益气活血方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的影响及其细胞凋亡机制

目的观察益气活血方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的影响并探讨其中的细胞凋亡机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、酒石酸美托洛尔组、益气活血小剂量组和益气活血大剂量组。所有组别均进行大鼠冠状动脉结扎术,假手术组不进行最后的冠状动脉结扎。益气活血方由人参、黄芪、当归按一定比例组成。酒石酸美托洛尔组按12 mg/(kg·d)给药剂量灌胃,益气活血小剂量组和大剂量组分别按2 g/(kg·d)和20 g/(kg·d)给药剂量灌胃,假手术组和模型组给予生理盐水灌胃。于造模后24小时开始,连续给药8周后进行小动物心动超声检测以及心脏组织取材TUNEL染色检测细胞凋亡。结果小动物心动超声结果显示,与假手术组比,模型组大鼠的心脏LVDd、LVDs显著增加(P<0.05),LVEF%、LVFS%显著降低(P<0.05)。与模型组比,给予益气活血方小剂量可以显著改善LVEF%、LVFS%(P<0.05),而大剂量益气活血方有改善LVEF%、LVFS%的趋势,但差异没有统计学意义(P>0.05)。大鼠心肌组织TUNEL染色表明,模型组大鼠心肌细胞TUNEL染色阳性细胞核显著增高(与假手术组比较,P<0.01),益气活血小剂量和大剂量可以明显抑制冠状动脉结扎大鼠模型心肌组织细胞凋亡的发生(P<0.05;P<0.01)。结论益气活血方可以改善心肌梗死后心功能,抑制细胞凋亡的发生可能是其中重要的机制。     

芪苈强心胶囊对心肌梗死大鼠心肌纤维化及TGF-β1／Smad3信号通路的影响

目的探讨芪苈强心胶囊对心肌梗死后大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制。方法 SD雄性大鼠结扎冠脉左前降支,建立急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction,AMI)模型,4周后根据心脏超声结果随机分为模型组和芪苈强心组,另设假手术组,分别给予1 g/(kg·d)芪苈强心及等体积蒸馏水灌胃。4周后超声心动图检测大鼠心脏功能,取梗死周围心肌组织采用HE及Masson染色观察心肌病理形态改变,免疫组织化学方法检测心肌α-SMA表达,Western blotting方法检测心肌α-SMA、胶原Ⅰ(collagenⅠ)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)及p-Smad3蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组左心室短轴缩短分数(FS)和射血分数(EF)明显降低(P0.05),左心室收缩末期内径(LVIDs)和收缩末期容量(ESV)显著升高(P0.05),心肌纤维化明显(P0.05),α-SMA、collagenⅠ、TGF-β_1和p-Smad3等表达增加(P0.05)。与模型组比较,芪苈强心组EF和FS明显升高(P0.05),LVIDs和ESV明显降低(P0.05),心肌纤维化程度减轻(P0.05),α-SMA、collagenⅠ、TGF-β_1和p-Smad3等表达明显降低(P0.05)。结论芪苈强心胶囊能够降低心肌梗死大鼠心肌纤维化程度,改善心脏功能,其作用机制可能与调控TGF-β_1/Smad3信号通路相关蛋白有关。     

益气活血方对大鼠心肌梗死边缘区Sigma-1R、SERCA2a、IP3R mRNA表达的影响

目的观察益气活血方对大鼠心肌梗死边缘区Sigma-1R、SERCA2a、IP3R mRNA表达的影响。方法结扎SD大鼠心脏左冠状动脉前降支建立心肌梗死后心力衰竭模型(假手术组只穿线,不结扎),随机分为模型组、益气活血低剂量组(益低组)、益气活血高剂量组(益高组)、氟伏沙明组。益低组、益高组分别予以含生药量15 g/kg、30 g/kg的益气活血方,氟伏沙明组予以氟伏沙明(1mg/kg),模型组和假手术组大鼠予以蒸馏水,每日1次灌胃。8周后,进行超声心动图检测;心脏取材并计算心脏质量指数;RT-PCR法检测左心室心肌梗死边缘区Sigma-1R、SERCA2a、IP3R mRNA的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠左室舒张末内径(LVDd)、左室收缩末内径(LVDs)、左室舒张末期容积(LV Vo Ld)、左室收缩末期容积(LV Vo Ls)及心脏质量指数显著增加(P0.01),左室后壁舒张末厚度(LVPWTd)、左室后壁收缩末厚度(LVPWTs)、射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)显著降低(P0.01),其心肌组织Sigma-1R、SERCA2a mRNA的表达降低(P0.05),IP3R mRNA表达增加(P0.01)。与模型组相比,各药物组大鼠心肌重构和心功能有不同程度改善(P0.01);益低组、益高组和氟伏沙明组大鼠的心脏质量指数均显著降低(P0.01);同时,各药物组Sigma-1R和益高组SERCA2a mRNA表达显著增加(P0.01),氟伏沙明组SERCA2a mRNA表达增加(P0.05),益低组SERCA2a mRNA表达无统计学意义,益低组、益高组IP3R mRNA表达降低(P0.05),氟伏沙明组IP3R mRNA表达明显降低(P0.01)。结论益气活血方药可显著改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心脏重构和心脏功能,其机制与调节心肌梗死后心肌组织Sigma-1R及相关因子SERCA2a、IP3R mRNA的表达有关。     

慢性心力衰竭大鼠脑血流量变化及其一氧化氮合酶作用机制

目的探讨慢性心力衰竭后大鼠脑血流量的变化及其一氧化氮合酶作用机制。方法采用结扎左冠状动脉前降支造成心肌梗死后慢性心力衰竭模型,60 d后采用超声心动检测心功能;通过Morris水迷宫定向航行实验和穿台实验评价认知功能;使用激光散斑多普勒血流仪检测脑血流量;通过免疫印迹法检测大鼠脑皮质内皮型一氧化氮合酶(eNOS)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量。结果与假手术组相比,模型组射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)明显降低(P<0.05),心功能下降;与假手术组相比,模型组定向航行实验的潜伏期与总路程差异均无统计学意义(P>0.05),穿台实验中穿台次数明显下降(P<0.01);与假手术组相比,模型组脑血流量差异无统计学意义(P>0.05);模型组大鼠大脑皮质eNOS表达量与假手术组相比有降低趋势,但eNOS/iNOS比值明显下降(P<0.05)。结论慢性心力衰竭大鼠存在明显的认知功能障碍,主要表现为记忆力下降。尽管慢性心力衰竭大鼠与血管舒张和收缩相关的一氧化氮合酶系统已出现异常,但是其脑部血流量并无明显变化。     

醒脑静注射液治疗缺血性脑梗死研究进展

醒脑静注射液被广泛用于脑血管疾病中,主要通过改善血脑屏障通透性、抗氧自由基损伤、抑制兴奋性氨基酸毒性和钙超载、抑制细胞凋亡、降低脑水肿和抑制细胞自噬等机制发挥作用。     

稳心颗粒调控内质网应激途径抑制心梗大鼠心肌凋亡的机制

目的 探讨稳心颗粒对心梗大鼠内质网应激凋亡通路的影响及分子机制。方法 结扎左冠状动脉前降支建立心梗大鼠模型,术后随机分为假手术组,模型组,稳心颗粒低剂量组、高剂量组及倍他乐克组,每组10只,假手术组与模型组给予10 mL?kg^-1?d^-1去离子水灌胃,稳心颗粒低剂量及高剂量组分别给予1.35,2.7 g?kg^-1?d^-1水溶液灌胃,倍他乐克组给予2.25 mg?kg^-1?d^-1水溶液灌胃,治疗2周后,采用导管法检测心脏血流动力学,之后处死大鼠取材,苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠心肌组织病理形态的变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）,蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）,磷酸化激活的PERK（p-PERK）,活化转录因子6（ATF6）,细胞核转录因子X盒结合蛋白（XBP1）和凋亡蛋白C/EBP同源蛋白（CHOP）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达变化,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡。结果 与假手术组比较,模型组的左室内压最大上升速率（+dp/dt_max）,下降速率（-dp/dt_max）,左室收缩压（LVSP）明显降低（P<0.05）,左室终末舒张压（LVEDP）明显上升（P<0.05）,内质网应激蛋白GRP78,p-PERK,PERK,ATF6及XBP1表达均明显升高（P<0.05,P<0.01）,凋亡蛋白CHOP和Bax表达显著增高（P<0.01）,Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax显著降低（P<0.01）,凋亡指数显著增加（P<0.01）;与模型组比较,稳心颗粒低剂量组-dp/dt_max及Bcl-2蛋白表达明显增加（P<0.05）,心肌细胞凋亡指数显著降低（P<0.01）;稳心颗粒高剂量组+dp/dt_max与-dp/dt_max明显增加（P<0.05,P<0.01）,内质网应激通路蛋白GRP78,p-PERK,PERK,ATF6,XBP1及凋亡相关蛋白CHOP,Bax表达均显著降低（P<0.01）,Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax显著增加（P<0.01）,凋亡指数显著降低（P<0.01）。结论 稳心颗粒可抑制过度的内质网应激,减少心肌细胞凋亡,进而改善心梗大鼠心脏血流动力学,其分子机制与下调GRP78,PERK,p-PERK,ATF6,XBP1表达,减少CHOP,Bax表达,增加Bcl-2表达有关。     

扶正化瘀胶囊对心肌梗死后心肌纤维化大鼠细胞外基质代谢的影响

目的探讨扶正化瘀胶囊治疗心肌梗死后心肌纤维化的可能作用机制。方法 24只大鼠随机分为模型组、扶正化瘀组、卡托普利组、假手术组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左冠状动脉前降支结扎术制备大鼠心肌梗死模型。造模后扶正化瘀组给予扶正化瘀胶囊0.4 g/(kg·d)灌胃,卡托普利组给予卡托普利2.25 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组均给予等体积的去离子水灌胃,各组均每日1次,连续8周。采用天狼星红染色检测心肌胶原分数(CVF),免疫组化、实时荧光定量PCR法分别检测Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)蛋白及mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠CVF、MMP-2/TIMP-2及Ⅰ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,扶正化瘀胶囊组、卡托普利组CVF、MMP-2/TIMP-2及Ⅰ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白及mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。与卡托普利组比较,扶正化瘀组CVF、TIMP-1蛋白表达升高,TIMP-1 mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论扶正化瘀胶囊能改善大鼠心肌梗死后心肌纤维化,其机制可能与调控MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白和mRNA表达及MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1有关。     

清开灵对小鼠脑微血管内皮细胞缺氧损伤MLCK基因转录的影响

目的:研究清开灵对小鼠脑微血管内皮细胞缺氧损伤MLCK基因转录的影响。方法:细胞分为正常对照组(有糖Earle液)、模型组(缺氧缺糖模拟缺血:无糖Earle液,37℃,5%CO2,1%O2培养24 h)、清开灵低、中、高浓度组(缺氧缺塘+清开灵1%、2%、4%),在37℃、5%CO2培养箱中培养24 h后经MTT比色法检测细胞活力、荧光定时定量PCR检测MLCK基因转录。结果:缺氧缺糖24 h后微血管内皮细胞活性降低(P<0.05)、MLCK基因转录被抑制(P<0.05);清开灵1%、2%、4%组均抑制了缺糖缺氧条件下微血管内皮细胞活性的降低(P<0.05),清开灵4%组降低MLCK的表达(P<0.05)。结论:缺糖缺氧条件下微血管内皮细胞活性降低。清开灵通过抑制MLCK的表达,恢复BBB的部分屏障功能。     

醒脑静注射液对高血压脑梗死大鼠模型的神经保护作用

目的研究醒脑静注射液对大鼠高血压脑梗死的神经保护作用及其机制。方法采用双肾双夹肾血管进行高血压大鼠模型的制备,1个月后高血压大鼠模型制备成功,将动物随机分成3组,即假手术组、模型组、醒脑静给药组。然后采用改良的Zea—Longa法（改良的线栓法）制备大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血损伤模型,醒脑静给药组于缺血造模后4h腹腔注射醒脑静注射液（3mL／kg）,每隔30rain给药1次,共给药3次。假手术组和模型组于造模后30min给予等体积的生理盐水腹腔注射1次。造模后24h,采用Zea—Longa方法对大鼠进行神经功能缺损评分后,测定脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、丙二醛（MDA）活性。结果脑缺血24h后,模型组大鼠神经功能评分与假手术组相比明显增高,醒脑静给药组较模型组显著降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。脑缺血后,模型组大鼠缺血脑组织中s0D、GsH—Px和MDA的活性较假手术组显著降低（P〈0．05）。醒脑静给药组s0D、GSH—Px活性均高于模型组（P〈0．05或尸〈0．01）,MDA活性显著低于模型组（P〈0．05）。结论醒脑静注射液能减轻神经损伤症状,降低脑组织MDA活性。增高脑组织中SOD、GSH—Px活性,能减轻脑缺血损伤,其机制可能与拮抗氧自由基损伤有关。