复杂巨大肝肿瘤的精确切除体会(附52例报道)

目的总结复杂巨大肝肿瘤的精确切除经验。方法 2008年4月至2009年8月期间四川大学华西医院肝胆胰外科行复杂巨大肝肿瘤精准切除52例,术前仔细进行肝脏储备功能、肝脏影像学等评估,术中选择适当的手术入路、血流阻断方式、断肝新技术、结合术中B超等方法。结果本组病例平均手术时间为350 min(210~440 min),半肝血流阻断时间平均为43 min(8~57 min),术中平均出血量为370 ml(250~1 150 ml),谷丙转氨酶恢复正常平均时间为10 d(7~14 d),总胆红素恢复正常平均时间为4.5 d(3~10 d);术后并发症发生率低,仅6例出现轻度漏胆,无肝功能衰竭等重大并发症,无死亡病例。结论精准肝切除治疗复杂巨大肝肿瘤安全、可行。     

人重组GDNF及其生物活性研究

从人胎脑组织中提取总 RNA,以 RT- PCR方法获取编码胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)成熟蛋白的 c DNA。将人 GDNF c DNA插入含 T7启动子的质粒 p ET- 2 8a(+ ) ,构建表达质粒 p ET- GDNF,转化大肠杆菌获得表达菌株BL GDNF,经诱导表达的 GDNF形成包含体。凝胶自动扫描分析表明 ,表达量约占菌体总蛋白的 30 %以上。用纯化的 GDNF蛋白免疫新西兰免制备了 GDNF抗血清。纯化和复性的 GDNF蛋白能显著促进多巴胺能神经元的存活。     

大鼠GDNF基因的克隆表达及对PC12工程细胞的影响

克隆与表达大鼠胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)并观察其对PC12工程细胞的影响。从新生4天的SD大鼠海马组织中提取总RNA，通过RT-PCR方法，扩增出GDNFcDNA。构建表达质粒pET-GDNF，转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导GDNF表达并在Ni^2 -NTA柱上用一步复性法纯化和复性。把PCDNA3．0-GFRαl和pcDNA3．0-BET质粒双转染入PC12细胞，C-418筛选稳定克隆，构建PC12工程细胞。用GDNF刺激工程细胞，3天后观察其存活和分化。大鼠GDNFcDNA的克隆与表达获得成功，纯化和复性的重组GDNF蛋白可显著增强PC12-GFRαl—RET工程细胞的存活和分化。初步明确GDNF诱导PC12工程细胞存活和分化是通过RET-依赖途径。     

胶质细胞源性神经营养因子对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的证实胶质源性神经营养因子(glial cellline-derived neurotrophic factor,GDNF)对脊髓前角运动神经元有保护作用.方法切断SD大鼠一侧坐骨神经建立脊髓前角运动神经元损伤模型,借助单盲端硅胶管系统在损伤神经局部给予GDNF,术后不同时间分别取L5脊髓切片,利用酶组织化学染色方法显示胆碱酯酶和酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)活性并进行图像分析.结果坐骨神经切断后第4,9,16及21 d,对照组和GDNF组胆碱酯酶活性分别为21.53±1.54和23.67±1.08(P＜0.05),19.82±1.35和22.87±1.04(P＜0.01),22.55±1.20和25.25±1.13(P＜0.01),25.52±1.43和28.92±1.37(P＜0.01);对照组和GDNF组ACP活性(平均灰度)分别为37.49±1.39和35.40±1.18(P＜0.05),40.94±1.38和38.43±1.31(P＜0.05),22.55±1.20和25.25±1.13(P＜0.05),37.15±1.52和34.68±1.43(P＜0.05)结论GDNF对损伤的脊髓前角运动神经元有保护作用.     

神经营养因子对成年大鼠脊髓损伤后皮质脊髓束再生的影响

背景：胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对脊髓运动神经元的存活有明显的保护作用，但GDNF对成年大鼠脊髓损伤后皮质脊髓束再生是否有促进作用仍不清楚。目的：研究胶质细胞源性神经营养因子对脊髓损伤后皮质脊髓束再生的保护作用。设计：随机对照实验。地点和材料：本实验在第二军医大学神经生物实验室完成。实验动物采用雄性成年SD大鼠64只，体质量250～300g。干预：采用Nystrδm法制备大鼠胸髓后路压迫损伤模型，压迫质量为50g，时间为5min，造成大鼠胸段脊髓急性重度损伤。脊髓损伤后24h，对照组注射6μL阳离子脂质体DC-Chol和2μg pCDNA3的混合物，实验组将6μL DC-Chol和2μg重组质粒pEGFP-GDNF cDNA混合后注入大鼠损伤脊髓。主要观察指标：应用RT-PCR技术和荧光显微镜检测GDNF体内转基因后在局部的表达，通过辣根过氧化物酶(HRP)顺行追踪技术和神经微丝(NF)免疫组化活性的变化来评价GDNF基因体内转染对大鼠皮质脊髓束再生的影响。结果：GDNF基因体内转染1周后发现在基因注射局部有转录和蛋白水平表达，4周后在脊髓损伤周围仍检测到GDNF蛋白表达。脊髓损伤后4周，实验组脊髓损伤区皮质脊髓束HRP标记明显多于对照组，仅在实验组可见部分神经纤维穿过损伤区至远端5～9mm。损伤区NF阳性轴突数(524．33&;#177;80．55／低倍视野)较对照组(309．84&;#177;56．65／低倍视野)明显增多(P&;lt;O．01)，GFAP阳性细胞数(186．68&;#177;16．25)明显少于对照组(239．78&;#177;21．44)(P&;lt;O．01)。结论：阳离子脂质体介导GDNF体内转基因能促进近端皮质脊髓束再生和神经骨架蛋白的修复，提示神经营养因子基因治疗可用来治疗创伤性脊髓损伤。     

胶质细胞源性神经营养因子对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的：证实胶质源性神经营养因子(glial cell line—derived neurotrophic factor，GDNF)对脊髓前角运动神经元有保护作用。方法：切断SD大鼠一侧坐骨神经建立脊髓前角运动神经元损伤模型，借助单盲端硅胶管系统在损伤神经局部给予GDNF，术后不同时间分别取L5脊髓切片，利用酶组织化学染色方法显示胆碱酯酶和酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)活性并进行图像分析。结果：坐骨神经切断后第4，9，16及21d，对照组和GDNF组胆碱酯酶活性分别为21．53&;#177;1．54和23．67&;#177;1．08(P&;lt;0．05)，19．82&;#177;1．35和22．87&;#177;1．04(P&;lt;0．01)．22．55&;#177;1．20和25．25&;#177;1．13(P&;lt;0．01)，25．52&;#177;1．43和28．92&;#177;1．37(P&;lt;0．01)：对照组和GDNF组ACP活性(平均灰度)分别为37．49&;#177;1．39和35．40&;#177;1．18(P&;lt;0．05)，40．94&;#177;1．38和38．43&;#177;1．31(P&;lt;0．05)，22．55&;#177;1．20和25．25&;#177;1．13(P&;lt;0．05)．37．15&;#177;1．52和34．68&;#177;1．43(P&;lt;0．05)结论：GDNF对损伤的脊髓前角运动神经元有保护作用。     

常温下连续阻断半肝血流60 min在乙肝肝硬变患者肝切除术中的应用

目的评价常温下连续阻断半肝血流60min行不规则肝切除术对乙肝肝硬变患者剩余肝脏安全性的影响。方法回顾性分析1995年1月至2006年12月在华西医院施行半肝血流阻断肝切除术的232例乙肝肝硬变伴有肝细胞癌患者的临床资料。依据半肝血流阻断时间将患者分成3组：〈60min组、60～90min组和〉90min组;分析3组患者术中的出血量、输血量、肝脏功能和术后并发症发生情况。结果3组术后并发症发生情况比较差异无统计学意义（P〉0.05）。3组患者的AST、ALT、PT和总胆红素水平在术后第1和3d较术前均显著升高（P〈0.05）,于术后第7d则明显下降并接近术前水平;白蛋白水平和血小板计数在术后第1d较术前均显著下降（P〈0.05）,于术后第3和7d则明显升高并接近术前水平。〉90min组的住院时间、ALT和AST水平均高于〈60min组和60～90min组（P〈0.05）,而后2组间差异则无统计学意义（P〉0.05）。结论半肝血流阻断法在乙肝肝硬变不规则肝切除术中具有可行性和一定的安全性;当半肝血流阻断时间〉90min时,使用该方法应慎重。     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后前角神经元的保护作用

目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用。　方法　雄性SD大鼠 4 5只随机分为等渗盐水组、GDNF组、神经生长因子 (NGF)组 ,每组 15只 ,采用改良Nystr¨om法后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ,经蛛网膜下腔局部注射GDNF(1μg μl,10 μg d) 1周。伤后 1,2 ,4周应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察前角运动神经元存活数目及胆碱酯酶 (CHE)和酸性磷酸酶 (ACP)的变化。　结果　脊髓损伤后第 1,2周 ,GDNF组前角运动神经元存活数目 [(2 1.4± 3.8,2 0 .7± 3.6 )个 前角视野 ]明显多于等渗盐水对照组的 (17.3± 2 .8,16 .5± 3.0 )个 前角视野 (P <0 .0 1) ;GDNF组前角运动神经元中CHE灰度值 (6 5 .2± 2 3.8,98.7±31.6 )低于等渗盐水组 (94 .5± 35 .2 ,12 5 .6± 4 1.6 ) (P <0 .0 1) ;ACP灰度值 (74 .2± 2 5 .7,6 8.6±30 .6 )高于等渗盐水组 (5 8.5± 18.2 ,4 9.6± 2 1.6 ) (P <0 .0 1)。　结论　外源性GDNF能保护脊髓不完全性损伤后引起的运动神经元损害。     

胶质细胞源性神经营养因子对脊髓损伤后皮质脊髓束再生的保护作用

目的:观察外源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对大鼠损伤脊髓皮质脊髓束再生的影响.方法:利用Nystrm法制备大鼠胸髓压迫损伤模型.蛛网膜下腔置管至损伤局部,连续1周给予GDNF.应用辣根过氧化物酶 (HRP)顺行追踪技术和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经中丝(NF)免疫组化活性的变化来评价外源性GDNF对伤区皮质脊髓束和轴突再生的影响.结果:脊髓损伤后4周GDNF治疗组GFAP表达较对照组明显减少,NF标记轴突数显著多于对照组,皮质脊髓束部分再生并通过损伤区至远端0.5 cm.结论:外源性GDNF局部给药能减少胶质细胞增生,促进脊髓损伤大鼠皮质脊髓束轴突再生和神经骨架蛋白的修复.     

Diaphragmatic Metastasis from Colon Carcinoma Mimicking A Hepatic Neoplasm: Report of A Case

A 70-year-old male with a cystic tumor indicated by computed tomography (CT) imaging in the subphrenic part of the liver consulted for surgery. He had undergone a resection of ascending colon carcinoma 1-year before admission to the hospital, and had no recurrence inspected by CT imaging. Laparotomy showed a well-circumscribed tumor derived from the diaphragm, which made a significant depression in the liver. Complete removal of the tumor was achieved. Pathologic examination led to a diagnosis of metastatic mucinous adenocarcinoma originating from the colon. The incidence of metastatic diaphragm tumors from colon carcinoma is rare. The cause of the metastasis was thought to be the peritoneal stomata of the diaphragm, which has previously been shown to absorb both intraperitoneal fluid and small particles.