重组hIL-10抗家兔皮肤移植反应中CC、IL-8/CXCL8趋化因子的变化

目的:检测家兔皮肤移植经rhIL-10作用后,血清中CC、IL-8/CXCL8趋化因子的变化,探讨CC、IL-8/CXCL8趋化因子在rhIL-10抗免疫排斥机制中的作用。方法:皮肤移植家兔分6组:①rhIL-10低剂量,②rhIL-10高剂量,③CsA低剂量,④CsA高剂量,⑤rhIL-10+CsA低剂量联合和⑥生理盐水组;每只家兔均于术前1天开始肌注给药,连续注射10天;各组分别于术前1天、术后1、4、7、14、21、28天取外周血,分离血清,以ELISA法检测移植家兔血清CC、IL-8/CXCL8趋化因子水平。结果:(1)术后各组IL-8水平均升高,术后4天、7天⑥组IL-8水平高于各组(P<0.05)。(2)术后各组MCP-1水平明显升高,术后1天、4天,⑥组MCP-1水高于各组(P<0.05),术后7天⑥组MCP-1水平高于①组、⑤组(P<0.05);术后7天、14天CsA抑制组高于联合组(P<0.05)。(3)术后各组MIP-1α明显升高,术后4天⑥组MIP-1α水平高于①、③、⑤组,术后7天⑥组MIP-1α水平高于各组(P<0.05);(4)术后各组MIP-1β水平升高,但同时间段组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CC、IL-8/CXCL8趋化因子在皮肤移植后明显升高,表明在急性排斥反应中发挥了重要作用,随排斥反应加重而进一步增高,皮片排斥后下降,可作为观察和诊断移植排斥的合适标志物。     

重组人白细胞介素10抗家兔同种异体皮肤移植排斥模型的建立

背景:研究表明,白细胞介素10在移植排斥反应的预防和治疗中具有一定的应用前景,有望成为一种新的临床用免疫抑制剂.动物移植模型是研究免疫抑制剂常用的实验平台,最常用的皮肤移植模型动物是小鼠,但小鼠属于小动物模型,移植技术要求较高.目的:建立家兔同种异体皮肤移植模型,观察重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植排斥反应的效果.方法:取家兔背部皮肤修剪成含真皮层的全厚皮片、中厚皮片和不含真皮层的薄层皮片进行家兔自体皮肤移植,随机分为固定组和非固定组,固定组用自制脖套对家兔头颈部活动进行一定限制;药物抗家兔同种异体移植排斥设重组人白细胞介素10组、环孢素A阳性对照组和生理盐水阴性对照组.采用混合淋巴细胞反应法观察家兔混合淋巴细胞反应增殖指数.在30 d内连续观察移植皮肤出现排斥的时间和移植皮片平均存活时间.结果与结论:供、受体混合淋巴细胞培养呈增殖反应,表明家兔同种异体主要组织相容性复合体不同,相互皮肤移植可发生排斥反应.移植皮片厚度以含真皮的中厚皮片为最佳;自制脖套固定可有效限制家兔脖头颈部活动,有利于移植创面的保护.实验成功建立了重组人白细胞介素10抗家兔同种异体皮肤移植排斥模型,重组人白细胞介素10具有抗移植排斥的作用.     

重组hIL-10 对AA 大鼠T 淋巴细胞及IL-17A 的影响研究

目的:以重组人白细胞介素-10(human interleukin-10,h IL-10)及其联合甲氨碟呤(MTX)作用佐剂性关节炎大鼠模型,检测T淋巴细胞亚群及IL-17A水平的变化情况,研究重组hIL-10及其联合MTX治疗佐剂性关节炎大鼠的效果。方法:用IL-10、MTX以及IL-10+MTX处理AA大鼠模型,用流式细胞仪测定各组大鼠血液中CD4~+T细胞与CD8~+T细胞比值,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清IL-17A的含量。结果:各治疗组CD4~+淋巴细胞总数与CD4~+/CD8~+值不同程度下降,各治疗组与模型组比较有显著性差异(P0.05)。各治疗组IL-17A水平有不同程度下降,各治疗组与模型组比较有显著性差异(P0.05),联合组与IL-10组比较有显著性差异(P0.05)。结论:重组hIL-10能下调AA大鼠血液中CD4~+T细胞的数量及CD4~+/CD8~+比值,降低血清中IL-17A水平,联合组较IL-10组对血清中IL-17A影响更显著,提示重组hIL-10联合MTX在治疗类风湿关节炎中能更好地发挥作用。     

流行性出血热免疫学诊断技术研究及应用

流行性出血热(EHF)是本世纪三十年代初,在黑龙江下游,中苏国境交界地区最早发现的一种疫源性疾病。但因无特异性检测方法,以致防治研究进展缓慢。1976年朝鲜大学医学院病毒研究所所长Lee HW(李镐汪)以间接免疫荧光(IFA)技术首先检测黑线姬鼠的肾、肺组织与本病病人的恢复期血清可呈特异荧光反应     

“荧光定量PCR溶解曲线法”监测人TCRβ链CDR3谱系漂移技术的建立

目的 建立"荧光定量PCR溶解曲线分析技术"监测人外周血T细胞TCR β链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生).方法 提取4例正常人、9例大肠癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell-PBMC)中的总RNA,逆转录成cDNA,以26个人TRBV基因家族设计上游引物,共同的TRBC基因设计下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增26个TRBV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单/寡/多克隆增生.结果 正常人外周血T细胞TCR β链26个家族CDR3表达频率不一致,各家族PCR产物的"溶解曲线谱型图"(melting curve spectratyping)呈现溶点不同的CDR3多态性,为多克隆增生的高斯分布;9例大肠癌患者的外周血TCR β链CDR3谱系的26个家族CDR3表达频率不一致,有的患者部分家族呈缺失状态,患者各家族PCR产物的"溶解曲线谱型图"上,多数家族为多克隆增生的高斯分布,但每个患者均出现数量不等的单克隆和寡克隆增生家族.结论 "荧光定量PCR溶解曲线分析TCR CDR3谱系漂移技术",方法稳定简便,能较好的监测正常人和临床样本外周血T细胞TCR β链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生).     

儿童接种新甲型(H1N1)流感疫苗后特异性CD4+ T细胞亚群的表型特征

目的 探讨儿童接种新甲型(H1N1)流感疫苗接种后远期疫苗特异性CD4+记忆T细胞亚群的特征.方法 根据自愿原则,选择31例接种甲型H1N1流感疫苗47个月后的儿童,取静脉血并分离淋巴细胞,细胞培养中滴入甲型H1N1流感疫苗,同时设不加疫苗刺激的作为对照组,流式细胞仪检测CD4+记忆T细胞亚群的表型特征.结果 外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+疫苗特异刺激组为29.85％,对照组为39.00％,实验组低于对照组;CD4+初始T细胞实验组为74.32％,对照组为70.08％(P＞0.05);CD4+记忆T细胞实验组为28.54％,与对照组25.52％比较,无统计学意义(P＞0.05);记忆T细胞分中央型与效应型记忆T细胞,检测结果:CCR7和CD62L单阳性记忆T细胞亚群实验组分别为72.52％、29.85％,对照组分别为84.0％、93.44％,实验组的明显低于对照组(P＜0.05).结论 实验儿童初始T细胞比例都较高;甲型H1N1流感疫苗能诱导抗原特异性记忆CD4+T细胞的产生,可是为数较少,当中主要是中央型记忆CD4+T细胞,其中CCR7+和CD62L+记忆T细胞数量较低.     

IL-17免疫调节作用的研究进展

白细胞介素(IL)-17是近年来发现的一种促炎症性细胞因子,是一种含有155个氨基酸的糖蛋白.IL-17通过与受体特异性结合发挥生物学作用,IL-17与炎症发展、免疫应答、免疫排斥等多种生物学活性有关.     

重组空肠弯曲菌PEB1蛋白的大量表达及其鉴定分析

目的 探讨基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)大量表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白的稳定性及其纯化方法并鉴定.方法 诱导培养工程菌E.coli BL21(DE3)表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化,透析后通过SDS-PAGE分析纯化后的重组空肠弯曲菌PEB1蛋白分子量大小.结果 挑取的PEB1 E.coli BL21(DE3)单个菌落,经总共17 h的扩增,细菌总数可达1×1010以上.在咪唑浓度为100,200,300 mmol/L时,洗脱液中重组蛋白的含量较高,分子量在31KD左右.结论 基因工程菌PEB1 E.coli BL21(DE3)可大量稳定表达重组空肠弯曲菌PEB1蛋白,经鉴定与空肠弯曲菌外膜蛋白-PEB1蛋白分子量相同.     

心肌致密化不全伴左束支传导阻滞1例

心肌致密化不全,又称为“海绵状心肌病”、“心肌窦状隙持续状态”,是一种罕见的先天性心室肌发育不全性的心肌病,发病率低,约为0.0045％.其是在胚胎形成过程中,心内膜心肌致密化过程异常所导致的一种先天性心肌畸变.解剖学显示受累的心腔内,可见很多特征性突起的小梁及小梁间隐窝.此病常并发心律失常、心力衰竭、血栓栓塞,致死率高,早期诊断和干预对提高预后、预防严重并发症具有重要的意义.现将本院2012年12月诊断的1例NVM报道如下,并结合文献进行总结.     

外周B淋巴细胞BCR二次重排(编辑/修正)与选择

B淋巴细胞介导的获得性免疫能识别、应答多种多样的抗原;分清自我和非我;形成免疫记忆.这些特性的机制是经典的Burnat克隆（或者细胞）选择学说,即B淋巴细胞在骨髓的发育过程中,经过重链和轻链基因重排（Rearrangement）,组成了外周多样性的BCR淋巴细胞库,同时对自身反应性B淋巴细胞,通过凋亡或克隆无能进行选择（细胞水平选择或克隆选择,Cell or clonal selection）;抗原将从已存在的多样免疫抗原受体中挑选特异性的克隆细胞;免疫记忆是抗原特异性细胞的大量扩增后部分保持的结果.