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1.
2.
目的:构建Peroxiredoxin2(PRDX2)基因RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒表达载体,探讨PRDX2基因干扰后对结直肠癌SW480细胞增殖的影响。方法设计、合成靶向PRDX2的RNA干扰的序列,构建pGC‐EGFP‐shPRDX2慢病毒载体并进行鉴定,同时应用qRT‐PCR和Westernblot方法观察转染的SW480结肠癌细胞PRDX2mRNA和蛋白表达的抑制效果,并通过MTT、平板克隆形成实验检测细胞增殖变化。结果成功构建PRDX2基因慢病毒载体并经测序证实;pGC‐EGFP‐shPRDX2可有效抑制结直肠癌SW480细胞PRDX2的表达,感染慢病毒的SW480细胞中PRDX2mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);SW480细胞经PRDX2RNA干扰后其生长和增殖能力显著降低(P<0.05)。结论PRDX2基因RNAi慢病毒表达载体在SW480细胞中表达稳定可靠,PRDX2基因干扰后有效抑制了结直肠癌SW480细胞的增殖和生长,为进一步探讨PRDX2在结直肠癌发生、发展及转移中的作用奠定基础。 相似文献
3.
4.
重组人白细胞介素10抗家兔同种异体皮肤移植排斥模型的建立 总被引:2,自引:1,他引:1
背景:研究表明,白细胞介素10在移植排斥反应的预防和治疗中具有一定的应用前景,有望成为一种新的临床用免疫抑制剂.动物移植模型是研究免疫抑制剂常用的实验平台,最常用的皮肤移植模型动物是小鼠,但小鼠属于小动物模型,移植技术要求较高.目的:建立家兔同种异体皮肤移植模型,观察重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植排斥反应的效果.方法:取家兔背部皮肤修剪成含真皮层的全厚皮片、中厚皮片和不含真皮层的薄层皮片进行家兔自体皮肤移植,随机分为固定组和非固定组,固定组用自制脖套对家兔头颈部活动进行一定限制;药物抗家兔同种异体移植排斥设重组人白细胞介素10组、环孢素A阳性对照组和生理盐水阴性对照组.采用混合淋巴细胞反应法观察家兔混合淋巴细胞反应增殖指数.在30 d内连续观察移植皮肤出现排斥的时间和移植皮片平均存活时间.结果与结论:供、受体混合淋巴细胞培养呈增殖反应,表明家兔同种异体主要组织相容性复合体不同,相互皮肤移植可发生排斥反应.移植皮片厚度以含真皮的中厚皮片为最佳;自制脖套固定可有效限制家兔脖头颈部活动,有利于移植创面的保护.实验成功建立了重组人白细胞介素10抗家兔同种异体皮肤移植排斥模型,重组人白细胞介素10具有抗移植排斥的作用. 相似文献
5.
6.
目的:探讨RNA 干扰过氧化还原酶1(Peroxiredoxin 1,PRDX1)表达对人结直肠癌SW480 细胞侵袭转移能力的影响。方法:筛选RNA 干扰PRDX1 的慢病毒质粒,与阴性对照慢病毒质粒分组转染结直肠癌SW480 细胞,转染后的SW480 细胞可分为PRDX1 基因沉默组(si-PRDX1)和阴性对照组(Vector)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测两组细胞中PRDX1 mRNA 和蛋白表达;采用Transwell 侵袭和迁移实验检测基因沉默PRDX1 表达对结直肠癌细胞侵袭及迁移能力的影响;通过Western blot 检测两组细胞中基质金属蛋白酶(MMP)家族部分蛋白表达水平。结果:基因沉默PRDX1 表达可有效抑制结直肠癌SW480 细胞中PRDX1 mRNA 和蛋白水平的表达,与阴性对照组相比(Vector),差异均具有统计学意义(P<0.01),说明基因沉默PRDX1 的SW480 细胞系构建成功;Transwell 侵袭和迁移实验显示si-PRDX1组细胞的侵袭及迁移能力较对照组均明显降低(P<0.01);Western blot 结果显示,与Vector 组相比,si-PRDX1 组细胞中组织基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达明显增加,而MMP-2 及MMP-9 的表达显著下降,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:基因沉默人结直肠癌SW480 细胞的PRDX1 表达可有效抑制细胞的侵袭、迁移及转移能力,其机制可能会通过调控TIMP-2、MMP-2 及MMP-9 的表达介导。 相似文献
7.
目的探讨CHB患者血清病毒学标志物及肝组织、血清HBV DNA与肝组织HBVcccDNA的关系。方法应用实时荧光定量法进行20例CHB患者肝组织HBVcccDNA、肝组织及血清HBV DNA定量的测定,时间分辨荧光免疫分析法进行HBsAg、HBeAg、HBcAb等血清学标志物的测定,分析肝组织HBVcccDNA与肝组织HBV DNA、血清HBV DNA、HBsAg及HBeAg定量水平之间的关系。相关性分析采用Spearman相关性检验。结果所有患者肝组织中均能检测到HBVcccDNA,含量在7.63×10~4拷贝数/mg~9.46×10~8拷贝数/mg(对数值:7.55±1.08)之间;肝组织HBVcccDNA与肝组织HBV DNA呈显著正相关关系(r=0.859,P0.01),与血清HBV DNA呈显著正相关关系(r=0.640,P0.01);肝组织HBVcccDNA与HBeAg呈显著正相关(r=0.676,P0.01),与血清HBsAg无相关性(r=0.195,P0.05),与HBcAb呈显著负相关(r=-0.624,P0.01)。结论 CHB患者肝组织内HBVcccDNA呈稳定的中等水平复制;血清HBsAg定量尚不能作为反映肝组织中HBVcccDNA水平的指标,结合肝组织HBV DNA、血清HBV DNA等定量检测可以更全面反映HBV复制水平及患者病情评估。 相似文献
8.
1997年日本学者[1] ,在输血后不明原因肝炎病人中发现一种单股 DNA病毒 ,暂称为输血相关病毒 ( TTV) ,此后国内外学者对此进行了多方面研究。为了解 TTV在本地区不同人群中感染状况 ,我们对传染科就诊肝炎患者、有偿献血员以及健康群体的 TTV感染进行了初步调查 ,现报告如下。材料和方法1 研究对象 来我院就诊的肝炎患者 1 3 3例均符合 1 995年 5月北京第 5次全国传染病寄生虫病会议修订的肝炎分型诊断标准。其中男 90例 ,女 43例 ,年龄 2~ 70岁 ;重型肝炎 1 5例 ,慢性肝炎及其肝硬化 5 2例 ,急性肝炎 66例。有偿献血员 3 0例 ,ALT… 相似文献
9.
我院于1988—1989年采用中药护肝饮(人参皂甙、黄芪、柴胡等)治疗各型乙肝60例。结果显示,护肝饮治疗组的疗效明显优于对照组(肝必复治疗组),对于HBV标志的影响两组差异显著。护肝饮治疗组HBeAg阴转率为16.6%,而肝必复治疗组的阴转率为6.66%。护肝饮治疗组抗-HBcIgM阴转率60%,肝必复治疗组阴转率为18.1%(P<0.01),说明以调节免疫为主,兼具清热解毒作用的护肝饮是治疗乙肝的有效药物,对HBV的复制有显著的抑制作用。 相似文献
10.
目的探讨心理干预在外科手术学教学中的应用及效果。方法选择遵义医学院珠海校区2009级临床医学专业本科学生200名,随机分为观察组和对照组,每组各100人。两组学生的手术学教学课时、教学内容和课堂教学环节等完全一致,同时针对观察组学生在课前和课后进行有针对性的专业心理辅导。对两组学生手术学学习效果进行测评,并采用症状自评量表SCL-90以问卷形式对两组学生进行评估。采用SPSS软件对两组学生测评成绩及问卷调查数据分别行x2检验、秩和检验。结果观察组学生的手术学综合测评平均成绩高于对照组[(82.21±6.05)VS.(76.29±6.83)],差异有统计学意义(t=6.49,P=0.000)。问卷结果显示,观察组学生的SCL-90总评分较低,与对照组比较,差异有统计学意义(Z=-3.6254,P=0.000)。结论在手术学教学中引入心理干预,可有效提高手术学教学质量;应将心理干预措施融入到具体的教学实践环节。 相似文献