In Situ PLA技术原位分析MTA1与NuRD复合体其他组分的相互作用

目的原位检测肿瘤转移相关蛋白MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用并分析MTA1/NuRD复合体在HCT116细胞中的分布情况。方法首先利用co-IP技术体外验证MTA1与NuRD复合体其他组分Mi2、HDAC2及MBD3在HCT116细胞裂解液中的相互作用。然后利用In Situ PLA技术,体内原位检测MTA1与三者的相互作用,并根据镜下阳性荧光信号数目,比较MTA1与Mi2、HDAC2及MBD3之间的作用强弱;根据相互作用位点的亚细胞分布情况,分析间期及M期MTA1/NuRD复合体的核质分布情况。结果首次从体内原位水平证实MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用;其作用强度HDAC2最高,Mi2次之,MBD3最弱;首次发现MTA1/NuRD复合体存在很明显的胞质分布（约占总量的1/4）;另外,我们还首次发现在M期MTA1/NuRD复合体不再位于核区,而是位于染色体外周。结论In Situ PLA技术是一项有效的原位检测蛋白相互作用的新技术;MTA1/NuRD复合体可能参与MTA1胞质中功能的发挥;并且其胞质分布可能参与M期进程调控。     

硒预防病毒性肝炎的实验研究

1.硒盐对人群肝炎的预防试验:供应硒盐乡与周围乡居民对比观察肝炎发病率的变化,试验结果1986、1987、1988年硒盐乡居民肝炎发病率明显低于周围对照乡(p0.001)且对乙型肝炎发生亦有抑制作用。45万人群扩大预防试验,进一步验证吃硒盐乡居民甲型乙型肝炎发病率明显较对照乡低。硒盐预防肝炎,即使停吃硒盐,预防肝炎的作用尚可维持一年。 2.硒盐可行性试验证明无毒,对肝肾功能均无影响。资料表明,百万人群吃硒盐10年亦无毒副作用。剂量易于控制,可在低硒或缺硒地区大规模推广应用。     

骨唾液酸蛋白与肿瘤

骨唾液酸蛋白(BSP)是存在于细胞外基质中的一种高度磷酸化和糖基化的分泌性非胶原蛋白，主要分布在矿化组织中，参与骨骼的矿化、转换、分化以及骨吸收等生理病理过程。近年来，BSP在骨转移瘤中的高表达提示它在肿瘤的生长、浸润和转移中发挥重要作用。现主要综述BSP的结构功能、调节机制及其与肿瘤的关系。     

反义 HSP70对人乳腺癌细胞的抑瘤效应

目的：观察反义热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70)RNA对人乳腺癌细胞学特性的影响,探讨其抗肿瘤作用。方法：将逆转录病毒真核表达载体介导的反义HSP70重组质粒pX-AHSP70和空载体pLXSN-neo转染至MCF7／Adr人乳腺癌细胞,通过细胞生长曲线和软琼脂集落实验以及裸鼠移植瘤实验观察转染反义HSP70重组质粒细胞的体内外抑瘤作用。结果：建立了稳定表达反义HSP70 RNA的MAp70细胞,与空载体细胞相比,HSP70蛋白的表达下降了48％。细胞群体生长速度明显减慢,软琼脂集落形成率和抑制率分别为6．08％和62．14％,裸鼠皮下接种的平均出瘤时间为15天,最终平均瘤重为108mg,以上参数与空载体细胞相比,均有显著差异。结论：反义HSP70RNA能够有效地抑制HSP70表达,进而抑制乳腺癌细胞的体外增殖和体内移植瘤的形成与发展。     

反义HSC70与mtP53和肿瘤耐药关系的探讨

目的 观察反义HSC70RNA对MCF7／Adr人乳腺癌细胞耐药性影响,探讨其与突变型p53稳定性和肿瘤耐药间的关系。方法 利用DNA重组技术将人HSC70DNAt片段反向克隆至真核载体pLXSN中,构建反义人HSC70真核表达质粒pX-AHSC70。用脂质体方法将重组质粒转染至MCF7／Adr人乳腺癌细胞内,以PCR确定转染细胞中外源DNA存在后,Western blot检测HSC70蛋白的抑制程度。MTT法检测细胞耐药性的影响。p53稳定性实验分析反义HSC70RNA对突变型p53半衰的改变。结果 经G418筛选获得稳定表达反义HSC70RNA细胞株MAc70,与空载体MAX细胞相比,HSC70蛋白表达下降42％,细胞耐药性显著下降。p53稳定性实验表明,其胞内突变型p53含量下降,半衰期缩短,稳定性明显下降。结论 反义HSC70RNA能够明显降低HSC70蛋白表达,导致乳腺癌细胞的耐药性下降,提示HSC70可能通过增强突变型p53稳定性的途径而参与MCF7／Adr乳腺癌细胞的耐药。     

HBV启动子调控的GFP在肿瘤细胞中的表达

为进一步探讨针对晚期肺癌患者治疗的新方式 ,本文根据曾有动物实验研究报告 (即ＢＣＧ辅以ＩＬ 2吸入防治实验肺癌模型 ) ,通过采用超声雾化方式 ,在临床上试行将相关免疫制剂配合化疗药物以气溶胶微粒形式吸入肺组织用以治疗肺癌 ,先后对 10例患者进行共 16例次的治疗。初步观察该方法在控制肿瘤病灶发展、减轻病痛等方面临床意义 ,现报告如下。10例患者中 ,男 7例 ,女 3例 ;年龄 6 2～ 88岁。所有患者均以临床表现 ,影像学检查 ,部分经病理证实诊断为肺癌 ,其中 ,原发性肺癌 7例 (腺癌、鳞癌各 3例 ,1例无病理 ) ;转移性肺癌 3例。ＫＰＳ…     

LONG TERM SUPPLEMENTATION OF SE-ENRICHED MALT FOR THE HIGH RISK POPULATION OF LUNG CANCER: INHIBITION OF ULTRAVIOLET LIGHT AND BENZOaPYRENE INDUCED UNSCHEDULED AND SYNTHESIS OF PERIPHERAL LYMPHOCYTES

Se malt cakes containing 300μg selenium were taken up daily to men from high risk area in lung cancer and the influences of Ultraviolet (UV) and Benaopyrene (BαP) induced unscheduled DNA synthesis (UDS) were determined. The Se levels in serum, hair and activity of GSH-px were increased by 89%, 67% and 178%, respectively, after Se-supplementation for half year. In the UV treatment, the ratio of UDS was decreased from the mean values of 2. 47 in the control to 1. 61 (P<0. 05) in the Se-group, In the BaP treatment, furthermore, the elevated Se levels of 78% in serum and 83% in the hair accompanied with 56% high in activity of GSH-px were followed by the Se intake for one year, while the mean value of UDS was reduced from 2. 21 in the control to 1. 47(P< 0. 05) in the group of selenium tested. The blocking effects of UV irradiation and BaP treatment induced UDS of peripheral lymphocytes were showed in the Se-supplementation.     

热休克蛋白90α(HSP90α)在大肠杆菌中的表达

目的 :探讨热休克蛋白 90α的生物学功能 ,获得高质量及充足的HSP90α蛋白。方法 :采用PCR的方法扩增HSP90αcDNA5’端 42 4bp片段 ,在起始密码子位置制造一个NcoI酶切位点 ,将PCR产物克隆到中间载体 ,再通过合适的酶切位点将其余片段连接到此载体 ,形成一个带有NcoI突变位点的HSP90αcDNA全长克隆。最终将HSP90α全部编码cDNA插入到pET 16b表达载体中。结果 :经诱导表达 ,SDS PAGE凝胶电泳分离显示在分子量大约 83kD处有一诱导蛋白带。WesternBlot证明表达产物与抗HSP90α抗血清有特异的免疫反应。结论 :构建成了T7启动子控制下的HSP90α表达质粒。