坚持特色加强管理发挥重点实验室的科技攻坚作用

广东省鼻咽癌诊治研究重点实验室,通过近6年的建设在国内外形成了自身的专业特色,使广东省鼻咽癌防治水平走在全国的前列,在具有国际前沿领域原创性的鼻咽癌易感基因研究方面取得了突破性的进展。加强管理科技攻坚是其关键。     

T790M的突变富集PCR检测方法和克隆演化假设

3背景·吉非替尼在临床部分非小细胞肺癌（nonsmall cell lungcancer，NSCLC）患者中取得了较好的疗效．但几乎所有的患者最终将发生耐药。     

FG020326通过增加泰素帝介导caspase-8和3激活的敏感性克服多药耐药细胞MCF-7/ADR的凋亡抗性

背景与目的:多药耐药(multidrug resistance,MDR)的主要特征是具有药泵功能的P-gp的高表达,近来研究发现P-gp还抑制caspase依赖方式凋亡,使MDR细胞免于多种形式的caspase依赖性凋亡.本研究拟探讨新型化合物FG020326对耐药细胞MCF-7/ADR的细胞毒作用,克服MCF-7/ADR对泰素帝的凋亡抵抗作用及机制.方法:MTT法测定FG020326体外逆转活性,Hoechst33258染色后荧光显微镜观察凋亡细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡通路PARP、caspase-3、caspase-8的表达,并用比色法测定caspase-8和3的活性.结果:10μmol/LFG020326作用下MCF-7/ADR细胞对泰素帝耐药性逆转了24倍.10μmol/LFG020326作用下,0.1 μmol/L泰素帝可诱导MCF-7/ADR细胞染色质凝集,凋亡小体产生以及出现亚凋亡峰.10 μmol/L FG020326作用48 h,泰素帝介导的caspase激活敏感性增加,0.1μmol/L泰素帝诱导下出现caspase-8和caspase-3,PARP裂解.与0.1 μmol/L泰素帝单独作用相比,10μmol/L FG020326作用下,泰素帝介导的caspase-8和caspase-3活性显著提高,并呈时间依赖性,48 h活性最高.结论:新型化合物FG020326可显著逆转MCF-7/ADR对泰素帝的抗药性,通过增加泰素帝介导的caspase-8和caspase-3的激活敏感性克服MDR细胞MCF-7/ADR的凋亡抗性.     

吗丙嗪逆转多药抗药性作用及其分子机制的探讨

目的：探讨吗丙嗪逆转肿瘤多药抗药性（ＭＤＲ）的作用及其机制。方法：以ＭＴＴ与Ｆｕｒａ－２－ＡＭ法进行吗丙嗪逆转ＭＤＲ活性测定；以ＤＰＨ荧光测定法探讨吗丙嗪对膜脂流动性的影响；以荧光分光光度计法测定吗丙嗪与高钙或低钙对细胞内阿霉素（Ｄｏｘ）积累的影响及Ｆｕｒａ－２－ＡＭ法测定吗丙嗪对细胞内游离钙离子浓度的影响。结果：在浓度２．５μｍｏｌ·Ｌ－１时，吗丙嗪能显著增加ＭＣＦ－７／ＡＤＲ细胞内Ｆｕｒａ－２的积累和降低ＭＣＦ－７／ＡＤＲ对Ｄｏｘ的ＩＣ５０而对敏感株ＭＣＦ－７无明显影响，表明吗丙嗪具有逆转ＭＤＲ的作用。吗丙嗪能显著增加ＭＤＲ细胞内Ｄｏｘ积累和降低ＭＤＲ细胞的膜脂流动性。高钙或低钙对ＭＤＲ细胞内Ｄｏｘ积累无影响，吗丙嗪也不能改变１９９７－０４－１１收稿１中山医科大学中心实验室，广州５１００８９作者简介：符立梧，男，３２岁，博士，讲师，主要从事逆转多药抗药性的研究；潘启超，男，６７岁，教授，博士生导师，主要从事肿瘤药理与化疗方面的研究ＭＤＲ细胞内游离钙离子浓度。结论：吗丙嗪有逆转ＭＤＲ作用。其逆转机制与降低膜脂流动性增加细胞内ＤＯＸ积累有关，与钙离子浓度无关     

四氯化碳引起大鼠肝微粒体钙泵的抑制与巯基关系的探讨

四氯化碳（ＣＣｌ４）与肝微粒体共同温浴，引起微粒体的丙二醛（ＭＤＡ）升高、蛋白巯基的降低和钙泵的抑制。与对照组比较具有显著性意义，且存在着剂量－反应关系及时间－反应关系。在本实验条件下，发现Ｃｌ４引起蛋白巯基的降低和钙泵的抑制呈明显的相关关系。用巯基供剂ＤＴＴ、过化物自由基清除剂ＳＯＤ均能部分地拮抗ＣＣｌ４引起肝微粒体脂质过氧化（ＬＰＯ），从而保护了微粒体的蛋白巯基及钙泵。表现耿ＤＴＴ＋ＣＣｌ４及     

我国对多药抗药性研究概况评述

肿瘤化疗是治疗肿瘤的重要手段。目前肿瘤化疗的最大障碍主要为：其一，剂量限制性毒副作用。由于抗癌药物选择性不强，在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常机体细胞的也有杀伤作用，团此，产生毒副作用，限制了抗癌药物的应用剂量，同时也使药物的疗效受到限制。其二，肿瘤细胞对抗癌药物产生抗药性，使原来有效的药物或方案变为无效，尤其是多药抗药性。所谓多药抗药性（MeqResistance，MDR）是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生抗药性时，同时对结构和作用机理不同的多种天然来源的抗肿瘤药物产生交叉抗药性。多药抗药性产生的原因十分方卖．与…     

反相高效液相色谱法检测小鼠血浆中FG020326方法的建立

目的建立测定多药耐药(multidrugresistance,MDR)逆转剂FG020326在KM小鼠血浆中血药浓度的方法。方法将KM小鼠(20·0~25·1)g随机分组,每组6只,♀♂各半,尾静脉注射,给药量为30mg·kg-1,分时取血、处理。采用反相色谱柱,应用外标法测定FG020326在KM小鼠血浆中的血药浓度。结果在所建立的方法学下,FG020326的保留时间为7·9min;标准曲线为Y^=0·0144X-0·0285(r=0·9998),在162·5~41600μg·L-1血浆浓度范围内呈良好的线性关系,最低检测浓度40μg·L-1(S/N=3);在650、2600、20800μg·L-1低、中、高3个浓度下的绝对回收率为68·66%~84·63%,相对回收率为92·58%~110·88%;日内及日间RSD均小于3·2%(n=5)。在室温及冷冻-解冻试验中,FG020326具有良好的稳定性,RSD分别小于1·3%和6·0%。尾静脉单次给药后,FG020326在体内过程符合二室模型,T12α为0·088h,T21β为5·33h,AUC0~∝为14183h·μg·L-1,Vd为0·37L。结论该方法快速、准确、简便,能够满足FG020326药代动力学研究要求。     

建立离子对高效液相色谱法检测小鼠血浆中粉防己碱浓度的方法

目的建立高效液相色谱法检测小鼠血浆粉防己碱浓度的方法。方法用反相色谱柱,在室温条件下,流量为0 .7 mL·min-1,紫外检测波长为230 nm。内标为盐酸小檗胺,样品用乙醚萃取。结果在所建立的HPLC条件下,粉防己碱(TET)血浆线性浓度范围是50-2000ng.mL-1(γ=0.9991)。TET的最低检测浓度为10 ng·mL-1(S/N=3)。日内、日间精密度结果提示,各浓度组的变异系数分别小于3.25％,9.70％。结论离子对HPLC测定粉防己碱血浆浓度的方法精密、准确及重现性好。