阿萨伊油、醇提及水提物对虚热及虚寒小鼠温度趋向性及代谢水平的影响

通过考察阿萨伊油、醇提物和水提物等拆分组分对虚热及虚寒证小鼠的温度趋向性动物行为学表征,环核苷酸及代谢水平等内在生化指标的影响,探讨阿萨伊各拆分组分的寒热药性特点以及寒凉的物质基础。将昆明种雄性小鼠随机分为空白组、虚热模型组、虚热+阿萨伊冻干原粉组、虚热+阿萨伊油组、虚热+阿萨伊醇提物组、虚热+阿萨伊水提物组、虚寒模型组、虚寒+肉桂组、虚寒+阿萨伊冻干原粉组、虚寒+阿萨伊油组、虚寒+阿萨伊醇提物组、虚寒+阿萨伊水提物组共12个组。虚热组小鼠每天下午灌胃给予甲状腺片溶液160 mg·kg-1,虚寒组小鼠给予氢化可的松溶液25 mg·kg-1,连续14 d,各给药组灌胃相关药物,实验结束后测定动物温度趋向性、环核苷酸及代谢水平等相关指标。阿萨伊醇提物同阿萨伊原粉一致,表现出对虚热模型小鼠的调整作用;阿萨伊油及其水提物同肉桂一致,表现出对虚寒模型小鼠的调整作用。该研究基于中药性味可拆分理论,采用同类比较异类反证的方法证明了阿萨伊醇提物性偏凉,油及其水提物性偏温的特征,并明确了醇提物为阿萨伊性凉的物质基础。     

超极化激活环核苷酸门控阳离子通道亚型在大鼠脊髓背角浅层的特异性表达

目的:探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channels,HCN通道)4种亚型在大鼠脊髓背角浅层的表达与分布特点。方法:选取3~5周龄SD大鼠,雌雄不拘,制作L4~L5段脊髓横切片,应用免疫组织化学技术及激光共聚焦成像技术,观察HCN通道的4种亚型在脊髓背角浅层神经元、胶质细胞及神经元亚细胞结构中的分布。结果:HCN通道不同亚型在正常SD大鼠脊髓背角中的表达和分布具有特异性:(1)HCN1主要与神经元标志物[神经元核抗原(neuronal nuclei,NeuN)]和星形胶质细胞标志物[胶质细胞原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)]共存,HCN2和HCN3主要与NeuN共定位;(2)HCN2主要与肽能初级传入神经末梢标志物[降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)]共存,HCN4主要与非肽能初级传入神经末梢标志物[异凝集素B4(isolectin B4,IB4)]共存;(3)HCN1和HCN4主要与神经元树突标志物[微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP2)]共存;(4)HCN4主要与抑制性中间神经元轴突末梢标志物[囊泡γ-氨基丁酸转运体(vesicularγ-aminobutyric acid transporter,VGAT)]共存。结论:HCN1~4主要分布在大鼠脊髓背角浅层,且在神经元、胶质细胞及神经元亚细胞结构中呈特异性分布。     

从阴阳调和立论探讨针刺结合豨芍方治疗疼痛的效应机制

阴阳学说是中医学的核心理论,阴平阳秘是维持人体正常生命活动的基础,阴阳失衡是疾病发生的主要原因。疼痛的核心病机包括阴阳偏盛或偏衰导致的不通则痛和不荣则痛。针刺和中药可以通过调和阴阳、疏通经脉、畅达气血,达到镇痛的目的。现代医学研究表明,环核苷酸是维持机体稳态的重要活性物质,可反映机体阴阳的基本特性。针刺结合豨芍方可通过调节异常表达的环核苷酸,恢复其正常状态,从而缓解疼痛。从阴阳立论,结合现代医学对阴阳相关物质基础环核苷酸的研究,阐明针刺结合豨芍方通过调和阴阳发挥镇痛作用的机制,为疼痛的中医药治疗提供新的理论依据。     

心脏电子起搏器时代与生物起搏替代的前沿话题

植入电子起搏器是目前治疗症状性缓慢心律失常的主要方法,然而它存在许多缺点.能否利用分子生物学原理发展生物起搏器成为大家关注的热点.通过转染编码If电流的超极化激活环核苷酸门控通道基因,过度表达超极化激活环核苷酸门控通道,增加心脏舒张期内向电流,从而在窦房结被抑制时提供起搏作用,这种利用基因治疗和细胞治疗构建的生物起搏在不久的将来可能会成为电子起搏器最为理想的替代方法.目的:总结超极化激活环核苷酸门控通道基因构建生物起搏的研究进展.检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索.Pubmed数据库1979-01/2007-06的相关文献.检索词"hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated nnel;biological pacemaker",并限定文章语言种类为English.共检索到157篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与生物起搏及超极化激活环核苷酸门控通道基因密切相关.②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章.排除标准:重复性研究.文献评价:文献的来源主要是超极化激活环核苷酸门控通道基因的基础实验.所选剧的36篇文献中,10篇为综述,其余均为临床或基础实验研究.资料综合:①在4种异构体中超极化激活环核苷酸门控通道1,2,4是心脏中的主要部分,超极化激活环核苷酸门控通道3只在胚胎起搏细胞中有低水平表达.起搏活性小的区域(如心室肌),超极化激活环核苷酸门控通道2的表达占优势;而起搏活性高的区域超极化激活环核苷酸门控通道4的表达占优势.此外,超极化激活环核苷酸门控通道2在整个发育阶段,是心室的主要异构体,超极化激活环核苷酸门控通道2:超极化激活环核苷酸门控通道4的相当表达量在乳鼠为5:1,成年鼠为13:1.②超极化激活环核苷酸门控通道通道缺陷可导致病窦综合征.③到目前为止.转染编码If电流的超极化激活环核苷酸门控通道基因被认为是最有可能实现生物起搏的.结论:基因治疗和细胞治疗必将成为改善生物"起搏"功能最理想的方法,以超极化激活环核苷酸门控通道基因和细胞为主的生物起搏在缓慢性心律失常治疗中必将占有一席之地.     

慢性肺心病急性加重期血小板内Ca^2＋cAMP和TXB2含量关系的探讨

目的：为探讨慢性肺心病急性加重期患者血小板内游离Ｃａ２＋、ｃＡＭＰ和ＴＸＢ２之间的相互关系及意义。方法：用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光技术测定了３０例慢性肺心病患者急性加重期和２５例正常对照的血小板内游离Ｃａ２＋含量，用放射免疫分析法测定其血小板内ｃＡＭＰ和ＴＸＢ２的含量。结果：患者血小板内游离Ｃａ２＋和ＴＸＢ２含量明显高于正常对照（Ｐ均＜０．０１），而血小板内ｃＡＭＰ含量则明显低于对照组（Ｐ＜０．０１），且患者中血小板内Ｃａ２＋含量和ＴＸＢ２含量均与血小板内ｃＡＭＰ含量成负相关（ｒ分别为－０．７６６和－０．５３３，Ｐ均＜０．０１），而Ｃａ２＋含量与ＴＸＢ２含量之间则呈明显的正相关性（ｒ为０．７０７，Ｐ＜０．０１）。结论：慢性肺心病急性加重期血小板处于活跃状态，可能与其内Ｃａ２＋含量升高、ＴＸＢ２生成增加、ｃＡＭＰ含量降低有关，三者相互作用来激活血小板     

电针对神经病理性疼痛伴发焦虑大鼠行为学及缰核HCN1表达的影响

[目的]观察电针(electro-acupuncture, EA)对神经病理性疼痛伴发焦虑大鼠行为学的干预作用,以及对缰核中超极化激活环核苷酸门控通道蛋白1(hyperpolarization-activated cyclicnucleotide-gated channels 1,HCN1)和c-fos表达的影响,部分阐明神经病理性疼痛伴发精神障碍的发病机制及EA的干预机制。[方法] 32只雄性SD大鼠按完全随机法分为空白对照组、假手术组、坐骨神经分支选择性损伤(sciatic nerve branch selective injury,SNI)组和EA组,每组8只。SNI组和EA组以SNI法制备神经病理性疼痛模型,模型制备第8天起,EA组选取"足三里""昆仑"两穴,以EA治疗,每次30min,1次/d,共3次,其余组别不予治疗。造模前,造模后l、3、5、7、8、9和10d检测机械性缩足反射,造模后第10天采用旷场实验观察大鼠的焦虑情绪,免疫荧光检测缰核HCN1与c-fos的表达。[结果]造模第1天起,与空白对照组比较,假手术组大鼠患侧机械性痛阈各时点差异无统计学意义(P0.05),SNI组大鼠较假手术组下降(P0.01);与SNI组比较,EA组大鼠各时点机械性痛阈均上升(P0.01);4组大鼠健侧机械性痛阈无明显变化(P0.05)。旷场实验中,SNI组大鼠运动总距离、进入中央区次数、中央区运动距离均低于假手术组(P0.01,P0.01,P0.05),而中央区停留时间仅低于空白对照组(P0.05),EA组大鼠运动总距离、进入中央区次数和中央区停留时间均少于SNI组(P0.05,P0.01,P0.01),中央区运动距离差异无统计学意义(P0.05)。各组大鼠健侧内侧缰核(medial habenular nucleus,MHb)、外侧缰核外侧部分(lateral habenular nucleus lateral part,LHb L)和外侧缰核内侧部分(lateral habenular nucleus medial part,LHbM)的HCN1表达差异无统计学意义(P0.05);与假手术组比较,SNI组患侧各部分HCN1表达水平均增高(P0.01,P0.01,P0.01);与SNI组比较,EA组患侧HCN1表达水平均降低(P0.01,P0.01,P0.01)。各组大鼠健侧MHb与LHb L的c-fos表达差异无统计学意义(P0.05);与假手术组比较,SNI组健侧LHbM以及患侧MHb、LHbL的c-fos表达也显著增高(P0.01,P0.05,P0.01),而两组患侧LHbM的c-fos表达差异无统计学意义(P0.05);EA组双侧c-fos的表达均低于SNI组同侧(P0.01,P0.01)。[结论]大鼠患侧缰核HCN1通道可能参与了神经病理性疼痛伴发焦虑的发生,而干预缰核HCN1的表达可能是EA调控神经病理性疼痛伴发精神障碍的机制之一。     

止血愈疡颗粒剂对大鼠乙酸型胃溃疡及环核苷酸的影响

自制止血愈疡颗粒剂对乙酸型胃溃疡大鼠有显著的抗溃疡作用。检测雷尼替丁组及模型组大鼠胃粘膜环磷酸腺苷／环磷酸鸟苷（cAMP／cGMP）比值分别为7．2±3．5和24．8±20．8，两组比较差异有显著性意义（P＜0．05）。表明，雷尼替丁能使大鼠胃粘膜cAMP／cGMP水平下降，提示可能cAMP／cGMP比值降低则胃酸分泌减少。止血愈疡颗粒剂表现出与雷尼替丁相同的效应。     

重型颅脑损伤合并缺血缺氧后氨基酸谱改变

目的 :研究重型颅脑损伤 (SHI)合并缺血、缺氧时脑组织谷氨酸 (Glu)及环核苷酸代谢的改变及临床意义。方法 :在 SD大鼠弥漫性脑损伤模型基础上 ,制成 SHI合并低血压及脑缺血模型。通过氨基酸分析仪与放射免疫法测定伤后不同时间脑组织 Glu、c AMP和 c GMP含量。结果 :SHI后 10分钟 ,Glu明显增加〔(19.0±0 .9)μmol/ g(P<0 .0 1)〕,随后逐渐下降 ,并于 2 4小时达最低点〔 (6 .5± 1.0 )μmol/ g〕,72小时组出现回升趋势 ,但仍维持低水平 ;SHI后 2 4小时 c AMP下降至 (5 .7± 1.9) nm ol/ g(P <0 .0 5 ) ,c GMP则升高到 (1.1±0 .3) nm ol/ g(P<0 .0 1) ,c AMP/ c GMP比值下降到 (5 .0± 1.0 ,P<0 .0 5 ) ;SHI合并缺血、缺氧后 ,上述指标变化更加明显。结论 :在 SHI合并缺血、缺氧后 ,脑组织 Glu、c AMP和 c GMP含量发生显著变化 ,上述氨基酸谱的改变所引起的神经细胞兴奋毒性和代谢性应激反应是加重继发性脑损害的关键因素。     

起搏通道HCN2基因稳定转染HEK293细胞的电生理特点

目的了解超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型HCN2(hHCN2)稳定转染人胚肾细胞(HEK293)的离子通道电生理特点。方法采用全细胞膜片钳技术测定hHCN2稳定转染HEK293细胞的通道电流(IhHCN2)电生理特点。结果人全长起搏通道HCN2(hHCN2)基因稳定转染HEK293,记录到一系列超极化内向离子流,该电流激活缓慢,呈电压、时间依赖性,没有明显失活过程,激活电位、半最大激活电位分别为-87±8mV(P>0.05)、-98±2mV(n=20),激活时间常数为196±36ms。起搏电流阻断剂ZD7288和Cs+灌流,IhHCN2峰值幅度均降低,半效抑制浓度分别为23.9±5.9μmol/L、126.8±27.1μmol/L,ZD7288的作用冲洗后抑制作用不能恢复,Cs+的作用在冲洗后基本恢复。结论稳定转染HEK293细胞的克隆起搏通道hHCN基因具有起搏电流的特点。     

细胞兴奋:从起搏电流到超极化激活的环核苷酸门控通道

心脏传导组织特定心肌细胞的起搏点功能就在于这些细胞可以产生舒张期自动去极化。在动作电位 (AP)结束时 ,起搏点去极化可使膜电位逐渐增高接近新AP启动的阈值 ,因而产生周而复始的电活动。起搏点去极化的离子机制是一种超极化激活的电流If。这种电流首次在兔窦房结(SAN)上描述时曾被称做“特种电流 (funnycurrent,If;或queercurrent,IQ)” ,现在也称做超极化激活的阳离子电流(hyperpolarization activatedcationcurrent,Ih) ,原因是它有几种不同寻常的特点 ,包括超极化激活、钾钠离子通透、胞内cAMP调节及微弱的单通道电导等[1 ,2 ]…