基于药动学与药效学相关联的养阴通脑颗粒主要有效部位正交配伍研究

目的探讨养阴通脑颗粒主要有效部位(总生物碱、总黄酮、总皂苷、总酚酸)配伍后在脑缺血再灌注模型大鼠体内药物浓度及其药动学与药效学变化。方法采用正交试验法组成上述主要有效部位用量配比不同的9个组方,供脑缺血再灌注模型大鼠ig给药,高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定不同时间点血浆中的葛根素、阿魏酸和川芎嗪血浆药物浓度。DAS 3.2.6软件以非房室模型拟合药动学参数,并运用总量统计矩法和综合评分法对整体药动学特征进行评价。同时采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定大鼠血浆中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的含量。最后进行药动学-药效学(PK-PD)模型研究,获得各药物浓度与药效之间的定量方程。结果葛根素、阿魏酸和川芎嗪在模型大鼠体内的药动学特征有所差异。总量统计矩和综合评分研究表明不同配伍对总量零阶矩、总量平均滞留时间、综合评分等参数影响不一。主要有效部位正交配伍给药后,一定程度上会抑制脑缺血再灌注大鼠血浆中SOD和CAT的降低。各PK-PD模型均采用Sigmoid-Emax模型,拟合结果与实测数据之间相关性良好,R值均大于0.85。结论养阴通脑颗粒主要有效部位配伍对模型大鼠体内的药动学行为和抗氧化指标具有一定影响;中药复方多成分药物代谢动力学可采用总量统计矩和综合评分法进行研究;PK-PD结合模型可用于中药复方多成分药动学与药效学之间相关性的评价与预测。     

HPLC法测定清凉含片中葛根素的含量

目的建立HPLC法测定清凉含片中葛根素含量的方法。方法色谱柱为Waters VP-ODS-C18(250mm×4.6mm),流动相为甲醇-水(20∶80),流速为1.0m L/min,检测波长250nm。结果葛根素的进样量在4.019~200.9ng(r=0.9995)范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),平均加样回收率为99.30%,RSD为0.7%(n=6)。结论本方法简单,灵敏,重现性好,可用于清凉含片中葛根素的含量测定。     

葛根素在抗卵巢抗体阳性卵巢早衰患者中的应用价值与安全性研究

目的研究葛根素对AoAb阳性POF患者的治疗效果和应用经验,并探索葛根素对于POF患者AoAb的调节机制。方法将确诊为AoAb阳性的POF患者80例随机分为治疗组和对照组各40例,对照组采用雌激素-安宫黄体酮替代治疗,治疗组采用葛根素-安宫黄体酮序贯治疗,比较两组的临床疗效、激素水平、AoAb变化。结果两组治疗后的Kupperman评分与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组间治疗前后的Kupperman评分均无统计学差异(P>0.05)。两组的治疗效果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较,两组治疗后的FSH、LH水平均有显著降低(P<0.05);治疗组治疗后的E_2无明显变化(P>0.05),对照组治疗后E_2水平显著升高(P<0.05)。治疗组治疗后的AoAb浓度显著低于对照组和治疗前(P<0.05)。未发现葛根素诱发雌激素相关性肿瘤的发生。结论葛根素-安宫黄体酮序贯疗法是治疗POF的一种安全有效的方法,可降低血液AoAb浓度,甚至转阴,进而发挥保护卵巢的作用。     

葛根素联合复方樟柳碱注射液对眼底病患者的治疗效果及对血液流变学指标的影响

目的研究葛根素联合复方樟柳碱注射液对眼底病患者的治疗效果及对血液流变学指标的影响。方法选择2013年4月至2014年4月在绵阳市第三人民医院眼科进行眼底病治疗的患者100例,并按入院顺序抽签随机分为观察组和对照组,各50例。对照组进行葛根素常规治疗(葛根素注射液0.4 g加入生理盐水250 m L中静脉滴注,每日1次,1个疗程14 d,1个疗程后停药3 d,再进行下一疗程),观察组在此基础上联合复方樟柳碱注射液进行治疗(采用复方樟柳碱2 m L在患者颞浅动脉旁行皮下注射,每日1次,1个疗程14 d,完成1个疗程后停药3 d,再换肾俞穴进行注射,1个疗程后停药3 d,再进行第一个疗程的用药)。3个疗程后,比较两组患者治疗前后血液流变学的变化、术后复发率和不良反应情况及患者的治疗效果。结果治疗后,观察组全血黏度为(4.82±0.41)m Pa·s明显低于对照组的(5.56±0.39)m Pa·s,红细胞聚集指数(3.80±0.41)明显低于对照组(4.77±0.55),纤维蛋白原(4.20±0.24)g/L明显低于对照组(5.25±0.43)g/L,差异均有统计学意义(t=9.247,9.998,15.077,P<0.01);观察组患者治疗后复发率为2.0%(1/50),不良反应的总发生率为4.0%(2/50),分别低于对照组14.0%(7/50)和18.0%(9/50)(P<0.01);观察组患者的总有效率为98.0%(49/50),显著高于对照组的82.0%(41/50)(P<0.05)。结论葛根素和复方樟柳碱注射液联合治疗眼底病患者,可改善患者血液流变学,并提高临床治疗效果。     

葛根素的药理作用及临床应用分析

目的:探究葛根素的药理作用和临床应用效果。方法:选取心脑血管疾病的患者132例,分为研究组和对照组各66例,研究组患者采用葛根素治疗,对照组患者采用传统的丹参注射液治疗,比较两组患者的治疗效果。结果:患者在心血管疾病和脑血管疾病的治疗中,研究组患者治疗的有效率为95.45%,对照组患者有效率为84.85%,研究组患者的疗效明显高于对照组,差异显著,有统计学意义(P<0.05);研究组5例患者出现不良反应,发生率为7.6%,对照组6例患者出现不良反应,发生率为9.1%,没有明显差异,无统计学意义(P>0.05)。结论:葛根素对心脑血管系统的药理作用显著,可使外周循环得到改善,减少血小板的聚集,有β受体的阻断作用,以及降血糖、血压的效果,临床用用价值高,可广泛推荐。     

葛根素对小鼠胚胎干细胞源的心肌细胞T管发育的影响

目的:探讨葛根素(puerarin)对小鼠胚胎干细胞分化的心肌细胞横管(T管)发育的影响。方法:采用经典的悬滴法诱导小鼠D3系胚胎干细胞向心肌细胞分化,在分化过程中持续使用葛根素(100μmol/L)处理;应用Di-8-ANEPPS活细胞染色观察T管的形成;Real-time PCR测定T管发育相关蛋白的mRNA表达情况。结果:⑴在分化16 d和20 d,葛根素组中有T管的心肌细胞百分比分别为(39.56±1.02)%和(39.93±2.35)%,明显高于对照组(25.28±1.27)%和(29.57±1.54)%,(P<0.01);⑵葛根素显著上调T管发育相关基因caveolin-3、amphiphysin-2和junctophinlin-2的转录水平。结论:葛根素能促进小鼠胚胎干细胞源的心肌细胞中T管的发育,该作用可能与上调T管发育相关基因表达有关。     

HPLC检测柴银口服液中葛根素的含量分析

目的运用HPLC法对差银口服液只能够葛根素的含量进行检测分析。方法提取出柴银口服液中葛根素含量后,运用Agilent Eclipse XDB-C18作为色谱柱,将甲醇-水(25∶75)作为流动相,流速控制为1.0 m L/min,所检测的波长为250 nm,柱温控制为30℃。结果葛根素和峰面积线性关系最佳为0.02064~0.8256μg;葛根素峰面积的RSD为0.19%,试验仪器的精密度较好;葛根素峰面积的RSD为1.63%,表明,在24 h内,供试品溶液具有良好的稳定性;批号11113003、00512028以及00512010样品中含有的葛根素含量分别是0.8446、08357、0.8235 g/L,n=3时,其RSD分别为1.79%、2.27%、1.99%。结论采用HPLC法对柴银口服液中的葛根素含量进行检测,具有简便、快速、灵敏度高、专属性强以及重复性好的优点,可将其作为控制柴银口服液质量的有效方法。     

HLPC法测定感冒止咳颗粒中葛根素的含量

目的采用高效液相色谱法测定感冒止咳颗粒中葛根素的含量。方法 Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm);以甲醇-水溶液(28∶72)为流动相;检测波长为250 nm,流速为1.0 m L·min-1,柱温:35℃。理论板数按葛根素峰计算应不低于4 000。结果葛根素与其相邻杂质峰能完全分离,葛根素进样量在0.088 22~0.441 1μg之间与峰面积呈良好的线性关系,相关系数R2=1.000 0,平均加样回收率为97.66%,RSD=0.8017%(n=6)。结论本方法操作简便,精密度好,结果准确可靠,可用于感冒止咳颗粒的质量控制。     

葛根素预处理对大鼠血栓栓塞性脑缺血急性期的保护作用

目的:采用核磁共振技术、TTC染色方法检测葛根素预处理对脑缺血急性期的保护作用。方法:48只SD大鼠随机分为6组,每组8只。假手术组和模型对照组给予生理盐水,受试药给予葛根素注射液(21、42、84 mg/kg),阳性对照组给予灯盏细辛注射液(18 mg/kg)。尾静脉注射给药7天预防治疗后进行血栓栓塞性脑缺血手术。术后6 h行神经功能评分,采用核磁共振技术进行大鼠脑SE-T2WI以及弥散加权成像(DWI)序列扫描,测量脑病变范围;术后24 h评分后取脑进行TTC染色,测量脑梗死范围;取血清检测SOD、MDA。结果:葛根素42mg/kg预处理组大鼠缺血6 h和24 h行为障碍分别改善17.8%、33.3%;6 h脑病变范围和24 h梗死范围缩小29.4%、31.6%,血清MDA含量降低16.0%,SOD活力升高21.1%;葛根素84mg/kg较42mg/kg效果稍好,葛根素21mg/kg未见明显效果。结论:葛根素预处理能改善大鼠脑缺血急性期受损神经功能,缩小脑病变范围,具脑保护作用。     

葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤后JAK2/STAT3信号通路的影响

目的:探讨葛根素在大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用机制以及与JAK2/STAT3信号通路的相关性。方法:将36只SD雄性大鼠随机分为假手术组12只和造模组24只(其中造模组分缺血再灌注组12只及葛根素组12只)。采用线栓法制备大鼠MCAO模型,于脑缺血2h再灌注24h时用Longa评分法进行神经功能缺损评分,TTC染色法测定脑梗死体积,TUNEL法检测海马组织神经细胞凋亡数,免疫组织化学法检测海马组织磷酸化的JAK2(P-JAK2)、STAT3(P-STAT3)的表达。结果:与假手术组比较,造模组神经功能缺损加重,梗死体积增大,凋亡细胞数增多,P-JAK2和P-STAT3表达水平增高,差异具有统计学意义(P0.05);与缺血再灌注组比较,葛根素组神经功能缺损评分明显下降,梗死体积与凋亡阳性细胞数均见明显减少,P-JAK2及P-STAT3表达水平显著降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:JAK2/STAT3信号通路参与了脑缺血再灌注损伤过程;通过抑制JAK2/STAT3信号通路的异常激活可能是葛根素神经保护作用机制之一。