凉血化瘀方拮抗内质网应激引起的L02肝细胞凋亡作用及机制研究

内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS) 启动的细胞凋亡是近年才发现的一种新的凋亡途径,本研究从ERS途径探讨凉血化瘀方对肿瘤坏死因子α(TNF-α)和D-氨基半乳糖 (D-GalN)所致肝细胞凋亡的保护作用。研究发现,TNF-α和D-GalN可明显抑制L02肝细胞增殖,诱导细胞凋亡,使细胞质内游离钙离子含量明显上升,并使ERS凋亡相关信号分子磷酸化PERK,磷酸化elF2α,cleaved Caspase-12,GRP78,CHOP的蛋白表达显著增加。不同浓度的凉血化瘀方作用后,与TNF-α/GalN损伤组相比,可显著减轻L02肝细胞的增殖抑制、减少细胞的凋亡,抑制细胞质内游离钙离子含量的增高,并使磷酸化PERK,磷酸化elF2α,cleaved Caspase-12,GRP78,CHOP的蛋白表达量呈逐渐下降的趋势。这些发现说明:凉血化瘀方对TNF-α和D-GalN所诱导的肝细胞凋亡具有抑制作用,其机制可能与维持内质网腔钙稳态平衡和下调ERS凋亡相关信号分子磷酸化PERK,磷酸化elF2α,cleaved Caspase-12,GRP78,CHOP的表达有关。     

自噬对抗肿瘤免疫应答的影响

与细胞凋亡近似,自噬是一种重要的细胞生理反应.大量证据显示,自噬参与调控肿瘤发生、胚胎发育、组织重构等病理生理过程,更与免疫功能密切相关.免疫系统具有二重性,既能抑制又能促进肿瘤的发育进程.此外,自噬作为一种免疫系统效应器,已被证实参与天然免疫和获得性免疫过程.本文着重就自噬参与免疫反应分子机制方面的研究进展加以综述.     

从线粒体途径探讨凉血化瘀方对肿瘤坏死因子α致肝细胞凋亡的保护作用

目的:从线粒体途径探讨凉血化瘀方对肿瘤坏死因子α(TNF-α)和D-氨基半乳糖(D-GaIN)所致肝细胞凋亡的保护作用.方法:体外培养人正常肝L02细胞,用TNF-α(100 μg·L-1)和D-GaIN(44 mg·L-1)诱导肝细胞损伤模型,荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;采用细胞增殖实验(MTT)法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双染色法结合高内涵细胞成像系统检测肝细胞凋亡;罗丹明123(Rh123)染色结合高内涵分析系统检测线粒体跨膜电位;Western-blot检测线粒体途径凋亡标志蛋白凋亡蛋白酶激活因子(Apaf-1)、细胞凋亡诱导因子(AIF)、胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9)表达水平的变化.结果:与正常对照组相比,TNF-α和D-GalN可明显抑制L02肝细胞增殖,诱导细胞凋亡,使细胞线粒体跨膜电位明显下降,并使促凋亡蛋白Apaf-1,AIF,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9的表达显著增加.不同浓度的凉血化瘀方作用后,与TNF-α/GalN损伤组相比,可显著减轻L02肝细胞的增殖抑制、减少细胞凋亡,抑制细胞线粒体跨膜电位的下降,并促使凋亡蛋白Apaf-1,AIF,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9的表达量呈逐渐下降的趋势.结论:凉血化瘀方对TNF-α和D-GaIN所诱导的肝细胞凋亡具有抑制作用,其机制可能与稳定线粒体的膜电位和下调促凋亡基因Apaf-1,AIF,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9的表达有关.     

自噬与凋亡的相互关系在肿瘤方面的研究进展

肿瘤是一类涉及基因、代谢和信号传导异常等多方面因素引起的疾病,其发生的分子机制相当复杂,但本质上仍与细胞增殖与死亡的动态失衡有关。程序性细胞死亡（programmed cell death,PCD）是由基因控制的自杀程序引起的主动性死亡,对于多细胞生物个体发育的正常进行,维持内环境稳态以及抵御外界各种干扰因素方面有着关键性的意义。I型PCD（经典细胞凋亡）和II型PCD（自噬性细胞死亡）调控着肿瘤细胞的增殖与消耗,与肿瘤的发生、发展密切相关。本文结合近年来国内外研究进展,重点就自噬在肿瘤中的作用以及与凋亡的相互关系作一综述。     

基于数据挖掘技术探析中医药治疗中晚期非小细胞肺癌的用药规律

目的:挖掘中医药治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的成方规律,以期为临床遣方用药及新药研发提供一定的理论依据。方法:以中国知网(CNKI)中近40年来中医药治疗中晚期NSCLC的临床研究文献作为数据来源,通过筛选后建立方剂数据库,再运用数据挖掘软件进行频数统计、关联规则分析、系统聚类、因子分析及复杂网络构建等。结果:经过纳排标准筛选出307篇临床文献,包含方剂483首。中晚期NSCLC常见证候以气阴两虚为主,证候要素以气虚、阴虚、痰、血瘀、热(火)邪、毒邪、湿邪多见。使用的药物类别以补虚药、清热药、化痰止咳平喘药、利水渗湿药和活血化瘀药较为集中。使用高频次药物为黄芪、甘草、麦冬、浙贝母、茯苓等,其中四气以寒性最为常见,五味以苦、甘、辛味居多,归经主要集中在肺、脾、胃经。关联规则分析发现关联强度较高的规则有17条,因子分析中可提取公因子数为10个,系统聚类分析得出5大类。复杂网络分析提示核心中药处方为六君子汤合益气养阴解毒方加减。结论:益气养阴、健脾化痰、清热解毒、活血化瘀是中医药治疗中晚期NSCLC的基本治则,数据挖掘的核心组合和新方具有重要的指导借鉴意义,但仍需与中医理论相结合,有待进一步的临床及实验研究给予验证。