马钱子组分对人HaCaT细胞毒性作用的比较

目的研究马钱子生物碱及其不同组分对人永生化表皮细胞系Ha Ca T细胞的毒性作用。方法体外培养Ha Ca T细胞,加入相同质量浓度的马钱子碱、士的宁、马钱子碱与士的宁的混合物,和马钱子总生物碱作用于细胞24 h后,采用MTT比色法测定不同生物碱的细胞增殖抑制作用;流式细胞仪检测对Ha Ca T细胞的凋亡,比较马钱子生物碱不同组分对Ha Ca T细胞的毒性作用。结果士的宁对Ha Ca T细胞的抑制率和细胞凋亡率大于马钱子碱;马钱子碱和士的宁混合物组对Ha Ca T细胞的抑制率和细胞凋亡率大于马钱子总生物碱。结论马钱子生物碱组分均对Ha Ca T细胞存在细胞毒作用,呈剂量依赖关系,但马钱子碱的细胞毒性明显小于士的宁。     

HPLC同时测定通脉丸中6个指标性成分的含量

目的:建立了通脉丸中6种指标性成分士的宁、马钱子碱、芍药苷、阿魏酸、橙皮苷和丹酚酸B的含量测定方法,为其质量评价提供依据。方法:采用HPLC梯度洗脱,色谱条件:Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速1 m L·min-1,柱温35℃,检测波长260 nm(士的宁、马钱子碱、芍药苷、橙皮苷、丹酚酸B),316 nm(阿魏酸)。结果:6种成分均能达到基线分离且在该色谱条件下士的宁、马钱子碱、芍药苷、阿魏酸、橙皮苷和丹酚酸B的进样量分别在0.037~1.097,0.039~1.176,0.075~2.25,0.01~0.30,0.113~3.384,0.225~6.72μg呈良好的线性关系。结论:经过系统的方法学考察,该方法操作简便、结果准确、重复性好,适用于通脉丸的含量测定。     

Toxicity of Indigenous Plants and Agricultural Chemicals in Farm Animals

Abstract

A fatal case of strychnine intoxication is reported. The patient expired despite early aggressive management and prevention of metabolic complications. Serial blood levels are reported. In contrast to a previous report describing first order elimination kinetics, our data suggest that strychnine follows Michaelis-Menton elimination kinetics. The case illustrates the rapid, dramatic course of severe strychnine ingestions. A review of the toxicokinetics, mechanism of action and treatment of strychnine intoxication follows.     

HPLC法测定马钱子散中士的宁

目的 建立马钱子散中士的宁的高效液相色谱测定方法。方法 采用Akasil-C18柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇–0.01mol/L磷酸二氢钾溶液（25∶75）为流动相,体积流量为1.0 mL/min,检测波长为254 nm。结果 士的宁进样量在0.48～2.4 μg与峰面积线性关系良好（r＝0.999 5）,平均回收率为98.9%,RSD为2.2%（n＝6）。结论 所建立的方法专属性强、准确、快速,适用于马钱子散中士的宁的测定。     

Inhibitory neuromodulators do not alter the course of experimental hepatic encephalopathy

The neuromodulators, adenosine, serotonin, and glycine, did not alter the course of hepatic encephalopathy (HE) that followed a portacaval shunt and hepatic artery ligation in rats. The substances were instilled into the brain ventricle through an intraventricular cannula in doses that affect other aspects of behavior in the normal rat (adenosine, suppression of food intake; serotonin, loss of muscle strength and ataxia; glycine, leaning and circling). A subconvulsive dose of the glycine antagonist, strychnine, also had no effect on the course of HE. A large dose of the adenosine antagonist, caffeine, had a depressive rather than excitatory effect and shortened the time taken to induction of coma. These studies and a similar previous one with -aminobutyric acid (GABA) suggest that the inhibitory neuromodulators do not have a prominent role in the pathogenesis of hepatic coma.     

乳香、没药挥发油促九分散方中生物碱类成分的HaCaT细胞摄取及其机制研究

目的研究九分散中乳香、没药挥发油促进角质形成细胞HaCaT摄取马钱子碱、士的宁及盐酸麻黄碱的作用及其机制。方法采用CCK-8法检测乳香、没药挥发油单用/药对与九分散方中马钱子碱、士的宁、盐酸麻黄碱配伍对HaCaT细胞存活率的影响;采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)定量分析法结合BCA蛋白试剂盒测定在乳香、没药挥发油作用下HaCaT细胞对3种生物碱(马钱子碱、士的宁及盐酸麻黄碱)细胞摄取的影响;以DiBAC4(3)为荧光探针,利用流式细胞仪测定乳香、没药挥发油对HaCaT细胞膜电位的影响。结果不同乳香、没药挥发油均对3种生物碱有一定促透作用,且对脂溶性成分马钱子碱、士的宁的促透效果较水溶性成分盐酸麻黄碱好。乳香、没药挥发油分别作用于DiBAC4(3)标记的HaCaT细胞后,可降低HaCaT细胞膜电位,随着乳香、没药挥发油浓度增加,细胞膜电位荧光强度逐渐增强,具有浓度相关性,表现出类似氮酮的作用方式。结论九分散中乳香、没药挥发油均可促进HaCaT细胞摄取3种生物碱,促进机制可能通过影响皮肤表面负电荷而改变皮肤活性表皮屏障作用,从而有利于药物透过皮肤活性表皮层,其具体机制有待进一步探明。     

痹祺胶囊研究进展及其质量标志物的预测分析

中药质量控制一直是中药临床需求和产业发展的关键。刘昌孝院士于2016年提出的中药质量标志物(quality marker,Q-Marker)新概念和核心理论,建立了中药质量控制系列共性关键技术,构建了中药质量研究新模式,为中药品种的现代化研究指明了方向。以痹祺胶囊药效学、药动学研究为实例,在Q-Marker理论的指导下,从特有性、可测性、有效性和中药理论关联性等方面对痹祺胶囊的研究进行总结分析,发现士的宁、马钱子碱、甘草苷、丹酚酸B、甘草酸、隐丹参酮和丹参酮IIA可作为该复方的Q-Marker,为痹祺胶囊的质量控制及二次开发提供基础和依据,同时,也为建立痹祺胶囊的全程质量控制及质量可溯源体系奠定良好基础。     

HPLC法测定接骨丸中马钱子士的宁含量

目的:利用高效液相色谱法测定接骨丸中成药马钱子士的宁的含量,为控制接骨丸的质量提供可靠依据。方法:利用高效液相色谱法,waters C18(250 mm×4.6 mm,5μm)反相色谱柱;流动相∶乙腈∶0.2%磷酸水溶液(20∶70)等度洗脱;柱温:25℃;流速:1.0 m L·min-1;检测波长:260 nm。结果:士的宁的线性范围是0.080 g·L-1~0.400 g·L-1;r值均为0.99997,平均加样回收率为99.30%,RSD分别为0.89%。结论:利用高效液相色谱法测定接骨丸中士的宁的含量,具有良好的重现性和专属性,且准确快捷,能够很好地控制接骨丸的内在质量。     

基于“内外结合”分析马钱子的炮制火候

目的:通过机器视觉和电子鼻技术实现生马钱子饮片及其不同炮制火候砂炒马钱子饮片的鉴别与区分,并研究其颜色、气味与内在成分的相关性。方法:采用机器视觉技术和电子鼻技术获取生马钱子及其炮制品的颜色和气味信息,结合化学计量学方法(主成分分析、判别因子分析)分析炮制过程中的变化规律;采用HPLC测定不同炮制程度的马钱子饮片中生物碱成分士的宁和马钱子碱的含量;通过相关性分析法分析不同样品颜色值、气味值与成分的相关性。结果:马钱子炮制过程中随着炮制程度的加深,色调H值逐渐变小,饱和度S值逐渐变大,亮度V值逐渐变小,通过主成分分析和判别因子分析可实现炮制品的区分和判别;不同炮制程度的马钱子气味呈一定规律性变化;随着炮制程度的加深,马钱子中士的宁和马钱子碱的含量不断降低;通过相关性分析得出色调H及亮度V的颜色值变化与士的宁和马钱子碱的变化呈显著相关性,而气味与2种成分变化之间的相关性不显著。结论:通过机器视觉与电子鼻技术对颜色、气味的客观化评价,可实现马钱子与其不同炮制火候饮片的鉴别区分。传统以颜色作为马钱子炮制过程中的控制指标具有一定的科学性。     

通脉丸溶出液中士的宁和马钱子碱的含量测定

目的:建立通脉丸溶出液中士的宁和马钱子碱的含量测定方法。方法:采用超高效液相色谱法测定通脉丸溶出液中士的宁和马钱子碱的含量,色谱条件:Acquity UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈-0.02 mol·L~(-1)磷酸二氢钾与0.014 8 mol·L~(-1)庚烷磺酸钠等量混合溶液(用体积分数10%磷酸调节PH为2.8)(17∶83)为流动相;检测波长为260 nm;流速为0.3 m L·min~(-1);柱温30℃。结果:本方法对通脉丸溶出液中士的宁与马钱子碱均能适用,其中马钱子碱在3.712~74.24μg、士的宁在3.472~69.44μg内呈良好线性关系,r~2=0.999 9,平均加样回收率分别为102.65%(RSD 1.08%),104.19%(RSD 1.46%)。结论:该法分离效果好,专属性强,操作简便快捷,适用于通脉丸溶出液中马钱子碱与士的宁的测定。