山羊角提取物中焦谷氨酸含量测定研究

目的:对山羊角提取物中的焦谷氨酸进行含量测定研究。方法:通过氨基酸自动分析仪及傅立叶变换离子回旋共振质谱确认山羊角提取物中含有焦谷氨酸,并建立专属高效液相色谱方法对焦谷氨酸进行含量检测。色谱条件为:色谱柱为Sion-chrom ODS-BP(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-3.5 mmo.lL-1磷酸氢二钠缓冲液(1∶99),调pH=3,流速为1.0mL.m in-1,检测波长205 nm,柱温27℃。结果:高分辨质谱有m/z128离子峰,并且检测出该批山羊角提取物中含有焦谷氨酸7.65%。结论:所建立的方法可快速、稳定地检测山羊角提取物中的焦谷氨酸,从而有效提高山羊角提取物的检测标准。     

DNA条形码技术在动物类药材熊胆粉及其混伪品鉴定中的应用

应用DNA条形码技术对名贵中药材熊胆粉及混伪品进行DNA条形码鉴定研究,并建立其标准实验流程,以保障熊胆粉的安全有效利用。对收集到的12份熊胆粉样品进行DNA提取、PCR(聚合酶链式反应)扩增并双向测序、运用Codon Code Aligner V 7.0.1进行序列剪切去除引物区得到COI序列,同时与Gen Bank中得到棕熊及混伪品COI序列,运用MEGA 7.0对研究的5个物种50条序列比对分析,计算变异位点及种内和种间K2P(Kimura 2-Parameter)遗传距离并构建邻接(NJ)树。黑熊、棕熊的种内最大K2P遗传距离远小于其混伪品间最小K2P遗传距离;NJ树结果显示黑熊、棕熊各聚为一支,均可以与混伪品明显区分开。DNA条形码技术为一种安全便捷可靠的物种鉴定技术,建立动物类药材COI序列标准话流程,在中药研究领域具有重要的作用。     

对照提取物用于金银花药材的质量控制方法研究

为解决中药材色谱分析中对照品价格较高的问题,该文以金银花药材为例,提出采用对照提取物作为参考物质,对药材进行常规分析的方法。采用对照品对对照提取物进行了标定,测定出其中6种有机酸类化合物的含量,并考察了对照提取物的长期稳定性。利用对照提取物配制不同浓度的溶液,建立了标准曲线。对11批次金银花药材进行分析,采用t检验方法对分别利用对照品和对照提取物测得的结果进行比较,结果表明二者之间不存在显著性差异。该方法可用于金银花药材的质量控制,并对解决类似问题有借鉴意义。     

痰热清注射液质量关键影响因素辨识方法初探

为辨识痰热清注射液配液过程中影响最终产品质量的关键因素,采集了24个实际生产批次中5种中药提取物的近红外漫反射光谱,记录了配液过程中的31个操作参数,作为自变量;记录最终产品的总含固量和灯检合格率,作为因变量。采用偏最小二乘回归方法建立了定量校正模型,得到自变量和因变量之间的相关系数。所得总含固量和灯检合格率定量校正模型的校正相关系数分别为0.911 9,0.873 8,交叉验证的相关系数分别为0.724 2,0.795 0。根据相关系数筛选出4个与总含固量相关性较强的因素,8个与灯检合格率相关性较强的因素,并结合生产经验,对这些因素的实际意义进行了分析。该文所建方法对配液过程中影响痰热清注射液最终产品的因素进行了初步辨识,结果合理,可推广应用于解决类似问题。     

巢式病例对照设计在痰热清注射液过敏反应机制研究中的应用举隅

该文从痰热清注射液从上市后临床应用着眼,采用前瞻性、多中心、大样本、注册登记式临床安全性监测嵌套巢式病例对照设计,检测与分析过敏反应患者相关血液指标,探讨其过敏反应可能的机制。共监测使用痰热清注射液的患者3006例,出现不良反应的患者3例,其中2例为过敏反应。每例过敏反应患者,按1:4匹配4例未发生不良反应的患者作为对照组,同时纳入5例健康志愿者组成健康组,对各组之间总IgE,IgA,IgG,C3,C4,IFN-g,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10等过敏反应相关检测指标进行比较。基于现有的研究数据发现痰热清注射液的过敏反应可能为由IgE介导的Ⅰ型过敏反应,这也为促进临床安全合理用药起到促进作用。     

一种基于近红外光谱技术的熊胆粉粗提物洗涤工艺优化方法

在熊胆粉粗提物的乙酸乙酯洗涤工艺中,需要根据原料的性质对所用洗涤溶剂的倍数进行调整,才能提高产品的纯度和产率。该文采用近红外光谱反映熊胆粉粗提物原料的整体性质,对这一工艺进行了优化。按照不同的熊胆粉粗提物和乙酸乙酯用量设计试验,采集熊胆粉粗提物的近红外光谱,提取出光谱数据的前8个主成分,同乙酸乙酯用量一起作为输入变量,对熊胆粉提取物成品的纯度和收率进行回归。试验共计40组,其中30组校正集,用于建立模型;10组验证集,用于对所建模型进行评估。所建模型的校正、内部交叉验证和外部验证结果满意,纯度模型的相关系数分别为0.902,0.896,0.883,校正误差均方根（RMSEC）,交互验证均方根误差（RMSECV）,预测误差均方差（RMSEP）分别为1.22%,1.48%,1.59%。收率模型的相关系数分别为0.921,0.859,0.916;RMSEC,RMSECV,RMSEP分别为1.39%,1.65%,1.53%。结果表明,熊胆粉粗提物的近红外光谱结合乙酸乙酯用量可准确预测所得成品的纯度和收率,利用所建模型可以根据熊胆粉粗提物的性质优选出最为合适的乙酸乙酯用量,提高熊胆粉提取物的纯度和收率。     

痰热清注射液的清热作用及其主要活性成分在LPS诱导发热大鼠中的药物动力学研究

目的 研究痰热清注射液的清热作用及其主要活性成分在发热大鼠体内的药物动力学变化。方法 SD大鼠随机分成4组,分别为正常对照组、发热模型对照组、正常给药组、发热模型给药组。发热模型对照组和发热模型给药组腹腔注射LPS 100μg·kg^-1造模,正常对照组和正常给药组同时给予同剂量生理盐水。所有大鼠30 min后尾静脉给5 mL·kg^-1痰热清注射液,于给药后8 h内每0.5 h测1次体温,给药后不同时间取血浆,同时从血浆中提取3种成分,LC-UV法测定黄芩苷（BG）的浓度,LC-MS法测定熊去氧胆酸（UDCA）和鹅去氧胆酸（CDCA）的浓度。采用WinNonlin 6.3计算药动学参数。结果 痰热清注射液对LPS诱导发热大鼠有显著降温作用,能使发热大鼠体温降至与正常大鼠体温接近,并且在给药后5～8 h血药浓度较低时仍有较好的降温作用。发热模型大鼠和正常大鼠iv 5 mL·kg^-1痰热清后估算BG的半衰期分别为（41.42±7.65）和（50.32±19.10）min,AUC0～τ分别为（2 411.95±523.80）和（2 187.74±447.14）μg min.mL-1,估算UDCA的半衰期分别为（60.22±14.97）和（71.85±18.82）min,AUC0～τ分别为（1 687.59±319.65）和（1 581.38±101.48）μg min·mL^-1,AUC0～∞分别为（1 754.39±311.16）和（1 659.51±110.23）μg min·mL^-1,估算CDCA的半衰期分别为（96.47±25.04）和（94.35±27.41）min,AUC0～τ分别为（407.35±87.29）和（356.89±39.16）μg min·mL^-1,结果表明发热模型大鼠和正常大鼠iv 5 mL·kg^-1痰热清后BG、UDCA和CDCA的药物动力学行为相似。结论 痰热清注射液对LPS诱导发热大鼠有显著降温作用,发热状态下大鼠静脉注射痰热清注射液不影响其主要活性成分BG、UDCA和CDCA的药物动力学行为。     

近红外漫反射光谱法快速测定黄芩药材中黄芩苷和汉黄芩苷含量

目的针对中药生产中药材质量控制的问题,运用近红外漫反射光谱技术,结合化学计量学,提出一种快速测定黄芩药材中黄芩苷和汉黄芩苷含量的方法。方法利用HPLC法测定黄芩药材中黄芩苷和汉黄芩苷的含量作为对照值,运用偏最小二乘回归(PLS)建立黄芩药材近红外光谱与HPLC法含量测定值之间的多元校正模型,并对未知样本进行预测。结果黄芩苷和汉黄芩苷校正模型的相关系数分别为0.995、0.969,交叉验证误差均方根RMSECV分别为0.678、0.143,验证集预测误差均方根RMSEP分别为0.602、0.221。结论该方法可实现对黄芩药材的快速分析,预测结果准确可靠,可推广用于其他中药材的质量控制。     

痰热清注射液及5种中间体对四氯化碳致急性肝损伤大鼠的保护作用探讨

目的:观察痰热清注射液及5种中间体对四氯化碳(CCl_4)诱导急性肝损伤的保护作用,初步探讨痰热清注射液治疗急性肝损伤药效物质基础。方法:采用多次皮下注射复制CCl_4急性肝损伤模型,雄性大鼠随机分为正常组、模型组、痰热清注射液组、痰热清注射液治疗组、甘利欣注射液阳性药组、黄芩治疗组、熊胆粉治疗组、山羊角治疗组、连翘治疗组和金银花治疗组,大鼠尾静脉注射给药连续7 d。观察各组大鼠体质量、肝体比及肝功能各项血清生化指标,并观察肝组织病理状态,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测钠离子-牛磺胆酸协同转运蛋白(NTCP),磺基转移酶2A1(SULT2A1),谷胱甘肽-S-转移酶A2(GSTA2)和细胞色素P450酶3A11(CYP3A11)mRNA水平的变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝体比显著升高,体质量下降,丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),总胆红素(T-Bil),直接胆红素(D-Bil)和总胆汁酸(TBA)水平显著增高,肝细胞大面积坏死变性明显,NTCP,GSTA2和CYP3A11mRNA表达显著降低(P0.05,P0.01)。与模型组比较,痰热清注射液能显著恢复肝系数,降低各项血清生化指标,肝组织病理炎症减轻;而各中间体的血清肝功能指标改善的优劣顺序分别是连翘、金银花、山羊角、熊胆粉。痰热清注射液和连翘能上调NTCP,GSTA2和CYP3A11mRNA表达,熊胆粉仅能上调SULT2A1和GSTA2mRNA的表达,金银花上调SULT2A1,GSTA2和CYP3A11mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:痰热清注射液具有显著改善CCl_4诱导的大鼠急性肝损伤作用,而其中起保肝作用的主要药效部位可能为熊胆粉、山羊角、连翘和金银花,其作用机制可能与上调NTCP,SULT2A1,GSTA2和CYP3A11的表达,加速肝内胆汁酸代谢有关。