融合蛋白AML1-ETO对C/EBPα基因表达的影响

背景：已有研究显示AML1-ETO可以通过包括抑制C/EBPα的功能在内的机制引起分化的阻滞。目的：观察AML1-ETO对髓系分化相关基因C/EBPα表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用。方法：应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937、U937-MOCK和U937-A/E1细胞表面抗原CD11b、CD14的表达;荧光实时定量PCR检测C/EBPαmRNA的表达;免疫印迹法检测C/EBPα蛋白的表达;染色质免疫沉淀技术研究转染细胞中AML1-ETO与C/EBPα基因启动子之间直接的相互作用情况。结果与结论：AML1-ETO转染细胞的细胞表面分化抗原CD11b和CD14的表达明显下降,且转染了AML1-ETO的U937细胞系中,C/EBPα的mRNA与蛋白水平均下调,转染细胞沉淀富集的DNA中含有C/EBPα基因的启动子序列。结果提示C/EBPα是AML1-ETO的直接靶基因,AML1-ETO能下调C/EBPα的表达。     

融合蛋白AML1-ETO对C/EBPα基因表达的影响

背景:已有研究显示AML1-ETO可以通过包括抑制C/EBPα的功能在内的机制引起分化的阻滞。目的:观察AML1-ETO对髓系分化相关基因C/EBPα表达的影响,探讨其在白血病发生中的作用。方法:应用流式细胞术检测急性单核细胞白血病细胞株U937、U937-MOCK和U937-A/E1细胞表面抗原CD11b、CD14的表达;荧光实时定量PCR检测C/EBPαmRNA的表达;免疫印迹法检测C/EBPα蛋白的表达;染色质免疫沉淀技术研究转染细胞中AML1-ETO与C/EBPα基因启动子之间直接的相互作用情况。结果与结论:AML1-ETO转染细胞的细胞表面分化抗原CD11b和CD14的表达明显下降,且转染了AML1-ETO的U937细胞系中,C/EBPα的mRNA与蛋白水平均下调,转染细胞沉淀富集的DNA中含有C/EBPα基因的启动子序列。结果提示C/EBPα是AML1-ETO的直接靶基因,AML1-ETO能下调C/EBPα的表达。     

双切口双钢板内固定治疗复杂胫骨平台骨折

目的探讨双切口双钢板内固定治疗复杂胫骨平台骨折的临床效果。方法复杂胫骨平台骨折16例,按Schatzker分型:Ⅴ型9例,Ⅵ型7例,均采用前外侧和后内侧双切口双钢板内固定治疗。结果随访6～46个月,骨折均愈合,按Mer-chant评分标准评定:优8例,良5例,可3例。结论双切口双钢板内固定治疗复杂胫骨平台骨折,固定稳固,并发症少,关节功能恢复满意。     

抗CD40单链抗体的慢病毒载体的构建和表达

目的克隆大鼠抗小鼠的抗CD40激活型抗体的单链抗体（CD40-scFv）,并构建可表达大鼠抗小鼠的抗CD40抗体的单链抗体（CD40-scFv）的重组慢病毒。方法采用RT-PCR法从分泌大鼠抗小鼠抗CD40激活型抗体的杂交瘤细胞株（FGK-115）中克隆VH和V1基因,用重叠延伸PCR法将V。和V。拼接在一起,构建抗CD40抗体的scFv基因,将CD40-scFv基因连接至PEGM-T克隆载体,限制性内切酶酶切及测序鉴定;构建含有大鼠抗小鼠的抗CIM0激活型抗体的单链抗体（CD40-scFv）的慢病毒穿梭质粒,并与其它包装质粒一起通过磷酸钙法感染293T细胞;获得病毒颗粒并感染人慢性髓系白血病细胞MEG-01,检测其感染效率。结果含大鼠抗小鼠的抗CIM0激活型抗体的单链抗体（CD40-scFv）的慢病毒穿梭质粒构建成功;通过磷酸钙感染293T细胞所得病毒上清可成功感染MEG-01细胞,流式细胞术检测阳性率可达96％。结论成功克隆了大鼠抗小鼠的抗CD40激活型抗体的单链抗体（CD40-scFv）基因,并建立其重组慢病毒表达系统,为后续的实验及应用研究工作奠定了基础。     

APOPTOTIC AND PROLIFERATIVE ACTIVITY IN OVARIAN BENIGN，BORDERLINE AND MALIGNANT TUMORS

INTRODUCTIONEpithelialovariancarcinoma（EOC）isoneofthemostcommongynecologicmalignantlesions．Becauseofapaucityofspecificearlysymptomsandinsensitivescreeningtest，mostpatientspresentwithlate－stagedis－ease．Despiterecentadvancesinsurgicalandcytotoxicther     

雷公藤多甙对成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者谷氨酸脱羧酶抗体和B细胞功能的影响

目的探讨雷公藤多甙（GTT）对成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA）患者谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab）和B细胞功能的影响。方法60例LADA患者随机分为GTT组和对照组，应用GTT观察3个月前后空腹C肽、GAD-Ab和胰岛素抗体（IAA）的变化。结果①GTT组患者应用GTT治疗3个月后GAD-Ab阳性率下降，转阴率为43％，与对照组比较差异有显著性（P〈0．01）。②IAA治疗前后，2组组内和组间比较差异均无显著性。③GTT组患者治疗后C肽水平略有上升，组内治疗前后比较差异无显著性，而与对照组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论研究提示GTT对GAD-Ab具有免疫抑制作用，并有一定的改善B细胞功能的趋势。     

宫颈癌石蜡标本中人乳头状瘤病毒检测方法的初步探讨

目的:探讨适合检测宫颈癌石蜡包埋标本中高危型HPV的方法。方法:用高危型HPV-DNA HC2检测及PCR扩增联合DNA测序法,对25例宫颈癌(宫颈鳞癌23例,宫颈腺癌2例)进行高危型HPV检测。每例取石蜡包埋组织块中的癌组织,21例术前曾于门诊取材(新鲜脱落细胞)行高危型HPV-DNA HC2检洲。结果:(1)21例宫颈癌石蜡标本, PCR扩增法高危型HPV阳性检出率为66．7%;HC2高危型检测阳性检出率为47．6%;(2) PCR扩增法灵敏度为66．7%,特异度为33．3%,与参照标准的符合率为61．9%,阳性预测值为85．7%,阴性预测值为14．3%;(3)HC2检测法灵敏度为44．4%,特异度为33．3%,与参照标准的符合率为42．9%,阳性预测值为80．0%,阴性预测值为9．1%;(4)石蜡标本保存时间与HPV检出率有关。半年以内标本HPV检出率为92．3%(12/13),半年以上者为33．3% (4/12),两者差异有统计学意义(P=0．004)。结论:HPV-DNA扩增(PCR)联合测序法是目前回顾性研究宫颈癌石蜡包埋标本中HPV感染的可行方法;石蜡标本保存时间与HPV检出率有关,石蜡包埋时间越短、标本越新鲜,检出率越高。     

二期翻修治疗人工髋关节置换术后感染

目的评估应用抗菌素骨水泥旷置二期翻修治疗髋关节置换术后感染的疗效。方法2000年1月～2005年12月收治的9例髋关节置换术后感染病例，通过对临床表现、实验室检查、影像学检查、关节穿刺及培养、术中病灶组织涂片及培养等综合分析，明确诊断为人工髋关节置换术后深部感染。细菌培养：2例表皮葡萄球菌，4例金黄色葡萄球菌，2例混合感染，1例培养阴性。所有患者均行一期清创后假体取出加抗菌素骨水泥支架旷置；二期翻修采用骨水泥型假体再置换并结合抗感染治疗。结果一期处理后伤口均愈合，平均5．8个月后进行二期手术。术后平均随访40个月时髋关节Harris评分由术前30．8分提高至63．1分。结论人工髋关节置换术后感染的诊断困难，需多种方法进行综合分析；抗菌素骨水泥旷置二期翻修是治疗髋关节置换术后感染非常有效的方法，感染复发率低。     

阴道自取样HPV宫颈癌筛查联合宫颈细胞学p16~(INK4a)蛋白检测在精准筛查中的应用

目的探讨阴道自取样人乳头瘤病毒(HPV)宫颈癌筛查模式的有效性及联合宫颈细胞学p16~(INK4a)检测的价值。方法 2018年10—11月对贵州三都水族自治县和北京市门头沟地区3 905名30～59岁女性进行阴道自取样HPV宫颈癌筛查和宫颈细胞学p16~(INK4a)蛋白检测;对14种高危型HPV和p16~(INK4a)蛋白阳性者转诊阴道镜及定位活检,分析高危型HPV和p16~(INK4a)检出宫颈高级别病变(HSIL)及联合检测的效果。结果①3 905名女性阴道自取样本的合格率为100%,14种HPV阳性率16.08%(628/3 905),其中门头沟地区HPV阳性率16.45%(334/2 031),三都水族自治县HPV阳性率15.69%(294/1 874);单一HPV感染占72.77%(457/628);前5位HPV型别依次是HPV52、HPV16、HPV 58、HPV39和HPV68。②593例阴道镜下活检患者中,检出HSIL及以上病变62例(10.46%),其中HPV阳性61例(98.39%,61/62),包括HPV16/18阳性38例(62.30%,38/61),非HPV16/18阳性23例(37.71%,23/61),不同级别病变HPV阳性率比较,差异有统计学意义(P 0.01);③宫颈HSIL及以上病变、LSIL和宫颈炎中p16~(INK4a)蛋白表达的阳性率分别是90.33%、37.64%和19.27%(P 0.001),其检出宫颈HSIL及以上病变的敏感度、特异度、阴性预测值和准确度分别是90.33%、74.58%、98.51%和76.23%,其假阳性率(25.43%)明显低于HPV检测(80.04%)(P 0.001);HPV阳性联合p16~(INK4a)检测,在保持高敏感度(90.17%)的同时,特异度(83.46%)、准确度(84.30%)明显升高(P 0.05),假阳性率(16.55%)明显降低(P 0.05)。结论阴道自取样HPV检测宫颈癌筛查模式是可行的,可作为传统筛查模式的补充。宫颈细胞学p16~(INK4a)蛋白检测可用于对自取样HPV阳性/非HPV16/18的分流或精准筛查的方法。