宁痫冲剂对戊四唑致痫大鼠脑源性神经营养因子蛋白表达的影响

[目的]探讨以升清降浊法组成的中药复方宁痫冲剂的抗痫作用机理。[方法]SD大鼠40只,随机分为5组:即正常组,模型组,宁痫冲剂高、低剂量组(10g/kg和5g/kg)及苯巴比妥组(60 mg/kg);除正常组外,其他4组均以戊四唑(PTZ)亚惊厥剂量35mg/kg诱导慢性癫痫模型,造模同时各组按设定剂量分别给药,1次/d,连续4周;动物处死后以免疫组织化学方法,观察宁痫冲剂对大脑额叶皮质、海马CA3区脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。[结果]模型组大鼠脑内海马、皮质区免疫标记阳性神经元数目均增多(P<0.05或P<0.01),标记强度增强;宁痫冲剂低剂量组能减少免疫阳性神经元数目(P<0.05或P<0.01),减弱免疫反应性。[结论]PTZ慢性诱导癫痫反复发作可导致脑内BDNF表达增强;宁痫冲剂的抗痫作用机制可能与降低BDNF蛋白表达有关。     

宁痫颗粒对耐药性癫痫大鼠c-fos基因表达的影响

目的：观察宁痫颗粒联合卡马西平对耐药性癫痫大鼠即早基因c-fos表达的影响,并探讨其作用机制。方法：Wistar雄性大鼠42只,按体质量随机分为假手术组、模型组、卡马西平＋宁痫颗粒高[（0.03＋4.80）g.kg-1.d-1]、中[（0.03＋2.40）g.kg-1.d-1]、低[（0.03＋1.20）g.kg-1.d-1]剂量组、宁痫颗粒组（2.40 g.kg-1.d-1）和卡马西平组（0.03 g.kg-1.d-1）,每组6只。采用海人酸海马CA3局部注射制作大鼠癫痫模型,术后第2天予苯妥英钠药物筛选14 d后制作耐药性癫痫模型。各组灌胃2周后免疫组织化学法检测大鼠即早基因c-fos表达的影响。结果：免疫组化实验显示：各治疗组大鼠耐药性癫痫模型颞叶皮层、海马CA3区c-fos阳性细胞较假手术组表达增强,密集分布,染色较深,同时又低于模型组;宁痫颗粒联合卡马西平各组均抑制c-fos蛋白的表达,作用优于卡马西平组（P〈0.05）。各组间比较无显著差异性,宁痫颗粒组与卡马西平组无统计学差异。结论：宁痫颗粒联合卡马西平能抑制即早基因c-fos表达,两者联合疗效明显增强,以联合宁痫颗粒高剂量组疗效最佳,但治疗组指标均完全恢复到假手术组水平。     

宁痫颗粒联合卡马西平对耐药性癫痫大鼠c-fos基因表达的影响

目的：观察宁痫颗粒联合卡马西平对耐药性癫痫大鼠即早基因c-fos表达的影响,并探讨其作用机制。方法：Wistar雄性大鼠42只,按体质量随机分为假手术组,模型组,卡马西平＋宁痫颗粒高[（0.03＋4.80）g.kg-1.d-1]、中[（0.03＋2.40）g.kg-1.d-1]、低剂量组[（0.03＋1.20）g.kg-1.d-1],宁痫颗粒组（2.40 g.kg-1.d-1）和卡马西平组（0.03.g.kg-1.d-1）,每组6只。采用海人酸海马CA3局部注射制作大鼠癫痫模型,术后第2天予苯妥英钠药物筛选14 d后制作耐药性癫痫模型。各组灌胃2周后免疫组织化学法检测大鼠即早基因c-fos表达的影响。结果：免疫组化实验显示：各治疗组大鼠耐药性癫痫模型颞叶皮层、海马CA3区c-fos阳性细胞较假手术组表达增强,密集分布,染色较深,同时又低于模型组;宁痫颗粒联合卡马西平各组均抑制c-fos蛋白的表达,作用优于卡马西平组（P〈0.05）。各组间比较无显著差异性,宁痫颗粒组与卡马西平组无统计学差异。结论：宁痫颗粒联合卡马西平能抑制即早基因c-fos表达,两者联合疗效明显增强,以联合宁痫颗粒高剂量组疗效最佳,但治疗组指标均完全恢复到假手术组水平。     

宁痫汤对戊四唑致痫大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响

【目的】探讨以升清降浊法组成的中药复方宁痫汤对实验性癫痫大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响。【方法】以戊四哇(PTZ)诱导SD大鼠癫痫模型,观察中药复方宁痫汤(由升降散合温胆汤化裁组成)的抗痫效应,采用氨基酸分析法测定大鼠海马、皮层组织γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)的含量,并与正常组、模型组以及西药(苯巴比妥)组相对照。【结果】低剂量宁痫汤和西药苯巴比妥均能改善癫痫模型大鼠的惊厥行为(P<0.05),均能升高癫痫模型海马和皮层中GABA含量、同时降低其Glu含量(与模型组比较,P<0.05或P<0.01),并且两组的作用基本相仿(P>0.05),而高剂量宁痫汤的作用则比西药组差(P<0.05)。【结论】宁痫汤对癫痫发作有拮抗作用,其作用机制可能与调节脑内GABA、Glu水平,从而改善脑神经元兴奋--抑制平衡失调有关。     

艾芬地尔对戊四氮致痫大鼠海马nNOS表达的影响

目的:观察艾芬地尔对戊四氮(PTZ)急性致痫大鼠海马一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响,探讨癫痫发生的机制及艾芬地尔的药理作用。方法:将60只大鼠随机分为空白对照组(A组)、PTZ致痫组(B组)、艾芬地尔干预组(C组),通过腹腔注射PTZ建立急性癫痫动物模型,并采用免疫组化技术观察海马nNOS的表达变化情况。结果:模型组各时间点nNOS水平较正常组各相应时间点明显升高(P<0.05);模型组nNOS在24h免疫反应阳性神经元AOD值达到最高;艾芬地尔干预组与模型组相比表达下降,各时间点AOD值均存在显著性差异(P<0.05)。结论:PTZ点燃癫痫大鼠海马组织nNOS表达明显增加,提示nNOS可能参与了戊四氮点燃癫痫的形成过程;艾芬地尔明显减少了nNOS阳性细胞的表达,有利于保护癫痫损伤后神经细胞的功能。     

平痫冲剂对戊四唑致痫大鼠乙酰胆碱和脑含水量影响的生物化学研究

目的通过平痫冲剂对实验性癫痫大鼠脑组织中海马内乙酰胆碱（Ach）、脑含水量的影响，探讨平痛冲剂抗癫痫的作用机制。方法将50只Wistar幼龄大鼠随机分为正常对照组、空白对照组、平痫冲剂小剂量组、平痫冲剂大剂量组、苯巴比妥对照组。分别对各组大鼠大脑Ach、脑含水量进行检测。结果平痛冲剂大剂量组、空白对照组、平痫冲剂小剂量、正常对照组与空白对照组对比，均有显著性差异（P〈0．01或P〈0．05）。结论平痫冲剂能明显降低实验性癫痫大鼠脑组织中Ach含量和脑含水量。其抗癫痫的作用机制可能是通过抑制大脑颞叶皮质及海马兴奋性神经递质受体的活性与表达，降低大脑皮质的兴奋陛，从而有效抑制癫痫发作。     

调督安神胶囊对PTX致痫大鼠海马神经元超微结构的影响

目的：观察调督安神胶囊对PTX致痫大鼠海马神经元超微结构的影响。方法：建立PTX癫痫大鼠模型。随机分为模型对照组，中药低、高剂量组及西药组。分别给予双蒸水和调督安神胶囊、西药灌胃。采用透射电镜法观察海马CA3区神经元超微结构的变化。结果：PTX致痫大鼠海马神经元水肿、变性，损伤明显。经过中药治疗后的大鼠海马神经元损伤较轻，尤以中药高剂量纽海马神经元损伤最轻。结论：调督安神胶囊可减轻海马神经元的损伤，进而起到神经保护作用，这可能是其改善癫痫大鼠学习和记忆障碍的机制之一。     

宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α影响的实验研究

目的：观察宁痫颗粒联合卡马西平对海人酸难治性癫痫大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平的影响,探讨其作用机制.方法：Wistar雄性大鼠42只,按体质量随机分为假手术组、模型组、卡马西平＋宁痫颗粒高（0.03＋4.80/g·kg-1·d-1）、中（0.03＋2.40/g·kg-1·d-1）、低剂量组（0.03＋ 1.20/g·kg-1·d-1）、宁痫颗粒组（2.40/g· kg-1·d-1）和卡马西平组（0.03/g· kg-1·d-1）,每组6只.采用海马CA3局部注射海人酸制作大鼠癫痫模型,术后第二天予苯妥英钠药物筛选14d后成功制作难治性癫痫模型.各组分别灌胃2周后股动脉采血,收集各实验组大鼠血清,采用免疫酶联法（Elisa法）,测定各实验组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平.结果：与卡马西平组比较,宁痫颗粒低剂量联合卡马西平组大鼠血清IL-1β、IL-6含量显著降低（P＜0.05）,宁痫颗粒中、高剂量组联合卡马西平大鼠血清IL-1β、IL-6含量极显著降低（P＜0.01）;宁痫颗粒低、中、高剂量联合卡马西平组大鼠血清TNF-α含量极显著降低（P＜0.01）.结论：IL-1β、IL-6、TNF-α共同参与了免疫反应,其水平的变化间接反映了脑组织损伤程度.表明宁痫颗粒联合卡马西平具有一定的免疫抑制作用,比单用卡马西平疗效显著,说明两者联合具有协同作用,其机制可能是通过抑制炎症反应从而阻断癫痫发作,达到治疗癫痫目的.     

槐定碱致痫大鼠海马组织超微结构的观察

目的建立槐定碱（sophoridine,SRI）致痫大鼠癫痫模型,电镜下观察槐定碱致痫大鼠海马组织超微结构的变化,探讨癫痫发病机制。方法将30只成年SD大鼠（雌雄不拘）随机分为生理盐水对照组（NS）、槐定碱致痫组（SRI）、苯巴比妥钠＋槐定碱组（PBS＋SRI）,每组各10只。腹腔注射大剂量槐定碱（47．83mg／kg）后,观察大鼠行为学变化以及应用电镜技术观察各组大鼠致病后海马CAI区和CA3区神经元组织病理学和形态学的改变。结果腹腔注射大剂量槐定碱后,大鼠出现了痫性行为发作;电镜下可见槐定碱致痫大鼠海马CAI区和CA3区神经元核膜双层结构破坏,神经细胞核严重固缩,染色质颗粒状聚集,线粒体肿胀,嵴断裂或消失,毛细血管内皮细胞核固缩。经苯巴比妥钠干预后,槐定碱致痫大鼠海马CAI区和CA3区神经细胞的损伤程度减轻。结论大剂量槐定碱可导致大鼠在体海马神经细胞损伤,从而诱发癫痫。     

中药复方对戊四氮致痫大鼠海马mGLuR1表达的影响

目的：观察戊四氮（PTZ）致痫大鼠海马神经元代谢型谷氨酸受体（mGluR1）表达以及中药复方AAP的脑保护作用。方法：动物随机分为6组,复制戊四氮致痫大鼠模型;于致痫后12h、2d、5d、7d相应时间点取材,制备脑标本;免疫组化技术检测大鼠海马神经元mGluR1表达。结果：与正常组比较,模型组mGluR1免疫反应阳性表达增加,差异显著（P〈0.05）;与模型组及丙戊酸钠组比较,中药复方AAPl、AAPm、AAPs组海马CA3区mGluR1阳性表达水平降低,差异显著（P〈0.05）。结论：戊四氮致痫大鼠海马mGluR1表达增加,mGluR1可能在PTZ致大鼠癫痫发作中起作用;中药复方AAP可降低mGluR1表达,对癫痫大鼠有脑保护作用。     

中药石菖蒲及其主要成分α-细辛醚对癫痫幼鼠惊厥行为及脑电图的影响

目的：观察中药石菖蒲及其主要成分α-细辛醚对戊四氮（PTZ）诱发的实验性癫痫幼鼠惊厥行为和额叶皮层放电的影响。方法：Wistar幼鼠随机分为正常对照组（N组）、致痫对照组（A组）、苯巴比妥钠组(B 组）、石菖蒲组（C组）和α-细辛醚组（D组）。除正常对照组外,各组幼鼠腹腔注射PTZ 60 mg·kg^-1建立癫痫动物模型。正常对照组和致痫对照组均给予生理盐水0.5 mL灌胃,其余各组分别给予苯巴比妥钠18 mg·kg^-1、石菖蒲2.35g·kg^-1、α-细辛醚29 mg·kg^-1灌胃。给药7 d后,除正常对照组外,各组幼鼠再次腹腔注射PTZ 60 mg·kg^-1,观察动物行为的改变,同时利用脑立体定位仪记录各组癫痫幼鼠脑部单侧额叶皮质的脑电变化。 结果：①动物行为学观察显示,与致痫对照组比较,药物治疗组幼鼠癫痫发作的潜伏期延长（P<0.05）,2 h强直-阵挛发作的次数减少（P<0.05）,发作持续时间缩短（P<0.05）。α-细辛醚、石菖蒲的上述作用较苯巴比妥钠弱（P<0.05）。②脑电图结果显示,与致痫对照组比较,药物治疗组幼鼠额叶皮质痫性波发生潜伏期延长（P<0.05）,2 h内异常放电频率下降,脑电波波幅下降（P<0.05）。α-细辛醚与石菖蒲对动物脑电的影响较苯巴比妥钠显著（P<0.05）。结论：石菖蒲及α-细辛醚均能有效抑制戊四氮诱发的幼鼠癫痫发作和额叶皮层的异常放电。     

补阳还五汤对大鼠全脑缺血再灌注的药效研究

【目的】比较补阳还五汤复方胶囊与原方汤剂保护和修复大鼠全脑缺血再灌注损伤神经细胞的作用,并从抗氧化角度探讨其作用机制。【方法】选用SD雄性大鼠,随机分为假手术组,模型组,补阳还五汤原方汤剂组(剂量为10 g.kg-1.d-1),复方胶囊高、中、低剂量组(剂量分别为7.56、3.78、1.89 g.kg-1.d-1);采用4血管闭塞法复制全脑缺血再灌注模型,比较补阳还五汤复方胶囊和原方汤剂对海马CA1区病理形态结构的修复程度,并对血清及脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及脑组织含水量进行测定。【结果】原方汤剂组及复方胶囊各剂量组对海马CA1区神经元细胞病理形态变化均有康复改善作用,且复方胶囊中剂量组作用最为显著;在血清和脑组织中,原方汤剂组及复方胶囊组均可使SOD活性显著升高,MDA含量显著下降(P<0.01),且以复方胶囊中剂量组作用最为明显;原方汤剂组及复方胶囊各剂量组均可显著降低脑组织含水量(P<0.01),其中复方胶囊高剂量组作用最明显。【结论】补阳还五汤原方汤剂及复方胶囊对大鼠全脑缺血再灌注损伤均有保护作用,但复方胶囊疗效更为确切。     

雌二醇对慢性脑缺血去卵巢大鼠脑病理改变的影响

目的：探讨苯甲酸雌二醇对大鼠额部皮质和海马CA1区细胞形态和数量的影响，初步研究雌激素对血管性痴呆（Vascular dementia,VD)大鼠的神经保护作用。方法：利用双侧颈总动脉持久性结扎及卵巢切除大鼠模型，利用光镜，电镜结合图像分析，观察大鼠额叶皮质和海马CA1区的病理和超微结构变化。结果：手术组较治疗组大鼠额部皮质和海马CA1区细胞形态改变明显，数量减少，统计学分析呈显著差异，结论：雌激素具有一定的神经保护作用，可以为缓解血管性痴呆的症状提供结构基础。     

内源性组胺对大鼠戊四唑点燃癫痫诱发记忆障碍的作用

目的：研究大鼠戊四唑点燃癫痫诱发记忆障碍的发病机制，并探讨内源性组胺对此类记忆障碍的作用。方法：大鼠隔日腹腔注射亚惊厥剂量（35mg／kg）的戊四唑，直至完全点燃。采用穿梭箱被动回避试验测定大鼠的记忆能力。化学荧光法测定脑内组胺含量。大鼠脑病理切片采用HE染色，在光学显微镜下计数海马完整神经元。结果：大鼠戊四唑点燃后记忆能力明显下降，表现为穿梭箱内被动回避反应潜时缩短，而腹腔内注射组胺前体物质组氨酸则阻断了被动回避反应潜时的缩短。戊四唑点燃后大鼠海马、丘脑和下丘脑组胺含量明显下降，同时点燃使海马CA1区和CA3区完整神经元数目分别减少至对照组的72．7％和78．9％。结论：戊四唑点燃癫痫可导致大鼠记忆能力下降，可能与癫痫造成的组胺能神经活性降低和海马神经元丢失有关。     

利鲁唑对戊四氮致癫痫大鼠海马CA3区IL-1β、TNF-α的影响

目的 探讨利鲁唑对戊四氮(PTZ)致癫痫大鼠海马CA3区白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 将45只大鼠按完全随机设计方法分为对照组、癫痫模型组(PTZ组)和利鲁唑组(Riluzole组),每组15只;造模大鼠连续给予PTZ(35 mg·kg-1·d-1)腹腔注射30 d,3次Ⅳ级或以上发作大鼠为癫痫造模成功;免疫组织化学法检测各组大鼠海马CA3区IL-1β、TNF-α的表达和分布.结果 对照组、PTZ组及Riluzole组大鼠的IL-1β阳性细胞平均光密度值(OD)分别为(0.210±0.002)、(0.241±0.002)和(0.220±0.002),不同组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);TNF-α阳性细胞OD值分别为(0.191±0.003)、(0.230±0.003)和(0.202±0.003),不同组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);大鼠海马CA3区IL-1β与TNF-α表达水平呈显著正相关(r=0.969,P<0.01).结论 利鲁唑通过抑制癫痫大鼠脑内神经细胞过度表达IL-1β、TNF-α,可能降低其对正常神经细胞的损伤作用,可能减缓癫痫发病对正常神经细胞的损伤,产生神经保护作用.     

PTX腹腔注射致SD鼠点燃癫痫模型

目的：观察不同剂量印防已毒（PTX）致SD鼠慢性点燃癫痫模型及药物对该模型的影响,方法：采用TPX腹腔注射制作SD鼠慢性点燃模型,并将其分为对照组,癫痫I组（PTX,1．5mg.kg^-1.d^-1),癫痫II组（TPX,2mg^-1.d^-1)和苯巴比妥钠干预组,观察发作情况,并做脑电图记录,结果：注药第20d时,对照组无癫痫发作,癫痫I组71％SD鼠（10／14）完全点燃;癫痫II组4只死亡,2只Ⅳ级,2只Ⅴ级;苯巴比妥钠干预组17％SD鼠（1／6）完全点燃,完全点燃的SD鼠在脑电图上出现典型尖波,棘波发放,结论：在该实验中,PTX腹腔注射致SD鼠点燃癫痫模型的较好剂量是1．5mg/kg^-1.d^-1,苯巴比妥钠可阻止该模型的形成。     

尼膜同对戊四氮致痫大鼠海马神经细胞凋亡和p~(53)蛋白表达的影响

目的 :探讨尼膜同对癫痫发作大鼠海马神经细胞凋亡与 p53蛋白表达的影响。方法 :采用戊四氮致痫大鼠模型 ,以原位末端标记 ( TUNEL)法检测凋亡细胞 ;免疫组化法检测 p53蛋白。观察大鼠癫痫发作后 48h其海马 CA1区神经细胞凋亡和 p53蛋白表达变化及尼膜同对它们的影响。结果 :戊四氮致痫后 ,大鼠海马 CA1区凋亡细胞和 p53蛋白表达均明显增加 ,p53蛋白表达与细胞凋亡呈正相关 ( r=0 .846,P<0 .0 0 1 ) ;尼膜同干预后 ,凋亡细胞数及 p53蛋白表达均显著性降低 ( P<0 .0 0 1 )。结论 :尼膜同对癫痫所致神经细胞凋亡有抑制作用 ,其抑制凋亡的分子机制可能是通过抑制 p53蛋白表达而实现的