用BA-ELISA法测定载脂蛋白A-I

介绍一种高灵敏度的裁脂蛋白A-I(Apo A-I)的测定方法——生物素-亲和素酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA)。本法的工作范围为0.25～4ng Apo A-I,灵敏度约0.1ngAp0 A-I,较已报道的放射免疫法(RIA)和ELISA高3～5倍以上。热处理或加入变性剂均不影响人血清Apo A-I的免疫测定结果。组内和组间变异系数分别为4.55和8.04。经本法测定77名正常成年人血清Apo A-I为1.34±0.23g/L((?)±SD),而且正常成年人血清ApoA-I浓度与高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的浓度呈高度相关(r=0.83,p<0.001)。     

应用自制的LAB系统进行免疫化学标记的研究

国外自80年代初期应用ABC方法于免疫组织化学的研究以来,大大地推动了细胞学、免疫学及病理学等学科的发展。我室应用ABC方法进行了一些研究工作,已标记了近万张组织切片或细胞滴片,比PAP方法敏感性高。为了解决进口试剂价格昂贵以及推广应用上的困难,我们从1985年起应用上海医科大学化学教研室自制的LAB系统(标记的卵白素-生物素-辣根过氧化酶系统)进行免疫化学标记的研究,现将结果报道如下。材料与方法单克隆抗体:B-Liu M,为生物素标记的抗单核细胞单克隆抗体,Liu M由本室自己制备(方法即将在上海医大学报发表)。生物素标记工作由上海医大化学教研室完成(方法将另有专文报道)。L_3B_12为抗淋巴造血系统细胞的单克隆抗体,美国斯坦福大学病理系提供。     

聚焦层析分离人肝精氨酸酶同工酶组分

用聚焦层析结合DEAE-Sephadex A-50离子交换层析,从正常人肝浸液中分离得两个精氨酸酶同工酶组分.经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定从聚焦层析得到的第一峰同工酶组分为一条蛋白带,第二峰具有精氨酸酶活性的蛋白组分的主要蛋白带也极明显。各蛋白质成分向阴极电泳的前后顺序与从聚焦层析洗脱的先后次序一致。两型同工酶的比活力分别约为2050U/mg及790U/mg。用SDS-PAGE检测两型同工酶均由两种亚基组成,且分子量近似。     

慢性肝炎患儿血清转铁蛋白含量变化与肝细胞损害程度的关系

采用本室建立的生物素－抗生物素蛋白－酶联免疫吸附测定法（ＢＡ－ＥＬＩＳＡ），检测健康儿童组、慢性肝炎患儿组的血清转铁蛋白（Ｔｆ）含量，并与患儿肝穿刺标本病理变化作对比研究。结果显示，慢性肝炎组血清Ｔｆ含量明显低于健康儿童组；Ｔｆ含量的降低与肝细胞损害程度具有相关性，慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）的血清Ｔｆ下降程度比慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）更为显著。     

人血浆凝血酶原和异常凝血酶原的BA-ELISA法检测

应用与凝血酶原及异常凝血酶原有免疫交叉反应的非Ca(Ⅱ)依赖性抗人凝血酶原抗体,建立夹心BA-ELISA法,检测人血浆凝血酶原的最低浓度可达1ng/ml。血浆经皂土和柠檬酸钡吸附处理,除去纤维蛋白原和凝血酶原后,可用本法检出存留于血浆中的微量异常凝血酶原,并测得健康人血浆异常凝血酶原的均值为74.61±19.43ng/ml。本法操作简便,特异性强,重复性好。     

系统性白色念珠菌抗原血症的研究——Ⅰ.从白念菌提取胞壁抗原——甘露聚糖

白色念珠菌(以下简称白念菌)是一种条件致病菌,在正常情况下不致病或仅引起表浅感染,当机体的抵抗力严重下降时,可能并发条件致病菌感染,引起深部感染,甚至全身播散性感染,其中以白念菌为最多见。此时诊断甚难。为了提高微生物学的诊断效果,近年来,国外有人试从血液中寻找可溶性抗原,以协助确诊。最常被检测     

系统性念珠菌病患者抗原血症的研究——Ⅱ.甘露聚糖—牛血清白蛋白偶联抗原的制备及其性状

另文中我们报道从一株白色念珠菌(简称白念菌)提取与纯化特异性菌体表面多糖—甘露聚糖(mannan,Mn)。Mn是一种半抗原,用于制备抗血清,必须先与大分子载体结合,使成为完全抗原。本文中我们选用     

小鼠肝脏免疫抑制蛋白质的分离和纯化

我们应用硫酸铵分段盐析,结合多种离子交换柱层析和羟磷灰石柱层析,从正常小鼠肝浸液中分离纯化出一种免疫抑制蛋白质,在体外它能很强地抑制小鼠T和B淋巴细胞对促有丝分裂原和同种异型抗原的增生反应。纯化的免疫抑制蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳及等电聚焦电泳鉴定均为一条带,其pI值在7.5～7.8之间。Sephadex G-100凝胶层析测得纯化蛋白质的分子量为78,000,SDS-PAGE测得此蛋白质亚基的分子量为38,500。同时经初步鉴定,此纯化的蛋白质既非糖蛋白又非脂蛋白。     

人血清铁蛋白的生物素-抗生物素蛋白酶联免疫吸附检测法

铁蛋白是机体主要的铁贮藏蛋白,血清铁蛋白含量与铁贮藏呈正比关系。因此,血清铁蛋白的检测,对临床上的缺铁性贫血的诊断和治疗具有重大的意义。此外,异常的高血清铁蛋白,常提示为一些铁过负性疾病(如血色素病、慢性炎症等)以及肝、胰、肾等实质性器官的病变和某些肿瘤疾病(尤其是肝癌)。目前临床上惯用Addison等建立的放     

应用自制的LAB系统进行免疫化学标记的研究

国外自80年代初期应用ABC方法于免疫组织化学的研究以来,大大地推动了细胞学、免疫学及病理学等学科的发展。我室应用ABC方法进行了一些研究工作,已标记了近万张组织切片或细胞滴片,比PAP方法敏感性高。为了解决进口试剂价格昂贵以及推广应用上的困难,我们从1985年起应用上海医科大学化学教研室自制的LAB系统(标记的卵白素-生物素-辣根过氧化酶系统)进行免疫化学标记的研究,现将结果报道如下。