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2.
3.
fas基因与bcl-2反义RNA转导胃癌耐药细胞的药敏上调效应 总被引:7,自引:4,他引:7
目的比较fas基因和bcl-2基因在胃癌耐药细胞与非耐药细胞表达的差异,将fas基因和bcl-2反义核酸导入胃癌耐药细胞,并分析转导前后的细胞在mRNA与蛋白的表达水平,研究转导株与非转导株对化疗药物敏感性的区别.方法采用分子克隆技术将fas 基因和反义bcl-2片段分别插入真核表达载体pBK-CMV和pDOR-SV40的多克隆克隆位点之间,以脂质体介导法将两个重组表达载体分别转染受体细胞SGC7901/ VCR,G418筛选克隆细胞,Northern blot, Western blot检测耐药细胞与非耐药细胞以及转导细胞中fas基因和bcl-2基因mRNA及其蛋白的表达,MTT法药敏实验检测转导细胞与非转导细胞对VCR、顺铂、5-FU 的敏感性.结果真核表达载体pBK-fas cDNA和pDOR-bcl-2 cDNA转导胃癌耐药细胞后,分别从2×105细胞中筛选出大约80和120个抗性克隆,转导率各为0.4‰和0.6‰,随机各挑选2个克隆继续筛选与扩增培养,均获得了稳定的抗性细胞,我们将此命名为SGC7901 fas/ VCR cell和SGC7901 anti bcl-2/ VCR cell. 杂交结果表明,胃癌耐药细胞SGC7901/ VCR与非耐药细胞相比,bcl-2基因的表达明显较高,而fas基因表达极其微弱. 转导株SGC7901 fas/ VCR cell的fas mRNA及其蛋白水平的表达显著高于非转导株,SGC7901 anti bcl-2/ VCR cell中bcl-2蛋白的表达明显低于非转导株. 2株转导细胞对VCR、顺铂、5-FU的敏感性明显高于非转导株.结论胃癌耐药细胞与非耐药细胞相比,bcl-2基因处于高表达状态,而fas基因处于极其低弱的表达状态. 通过脂质体介导的基因转染,有效地阻断了bcl-2蛋白在SGC7901 anti bcl-2/ VCR cell的表达,明显增强了fas mRNA及其蛋白在SGC7901 fas/ VCR cell的表达. bcl-2反义核酸和fas基因转导胃癌耐药细胞后,对化疗药物的敏感性明显增加. 相似文献
4.
目的:分析中国胃癌发病率30来的变化趋势,找到影响胃癌发病率的最主要原因,为中国胃癌的防治提供有用的指导意见。方法:收集各影响因素的历年变化趋势数据,采用双变量相关的统计学方法,与当年胃癌的发病率进行相关性分析,求出Spearman等级相关系数r,并对有统计学意义的影响因素按照r绝对值的大小进行排序。结果:农村胃癌的发病率总体呈下降趋势,而城市胃癌的发病率一直趋于平稳,且远低于农村的水平,但从09年开始小幅上升,使得城乡胃癌发病率水平基本接近。与城乡胃癌发病率负相关的有:新鲜瓜果消费量、可支配收入、电冰箱拥有量、老龄化水平;仅与城市胃癌发病率负相关的有:城市人口比例;仅与农村胃癌发病率正相关的有:高盐腌渍食物消费量、工业废水化学需氧量排放量、工业废水氨氮排放量、农村人口比例。结论:我国近30年来胃癌发病率呈逐渐下降趋势,其主要原因在于社会经济的发展和生活方式的改变。为进一步降低胃癌发病率,应加快推广幽门螺杆菌的“检测与根除”策略。 相似文献
5.
转染Bcl-2反义核酸对胃癌细胞药物敏感性的影响 总被引:5,自引:3,他引:2
以手术根治为主的胃癌综合治疗,五年生存率只有37-7%,对胃癌的化疗并未取得理想的效果[1].Bcl2基因的异常表达,不仅与胃癌的发生有关,其抗凋亡作用的发挥,势必影响化疗效果[2];肿瘤细胞对化疗药物存在多药耐药现象,缘于多种机制,Bcl2基因的异常表达可能与之有关[3].我们通过pDOR载体将Bcl2反义核酸转染胃癌细胞,观察转导细胞对化疗药物顺铂(DDP)、5氟脲嘧啶(5FU)、长春新碱(VCR)的敏感性调变,能否逆转耐药,为胃癌的治疗探索新的途径.1 材料和方法1.1 材料 人… 相似文献
6.
7.
8.
时永全 《细胞与分子免疫学杂志》1997,13(A02):58-60
近年研究发现,肿瘤组织的热休克蛋白-多肽复合物具有肿瘤疫苗的免疫作用,可诱导动物产生特异性的抗肿瘤免疫应答。在诱导免疫应答中,巨噬细胞和B细胞作为抗原提呈细胞而发挥作用。肿瘤细胞表面的热休克蛋白-多肽复合物也可直接激活γδ^+T细胞和NK细胞。 相似文献
10.
目的观察黄贝平甲胶囊与他巴唑联用对Graves病(毒性弥漫性甲状腺肿)小鼠Bcl-2及Bax表达的影响。方法用BALB/c雌性小鼠建立Graves病动物模型,在用药物干预后,采用放射免疫分析检测甲状腺素(TT4)、促甲状腺激素(TSH)、TSH受体抗体(TRAb)及逆转录-PCR方法测定Bcl-2、Bax表达量。结果黄贝平甲胶囊组治疗后的TT4、TRAb较模型组明显降低(P<0.05),而TSH的改变则无统计学意义。他巴唑组、黄贝平甲胶囊与他巴唑联用组治疗后,TT4、TRAb均较模型组显著降低,而TSH明显升高(P<0.05);Bcl-2较模型组显著降低(P<0.05),Bax较模型组显著升高(P<0.05),以联合用药组更为明显。结论黄贝平甲胶囊与他巴唑联用对Graves病小鼠Bcl-2及Bax的表达有明显的调节作用,较单独使用黄贝平甲胶囊更有效。 相似文献