人胚雪旺细胞组织工程神经修复坐骨神经缺损的实验研究

目的：探索人胚雪旺细胞作为组织工程的种子细胞修复周围神经缺损的可行性。方法：通过组织工程方法用PLGA导管和polyglactin 910纤维负载人胚雪旺细胞预先构置好人工神经，然后用于修复大鼠20mm的坐骨神经缺损，并与神经切断后原位缝合以及用单纯的PLGA导管进行修复的实验组进行对照。通过活体肢体功能观察、靶器官肌肉测量、电生理检测、辣根过氧化物酶示踪、连续组织切片图像分析以及透射电镜等检查神经再生情况。结果：人工神经修复组神经再生良好，效果接近于神经原位缝合组，明显优于单纯的PLGA导管修复组。结论：人胚雪旺细胞构建的人工神经可以修复20mm的周围神经缺损。     

雪旺细胞源运动神经营养蛋白对周围神经再生的影响

目的：研究雪旺细胞源运动神经营养蛋白对周围神经再生的影响。方法：６０只ＳＤ大鼠均分为３组，Ａ和Ｂ组分别在桥接于大鼠右侧坐骨神经断端之间的硅胶管内加入２６ＫＤ和５０ＫＤ的雪旺细胞源运动神经营养蛋白，Ｃ组加ＰＢＳ液作为对照。术后１～６月每隔半月测定实验侧坐骨神经功能指数，术后３月测定实验侧坐骨神经的电生理和形态学指标。结果：Ａ和Ｂ组实验侧坐骨神经的功能指数、电生理和形态学指标与Ｃ组比较，差别有非常显著性。结论：２６ＫＤ和５０ＫＤ雪旺细胞源运动神经营养蛋白对周围神经再生有促进作用。     

脱细胞异体神经材料复合雪旺细胞的体外三维构建的活性研究

目的探讨雪旺细胞在AECM支架材料上体外三维培养的生长活性.方法将培养的雪旺细胞悬液接种在支架材料上,用MTT法、倒置相差显微镜、流式细胞仪、扫描电镜、RT-PCR、测定雪旺细胞的活性.结果 AECM上的雪旺细胞各项指标与正常培养的雪旺细胞活性比较,差异无显著意义(P>0.05),实验组雪旺细胞DNA无损伤,且能合成分泌GDNF.结论 AECM适于构建具有雪旺细胞活性的组织工程化人工神经.     

Wister大鼠乳鼠雪旺细胞的分离和培养

目的 通过用不同方法分离和培养雪旺细胞的研究,寻找一种能够满足临床需要的方法.方法 通过常规的热酶消化法、组织块法以及冷酶消化对雪旺细胞进行分离;雪旺细胞培养通过双差速贴壁和有丝分裂抑制剂阿糖胞苷(Ara-C),去除或抑制成纤维细胞生长,通过成纤维细胞生长因子(bFGF)使雪旺细胞得到进一步增殖.结果 冷酶联合消化法在8h内能分离106以上的雪旺细胞,细胞纯度达到90%以上.结论 冷酶联合消化法从分离时间、纯度、浓度和细胞活性,均达到从自体组织快速分离和培养雪旺细胞的要求.     

组织工程在周围神经缺损修复中的应用

近年来组织工程学的迅速发展使其在周围神经修复方面有了，“阔的发展空间。组织工程的核心是建立细胞与生物材料的三维空间复合体，即具有生命力的活体组织，用以对病损组织进行形态、结构和功能的重建并达到永久性替代。其重点问题包括：导管材料的选择以及神经生长的微环境。     

翻转静脉与常规静脉用于桥接修复周围神经缺损的比较研究

目的 :探寻静脉翻转后对引导神经再生的影响 ,为周围神经缺损的修复提供一种新方法。方法 :SD大鼠静脉段取出后 ,先将其内外翻转成一外膜在内 ,内膜在外的翻转静脉。然后再用此翻转静脉段桥接修复大鼠自体坐骨神经 10mm缺损 (IOVG)并与常规静脉桥接修复方法 (CVG)进行对比研究。术后 5个月 ,进行神经电生理及组织形态学检测。结果 :与CVG相比 ,IOVG组再生神经纤维的数目、髓鞘厚度、纤维直径以及运动神经传导速度均有提高。结论 :翻转静脉桥接修复周围神经缺损是一简单而有效的新方法     

失神经骨骼肌提取液对雪旺细胞体外增殖的作用

目的：观察去神经支配骨骼肌粗提液在体外培养条件下对雪旺细胞（Schwann cells,SCs)增殖的作用,了解外周神经损伤后SCs大量增殖的机理。方法：将新生大鼠SCs培养标本分为加正常骨骼肌提取液组,加失神经支配骨骼肌提取液组和正常对照组,每组10个标本。通过活细胞计数和S－100免疫细胞化学染色证实,观察两种肌肉提取液对SCs增倍时间的影响。结果：对照组SCs增倍时间为8天,正常骨骼肌提取液组为7天,而去神经支配骨骼肌提取液组为5．5天。结论：周围神经损伤后SCs可能受失神经支配骨骼肌产生的某些物质的刺激而增殖加快。     

成年兔坐骨神经雪旺细胞的分离纯化培养

目的：探讨从成年新西兰兔坐骨神经分离培养获得大量雪旺细胞的有效手段,方法：利用成年免发生Wallerian变性的坐骨神经用植块法进行培养,通过相差显微活细胞计数和S－100细胞化学标记相结合鉴定了雪旺细胞增值和纯化程度。结果：通过上述方法获得大量雪旺细胞纯度达95％,并绘制其生长曲线,体外培养的雪旺细胞倍增时间为8d。结论：本方法能获得大量高纯度的雪旺细胞,为组织工程修复周围神经缺损打下基础。     

pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞移植对损伤脊髓功能恢复的影响

目的观察pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞(SC)移植对损伤脊髓功能恢复的影响. 方法采用切割法制备脊髓半横断损伤模型(T8平面),实验动物随机植入pSVPoMcat微基因的 SC组(A组)、SC组(B组)和明胶海绵组(C组),每组10只.用皮层体感诱发电位(CSEP) 及图像分析方法比较各组间诱发电位潜伏期、波幅,再生轴突计数.同时,行电镜观察及联合行为(CBS)记分. 结果 A,B两组潜伏期和波幅呈恢复趋势,且A组已接近正常,与CBS结果一致.再生轴突计数A组为388±163,B组为109±16(P＜0.01),与电镜观察一致. 结论 pSVPoMcat微基因修饰SC移植对脊髓损伤(SCI)后的神经功能恢复有明显的促进作用.     

雪旺细胞和纤连蛋白对脊髓损伤后功能恢复的初步研究

目的：观察雪旺细胞和纤连蛋白对大鼠损伤的脊髓的功能的影响。方法：将体外培养的雪旺细胞结合纤连白植入大鼠半切损伤的脊髓内,用脊髓诱发电位及图像分析方法比较治疗组和对照组诱发电位潜伏期,再生轴突计数及二者间的关系。结果;雪旺细胞结合纤连蛋白治疗纽脊诱发电位潜伏期显著缩短,再生轴突明显增多,二者呈负相关。结论：雪旺细胞结合纤蛋白移植具有促进脊髓损伤后轴突再生的作用,并能够分恢复体髓的传入功能.