不同状态下牙髓组织蛋白质表达的二维电泳分析

目的 利用蛋白质组技术探讨牙髓对中龋和热刺激的反应.方法 用双向电泳得到牙髓在中龋和热刺激状态下的二维电泳图谱,对差异点进行质谱鉴定.结果 经Image Master2-D Platinum 5.0软件分析显示,正常牙髓和中龋牙髓的蛋白表达无显著差异;热损伤牙髓有2个蛋白点缺失,8个蛋白点下调.质谱分析鉴定了7种蛋白质.结论 本实验条件下,中龋牙髓的蛋白质表达与正常牙髓无显著差异,热刺激可造成部分蛋白表达的下调.     

成人牙周炎治疗前后龈沟液蛋白质的电泳分析

目的通过分析成人牙周炎患者同一位点基础治疗前后１个月龈沟液（ｇｉｎｇｉｖａｌｃｒｅｖｉｃｕｌａｒｆｌｕｉｄ，ＧＣＦ）中蛋白成分的改变，以期发现能够反映牙周健康及疾病状况的特异蛋白。方法采用滤纸条法收集１２例成人牙周炎患者５６个位点ＧＣＦ样本，以十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳＰＡＧＥ）法分离，ＩｍａｇｅＭａｓｔｅｒＴＭ电泳图象分析仪分析其中的蛋白质。结果治疗后蛋白区带数及非血清源低分子量１２０００，１００００蛋白的丰度及百分含量较治疗前显著减少（分别为Ｐ＜０００１和Ｐ＜００５），而３８０００蛋白百分含量呈增加趋势且与治疗前牙周探诊深度和ＧＣＦ量呈负相关（Ｐ＜００５）。结论分子量为１２０００，１００００的蛋白与牙周炎症有关；分子量３８０００的蛋白与疾病的好转有关     

杭州市五家医院万古霉素耐药肠球菌耐药转座子结构及分子分型

目的 明确万古霉素耐药肠球菌(VRE)耐药转座子结构及分子分型.方法 收集2006年4月至2007年4月杭州市5家医院21株VRE菌株,用Etest法进行抗菌药物的药敏试验,并通过PCR、接合试验、质粒提取、耐药转座子结构、脉冲凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型(MIST)及多位点串联重复序列分型(MLVA)进行研究.结果 21株VRE基因型及表型均符合vanA.属于10个不同的PFGE型,7个不同的MLST分型,4个不同的MLVA分型,其中18株属于克隆复合体CC17,另外3株为ST343与CC17接近.所有VRE菌株均对利奈唑胺及替加环素敏感.多对引物对转座子的不同区域的PCR扩增并进行序列拼接、比对,发现其中2株VRE菌株携带典型的耐药转座子Tn1546,其余19株VRE菌株均携带一种新的与Tn1546相似耐药转座子,均在vanXY之间反向插入IS1485.18株VRE菌株均可通过滤膜接合试验进行万古霉素耐药转移,接合菌均含有约54 000 bp大小的质粒.结论 杭州市5家医院21株VRE菌株均为vanA表型及基因型,发现了一种新的万古霉素耐药转座子结构.21株VRE菌株经MLST分型属于7个不同的序列分型,属于或接近易在医院环境里生存并在近年来迅速造成了全球播散的克隆复合体CC17.     

两种方法测定血清白蛋白的临床应用评价

目的分析电泳法和溴甲酚绿法检测白蛋白及白蛋白/球蛋白比值的相关性。方法本院健康体检人员及相关疾病人员102例,采用Helena全自动电泳仪和日立7600-020全自动生化分析仪分别进行测定,得出总蛋白、白蛋白及A/G比值,对上述结果进行相关性分析。结果溴甲酚绿法与电泳法进行比较:健康组ALB及A/G相关系数r分别为0.98、0.97,(P>0.05);肝病组ALB及A/G相关系数r分别为0.90、0.91(P>0.05);肾病组ALB及A/G相关系数r分别为0.74、0.73(P<0.05);多发性骨髓瘤组ALB及A/G相关系数r分别为0.52、0.55(P<0.05)。结论对健康人和肝病患者两种方法检测白蛋白有相关性,电泳法依据物理性质分离蛋白质,结果更具客观性,在肾病和多发性骨髓瘤病人的测定结果更加稳定可靠。     

高效毛细管电泳法快速测定血清中游离氨基酸

目的建立快速测定人血清中游离氨基酸的方法。方法用高效毛细管电泳法检测了４０例健康人，３２例肾病患者血清氨基酸。结果在８分钟内分离１６种氨基酸，线性在１０～７００μｍｏｌ／Ｌ范围，最低检出限为２．５～７．９μｍｏｌ／Ｌ，回收率为８６３％～１０７．４％，批内精密度为２．８％～１０．３％，批间精密度为３．５％～１１．６％。对３２例肾脏病患者血清中氨基酸测定结果与４０例正常人对照组氨基酸测定值进行统计分析。结论高效毛细管电泳法具有快速、准确、灵敏等特点，为临床及科研工作中测定氨基酸提供了一种有效的方法     

血清苯丙氨酸、酷氨酸的高效毛细管电泳分析

目的 建立和完善用高效毛细管电泳（HPCE）快速测定血清中苯丙氨酸（Phe）和酪氨酸（Tyr）的方法。方法 用HPCE检测7例正常儿童和10例苯丙酮尿症息儿血清中苯丙氨酸和酪氨酸，用苯丙氨酸和酪氨酸标准液测定后绘制校正曲线，并使用高效液相色谱法（HPLC）对部分标本同步测定进行比较。结果 对HPCE实验条件和电泳条件进行优化和选择，最终采用：水浴温度50℃，水浴时间40min，硼酸钠缓冲溶液pH为9．8，分离电压28kV，分离温度15℃。苯丙氨酸迁移时间为6．8min，酪氨酸迁移时间为5．9min;用HPCE检测苯丙酮尿症患儿血清中Phe和Tyr的水平，与HPLC的检测结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 该方法快速、简便、准确、灵敏度高，为临床检测苯丙酮尿症提供了一种有效的方法。     

Urinary free light chain analysis by the Freelite immunoassay: a preliminary study in multiple myeloma

Evaluate the Freelite free light chain immunoassay for urine analysis in myeloma.Urine specimens from 20 patients were analyzed by Freelite (The Binding Site) and SDS-agarose gel electrophoresis (Hydragel protéinurie, Sebia).Using the kappa/lambda ratio, Freelite was more sensitive than electrophoresis to detect free light chains, but concentration was overestimated in 75% of cases.Despite high sensitivity and full automation, Freelite inaccurately measures monoclonal free light chains in urine.     

2008—2013年北京市17株伤寒和副伤寒沙门菌耐药和分子分型研究

目的分析2008—2013年北京市17株伤寒、副伤寒沙门菌耐药及分子分型。方法对2008-2013年通过对北京市肠道门诊监测系统分离到的17株伤寒、副伤寒沙门菌进行生化鉴定、血清分型并运用纸片法进行药敏检测;利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型。结果 17株伤寒、副伤寒沙门菌对三代头孢菌素类药物头孢他啶敏感率达100%,头孢噻肟和头孢曲松敏感率均为93.75%,对氟喹诺酮类药物环丙沙星敏感率为93.75%,萘啶酸耐药率达31.25%。其中16株伤寒、副伤寒沙门菌可分为15种PFGE带型,带型分布较分散。结论北京市伤寒、副伤寒沙门菌分离株对3代头孢类抗生素及环丙沙星敏感;PFGE分子型别较多,无聚集性。     

大鼠心肌缺血预适应延迟相的差异蛋白质的分离及鉴定

目的采用蛋白质组学技术探讨缺血预适应心肌内源性保护的分子机制。方法应用双向凝胶电泳技术分离假手术组和心肌缺血预适应延迟相组大鼠的心肌总蛋白质。结果在假手术组的双向凝胶电泳图谱上展示704±27个蛋白质点,而在心肌缺血预适应延迟相组展示778±35个蛋白质点。经凝胶图像分析找到的差异蛋白质23个,基质辅助激光解析—电离飞行时间质谱对差异蛋白进行鉴定,共鉴定出12个蛋白质。这些蛋白质包括应激反应蛋白、代谢相关蛋白、信号调节蛋白、结构蛋白等。结论这些差异蛋白可能通过其分子伴侣功能、清除自由基、改善能量代谢等发挥心肌缺血预适应延迟相的心肌保护作用。     

垂直板SDS-PAGE分析尿蛋白组分及临床应用的初步研究

目的：利用垂直板SDS-PAGE法进行尿蛋白谱分析,以区分尿蛋白类型。方法：收集患者及正常人体尿液,直接做垂直板十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）,用考马斯亮蓝染色,肉眼判定结果。结果：根据尿蛋白电泳图谱区分尿中含有不同分子量蛋白来判断属于肾小球性、肾小管性、混合性、溢出性及生理性蛋白尿。结论：本法分析尿蛋白组分操作简单方便、成本低、相对省时、结果直观易判定,适于推广使用。