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1.
2.
目的 克隆竹节参Panax japonicus鲨烯环氧酶基因(squalene epoxidase,PjSE)的全长cDNA序列,进行生物信息学分析和原核表达。方法 设计特异性引物,从竹节参中克隆得到PjSE序列;以PjSE基因序列作为输入数据,利用多序列同源比对等生物信息学分析工具进行序列分析;构建重组原核表达载体pCold-PjSE,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达;采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在竹节参不同组织中的相对表达量。结果 PjSE基因开放阅读框长度为1884 bp,编码627个氨基酸,PjSE蛋白相对分子质量为68 639.49,初步预测其具有跨膜结构域,可能定位在叶绿体上;聚丙烯凝胶电泳结果显示诱导表达蛋白的相对分子质量大小与预期结果一致;该基因在竹节参叶中表达量最高,须根次之,根中表达量最低。结论 PjSE基因的克隆、生信分析及原核表达研究,不仅有助于丰富竹节参中该类功能蛋白的种类和数量,完善竹节参皂苷类成分的生物合成途径,也为后期开展竹节参皂苷的异源合成提供了可供选择的关键基因元件。 相似文献
3.
4.
竹节参规范化生产标准操作规程(SOP)(讨论稿) 总被引:5,自引:0,他引:5
1 主要内容与使用范围。1.1 主要内容 本规程按我国中药材GAP产品标准规定了湖北省恩施市竹节参产区有关规范化生产的综合技术要求。 相似文献
5.
6.
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8.
目的:比较竹节参中4种主要皂苷成分竹节参皂苷Ⅴ、伪人参皂苷RT1、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa及其组合物的降脂活性。方法:采用油酸诱导的HepG2细胞脂肪堆积模型,以辛伐他汀和血脂康为阳性对照,以三酰甘油(TG)清除率为指标,考察竹节参皂苷Ⅴ、伪人参皂苷RT1、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa及其不同比例组合物的体外降脂活性差异。构建蛋黄乳诱导的小鼠急性高脂血症模型,以辛伐他汀和血脂康为阳性对照,以血清TG、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)为指标,比较4种皂苷成分组合物与竹节参总皂苷的体内降脂作用。结果:体外实验结果显示,在相同剂量下,4种皂苷成分组合物的降脂活性优于各竹节参皂苷单体化合物和竹节参总皂苷,TG清除率显著升高(P0.05,P0.01);其中竹节参皂苷Ⅴ、伪人参皂苷RT1、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa按2∶1∶1∶1比例组合物的降脂作用最为显著。体内实验结果显示,上述配比的竹节参皂苷组合物可显著降低急性高脂血症小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P0.05,P0.01),升高HDL-C水平(P0.05,P0.01),且其降脂作用优于竹节参总皂苷。结论:竹节参皂苷Ⅴ、伪人参皂苷RT1、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa按2∶1∶1∶1组合可发挥协同降脂作用。 相似文献
9.
目的建立一测多评法同时测定竹节参中7种皂苷类成分的含量,并验证此方法在竹节参中应用的可行性与适用性。方法采用HPLC法,以竹节参皂苷Ⅴ为内参物,建立人参皂苷Rg1、Re、Rb1,假人参皂苷RT1,竹节参皂苷Ⅳ、Ⅳa的相对校正因子(fs/i),并利用fs/i计算竹节参样品中成分的含量,同时用外标法测定各成分的含量,比较2种方法的差异。结果人参皂苷Rg1、Re、Rb1,假人参皂苷RT1,竹节参皂苷Ⅳ和Ⅳa的fs/i分别为1.286 7、1.432 7、0.966 6、0.962 4、1.207 2、0.938 4。采用一测多评法与外标法得到的10批竹节参样品各成分含量无显著性差异。结论建立的一测多评法准确性高,可用于竹节参皂苷类成分的定量分析和质量评价。 相似文献
10.
竹节参地上部分中总皂苷成分抗炎镇痛活性 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究竹节参地上部分中所含总皂苷成分抗炎镇痛的活性.方法:分别取竹节参地上部分和根茎的总皂苷提取物,采用小鼠二甲苯致耳肿胀和腹腔毛细血管通透性实验观察对比两者的抗炎作用,采用小鼠热板和扭体实验进行两者镇痛效果的比较.结果:竹节参地上部分中总皂苷提取物低剂量组能降低腹腔毛细血管通透性,而竹节参根茎中总皂苷提取物低、中剂量组能抑制二甲苯所致的耳肿胀,两者均有抗炎的活性.竹节参地上部分及根茎的总皂苷提取物均能减少醋酸所致小鼠扭体次数,且中、高剂量组均可提高小鼠热板痛阈,两者均有镇痛作用.结论:竹节参的地上部分中所含总皂苷为其抗炎镇痛活性成分,其抗炎镇痛活性与根茎相似. 相似文献