基于转录组数据分析药用大黄的密码子使用偏好性

目的研究药用大黄Rheum officinale转录组编码序列的密码子使用特点及其影响因素,为蒽醌类化合物异源合成的载体选择及药用大黄分子进化研究提供理论基础。方法利用perl程序及Codon W软件分析4733条药用大黄转录组编码序列的密码子使用偏好性。结果药用大黄转录组编码序列的GC、GC3平均含量分别为45.6%、44.73%,GC12与GC3存在显著正相关(r=0.215,P0.001);ENc-GC3中性图及偏倚性分析结果显示,大部分基因分布于远离期望曲线和平面中心点,大部分基因分布偏离期望曲线和中心点。通过基因高表达筛选密码子方法确定了29个药用大黄的最优密码子,大多数的最优密码子以U和A结尾。结论突变压力在药用大黄转录组编码序列的密码子使用偏好性形成过程这起到主要作用。     

Crude extract of Rheum palmatum L induced cell death in LS1034 human colon cancer cells acts through the caspase‐dependent and ‐independent pathways

Crude extract of Rheum palmatum L (CERP) has been used to treat different diseases in the Chinese population for decades. In this study, we investigated the effects of CERP on LS1034 human colorectal cancer cells in vitro and also examined possible mechanisms of cell death. Flow cytometric assays were used to measure the percentage of viable cells, cell cycle distribution including the sub‐G1 phase (apoptosis), the activities of caspase‐8, ‐9, and ‐3, reactive oxygen species (ROS) and Ca²⁺ levels, and mitochondrial membrane potential (ΔΨ_m). DNA damage, nuclei condensation, protein expression, and translocation were examined by Comet assay, 4′‐6‐diamidino‐2‐phenylindole (DAPI) staining, Western blotting, and confocal laser system microscope, respectively. CERP induced apoptosis as seen by DNA fragmentation and DAPI staining in a concentration‐ and time‐dependent manner in cancer cells. CERP was associated with an increase in the Bax/Bcl‐2 protein ratio and CERP promoted the activities of caspase‐8, ‐9, and ‐3. Both ROS and Ca²⁺ levels were increased by CERP but the compound decreased levels of ΔΨ_m in LS1034 cells. Laser confocal microscope also confirmed that CERP promoted the expressions of AIF, Endo G, cytochrome c, and GADD153 to induce apoptosis through mitochondrial‐dependent pathway. © 2013 Wiley Periodicals, Inc. Environ Toxicol 29: 969–980, 2014.     

早期应用中药选择性肠道去污染对重症胰腺炎的治疗作用

目的　观察早期应用中药 (芒硝、生大黄 )保留灌肠选择性肠道去污染 (selective decon-tam ination of the digestive tract,SDD)对重症胰腺炎 (severe acute pancreatitis,SAP)的治疗作用。方法　 2 0 0 0年 3月至 2 0 0 2年 9月收治 SAP4 3例 ,患者入院后随机分为治疗组和对照组。治疗前治疗组与对照组患者 APACHE- 积分、Ranson积分和 CT分级比较无统计学差异。治疗组 2 3例 ,入院后 2 4 h给芒硝、生大黄保留灌肠 ,余同对照组治疗 ;对照组 2 0例 ,予禁食、胃肠减压、抑酸、抑酶、抗感染及对症、支持治疗等 ;观察两组早期 (1周 )胰腺感染率、早期 (1周 )多脏器功能衰竭 (Multiple- organ dysfunctionsyndrome,MODS)发生率、霉菌感染率、后期 (4周 )脓肿形成率、治愈率、死亡率、住院时间、住院费用。结果　治疗组和对照组早期胰腺感染率分别为 4 .34%和 2 0 % (P<0 .0 5 ) ,早期 MODS发生率分别为4 .34%和 2 0 % (P<0 .0 5 ) ,后期脓肿形成率分别为 4 .34%和 10 % (P<0 .0 5 ) ,霉菌感染率分别为 8.7%和 35 % (P<0 .0 5 ) ,治愈率分别为 95 .6 6 %和 85 % (P<0 .0 5 ) ,死亡率分别为 4 .34%和 15 % ,(P<0 .0 5 ) ,住院时间分别为 (2 0 .3± 19.6 ) d和 (32 .1± 18.4 ) d,住院费用分别为 2 92 17元和     

非水液相微萃取-高效液相色谱法测定大黄中5种游离葸醌类化合物

目的利用非水液相微萃取-高效液相色谱法（HPLC）同时测定大黄中游离蒽醌类化合物的含量。方法利用自制的液相微萃取装置,以聚偏氟乙烯中空纤维为溶剂载体,正己醇为萃取溶剂,供相为甲醇,接受相为1mmol／L NaOH,搅拌速度为1500r／min,萃取时间为50min。萃取结束,接受相在434nm处进行HPLC分析。结果在优化的液相微萃取条件下,芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的线性范围、回收率、精密度和检测限分别为：0.015～13.2、0.075～11.2、0.085～12.8、0.096～14.4、0.117～17.6μg／ml;103.8％～106.1％;2.5％～5.2％和2.9.20.0ng／ml。结论本法选择性高,有机溶剂消耗少,能快速、准确地测定大黄药材中游离蒽醌类化合物。     

非水液相微萃取-高效液相色谱法测定大黄中5种游离蒽醌类化合物

目的利用非水液相微萃取-高效液相色谱法(HPLC)同时测定大黄中游离蒽醌类化合物的含量。方法利用自制的液相微萃取装置,以聚偏氟乙烯中空纤维为溶剂载体,正己醇为萃取溶剂,供相为甲醇,接受相为1mmol/LNaOH,搅拌速度为1500r/min,萃取时间为50min。萃取结束,接受相在434nm处进行HPLC分析。结果在优化的液相微萃取条件下,芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的线性范围、回收率、精密度和检测限分别为:0.015～13.2、0.075～11.2、0.085～12.8、0.096～14.4、0.117～17.6μg/ml;103.8%～106.1%;2.5%～5.2%和2.9～20.0ng/ml。结论本法选择性高,有机溶剂消耗少,能快速、准确地测定大黄药材中游离蒽醌类化合物。     

大黄水提物的促智作用研究

目的：观察大黄水提物对小鼠促智作用的影响。方法：跳台法。结果：大黄水提物能增强自然衰老小鼠的学习和记忆能力，并对由东莨菪碱、亚硝酸钠和40％乙醇分别引起的小鼠记忆获得、巩固及再现障碍病理模型有较明显的改善作用。结论：大黄水提物中含有促智作用的药效物质，它可能是临床常用以大黄为主药的汤剂治疗中风失语、老年记忆障碍、脑外伤后遗症等疾病并获良效的物质基础。     

唐古特大黄有效成分与色度相关性分析

目的 考察唐古特大黄主要药效成分与色度的相关性,建立快速评价唐古特大黄质量的色度分析方法.方法 采用HPLC测定唐古特大黄有效成分的含量,采用SPSS21.0软件进行主成分分析;测定唐古特大黄色度值L*、a*、b*、E*ab,分析其与有效成分的相关性.结果 主成分分析结果显示,总蒽醌、游离蒽醌、番泻苷A、番泻苷B的累计...     

丛枝菌根真菌对掌叶大黄产量及次生代谢产物的影响

目的:观察丛枝菌根(AM)真菌在人工栽培条件下对掌叶大黄根和根茎的产量及化学成分含量的影响。方法:通过室内盆栽对照试验,设不接种AM组为CK组,设接种摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)为AM组,每处理组重复15盆,每盆播种掌叶大黄种子10粒,出苗后间苗3株。采用文献方法计算菌根侵染率和浸染强度,采用称重法测定掌叶大黄根和根茎产量,采用高效液相色谱法测定掌叶大黄根和根茎中蒽醌类成分的含量,比较施加AM真菌后,掌叶大黄生物量、蒽醌类组分的变化。结果:AM组与CK组的侵染率分别为(96.96±1.57)%和0,侵染强度分别为(62.07±3.40)%和0;与CK组比较,AM组根和根茎产量提高了(42.96±2.12)%,总蒽醌类平均值提高了127.43%,差异均有统计学意义(P0.05)。HPLC分析结果表明,AM组与CK组掌叶大黄蒽醌类在含量和成分间的比例上发生了一定的变化,但接种AM真菌处理并未导致掌叶大黄有效成分的根本改变。结论:接种AM真菌后,能明显促掌叶大黄根和根茎的生长发育,增加药用部位中有效成分的含量,但在试验期间未造成掌叶大黄质量的变异。     

正品大黄中34种化学成分的高效液相色谱法定量分析

本文首次报道了应用高效液相色谱仪测定大黄中34种化学成分的方法,并用此法测定三种正品大黄:唐古特大黄(林棵黄)Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.,掌叶大黄R.palmatum L.和药用大黄(马蹄大黄)R.foficianle Baill.根和根茎中34种化学成分的含量,包括5种游离蒽醌、12种蒽甙、5种芪甙、3种苯丁酮甙、2种萘酚甙和7种鞣质化合物。结果表明:唐古特大黄含有除蒽醌及其单糖甙外的其他成分最多;其次为掌叶大黄,但掌叶大黄含有的游离蒽醌及其单糖甙最多;药用大黄的根茎,各种成分的含量均最少。