小鼠下丘脑SH2B1, SOCS3, PTP1B及NPY表达的变化及其与肥胖的关系

目的：研究肥胖小鼠及正常小鼠不同周龄下丘脑组织SH2B1(adapter protein with a Src-homology 2 domain),细胞因子信号转导抑制蛋白3(the suppressor of cytokine signaling-3,SOCS3),蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(proteintyrosine phosphatase 1B,PTP1B)和神经肽Y(neturopetide Y,NPY)表达的变化规律及其与血清瘦素及胰岛素水平的关系。方法：选用健康C57BL/6乳鼠制作肥胖动物模型,计算Lee’s指数及稳态模型胰岛素抵抗指数。荧光定量RT-PCR法检测下丘脑SH2B1,SOCS3及PTP1B mRNA表达量,Western印迹检测下丘脑SH2B1和NPY蛋白表达量。结果：与同周龄对照组小鼠相比,肥胖组小鼠下丘脑组织SH2B1 mRNA表达减少,SOCS3及PTP1B mRNA表达增加;Western印迹结果显示：肥胖组小鼠SH2B1蛋白表达水平较对照组下降,NPY表达升高。直线相关分析显示：血清瘦素和血清空腹胰岛素水平与SH2B1 mRNA表达呈负相关,与SOCS3及PTP1B mRNA表达正相关。结论：SH2B1,SOCS3,PTP1B及NPY是肥胖发生、发展过程中的关键因子。     

胆囊收缩素刺激小鼠胰腺腺泡肽链的 延伸及其分子机制

目的：研究胆囊收缩素（cholecystokinin, CCK）、碳酸胆碱(carbachol,CCh)及血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide, VIP）体外刺激小鼠胰腺腺泡细胞肽链的延伸及其作用的分子机制。方法：采用3H-亮氨酸掺入法分别测定基础状态及CCK, CCh及VIP处理后胰腺腺泡细胞肽链延伸率; Western 印迹分析基础状态和上述促分泌素处理后真核细胞延伸因子(eEF2)及其激酶磷酸化水平,进一步用MEK抑制剂 （PD98059）、SAPK/P38抑制剂（SB202190）、mTOR抑制剂（rapamycin）处理细胞,分别阻断MEK,SAPK/P38和mTOR 3种信号通路和磷酸酶抑制剂花萼海绵诱癌素A预处理再用CCK处理胰腺腺泡,分析eEF2及其激酶eEF2K磷酸化水平。 结果：体外除VIP外,其他2种促分泌素均能诱导胰腺腺泡细胞肽链的延伸。CCK和CCh处理后真核细胞延伸因子eEF2 Thr56去磷酸化及其激酶Ser366磷酸化水平增加,PD98059,SB202190和rapamycin特异性抑制MEK,SAPK/P38和mTOR信号通路以及磷酸酶抑制剂花萼海绵诱癌素A均能部分性逆转CCK诱导的eEF2去磷酸化。 结论：CCK可通过MEK,SAPK/P38和mTOR信号通路诱导真核细胞延伸因子eEF2 Thr56去磷酸化,参与小鼠胰腺腺泡细胞肽链的延伸调节。     

磷酸化蛋白质组学方法在信号网络解析中的应用

信号转导是细胞对各种外界刺激的应答反应，蛋白磷酸化或去磷酸化是信号从胞外流向胞内并导致细胞效应过程中的关键机制。磷酸化蛋白质组学(phosphoproteomics)是采用蛋白质组学的分析方法，研究细胞中所有磷酸化蛋白质及其修饰过程，从整体上观察细胞中被修饰的磷酸化蛋白质的状态及其变化，进而分析特定磷酸化修饰对生命过程的调控作用及其分子机制。     

染色体3p14.2-14.3区域一个与鼻咽癌相关新基因的克隆

目的：在染色体３ｐ１４．２－１４．３区域寻找与鼻咽癌发生发展密切相关的新基因。方法：运用ＲＡＣＥ方法获取基因全长ｃＤＮＡ序列,ｐＥＧＦＰ质粒和脂质体共转染ＣＯＳ７细胞进行新基因的蛋白质定位。结果：在３ｐ１４．２－１４．３区域克隆了一个在鼻咽癌中表达不调新基因的全长ｃＤＮＡ序列,被命名为ＣＰＣＤＲ１,编码１０９个氨基酸,其蛋白质聚集在细胞核内,其基因组由２个外显子和１个内含子组成。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印     

喉癌相关基因 LCRG1蛋白的细胞亚定位及生物学特性研究

目的：研究我们实验室最近克隆的喉癌相关基因LCRG1编码蛋白的细胞定位以及其是否具有抑瘤功能。方法：采用绿色荧光蛋白（GFP）荧光定位的方法,研究该基因编码蛋白的细胞亚定位;通过绘制细胞生长曲线,以及运用转染细胞软琼脂集落形成试验和裸鼠致瘤试验,研究喉癌相关基因LCRG1在喉癌细胞系Hep-2中的生物学特性。结果：喉癌相关基因LCRG1编码的蛋白定位在细胞核内;将CLRG1cDNA导入到不表达该基因的喉癌细胞系Hep-2中,观察到明显的生长抑制作用,表现为抑制Hep－2细胞的停泊非依赖性生长和抑制裸鼠致瘤性。结论 ：喉癌相关基因LCRG1具有一定的抑瘤功能。     

Comparative Proteome Analysis of Human Lung Squamous Carcinoma Tissue

目的利用蛋白质组学方法建立人肺鳞癌组织及其癌旁正常支气管上皮组织的差异蛋白质表达谱。方法对20例人肺鳞癌组织和配对的癌旁正常支气管上皮组织进行比较蛋白质组学研究,即利用双向凝胶电泳(2-DE)分离二者总蛋白质后,经图像分析识别差异表达的蛋白,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白质。结果(1)比较分析20例肺鳞癌及正常配对组织的2-DE图谱,找到差异蛋白质点76个;(2)对68个差异蛋白质点进行了肽质指纹图分析,鉴定出一些与瘤基因、细胞周期调控、信号转导等有关的肺鳞癌相关蛋白;(3)肺鳞癌相关蛋白mdm2、c-jun和EGFR存人肺鳞癌组织中高表达,而在正常对照中均表达下调,与蛋白质组的分析鉴定结果是一致的。结论成功鉴定了68个肺鳞癌相关蛋白,为进一步筛选用于肺鳞癌诊断、治疗和预后评估的肺鳞癌分子标志物奠定了坚实的基础。     

SH2-B 在原发性肝癌中的表达及其分子机制研究

目的：分析接头蛋白 SH2-B 在原发性肝癌中的表达,探讨其在肝癌癌变中的分子机制。方法用免疫组织化学 SABC 法检测 SH2-B 在27例肝炎、29例肝硬化、47例肝癌患者组织中的表达。免疫荧光筛选低表达 SH2-B 的肝癌细胞 HepG2,设转染组（转染 pcDNA3．1-SH2-B 质粒）、空载体组（转染 pcDNA3．1空白载体）和对照组（未转染）。Western blotting 检测基因转染效率,MTT 法分析细胞增殖情况,集落形成试验分析其对细胞集落形成的影响,流式细胞术分析细胞周期变化。结果SH2-B 在肝癌患者组织中的表达阳性率为95．7％,明显高于肝硬化组的55．2％（χ2＝18．64,P ＜0．01）和肝炎组的25．9％（χ2＝40．01,P ＜0．01）。肝癌细胞 HepG2转染 pcDNA3．1-SH2-B 质粒后可获得SH2-B有效表达;培养48 h 后转染组肝癌 HepG2细胞平均吸光度（A）值为1．12±0．19,明显高于空载体组的0．45±0．11（t ＝－31．55,P ＜0．01）,提示 SH2-B 促进肝癌细胞增殖;转染组细胞集落数为166±14,明显高于空载体组的82±8（t ＝－20．33,P ＜0．01）和对照组的78±9（t ＝－19．64,P ＜0．01）,提示SH2-B 显著促进肝癌细胞 HepG2细胞集落形成;转染组 S 期细胞比例为（45．7±5．8）％,明显高于空载体组的（19．4±4．7）％（t ＝－20．33,P ＜0．01）和对照组的（20．5±5．1）％（t ＝－34．69,P ＜0．01）,提示 SH2-B 促进肝癌 HepG2细胞周期演进。结论SH2-B 在肝癌中高表达,可能通过促进人体内肝癌细胞的细胞周期演进、增殖及转化参与肝癌的癌变过程。     

SH2-B在结肠癌组织中表达及临床意义

目的 探讨SH2-B在结肠癌癌变过程中的演变规律,分析SH2-B表达与结肠癌临床分期的关系,分析SH2-B表达与结肠癌转移的关系.方法 免疫组织化学方法检测69例结肠癌组织、27例结肠腺瘤组织、29例结肠息肉组织中SH2-B蛋白的表达.69例结肠癌患者I期11例、Ⅱ期22例、Ⅲ期19例、Ⅳ期17例,其中无转移34例,淋巴节转移35例.结果 免疫组织化学检测结果显示,SH2-B蛋白在结肠息肉组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织中的表达呈浆-核型,以胞浆为主.结肠息肉患者SH2-B阳性率为31%(9/29),结肠腺瘤患者SH2-B阳性率为52%(14/27),结肠癌患者SH2-B阳性率为93%(27/29).结肠癌组织中SH2-B的阳性细胞率(0.64±0.26)明显高于结肠腺瘤组织(0.26±0.27)和结肠息肉组织(0.12±0.21)(P<0.001),结肠腺瘤组织中阳性细胞表达率明显高于结肠息肉组织(P<0.05).结肠癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期强阳性率分别为18.2%(2/11)、45.4%(10/22)、57.9%(11/19)和82.3%(14/17).转移组和非转移组强阳性率为45.7%(16/35)和23.5%(8/34),转移组SH2-B强阳性率显著高于无转移组(P<0.05).结论 SH2-B过表达可能参与了结肠癌癌变过程,可能是结肠癌变的早期事件.SH2-B表达与结肠临床分期有关.SH2-B可能参与了结肠癌转移,SH2-B高表达与结肠癌转移呈正相关.     

抗—BudR单克隆抗体制备及特性鉴定

用碘化还原法将溴脱氧尿嘧啶(BudR)与牛r—球蛋白(BGG)偶联作为抗原(BudR—BGG)免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(653)进行融合,经放射免疫分析法(RIA)筛选和克隆化后,获得四株阳性杂交瘤Ⅱ_1B_7、Ⅱ_4B_4、Ⅰ_3F_(11)和Ⅱ_1H_7。杂交瘤细胞分别腹腔注射BALB/c小鼠,其中三株(Ⅱ_1B_7、Ⅱ_4B_4和Ⅱ_1H_7)获得腹水,纯化抗体并对其特性进行鉴定,三株单抗均可与BudR、IudR反应,而不与CdR、TdR及FudR反应,具有较高的特异性。     

一起饮水污染事故的处理报告

一起饮水污染事故的处理报告太原市卫生防疫站（０３００１２）马秉权，段朝军，吕建民１９９１年６月２４日，太原飞机场由于蓄水池设计不合理造成一起水污染事故，现将调查处理情况报告如下：飞机场共三眼自备井，均为深层地下水，供水人口５０００余人，市防疫站多年监...