KIF3A通过结合Wnt/β-catenin通路中的β-arrestin参与哮喘气道上皮的炎症调控

目的 研究KIF3A参与哮喘气道炎症调控的可能机制,为哮喘治疗提供新的靶点和方向.方法 选取20只雌性6～8周龄C57BL/6小鼠建立哮喘模型,随机分为哮喘组与对照组(n= 10).Western blot和免疫组化(IHC)检测两组小鼠KIF3A的表达;在体外分别用磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)和屋尘螨(house dust mite,HDM)干预人支气管上皮细胞 16HBE,Western blot 和RT-PCR检测KIF3A的表达;构建含有KIF3A的过表达组(LV-KIF3A-45894-J2,LV-KIF3A)和RNA干扰序列的慢病毒载体组(LV-KIF3A-RNAi-81183-1,RNAi),用含有空载的慢病毒和阴性对照序列的慢病毒载体作为对照,分别感染16HBE;免疫共沉淀检测过表达组中KIF3A与β-arrestin的结合,同时Western blot和RT-PCR检测各组细胞β-catenin的表达水平,RT-PCR检测KIF3A基因差异表达对趋化因子CCL-17和CCL-26表达的影响.结果 哮喘组的KIF3A表达水平较对照组减少(P＜0.05).HDM干预16HBE后的KIF3A蛋白和mRNA表达水平较对照组有下降趋势,但无统计学差异(P＞0.05).慢病毒载体感染16HBE 72 h且经流式分选绿色荧光阳性细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示LV-KIF3A组和RNAi组的KIF3A蛋白和mRNA表达分别增多(P＜0.05)和下降(P＜0.05).免疫共沉淀证实KIF3A与β-arrestin相结合.LV-KIF3A组和RNAi组的β-catenin蛋白总量无明显差异;与对照组相比,RNAi组的β-catenin mRNA表达显著下降(P＜0.000 1),LV-KIF3A组则无统计学差异.RT-PCR结果显示,与对照组相比,RNAi组的趋化因子CCL-17和CCL-26的mRNA水平增加(P＜0.001),LV-KIF3A 组则降低(P＜0.05).结论 KIF3A 与 Wnt/β-catenin 通路中的 β-arrestin 结合,通过调节趋化因子CCL-17和CCL-26的表达而参与哮喘气道上皮炎症的调控.     

以下游产品开发带动梅花鹿产业发展的机制研究

通过查阅文献等方式对鹿产业及鹿产品进行研究,针对国内市场对鹿茸的需求增加,国外廉价马鹿茸趁机涌入,严重冲击梅花鹿养殖业发展的重大问题,深入探讨了梅花鹿产业发展的机制:在明确市场经济效益机制的基础上,瞄准鹿茸产品进行深加工的研发;应用高科技技术针对中医古籍对鹿产品精方、验方进行筛选、分析定位,开发出具有引领效应的产品;依据肽键热振荡理论示范性开发保健食品、食品、化妆品。通过梅花鹿下游产品开发破解梅花鹿产业下滑的障碍,最终带动梅花鹿产业的发展。     

鹿茸炮制方法、化学成分以及药理作用研究进展

鹿茸是名贵的传统中药,是"东北三宝"之一,具有壮肾阳、益精血、调冲任、托疮毒的功效,鹿茸用于医疗保健的历史悠久,应用广泛。鹿茸化学成分复杂,药理作用广泛,本文就近年来对鹿茸的古代炮制方法和现代炮制法(包括药典法、岭南法、乳制品、文帮炮制法、彭氏炮制法和鹿茸粉),无机元素、糖类、氨基酸、蛋白质、多肽等化学成分和神经保护作用、免疫调节作用、抗肿瘤作用、抗疲劳等药理作用的研究现状进行综述。     

肌酸激酶线粒体1A在子宫内膜样腺癌组织中的表达及对Ishikawa细胞增殖和迁移能力的影响

[目的]探讨肌酸激酶线粒体1A(creatine kinase mitochondrial 1A,CKMT1A)在子宫内膜样腺癌（endometrioid adenocarcinoma,ECa）组织和癌旁组织中的表达情况及其对子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖和迁移能力的影响。[方法]选择2017年1月至2020年12月在郑州大学第三附属医院就诊,具有完整临床信息资料的ECa组织及癌旁组织各39例,采用qRTPCR检测组织中CKMT1A mRNA表达,采用免疫组化SP法检测CKMT1A蛋白表达情况。体外细胞实验使用siRNA干扰Ishikawa细胞中的CKMT1A基因表达,通过CCK8和划痕实验检测敲减CKMT1A后对Ishikawa细胞增殖和迁移能力的影响。[结果]与癌旁组织相比,ECa组织中CKMT1A mRNA表达量（t=4.006,P<0.05）和CKMT1A的阳性表达率均较高（P<0.001）。CKMT1A mRNA在不同ECa分期的患者组织中表达量不同,差异具有统计学意义（F=11.780,P<0.001）。在敲减CKMT1A组中,细胞增殖（P<0....     

阿尔茨海默症转基因小鼠模型Tg6799的鉴定及白藜芦醇对其的作用

目的:鉴定转基因小鼠模型Tg6799,探究该模型对阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)症状及病理特征的模拟情况及白藜芦醇(resveratrol,RES)对该模型的作用。方法:分别对Tg6799转基因小鼠进行基因鉴定、β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)免疫荧光染色、硫黄素S斑块染色、水迷宫行为学测试等检测。20只3月龄转基因小鼠随机分为空白对照组和白藜芦醇治疗组,每日连续灌胃40 d(60 mg/kg),Western Blot检测小鼠海马β-淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)表达,水迷宫检测小鼠学习记忆能力。结果:对Tg6799转基因小鼠基因鉴定可得到两条扩增条带;Aβ免疫荧光结果与基因鉴定结果一致;3月龄转基因小鼠脑内开始出现斑块沉积,且随年龄增长斑块数量越多,野生型小鼠9月龄仍未出现斑块沉积;水迷宫测试结果显示转基因小鼠组学习记忆能力低于野生型组。与对照组相比,白藜芦醇治疗组小鼠APP表达减少且空间记忆能力提高。结论:Tg6799是一种有效的AD动物模型,白藜芦醇能显著减少该模型APP表达并改善其学习记忆能力。本研究的结果为进一步探究白藜芦醇对AD的治疗作用及机制奠定了基础。     

Brg1通过STAT6促进哮喘气道黏液高分泌

目的研究染色质重构复合物核心催化亚基（Brg1）对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及其作用机制。方法将6~8周龄 雌性野生型C57bl/6小鼠和Brg1-/-小鼠（Ⅱ型肺泡上皮细胞AEC2s上特异性条件敲低Brg1的C57bl/6小鼠）随机分为4组：正常 对照组、哮喘组、Brg1敲低对照组（Brg1-/-）和Brg1敲低后构建哮喘模型组（Brg1-/-+哮喘）,每组10只。哮喘组和Brg1-/-+哮喘组用 鸡卵清蛋白（OVA）制备过敏性哮喘模型,对照组用生理盐水代替。收取标本,用ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中 黏蛋白MUC5AC和IL-13的表达。糖原染色检测小鼠气道杯状细胞的增生和黏液分泌,q-PCR和免疫组化检测各组小鼠气道 黏蛋白MUC5AC的表达和定量。Western blot检测各组小鼠肺组织中STAT6、p-STAT6的表达。结果Brg1-/-+哮喘组较哮喘组 气道杯状细胞增生和黏液分泌均显著减少,BALF中IL-13、MUC5AC表达明显降低,肺组织MUC5AC mRNA表达显著降低, 同时肺组织STAT6和磷酸化STAT6显著下调。结论Brg1-/-敲低的小鼠建立哮喘模型时气道黏液分泌较野生型小鼠减轻,其可 能通过影响STAT6从而抑制黏蛋白MUC5AC的表达,抑制支气管哮喘气道黏液高分泌,表明Brg1具有促进哮喘气道黏液高分 泌的作用。     

对脑梗死患者应用中医护理干预的效果观察

目的对脑梗死患者应用中医护理干预的效果观察。方法抽取收治的128例脑梗死偏瘫患者进行探讨,随机分成两组,对照组采取一般护理干预,研究组采取中医护理干预,对比效果。结果经过分析临床效果,研究组远远强于对照组,差异较大,存在临床对比价值。结论针对脑梗死偏瘫患者开展中医护理干预,能够有效的控制病情,增强肢体功能,提高治疗效果,改善生活质量,适合临床的大力推广与应用。     

薄荷醇下调肺组织P物质改善哮喘气道炎症及气道高反应性的研究

目的 探讨雾化吸入薄荷醇对哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性的作用及其对肺组织P物质(substance P,SP)含量的影响.方法 按随机数字表法将30只6～8周龄BALB/c雌鼠分为对照组、哮喘组及薄荷醇治疗组,哮喘组和薄荷醇治疗组用鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏激发建立哮喘模型,薄荷醇治疗组于每次雾化激发前给予1.6％薄荷醇溶液5 mL雾化吸人30 min,连续10 d,对照组用PBS替代.于末次雾化24 h内行肺功能检测小鼠气道高反应性;48 h内灌取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)计数细胞总数及细胞分类;肺组织HE染色观察肺部病理改变;ELISA检测血清总免疫球蛋白E(IgE)水平及肺匀浆SP含量;免疫组化染色检测肺组织SP的表达.结果 哮喘组气道高反应性明显高于对照组(P＜0.05),而薄荷醇治疗组较哮喘组显著降低(P＜0.05);哮喘组BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞绝对计数均较对照组明显增加(P＜0.01),薄荷醇治疗组较哮喘组显著减少(P＜0.01);HE染色显示,哮喘组支气管和血管周围炎症细胞浸润明显,薄荷醇治疗组较哮喘组明显减轻;ELISA结果显示,哮喘组血清总IgE水平及肺匀浆SP含量均较对照组升高(P＜0.01),薄荷醇治疗组较哮喘组减轻(P＜0.05);免疫组化染色结果显示,哮喘组肺组织SP在气道上皮细胞及血管周围强阳性表达,薄荷醇治疗组中度阳性表达.结论 雾化吸入薄荷醇能减轻哮喘小鼠气道炎症及降低气道高反应性,可能与减少SP含量进而减轻肺部神经源性炎症相关.