天疱疮的临床分型与诊断

天疱疮是一组大疱性皮肤和黏膜疾病,具有慢性、复发性和严重性等特点。临床表现为正常皮肤或黏膜表面出现松弛性水疱、大疱,尼氏征阳性。组织病理为棘层松解,表皮内可产生裂隙、水疱和棘松解细胞;真皮水肿,少数嗜酸性粒细胞或中性粒细胞浸润。天疱疮亦是一类自身免疫性疾病,患者血清中存在致病性的针对自身抗原的特异性抗体。     

CpG ODN刺激的寻常性银屑病中性粒细胞培养上清液对HaCaT细胞增殖的影响

Objective To investigate the role of nentrophils in the pathogenesis of psoriasis vulgaris. Methods Neutrophils were isolated from venous blood samples of 25 patients with psoriasis vulgaris (including 13 cases of active psoriasis and 12 cases of inactive psoriasis) as well as 25 normal human con-trols, and cultured. Then, these neutrophils were grouped and treated with lipopolysaccharide (LPS, 100 g/L),CpG-A (50 mg/L), CpG-B (50 mg/L), and RPMI 1640 culture medium, respectively, for 24 hours followed by the collection of culture supematants. Human keratinocytes (HaCaT) were cultured in the presence of su-pematants of treated or untreated nentrophils for 72 hours followed by the detection of cell proliferation with MTT assay. To determine the role of proinflammatory factors, SOD/CAT and monoclonal antibody to IL-8 and TNF-alpha of 400 u/mL were used to pretreat HaCaT cells 1 hour prior to the stimulation with super-natants of neutrophils. Results Compared with culture medium, the supematant of unstimulated neutrophils from normal controls or patients with inactive psoriasis had no significant effect on the proliferation of HaCaT cells (P ＞ 0.05), but that from patients with active psoriasis markedly promoted the proliferation of HaCaT cells (t = 2.41, P < 0.05). ARe, stimulation by LPS, CpG-A and CpG-B, the supematant of active patient-derived neutrophils significantly promoted the proliferation of HaCaT cells compared with that of normal control-derived nentrophils (t = 3.11, 2.89, 2.29, respectively, all P < 0.05). In comparison with tmstimulated neutrophils, the supematant from LPS- and CpG-A stimulated nentrophiles significantly accelerated the pro-liferation of HaCaT cells. Furthermore, the proliferation of HaCaT cells induced by the supematants of LPS-,CpG-A-, CpG-B-stimulated neutrophils from psoriatic patients was statistically suppressed by the pretreat-ment with the monoclonal antibody to IL-8, TNF-alpha and SOD/CAT (all P < 0.05). Conclusions In patients with psoriasis vulgaris, there is an abnormal secretion of IL-8, TNF-alpha and superoxide by neutrophils in peripheral blood, and these proinflammatory factors could promote the proliferation of HaCaT cells.     

弗氏佐剂与氢氧化铝佐剂对诱导小鼠获得性免疫应答作用的比较

为研究、比较不同佐剂对诱导小鼠产生获得性免疫应答的不同作用,以卵清白蛋白(OVA)为抗原,分别混合完全弗氏佐剂(CFA)或Al(OH)3佐剂,对C57BL/6小鼠进行常规免疫,采用流式细胞技术对细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4进行检测;ELISA方法对特异性抗OVA抗体滴度及抗体亚型进行了检测。结果显示在免疫后CFA组产生以IFN-γ为主的细胞因子而Al(OH)3组产生以IL-4为主的细胞因子;两组中均产生特异性抗OVA IgG抗体,但CFA组以IgG2a亚型为主,而Al(OH)3组则以IgG1亚型为主,不产生IgG2a亚型抗体。实验表明,经CFA加抗原免疫后机体产生的免疫应答以Th1型细胞免疫为主,抗体类型为IgG2a;而Al(OH)3佐剂则诱导机体产生Th2型细胞免疫应答,抗体类型为IgG1。     

ICAM-1 参与系统性红斑狼疮中免疫球蛋白产生的实验研究

目的:探讨ICAM-1在系统性红斑狼疮(SLE)免疫球蛋白产生中的作用。方法:流式细胞术检测分析SLE患者、健康者、anti-CD3 Ab/IFN-α刺激健康者CD4~+T细胞及Pristane诱导的狼疮样小鼠及对照鼠中CD4~+T细胞的活化表型;分选获得Pristane处理小鼠来源的CD4~+T细胞和B细胞,并于体外交叉共培养,加入ICAM-1阻断抗体或同型对照抗体,ELISA检测培养上清中IgG和IgM水平。结果:SLE患者及anti-CD3 Ab/IFN-α刺激健康者CD4~+T细胞表达HLA-DR,CD69和ICOS等分子的细胞比例明显高于对照组。Pristane诱导的狼疮样小鼠CD4~+T细胞的活化程度也显著高于对照;Pristane诱导的狼疮样小鼠血清中抗snRNP和抗dsDNA自身抗体水平显著高于对照组;Pristane处理小鼠来源的活化CD4~+T细胞与B细胞共培养可以促进B细胞产生IgM和IgG。而经抗ICAM-1抗体阻断处理的培养上清中IgM含量低于对照组,而IgG含量显著高于对照组。结论:Pristane来源的活化CD4~+T细胞可促进B细胞分化,ICAM-1分子可能在B细胞分化早期发挥作用,但不利于IgM型向IgG型的类别转换,为ICAM-1在SLE中抗体类别转化的分子机制提供新的理论依据。     

外伤诱发自身免疫性大疱性皮肤病三例

目的 总结皮肤外伤诱发自身免疫性大疱性皮肤病的临床特点、组织病理学表现等,探讨其可能的发病机制.方法 分析3例由皮肤外伤所诱发的天疱疮或类天疱疮患者的临床表现、组织病理特点及治疗,结合国内外相关文献讨论与总结.结果 3例自身免疫性大疱性皮肤病患者,女1例,男2例,年龄分别为62、60、71岁,由外伤或手术诱发,与发病间隔时间分别为5周、5周和3d,分别确诊为大疱性类天疱疮(BP180抗体109 U/ml,BP230抗体阴性)、寻常型天疱疮(Dsg1抗体68.8 U/ml,Dsg3抗体219 U/ml)和落叶型天疱疮(Dsg1抗体143 U/ml,Dsg3抗体阴性).经糖皮质激素系统和(或)外用治疗后皮疹均明显好转.结论 外伤可能是自身免疫性大疱性皮肤病的1个诱发因素.对于外伤后伤口愈合不良或皮肤出现红斑、水疱、糜烂,用外伤或手术难以解释时,都应警惕自身免疫性大疱性皮肤病的可能,及时行组织病理或免疫病理检查.     

siRNA通过前S1蛋白运载体对HBV发挥靶向投射作用

<正>对于慢性乙型肝炎,当前治疗方法的疗效是有限的。对病毒特异基因的RNA干预已经成为一种颇具潜力的抗病毒机制,但前提是需要找到一种合适的转运载体。为了找到一种新的治疗HBV相关性肝病的方法,来自中国重庆医科大学第二附属医院的Huang W等研究了一种新的可以在体内或体外将siRNA导入目标肝细胞的运载体。前S1蛋白第9位上的精氨酸可以将siRNA导入到Hep G2和Hep G2 2.2.15细     

Ⅰ型干扰素参与调节SLE外周T细胞活化和TLR表达谱的研究

血清高水平Ⅰ型干扰素(typeⅠinterferon)是系统性红斑狼疮(SLE)患者重要的病理特征之一,外周高水平IFN-α对T细胞的免疫调节作用值得深入探讨。本研究首先比较分析了SLE患者外周血T细胞活化和TLR分子表达格局,结果显示SLE患者外周血CD4~+或CD8~+T细胞和正常人相比呈现出更加活化的表型变化,其表面活化标志CD69和HLA-DR表达阳性率均高于正常人;分析T细胞表达TLR分子格局发现,SLE患者较正常人T细胞中TLR分子的表达有明显升高,其中CD4~+T细胞中TLR8和TLR9的升高明显,而在CD8~+T细胞中明显升高的TLR分子有TLR3和TLR8;结合SLE病理状态下外周高水平IFN-α的持续存在,我们进一步分析了IFN-α对正常T细胞活化和TLR分子表达谱的影响,结果显示IFN-α协同TCR信号可以促进T细胞的活化,并上调T细胞中部分TLR分子的表达,其中CD4~+和CD8~+T细胞中TLR8的表达均明显上升。综合分析SLE患者和经IFN-α活化的正常T细胞的活化和TLR分子表达谱的变化格局,提示SLE病理状态下高水平的Ⅰ型干扰素可以与T细胞的持续活化有关,其对T细胞表达TLR分子格局的影响,特别是与核酸类分子配体相关的TLR分子的表达增高为内源性核酸类配体参与T细胞的活化提供了分子基础。     

HLA-DRB1和HLA-DQB1基因多态性与天疱疮的相关性

目的探讨人白细胞抗原(HLA)-DRB1和HLA-DQB1等位基因多态性与天疱疮的遗传相关性。方法以上海地区的58例天疱疮患者(病例组)和89名正常对照者(对照组)作为研究对象。采用聚合酶链反应-序列特异性引物分型技术(PCR-SSP)对两组HLA-DRB1和HLA-DQB1等位基因进行分型,直接计数法计算等位基因频率并进行组间比较,以等位基因频率的比值比(OR)评价基因与疾病的关联性。结果病例组和对照组共检测到13种HLA-DRB1等位基因和5种HLA-DQB1等位基因。统计学分析结果表明:病例组HLA-DRB1*14和HLA-DQB1*05等位基因频率分别为17.24%和18.97%,显著高于对照组的1.69%(P=0.000,P值的校正值Pc<0.05,OR=12.150)和6.74%(P=0.001,Pc<0.05,OR=3.238);病例组HLA-DQB1*06等位基因频率为15.52%,显著低于对照组的30.90%(P=0.003,Pc<0.05,OR=0.411)。结论 HLA-DRB1*14和HLA-DQB1*05可能是上海地区天疱疮患者的易感基因,而HLA-DQB1*06则可能是保护基因。     

天疱疮患者皮损局部异位淋巴结构的病理学特征

目的 探讨天疱疮患者皮损处浸润淋巴细胞病理学特征及其与外周血抗桥粒黏蛋白（Dsg）1/Dsg3抗体滴度的相关性。方法 对2014—2016年上海交通大学医学院附属瑞金医院皮肤科93例寻常型和落叶型天疱疮患者的组织病理片进行分析。计算每例 × 50镜下淋巴细胞总数,定义为淋巴细胞密集程度指数。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定天疱疮患者血清中抗Dsg1/Dsg3抗体滴度。统计淋巴细胞密集程度指数与抗体滴度间相关性。对其中8例寻常型和8例落叶型天疱疮患者的皮损样本进行免疫组化染色,分析CD3+ T细胞、CD20+ B细胞、CD138+ 浆细胞的分布。结果 在93例病理切片中,Grade1、Grade2、Grade3淋巴细胞聚集出现概率分别为100.00%、68.09%、10.64%,寻常型（56例）和落叶型天疱疮（37例）比较,Grade1?3淋巴细胞聚集出现概率差异无统计学意义。淋巴细胞的密集程度在寻常型和落叶型天疱疮患者比较,差异无统计学意义,与天疱疮患者血清中特异性抗Dsg1和抗Dsg3 的抗体滴度无相关性。在16例天疱疮病例中,全部有CD3+ T细胞出现,15例有CD20+ B细胞,12例有CD138+ 浆细胞存在。16例切片中,Grade1?3淋巴细胞聚集区域中均含有大量的CD3+ T细胞,而含有CD20+ B细胞的淋巴细胞聚集占总数的52.80% ± 5.78%,含有CD138+ 浆细胞的淋巴细胞聚集占总数的34.59% ± 7.42%。CD3+ T细胞、CD20+ B细胞、CD138+ 浆细胞在寻常型（8例）和落叶型天疱疮（8例）分布差异无统计学意义。结论 天疱疮患者皮损处普遍出现不同程度的淋巴细胞浸润,可能形成异位淋巴结构,参与皮损的形成和加重。     

莱菔子素对人肝细胞Ⅱ相代谢酶的作用研究

目的:探讨莱菔子素(sulforaphene)对人肝细胞系HHL-5细胞Ⅱ相代谢酶的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定莱菔子素对HHL-5细胞的毒性作用;蛋白印记法(western blotting)检测莱菔子素对Ⅱ相代谢酶蛋白表达的影响。结果:5μmol/L莱菔子素处理HHL-5细胞24h促进细胞增殖,10～100μmol/L表现生长抑制作用;莱菔子素能明显诱导血红素加氧酶(HO-1)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)蛋白的表达并呈剂量依赖关系。结论:莱菔子素可诱导肝细胞Ⅱ相代谢酶HO-1和TrxR的表达,具有潜在的化学致癌物解毒功能。