基于“成分-靶点-通路”的枸杞子调控年龄相关性黄斑变性作用机制研究

目的采用网络药理学方法探讨枸杞子改善年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的活性成分及作用机制。方法以检索TCMSP数据库和查阅文献获得的枸杞子潜在活性成分为研究对象,通过Swiss Target Prediction平台、GeneCards数据库、OMIM数据库、DDT数据库和Drugbank数据库预测活性成分的潜在靶点;应用Metascape平台对潜在靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析;运用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络和"药物-成分-靶点-通路-疾病"网络;考察枸杞子不同提取部位对碘酸钠诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19活力的影响,以及对脂多糖诱导的小鼠小胶质细胞系BV2中炎症因子表达的影响。结果枸杞子中的88个活性成分通过调控血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)等靶点,参与氧化应激、炎症反应等生物学过程,影响晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGE)-晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)、IL-17、TNF等信号通路发挥改善AMD的作用。枸杞子95%乙醇提取部位能够显著提高碘酸钠诱导的ARPE-19细胞活力(P<0.001),并显著降低脂多糖诱导的BV2细胞中IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达水平(P<0.05、0.01、0.001)。结论枸杞子中多种成分具有影响AMD相关靶点的潜在作用,枸杞子能够通过改善氧化损伤、抑制炎症反应治疗AMD,为后续深入研究枸杞子中不同活性成分调节AMD的作用机制提供依据。     

黄葵四物方对尿毒素分子硫酸对甲酚在宿主细胞内代谢通路及转运环节的影响

目的探讨黄葵四物方对尿毒素分子硫酸对甲酚(p-cresyl sulfate,PCS)在宿主细胞内的代谢通路及转运环节的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱仪(ultra performance liquid chromatography-triple quadrupole/mass spectrometry,UPLC-TQ/MS)检测黄葵四物方干预后血浆及脏器内PCS水平的变化。采用酶活法检测肝脏内PCS合成酶磺基转移酶的活力。采用qRT-PCR及Western blotting检测结肠和肝脏中磺基转移酶及肾脏中有机阴离子转运体的基因转录和蛋白表达水平。结果黄葵四物方可降低动物血浆或肝脏中PCS水平。黄葵四物方显著下调肝脏内磺基转移酶基因转录和蛋白表达水平(P0.05),抑制肝脏中对甲酚向PCS转化,从而抑制宿主体内尿毒素分子PCS的合成。黄葵四物方不影响肾脏中有机阴离子转运体的基因转录和蛋白表达水平,不影响PCS由血液向肾脏中的转运过程。结论黄葵四物方可通过调控宿主细胞内PCS的合成途径,抑制PCS体内合成,减少尿毒素蓄积,从而延缓慢性肾病进程。     

“肝开窍于目”中医理论启示下的“肝-眼生物轴”的提出及其现代医学生物学证据

“肝开窍于目”是中医脏腑理论的重要认知,认为“眼乃五脏六腑之精华, 上注于目而为明”,并在临床实践中不断完善形成了“肝病及眼”“眼病及肝”的中医辨证与辨病理论基础和诊疗体系。随着现代医学生物学的发展,越来越多的证据表明肝脏和眼两大脏器之间在生理、病理诸方面存在着十分复杂而密切的联系, 这些生物学联系印证了“肝开窍于目”理论。因此,“肝-眼生物轴”的提出,既得益于“肝开窍于目”中医脏腑理论的启示,具有深厚的传统中医理论基础,又是人体脏器与眼部疾病之间存在共同的通路与靶点和复杂而紧密的生物学关系的客观判断。“肝-眼生物轴”的提出和不断丰富完善,必将为提升眼科学基础研究及临床诊疗水平做出应有的贡献。