AST)升高；50mg／kg体重剂量组的脾脏指数下降；50mg／kg体重以上剂量组天然杀伤细胞(NK)细胞活性均出现显著下降，以及谷丙转氨酶、尿素的升高。②荷瘤小鼠20mg／kg体重以上剂量组白细胞计数、巨噬细胞功能显著下降，50mg／kg体重以上剂量组脾脏指数、NK细胞活性、抗体生成细胞功能均出现显著下降，以及谷草转氨酶、各丙转氨酶、尿素的升高。③正常小鼠注射60mg／kg体重的CP后，血清白细胞介素-2及肿瘤坏死因子均出现显著下降；荷瘤小鼠注射60mg／kg体重的CP后，血清白细胞介素．2出现显著下降。[结论]给予C47BL／6J正常小鼠和荷瘤小鼠腹腔注射20-50mg／kg体重的CP，隔日连续45次，即可建立免疫抑制动物模型。建议采用正常小鼠免疫抑制模型。     

鞘内注射异氟烷对小鼠镇痛作用的影响

目的 探讨鞘内注射异氟烷（Iso）对小鼠的镇痛作用,以及探索Iso的镇痛剂量.方法 用扭体法和热板法观察鞘内注射Iso的小鼠的疼痛效应.结果 醋酸扭体实验中与aCSFⅠ组相比,除Iso1Ⅰ组外,其他两组均与之有差别（P＜0.05）;热板法中,Iso1Ⅱ、Iso2Ⅱ、Iso3Ⅱ各时点与aCSF相对应时点比,HPPT都有增加,改变有统计意义（P＜0.05）;Iso1Ⅱ、Iso2Ⅱ、Iso3Ⅱ各时点HPPT与各自基础值相比,亦有增加,且改变亦具有统计学意义（P＜0.05）;在10min时点,随Iso剂量的增大,HPPT增大（r=0.621,P＜0.05）,差异有意义.结论 Iso用于小鼠鞘内注射有一定的镇痛效果,且其效果有一定的剂量依赖性.