密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞凋亡因子Bax、Caspase-3、Fas和FasL的影响

目的观察密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞Bax、Caspase-3、Fas和FasL表达的影响。方法 30只新西兰长耳白兔随机平均分为5组,分别为:A组:空白组,不灌胃;B组:模型组,不灌胃;C组:密蒙花颗粒剂组,灌胃药物为密蒙花颗粒剂;D组:安慰剂组,灌胃药物为生理盐水;E组:睾酮组,在兔大腿肌肉处注射丙酸睾酮注射液。除A组外,所有兔子在干预前的造模方式均为双侧睾丸及附睾切除术,并在造模前1天和造模后第30天测定SIT和BUT。干预30天后,将所有兔子处死,摘取泪腺组织进行伊红染色观察泪腺组织结构,免疫组化法检测各组泪腺组织中Bax、Caspase-3、Fas和FasL表达。结果 HE染色显示:密蒙花颗粒剂组兔子泪腺组织排列整齐,细胞结构清晰,有少量炎症细胞浸润和细胞凋亡,Bax、Caspase-3、Fas和FasL少量表达于细胞膜和细胞浆中。免疫组化检测显示密蒙花颗粒剂组Bax、Caspase-3、Fas和FasL平均光密度均较模型组减少(P0.01)。结论密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞Bax、Caspase-3、Fas和FasL表达具有抑制作用;密蒙花颗粒剂通过抑制泪腺组织中Bax、Caspase-3、Fas和FasL的表达减轻泪腺组织的凋亡,达到治疗干眼的目的。     

密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症模型角膜和泪腺组织的保护作用

目的探讨密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症动物模型角膜及泪腺组织的保护作用与炎症反应的关系。方法150只健康1月龄Wistar雄性大鼠随机分为5组(正常组、假手术组、手术对照组、雄激素治疗组、密蒙花总黄酮治疗组,分别用A、B、C、D、E组表示),每组30只。A组不作处理;B组只切开阴囊,不切除睾丸,作为假手术对照组;C、D、E三组实验鼠切除双侧睾丸及附睾。自造模后1周,待伤口基本愈合开始用药。A、B、C组以生理盐水灌胃,1次/天;D组用丙酸睾酮注射液大腿肌肉注射,1次/3天;E组以密蒙花提取物生理盐水混悬液灌胃,1次/天。各组实验动物分别于用药1、3、5个月后随机取10只,行Schirmer I试验(SIT)、泪膜破裂时间(break-up,BUT)及角膜荧光素染色检查并处死各组动物,取双眼泪腺、角膜组织进行光镜和透射电镜观察。结果SIT、BUT、角膜荧光素染色:A、B组这3项指标无明显变化(P0.05);C、D、E组去势治疗1个月,角膜荧光素染色、SIT、BUT各段时间差异均无统计学意义(P0.05);C组3个月起角膜荧光素染色阳性,且随实验时间延长而加重;5个月起泪液浸湿滤纸长度较实验前短、BUT明显低于正常对照组,且随观察时间的延长而缩短,差异有统计学意义(P0.05);D、E组于去势3、5个月后,角膜荧光素染色点较C组减少,SIT、BUT明显高于C组,差异有统计学意义(P0.05);D、E两组间3个月后,SIT、BUT及角膜荧光素染色差异无统计学意义(P0.05);D、E两组间5个月后,差异有统计学意义(P0.05)。角膜和泪腺结构:A与B各组结构均无明显改变;C组自1个月起结构开始改变,且随时间延长逐渐加重;D、E两组间结构改变较C组相比明显减轻。结论密蒙花总黄酮能减轻去势雄鼠逐渐加重的泪腺分泌功能损害和角膜上皮缺失并减轻其局部炎症反应,对干眼症模型角膜和泪腺有一定的保护作用。     

密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和FasL的影响

目的观察密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和Fas L的影响,探讨密蒙花颗粒剂对去势雄兔干眼症模型的疗效。方法将密蒙花原药材制备成颗粒剂。将30只健康成年新西兰长耳白兔(雄性),随机分为空白组(A组),模型组(B组),密蒙花颗粒剂组(C组),安慰剂组(D组),睾酮组(E组)5组,每组6只。除A组外其余4组实验用兔行双侧睾丸及附睾切除术。除A、B组外,从术后第3日开始C组予密蒙花颗粒剂,按100 mg/kg灌胃,3次/日;D组予生理盐水20 m L灌胃,3次/日;E组按2 mg/kg在大腿肌肉处注射丙酸睾酮注射液,每3日注射1次。各组实验用兔,分别于术前和术后第4周各进行1次SchirmerⅠ试验(SchirmerⅠtest,SⅠT)和泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT)测定。用药观察4周后采用空气栓塞法处死各组兔子,摘取双眼泪腺组织,采用免疫组化法对泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和Fas L的表达进行检测,并观察泪腺组织结构形态图。结果 (1)SⅠT及BUT结果:与本组术前及术后A组比较,B、D组SⅠT及BUT均明显下降(P0.01);与B、D组术后比较,C、E组SⅠT及BUT升高,且差异均有统计学意义(P0.01)。(2)Bax、Bcl-2、Fas、Fas L表达:与A组比较,B、D组Bax、Fas、Fas L表达均明显增多,Bcl-2表达明显减少(P0.01);与B、D组比较,C、E组Bax、Fas、Fas L表达均明显减少,Bcl-2表达明显增多(P0.01)。(3)Bax、Bcl-2、Fas、Fas L表达观察结果:A组:泪腺结构清晰,未见Bax、Bcl-2、Fas、Fas L表达;B组:泪腺结构模糊,Bax、Fas、Fas L均大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒,Bcl-2仅少量表达;C组:泪腺结构清晰,散见Bax、Fas、Fas L表达,Bcl-2大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒;D组:泪腺结构模糊,Bax、Fas、Fas L均大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒,Bcl-2仅少量表达;E组:泪腺结构清晰,散见Bax、Fas、Fas L表达,Bcl-2未见表达。结论密蒙花颗粒剂具有与雄激素相似的抑制泪腺细胞凋亡因子Bax、Fas和Fas L表达,同时上调Bcl-2的作用,能抑制雄激素缺乏所致兔泪腺细胞的凋亡,维持泪腺基础分泌量,但其作用弱于雄激素。     

逍生散颗粒剂对干眼小鼠模型泪腺 Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的：研究逍生散颗粒剂对干眼小鼠模型泪腺Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达的影响。方法选择c57小鼠,分为空白对照组、干眼模型组、逍生散低剂量组、逍生散中剂量组、逍生散高剂量组,测定泪液分泌量和泪膜破裂时间,采用荧光定量PCR的方法检测泪腺中Bax、Bcl-2的mRNA含量。结果（1）干眼模型组的泪液分泌试验Ⅰ（ SIT）、泪膜破裂时间（ BUT）低于空白对照组,逍生散组的SIT、BUT均高于干眼模型组,且逍生散中剂量组的SIT、BUT均高于逍生散低剂量组和逍生散高剂量组;（2）干眼模型组泪腺组织Bcl-2的mRNA含量低于空白对照组、Bax的mRNA含量高于空白对照组,逍生散低剂量组、逍生散中剂量组、逍生散高剂量组泪腺组织Bcl-2的mRNA含量高于干眼模型组、Bax的mRNA含量低于干眼模型组;（3） SIT、BUT与泪腺中Bax的mRNA含量呈负相关、Bcl-2的mRNA含量呈正相关。结论逍生散颗粒剂能够调节干眼小鼠模型泪腺中Bcl-2、Bax的mRNA,3．6 mg/g＆#183;d中等剂量的调节作用最为明显,且Bcl-2、Bax的含量与干眼的体征存在相关性。     

密蒙花颗粒剂对干眼患者泪液白细胞介素1-β和白细胞介素18的影响※

目的:观察密蒙花颗粒剂对干眼患者泪液白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)表达的影响。方法:将70位干眼患者按随机数字表法平均分为2组,对照组以玻璃酸钠滴眼液治疗,治疗组在对照组的基础上口服密蒙花颗粒剂。治疗4周后,随访4个月,观察两组患者干眼症状评分、泪膜破裂时间(break up time,BUT)、泪液分泌试验(Schirmer I test,SIT)、角膜荧光素钠染色评分(fluorescent,FL)的情况,ELISA法检测患者泪液中IL-1β、IL-18的表达。结果:治疗组治疗后2周、4周干眼症状评分和FL较治疗前降低(P0.05),SIT和BUT较治疗前升高(P0.05);对照组治疗后2周、4周干眼症状评分和FL较治疗前降低(P0.05),SIT和BUT较治疗前升高(P0.05)。治疗组治疗后4周干眼症状评分和FL较治疗后2周降低(P0.05),SIT和BUT较治疗后2周升高(P0.05);对照组治疗后4周干眼症状评分和FL较治疗后2周降低(P0.05),SIT和BUT较治疗后2周升高(P0.05)。治疗后2周、4周两组干眼症状评分、SIT、BUT及FL相比,差异均有统计学意义(P0.05)。治疗组治疗后2周、4周泪液IL-1β和IL-18表达较治疗前降低(P0.05);对照组治疗后2周、4周泪液IL-1β和IL-18表达较治疗前降低(P0.05)。治疗组治疗后4周泪液IL-1β和IL-18表达较治疗后2周降低(P0.05);对照组治疗后4周泪液IL-1β和IL-18表达较治疗后2周降低(P0.05)。治疗后2周、4周两组泪液IL-1β和IL-18表达相比,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:密蒙花颗粒剂对干眼患者泪液中IL-1β、IL-18的表达具有抑制作用,这可能是密蒙花颗粒剂治疗干眼的分子生物学机制。     

密蒙花提取物对干眼症雄兔泪腺局部炎症反应影响的研究

目的:观察密蒙花提取物对去势所致干眼症雄兔基础泪液分泌量、泪腺局部炎症因子TGF-β1、IL-1β、TNF-α的影响,探讨密蒙花提取物抗雄激素水平下降所致的干眼症的作用机制。方法:将30只日本大耳雄兔随机分为空白组(A),模型组(B),治疗组(C、D、E),每组6只,对B、C、D、E组行去势术建立动物模型,对C、D、E组分别以密蒙花提取物1倍剂量和2倍剂量以及染料木黄酮连续灌胃1月,对全部实验兔行Schirmer I试验,采用免疫组织化学的方法,对兔泪腺组织中炎症因子TGF-β1、IL-1β、TNF-α进行检测。结果:C、D、E组Schirmer I试验测量值明显高于B组(P(0.01),泪腺导管及腺泡上皮细胞中,IL-1β、TNF-α阳性表达的细胞数均明显低于B组而TGF-β1阳性表达的细胞数均明显高于B组(P(0.01)。以上检测结果C、D组均优于E组(P(0.05)。结论:密蒙花提取物对于雄激素水平所致兔干眼症有良好的实验疗效,其作用机制可能与其中主要成分黄酮类物质拟雄激素效应调节体内性激素水平有关,从而可抑制泪腺局部炎症反应来起到疗效。     

密蒙花提取物对去势导致干眼症白兔泪腺细胞凋亡的影响

目的观察密蒙花提取物对去势导致的干眼症兔基础泪液分泌量、泪膜稳定性和凋亡相关基因蛋白Fas、FasL表达的影响,探讨密蒙花提取物抗性激素水平失调导致的干眼症的作用机制。方法将60只日本大耳白兔(雌雄各半)随机分为雄、雌兔空白组(A1、A2),雄、雌兔模型组(B1、B2),雄、雌兔1倍剂量密蒙花提取物治疗组(C1、C2),雄、雌兔2倍剂量密蒙花提取物治疗组(D1、D2),雄、雌兔染料木黄酮治疗组(E1、E2),每组6只。对B、C、D、E组行去势术建立动物模型,对C、D、E组分别以密蒙花提取物1倍剂量和2倍剂量以及染料木黄酮连续灌胃1月。对全部实验兔行SchirmerI试验、测量泪膜破裂时间,用免疫组织化学的方法对兔泪腺组织中凋亡相关基因蛋白Fas、FasL进行检测。结果C、D、E组SchirmerI试验测量值明显高于B组(P<0.01)、泪膜破裂时间明显长于B组(P<0.01),泪腺导管及腺泡上皮细胞中,Fas、FasL阳性表达的细胞数均明显低于B组(P<0.01)。以上检测结果C、D组优于E组(P<0.05)。结论密蒙花提取物中主要成分为黄酮类物质,可显著抑制性激素水平降低后兔干眼症的发生。其作用机制可能与黄酮类物质为植物雌激素的一种有关,可调节体内性激素水平,从而可调节和抑制泪腺细胞凋亡。密蒙花提取物可能成为治疗干眼症的新途径。     

淫羊藿总黄酮含药血浆对泪腺上皮细胞凋亡模型Caspase-3及Caspase-8表达的影响

目的观察淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔泪腺上皮细胞半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及Caspase-8表达的影响,探究其作用机制。方法将体外培养的雄兔泪腺上皮细胞,随机分为淫羊藿黄酮治疗组(黄酮组)、含雄激素培养对照组(雄激素组)和空白对照组(空白组)。分别加入含淫羊藿总黄酮血浆、丙酸睾酮、空白血浆干预48 h后,各组加入双氧水(H2O2)诱导细胞凋亡。采用Western Blot法检测Caspase-3、Caspase-8的表达情况。结果与空白组比较,黄酮组及雄激素组Caspase-3、Caspase-8蛋白表达降低(P<0.01),同时黄酮组较雄激素组的Caspase-3、Caspase-8蛋白表达降低(P<0.01)。结论淫羊藿总黄酮含药血浆作用于泪腺上皮细胞凋亡模型可抑制Caspase-3及Caspase-8的表达。     

Influence of XiaoZhong ZhiTong Mixture on Rats with Acute Spinal Cord Injury

目的:观察消肿止痛合剂对大鼠急性脊髓损伤的保护作用.方法:采用胥少汀脊髓半横切法制作大鼠T8～T9脊髓损伤模型,根据性别、体质量将60只大鼠随机分为6 组,空白组(A),消肿止痛合剂低、中、高剂量组(B、C、D),甲基强的松龙组(E),模型组(F),每组10 只,B、C、D 组予消肿止痛合剂,每日用药量分别按成人等效剂量的5、10、20 倍,每日用药3 次,术后第8 天开始改为每日2 次,剂量不变;E 组于术后开始肌注甲基强的松龙(0.03.g/kg);A组和F 组分别给予等量生理盐水.给药14 天后,用放免法检测血清IL-6、NOS 含量;免疫组化法测定Caspase-3的表达;观察各组大鼠HE染色脊髓损伤组织的病理变化.结果:HE染色提示脊髓损伤组织改善情况D 组优于C 组,且与E 组相似;损伤脊髓组织中IL-6、NOS 含量F 组显著增高,D、C 组与E 组相比有显著性差异(P＜0.01);Caspase-3的表达在F组中升高,C组与E组、D组相比Caspase-3表达有统计学意义(P＜0.01).结论:消肿止痛合剂能降低IL-6、NOS 在损伤脊髓组织中的含量,可抑制caspase-3 在急性脊髓损伤后的表达.     

电针对糖尿病胃轻瘫模型大鼠胃电及胃窦ghrelin的影响（英文）

目的:观察电针对糖尿病胃轻瘫(DGP)模型大鼠胃电及胃窦ghrelin的影响。方法:将50只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为A组、B组、C组、D组和E组,每组10只,A组为空白对照组,不接受任何干预;B组、C组、D组和E组采用单次腹腔注射2%的链脲佐菌素(STZ)并配合8星期高糖高脂饮食建立DGP大鼠模型。B组为模型组,不接受治疗;C组为电针穴位组,采用电针足三里、梁门和三阴交治疗;D组为电针非穴位组,采用电针足三里、梁门及三阴交的对照点治疗;胃复安对照组大鼠接受1.7%胃复安药液[10 mL/(kg·bw)]灌胃。用血糖仪检测大鼠血糖值;以酚红为标记物,检测大鼠胃排空率,BL-420F生物机能实验系统检测胃电,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测胃窦ghrelin含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测ghrelin mRNA的表达。结果:与A组比较,治疗前和治疗后B、C、D和E组的血糖均显著增高(均P0.01);治疗后B组大鼠胃排空率显著降低(P0.01),治疗后B、C、D和E组小肠推进率显著降低(均P0.01),治疗后C组胃窦ghrelin含量显著降低(P0.01),治疗后B、C、D和E组胃窦ghrelin mRNA表达显著升高(均P0.01),治疗后B组和D组胃电平均振幅显著降低(均P0.01);与B组比较,C组治疗后血糖明显下降(P0.05),治疗后C、E组胃排空率及小肠推进率明显升高(P0.05,P0.01),D组小肠推进率明显升高(P0.05),治疗后C组胃窦ghrelin含量及mRNA表达显著降低(P0.01),E组ghrelin mRNA表达显著降低(P0.01),治疗后C组胃电平均振幅明显增加(P0.05);与D组比较,治疗后C组胃窦ghrelin含量及mRNA表达显著降低(P0.01);与E组比较,治疗后C组胃窦ghrelin含量显著降低(P0.01)。结论:电针足三里、梁门及三阴交可以调节DGP模型大鼠的血糖水平,增强胃电活动,促进胃排空,调节胃窦ghrelin水平及下调ghrelin mRNA的表达。     

云南灯盏花乙素在大鼠体外震波中的作用研究

目的:分析灯盏花乙素(SCU)在大鼠体外震波(CSWT)中的作用机制。方法:随机将35只大鼠分为A(梗死对照组)、B(CSWT组)、C(FAK抑制+CSWT组)、D(IBTX+CSWT组)、E(SCU高剂量+CSWT组)、F(SCU中剂量+CSWT组)、G(SCU低剂量+CSWT组)7组,各5只,给予对应药物及体外震波处理后,取心脏组织,采用Real time-PCR法检测各组血管内皮生长因子A(VEGF-A)、整合素β1(ITGB1)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)、内皮一氧化氮合成酶(e NOS)基因表达情况,采用蛋白印迹法(Western Blot)检测各组VEGF、MCP-1、e NOS、CD29蛋白的表达。结果:1与A组比较,各组VEGF-A、ITGB1均上升,B、E组MCP-1下降,C、D、G组MCP-1下降,B、F、G组e NOS基因表达降低,C、D、E组基因表达上升(P0.05);与B组对比,C、E、F、G组VEGF-A基因表达均上升,C、D组ITGB1基因表达降低,E、F、G组ITGB1基因表达上升,C、D、E、G组MCP-1降低,E组上升,C、E组e NOS上升,D、F、G组下降(P0.05);2与A组比较,B、C组VEGF蛋白表达上升,D、E、F、G组下降;各组MCP-1蛋白表达均上升;除E组e NOS表达降低外,其余各组均上升,C、D、E、F、G组CD29蛋白表达降低(P0.05)。与B比较,C组VEGF上升,D、E、F、G组均降低(P0.05),C、F组MCP-1蛋白表达上升,其余各组均下降(P0.05),除E、G组外,各组e NOS蛋白表达均上升(P0.05),各组CD29蛋白表达均下降(P0.05)。结论:SCU联合CSWT可改善心梗大鼠心肌缺氧、缺血状态,促进新生血管形成,有较好的抗氧化应激作用。     

芪丹通脉片对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化易损斑块TLR4/NF-κB信号转导通路的影响

目的观察芪丹通脉片对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化易损斑块TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法采用右侧颈总动脉外置管术(PCCP)加高脂喂养制备易损斑块模型小鼠。将手术成功的60只小鼠随机分为模型组(B组)、黄芪甲苷组[C组,黄芪甲苷40 mg/(kg·d)]、丹参酮ⅡA组[D组,丹参酮ⅡA 90 mg/(kg·d)]、益气活血组[E组,黄芪甲苷40 mg/(kg·d)+丹参酮ⅡA 90 mg/(kg·d)]、芪丹通脉片组[F组,芪丹通脉片浸膏干粉700 mg/(kg·d)],每组12只;同时设12只ApoE~(-/-)小鼠为对照组(A组)。于手术后当天开始,各药物干预组按上述剂量分别溶于同等体积生理盐水灌胃,A、B组给予同等体积生理盐水灌胃,每日1次。A组给予普通饲料,其余五组给予高脂饲料。共计12周。常规HE染色检测各组小鼠动脉内斑块情况,常规生化法检测TC、TG、HDL、LDL;ELISA法检测TNF-α、IL-6、C-反应蛋白(CRP)表达水平;RT-PCR检测Toll样受体4(TLR4)、核转录因子(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9) mRNA的表达量及Western-Blot法检测斑块中TLR4、NF-κB蛋白相对表达水平。结果 HE结果显示:A组小鼠动脉管腔内壁光滑,无斑块附着;B组小鼠可见大量斑块沉积于动脉内壁,斑块内可见到较大的脂质池,斑块结构较不稳定;与B组比较,C组及D组小鼠动脉内斑块减小,斑块内脂质池缩小,斑块结构趋向稳定,其中C、D两组比较,D组小鼠动脉斑块结构较C组稳定;E、F组小鼠动脉内壁基本光滑,少量斑块附着,结构较B、C、D组稳定。与A组比较,B组TC、TG、LDL、TNF-α、IL-6、CRP水平升高,TLR4、NF-κB、MMP-9 mRNA及TLR4、NF-κB蛋白表达水平亦升高(P0.01),HDL水平降低(P0.01)。与B组比较,C组TC降低,D、E、F组TC、TG、LDL水平及NF-κB、MMP-9 mRNA表达量均降低,E、F组HDL水平升高(P0.05,P0.01);C、D、E、F组TNF-α、IL-6、CRP水平降低,TLR4 mRNA及TLR4、NF-κB蛋白表达亦降低(P0.05,P0.01)。与C组比较,D组TC降低,E、F组TC、LDL水平降低,F组TG水平降低,HDL水平升高(P0.05,P0.01);D、E、F组TNF-α、IL-6、CRP水平降低,NF-κB、MMP-9 mRNA表达量及TLR4、NF-κB蛋白表达水平亦降低(P0.05,P0.01),E、F组TLR4 mRNA表达量降低(P0.01);与D组比较,E、F组TNF-α、IL-6、CRP水平、MMP-9 mRNA表达量及TLR4、NF-κB蛋白表达水平降低(P0.05,P0.01),E组TG、LDL水平及NF-κB mRNA表达量降低(P0.05),F组TLR4 mRNA表达量降低(P0.05)。结论芪丹通脉片可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,降低TNF-α、IL-6、CRP水平及MMP-9 mRNA的表达量而发挥抗易损斑块的作用。其中丹参酮ⅡA抑制易损斑块的作用可能优于黄芪甲苷,益气活血药单体配伍使用具有明显的协同作用。     

当归红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病大鼠肾组织中NF-κB、TNF-α表达的影响

目的观察当归红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织中NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA表达的影响,探讨其干预DN的机制。方法 60只SPF级雄性Wistar大鼠,随机选取12只作为正常对照组(A组),其余48只采用一次性大剂量(60 mg·kg-1)腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合高脂高糖饲料喂养方法复制DN模型,造模成功后随机分为模型对照组(B组)、厄贝沙坦组(C组)、当归红芪超滤膜提取物低、高剂量组(D、E组)。连续给药8周后计算肾脏肥大指数,分别采用免疫组化法和RT-PCR法检测大鼠肾组织中NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA的表达情况。结果 (1)与A组比较,B组大鼠肾脏肥大指数显著升高(P0.05);与B组比较,C、E组肾脏肥大指数显著下降(P0.01或P0.05);(2)免疫组化:B组NF-κB、TNF-α阳性表达明显增多,用药后各组均有不同程度改善,E组改善程度优于D组;(3)与A组比较,B组大鼠肾组织NF-κB、TNF-α的平均光密度值显著升高(P0.01),用药8周后,C、E组显著下降(P0.05)且下降程度与D组比较有显著差异。(4)与A组比较,B组大鼠肾组织NF-κB、TNF-αmRNA的表达显著升高(P0.05);用药8周后,E组显著下降(P0.05)且下降程度与C、D组比较有显著差异(P0.05)。结论当归红芪超滤膜提取物可以下调DN大鼠肾组织炎症因子NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA表达并且有一定剂量依赖性,可以改善炎症状态、保护肾组织。     

当归红芪超滤膜提取物对DN大鼠FBG、TG、TC及肾组织TGF-β_1/Smad2/Smad3 mRNA表达的影响

目的观察当归红芪(1∶5)超滤膜提取物对糖尿病肾病大鼠空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及肾组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达的影响,并探讨其相关机制。方法 72只雄性SPF级Wistar大鼠,随机选12只作为正常组(A组),其余60只采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法复制DN模型,成模后随机分为模型组(B组)、西药(厄贝沙坦)对照组(C组)、中药(当归红芪超滤膜提取物)低、中、高剂量组(D、E、F组)。连续给药8周,每周测1次FBG;第8周末处死大鼠,采血离心取血清测TG、TC;取大鼠肾组织,Masson染色观察病理形态学改变,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达情况。结果 B组FBG高于A组(P0.01);给药4周后,与B组相比,E、F组FBG明显下降(P0.05),给药8周后,D、E、F组FBG均明显下降(P0.05或P0.01)。与A组相比,B组TG、TC明显升高(P0.01);与B组相比,E、F组TC降低明显(P0.05或P0.01),各药物组TG均明显降低(P0.05或P0.01);E组较C组比TG下降更明显(P0.05)。B组大鼠TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达明显高于A组(P0.01);C、E、F组TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达均低于B组(P0.05或P0.01)。结论当归红芪超滤膜提取物可以降低DN大鼠空腹血糖、甘油三酯、胆固醇,改善肾组织纤维化程度,下调肾组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达水平,从而延缓肾纤维化进展,对DN大鼠肾脏发挥保护作用。     

蛴螬对兔光损伤视网膜变性Caspase-8、 Bax、Bid、Caspase-3 mRNA表达的影响

目的:探讨蛴螬提取物对兔光损伤视网膜变性Caspase-8、 Bax、Bid、Caspase-3 mRNA表达的影响。方法:将30只雄性实验性兔随机平均分为空白组、模型组、蛴螬低剂量组、蛴螬中剂量组和蛴螬高剂量组。除空白组外,其余4组均建立光损伤视网膜变性模型,在给药14 d处死后取材采用RT-qPCR法测定Caspase-8 mRNA、 Bax mRNA、Bid mRNA、Caspase-3 mRNA的表达水平。结果:与模型组比较,蛴螬低、中、高剂量组的Caspase-8 mRNA、 Bax mRNA、Bid mRNA、Caspase-3 mRNA相对表达量降低,差异具有统计学意义(P0.05);与蛴螬低剂量组比较,中、高剂量组的Bax mRNA和Caspase-3 mRNA改善更为明显(P0.05),但中、高剂量组之间没有统计学意义(P0.05)。结论:蛴螬通过抑制Caspase-8 mRNA、 Bax mRNA、Bid mRNA、Caspase-3 mRNA的表达,抑制细胞凋亡受体信号通路来发挥保护视网膜作用,中、高剂量组效果较好。     

针刺对干眼兔泪腺中转化生长因子-β1表达的影响

目的:观察针刺对干眼兔泪腺中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨针刺治疗干眼的作用机制。方法:新西兰兔随机分为空白组、模型组、西药组、针刺组、假针刺组,每组6只。用氢溴酸东莨菪碱溶液皮下注射制备干眼兔模型。西药组予双眼滴氟米龙滴眼液,每天3次,每次1滴;针刺组电针"攒竹""瞳子髎"穴15 min,针刺"睛明""太阳""丝竹空"穴15 min,每天1次;假针刺组选穴同针刺组,用钝针对穴位表面点刺,每天1次。以上各组疗程均为14 d。观察各组兔泪流量、泪膜破裂时间(BUT)和泪腺形态学变化,并分别用Western blot法和实时荧光定量PCR法检测各组兔泪腺中TGF-β1蛋白和mRNA的表达。结果:与造模前比较,造模后除空白组外,其余各组泪流量、BUT显著降低(P0.01);与治疗前比较,治疗后西药组和针刺组泪流量、BUT增加(P0.05);治疗后与模型组比较,西药组和针刺组泪流量、BUT增加(P0.05)。模型组、假针刺组兔泪腺上皮细胞萎缩,黏膜组织间质中可见淋巴细胞、浆细胞浸润;西药组、针刺组兔泪腺上皮细胞结构基本正常,黏膜组织间质中有散在淋巴细胞、浆细胞浸润。与空白组比较,模型组和假针刺组兔泪腺中TGF-β1蛋白和mRNA表达显著增加(P0.01);与模型组比较,西药组和针刺组兔泪腺中TGF-β1蛋白和mRNA表达显著降低(P0.01,P0.05),假针刺组兔泪腺中TGF-β1蛋白和mRNA表达差异无统计学意义(P0.05)。结论:针刺干预可增加干眼兔的泪流量和BUT,其作用机制可能与针刺调控泪腺中TGF-β1的表达有关。     

针刺对乳腺增生大鼠乳腺组织Caspase-8mRNA和Caspase-3mRNA表达的影响

目的:探究针刺对乳腺增生大鼠乳腺组织中Caspase-8mRNA和Caspase-3mRNA表达的影响。方法:选取40只12周龄的健康雌性未孕SD大鼠(SPF级),将其随机分为正常组、模型组、针刺组与三苯氧胺组,每组10只。造模后进行4周的干预治疗,HE染色后光镜下观察各组大鼠乳腺组织病理状态,PCR法检测各组大鼠乳腺组织Caspase-8mRNA和Caspase-3mRNA的表达情况。结果:HE染色显示模型组较正常组出现乳腺小叶增多、腺泡结构紊乱等组织增生现象,Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA表达水平明显降低(P0.01);与模型组相比,治疗后的针刺组与三苯氧胺组组织增生的病理变化减轻,Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA表达水平明显增高(P0.01)。结论:针刺对乳腺增生大鼠乳腺组织中Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA表达有一定影响,可能通过干预凋亡通路对大鼠乳腺增生有调节和治疗作用。     

安胃汤对慢性萎缩性胃炎模型大鼠细胞凋亡因子表达的影响

目的:研究安胃汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠细胞凋亡因子表达的影响。方法:采用MNNG法建立CAG大鼠模型,将60只大鼠随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)、胃复春组(C组)、安胃汤低剂量组(D组)、安胃汤中剂量组(E组)、安胃汤高剂量组(F组)各10只,A、B两组给予3ml生理盐水灌胃,C组给予胃复春悬浊液按照0.078g/100(g·d)的剂量灌胃。D、E、F组分别给予0.5、1.0、2.0g/100(g·d)剂量的安胃汤灌胃,连续治疗4周。显微镜下观察胃黏膜组织形态的改变,使用QRT-PCR法和Western-blot法检测胃黏膜组织中Bax、Bcl-2、Fas、FasL mRNA及蛋白的表达,TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡指数。结果:镜下显示,B组胃黏膜明显萎缩,固有腺体萎缩消失,D、E、F组胃黏膜结构完整度呈递增趋势,固有腺体萎缩程度降低,数目增加,明显优于B组。与B组相比,C、D、E、F组的Bcl-2 mRNA相对表达量和蛋白表达量升高,Bax、Fas、FasL mRNA相对表达量和蛋白表达量降低(P0.05);与C组相比,E、F组的Bcl-2mRNA相对表达量和蛋白表达量升高,Bax、Fas、FasL mRNA相对表达量降低(P0.05)。与B组相比,C、D、E、F组凋亡指数均下降(P0.05);与C组相比,D、E、F组凋亡指数均下降,且随着剂量的升高,下降程度更明显(P0.05)。结论:安胃汤治疗CAG大鼠,能够通过调节Bax、Bcl-2、Fas、FasL等细胞凋亡因子水平,抑制胃黏膜细胞凋亡,改善胃黏膜萎缩,效果与安胃汤剂量正相关。     

通脉降浊煎剂对慢性心理应激动脉粥样硬化ApoE~(-/-)小鼠血脂及SREBP1、ABCA1表达的影响

目的:探讨通脉降浊煎剂对慢性心理应激动脉粥样硬化ApoE~(-/-)小鼠血脂及SREBP1、ABCA1表达的影响。方法:健康雄性4周龄ApoE~(-/-)小鼠48只,随机分为A组:对照组;B组:动脉粥样硬化模型组(M1);C组:M1+辛伐他汀;D组:动脉粥样硬化+心理应激组(M1+M2);E组:M1+M2+辛伐他汀;F组:M1+M2+劳拉西泮;G组:M1+通脉降浊方;H组:M1+M2+通脉降浊方组(双病模型中药治疗组)。建立动脉粥样硬化(M1)模型(除A组之外所有其他组别):对D、E、F、H组小鼠给予心理刺激,持续20周。从第5周开始给予高脂饲料(5%猪油+1%胆固醇+基础饲料)喂养,第8周开始给予药物治疗(10 mg/kg辛伐他汀,灌胃,1次/d;0.1 mg/kg劳拉西泮,腹腔注射,1次/d),光镜下观察主动脉病理改变,检测各组血清脂含量,采用Western Blot方法检测小鼠主动脉SREBP1和肝脏ABCA1蛋白表达,Real-time PCR方法检测SREBP1和ABCA1 mRNA表达。结果:血脂方面,与D组比较,B组和H组小鼠TC和LDL-C水平降低(P0.05);与F组比较,G组小鼠TC和LDL-C含量明显降低(P0.01)。与B组相比,G组SREBP1蛋白表达水平明显降低,但作用效果低于C组,ABCA1蛋白表达G、H组较B组升高;与D组相比,E、F组SREBP1表达水平显著降低,但作用效果低于G组和H组,差异有统计学意义(P0.05);G、H组ABCA1表达明显升高,与D、E、F组比较差异有统计学意义(P0.05)。与B组相比,G组SREBP1mRNA表达水平明显降低。但作用效果低于C组;与D组相比,H、G组SREBP1的表达水平显著降低,ABCA1mRNA表达水平升高,与D、E、F组比较差异有统计学意义。结论:通脉降浊方能够有效调节高脂饮食及慢性心理应激引起的ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化,其机制可能与调节血脂,改善小鼠抑郁状态,下调SREBP1和上调ABCA1的基因、蛋白表达有关。     

中药熏蒸治疗蒸发过强型干眼的临床研究

目的观察养阴生津中药熏蒸联合人工泪液治疗蒸发过强型干眼的治疗效果。方法前瞻性随机对照临床研究。2014年8月—2015年2月在上海市同仁医院门诊诊断为蒸发过强型干眼的患者75例(150只眼),随机分成3组,即中药熏蒸+人工泪液组(A组),人工泪液对照组(B组),热敷+人工泪液对照组(C组),每组25例。A组予自拟中药(鬼针草,密蒙花,生地黄,菊花,桑叶,红花)熏蒸双眼,每日1次;聚乙烯醇滴眼液点双眼,每日4次。B组予聚乙烯醇滴眼液点眼,每日4次。C组予双眼热敷,每日1次;聚乙烯醇滴眼液点眼,每日4次。疗程均为14 d。治疗前、治疗后第7天、第14天,对受试者进行泪膜破裂时间(BUT)、Schirmer I试验(SIT)检查,光学相干断层扫描(OCT)测量泪河高度,比较各组治疗效果。结果 1.单项指标:治疗后第7天、第14天,三组患者的BUT、SIT、泪河高度评分均较治疗前有统计学意义的改善(P0.05),A组、C组的SIT结果接近(P0.05),并好于B组(P0.05),三组BUT、泪河高度评分的组间差异无统计学意义(P0.05)。2.综合评分:治疗后第7天,三组综合评分均较治疗前降低(P0.05)(评分降低为好转),A组评分低于B组(P0.05),与C组比较无统计学意义的差异(P0.05)。治疗后第14天,A组评分低于B组、C组,两两比较差异有统计学意义(P0.05)。结论养阴生津中药熏蒸联合人工泪液对蒸发过强型干眼有较好疗效,优于热敷+人工泪液及单纯人工泪液,单纯使用人工泪液效果最差。