去整合素-金属蛋白酶17、Notch1及α-平滑肌动蛋白在子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的 研究去整合素-金属蛋白酶（deintegrin metalloproteinase,ADAM）17、Notch1及α-平滑肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin,α-SMA）在子宫内膜异位症（EMs）组织中的表达,及其与子宫内膜异位症的临床病理特征之间的相关性。方法选取2019年10月至2020年10月潍坊医学院附属医院收治的EMs病人异位内膜40例（异位内膜组）、在位内膜25例（在位内膜组）,正常内膜25例作为对照组。采用免疫组化法及半定量分析法分别检测ADAM17、Notch1、α-SMA在三组中的表达。分析异位内膜组织中ADAM17、Notch1、α-SMA的表达与病理特征的关系。采用Pearson相关分析分析ADAM17、Notch1、α-SMA在三组中的表达的相关性。结果 ADAM17、Notch1、α-SMA在异位内膜组中的表达高于在位内膜组（4.77±1.35比3.24±1.09,4.40±1.24比3.44±0.96,4.42±1.30比3.36±0.95）,差异有统计学意义（P<0.05）,在位内膜组的表达高于正常内膜组（2.36±1...     

转染胃动蛋白2基因抑制人胃癌细胞系MKN28增殖、迁移和侵袭

目的检测胃癌、癌旁组织和胃癌远端胃黏膜组织中胃动蛋白2(GKN2)的表达;分析GKN2转染人胃癌MKN28细胞系后对增殖、迁移和侵袭的影响。方法免疫组织化学技术检测胃癌、癌旁组织和胃癌远端胃黏膜中GKN2蛋白的表达;将GKN2基因真核表达载体(Xhol_GKN3SP-h GKN2-TEV-SBP_Xhol)转入人胃癌MKN28细胞,经G418筛选后获得稳转细胞株,Western blot确定GKN2在MKN28细胞中表达;MTT法测定MKN28细胞增殖;Transwell迁移实验和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭。结果 GKN2在胃癌组织中的表达少于胃癌远端胃黏膜和癌旁胃组织(P<0.05)。GKN2转染人胃癌MKN28细胞后吸光度值(A值)显著低于未转染组和空载体组(P<0.05)。与未转染组及空载体组相比,GKN2过表达致使迁移细胞数(P<0.05)和侵袭细胞数均明显下调(P<0.05)。结论 GKN2表达减低与胃癌的发生有关;GKN2过表达显然可阻抑人胃癌MKN28细胞的增殖、迁移和侵袭。     

核小体结合蛋白调控Survivin基因对前列腺癌DU145凋亡的作用

目的探讨抑制人核小体结合蛋白1（NSBP1）基因后促进非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145凋亡的作用机制。方法通过慢病毒lentivirus-NSBP1转染非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145后,MTT法观察细胞活性变化,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,应用Western-blot技术检测NSBP1、Survivin蛋白的变化情况。结果抑制NSBP1表达水平后非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145细胞活性降低,凋亡增加,同时Survivin蛋白的表达也随之降低。结论通过慢病毒转染抑制NSBP1的表达可以促进非激素依赖性前列腺癌细胞系DU145凋亡,NSBP1可能是通过调控Survivin基因的变化影响细胞的增值凋亡。     

α-SMA、CD68在人胸主动脉瘤和腹主动脉瘤中表达的比较

目的通过对胸主动脉瘤（TAA）、腹主动脉瘤（AAA）和正常主动脉的研究，探讨TAA和AAA的病理学特点。方法收集A从标本17例、TAA标本11例和正常主动脉标本6例，进行α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、CD68免疫组化技术染色，研究血管壁改变情况。结果TAA和从A在病变类型、血管平滑肌细胞（VSMC）和巨噬细胞的分布方面基本相同，TAA和AAA病变处巨噬细胞增多，VSMC数量减少。但是与TAA相比，AAA常合并有AS病变和更多的巨噬细胞浸润。结论TAA和AAA病理特点大体相同，但在某些量化指标上存在差异。     

银杏叶提取物对TGF-β1诱导的人Tenon's囊成纤维细胞增殖的影响及其机制的初步探讨

目的:观察银杏叶提取物(GBE)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人Tenon's囊成纤维细胞(H TCFs)增殖的影响及可能机制.方法:体外培养HTCFs及鉴定;MTT法检测不同浓度的GBE(25、50、100、200 mg/L)对TGF-β1(2 ng/mL)诱导的HTCFs增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期;免疫细胞化学法观察α-平滑肌动蛋白(α-SMA)表达的情况.RT-PCR检测细胞结缔组织生长因子mRNA(CTGF mRNA)的表达.结果:TGF-β1可显著促进HTCFs的增殖,促进细胞由G0/G1期进入S期,上调α-SMA、CTGF在蛋白和mRNA水平的表达;GBE能够抑制TGF-β1的上述作用.结论:GBE具有抑制TGF-β1诱导的人Tenon's囊成纤维细胞增殖的作用,其机制可能是阻止细胞进入S期,下调α-SMA及CTGF的表达.     

Ⅳ型胶原酶门脉灌注对兔肝硬化组织中ɑ-平滑肌动蛋白的影响

目的四氯化碳（CC l4）皮下注射建立兔肝硬化动物模型,观察Ⅳ型胶原酶门脉灌注对肝硬化组织中α-平滑肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。方法取雄性新西兰大白兔,采用臀部皮下注射50%CC l4橄榄油0.23 mL/kg,每周2次,共12周制作肝硬化动物模型,注射等量橄榄油作为对照。12周后各组动物均建立门静脉给药通路,将已形成肝硬化并门静脉插管成功的33只兔随机分为两组（组1,组2）,组1有16只、组2有17只。组1经门静脉给药通路注入0.1%Ⅳ型胶原酶1.5 mL,组2注入等量0.9%NaC l,5次/周,共4周。将造模对照组中门静脉插管成功的30只兔同样随机分为两组（组3,组4）,每组15只,处理方法同前。4周后,将各组动物处死后留取肝脏组织,固定后α-SMA免疫组织化学染色,行积分光密度、面密度分析。结果肝硬化动物肝脏α-SMA表达显著增强;门脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶肝硬化动物肝脏纤维化程度明显降低,但α-SMA表达强度显著增高。结论采用门脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶可显著增高α-SMA表达,可能与肝脏肝星状细胞激活有关。     

荧光定量聚合酶链反应法比较标准管家基因3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白、酸性核糖体磷蛋白P0及18S核糖体RNA在老年大鼠不同组织中的表达

背景:反转录聚合酶链反应用于基因表达分析越来越显示出其重要性,其中合适的内参基因选择很重要,目前并没有适合于所有体系可作为内参的管家基因.人鼠是常用动物模型,选择合适的大鼠管家基因作为内参尤其必要.目的:比较分析使用最广泛的4个标准管家摹因3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白、酸性核糖体磷蛋白P0及18S核糖体RNA在老年大鼠肝、肾、心、肺组织和大脑皮质中的表达情况.设计、时间及地点:观察对比实验,于2007-07/08在泰山医学院生命科学研究所分子生物学实验室及泰安市疾控中心病毒检测中心实验室完成.材料:选用老年SD大鼠3只,用于检测管家基因表达情况.方法:采用反转录实时荧光聚合酶链反应技术检测老年大鼠肝、肾,心、肺组织和大脑皮质中有着不同表达丰度和功能的4个管家基因3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白、酸性核糖体磷蛋白P0及18S核糖体RNA的表达情况.主要观察指标:老年大鼠不同组织内4个管家基因的表达水平及不同组织间的表达差异.结果:①酸性核糖体磷蛋白P0在老年大鼠不同组织间表达差异最小.②老年大鼠肾组织中表达最稳定的管家基因是β-肌动蛋白:心脏组织和肺组织中表达最稳定的管家基因是3-磷酸甘油醛脱氢酶.结论:老年大鼠组织间信使RNA分析仅用1个内参基因是不合适的,至少应该使用两个参照基因,1个选用18S核糖体RNA:另一个基因的选择标准如下:适用于分析不同组织间基因表达情况的内参基因是酸性核糖体磷蛋白P0,而心脏和肺组织研究适用3-磷酸廿油醛脱氢酶,肾组织研究适用β-肌动蛋白.     

上消化道间质瘤的内镜及病理学特点分析

目的探讨上消化道间质瘤(GIST)的胃镜、超声内镜及病理学特点。方法回顾分析该院2005年7月～2007年7月诊断的43例上消化道GIST的内镜及病理学资料。结果43例GIST中18例经胃镜加病理活检及免疫组织化学法确诊,胃镜下表现为球形或半球形黏膜下隆起,可有脐样溃疡;病理学上GIST细胞以梭形或上皮样细胞为主,成束状排列,免疫组织化学法示CD117,CD34表达阳性率分别为100%及89%,平滑肌肌动蛋白(SMA)及突触素(SYN)无表达;余23例经超声内镜诊断,良性20例,恶性3例,表现为起源于固有肌层的均质或不均质低回声。结论GIST的诊断有赖于胃镜、超声内镜与病理活检、免疫组织化学法相结合。     

5-氮胞苷诱导兔脂肪干细胞分化为心肌样细胞的特定基因表达

背景:采用生物学技术将脂肪干细胞进行心肌内移植,修复损伤心肌组织是近年来心血管病研究领域的一大热点。脂肪干细胞经诱导分化后的特定心肌基因表达尚无全面的研究报道。目的:观察兔脂肪干细胞经5-氮胞苷诱导分化为心肌样细胞后心肌特异性基因的表达。方法:取第2代脂肪干细胞,加入2.5,5,10,20,40,80μmol/L5-氮胞苷经24h作用后,用完全培养液对其继续进行培养,4周后再观察细胞生长和形态学的改变。待诱导1,2,3,4周,利用RT-PCR技术检测心钠素,脑钠素,α-骨骼肌动蛋白的基因表达。结果与结论:5-氮胞苷诱导1周,其细胞大多呈紧密平行排列,其体积有所增大,梭形细胞比例相对有所下降,40,80μmol/L组细胞形态变化明显。诱导第4周时,40,80μmol/L组细胞折光性减弱,细胞活性减弱,细胞死亡数继续增加。RT-PCR检测心钠素,脑钠素,α-骨骼肌动蛋白的基因表达呈逐渐增加趋势;10μmol/L组各基因的表达明显高于其他各组(P<0.05)。结果提示兔脂肪干细胞经5-氮胞苷诱导分化的细胞具有心肌细胞的某些基因的特异性表达。     

Rho家族蛋白与纤维化

Rho GTP酶是小鸟苷酸三磷酸酶,是一种单体G蛋白,又称小G蛋白,是Ras超家族成员之一.Rho GTP酶家族在结构上至少可分为五个家族:Ras家族,Rho家族,Rab家族,Sarl/Arf家族和Ran家族[1].而其中的Rho家族蛋白的主要成员Rho(包括RhoA、RhoB、RhoC)、Rac、Cdc42是当前研究的热点.Rho家族蛋白是一种重要的细胞内信号分子,以多种信号途径调节细胞的行为与功能,如细胞收缩、游走粘附、生长分裂、活化凋亡、分型转化等.由于其强大的细胞调节功能,Rho家族蛋白在各种疾病的发生发展过程中引起了广泛关注.大量研究表明Rho家族蛋白与组织器官纤维化密切相关,使人们对纤维化的发病机制有了更深入的认识,也为纤维化的治疗提供了新思路.