金钗石斛对糖尿病大鼠肾组织中糖基化终产物表达的干预作用

目的研究金钗石斛对糖尿病(DM)大鼠肾组织中肾脏糖基化终产物受体(RAGE)表达的干预作用。方法将W istar大鼠随机分3组,用链脲佐菌素(STZ)建立DM模型,金钗石斛水煎剂10 g/(kg.d)灌胃给药12周后,肾组织病理切片HE染色观察肾组织病理变化;生化法测定血糖、尿蛋白、肌酐浓度;荧光光谱法测定尿液和血清糖基化终产物(AGE)含量;免疫组化检测肾组织RAGE蛋白;实时荧光定量PCR检测肾组织RAGE mRNA表达。结果金钗石斛可降低DM模型大鼠血糖,减轻肾脏损害,降低血清中AGE以及肾组织RAGE mRNA和蛋白表达水平。结论金钗石斛干预减轻DM肾脏功能损害可能通过降低血清中AGE和下调肾组织中RAGE表达而实现。     

胞二磷胆碱与克拉瑞啶联合治疗多发性梗塞性痴呆20例

自2003年1月至2004年1月，我院采用胞二磷胆碱与克拉瑞啶联合治疗多发性梗塞性痴呆20例，临床效果满意，报告如下。     

非休眠期成年兔骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞用于核移植构建重组胚

目的研究非休眠期成年兔骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞作为供体,以体外成熟去核兔卵母细胞作为受体进行核移植构建重组胚胎的可行性及囊胚形成率. 方法首先利用新西兰兔骨髓和脂肪为来源分别培养骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞,然后用他们作为核供体,采用卵细胞胞质内直接注射法构建重组胚胎,7 d后比较囊胚形成率. 结果核移植操作后卵细胞存活率达80.0%,骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞作为供体重组胚胎囊胚形成率分别为88/522 (16.9%)和73/464 (15.7%), (P>0.05, Yates corrected). 结论处于非休眠期的成年兔骨髓基质干细胞和脂肪基质干细胞移植到去核卵母细胞后能够进行早期胚胎发育,两者囊胚形成率无明显差别.     

生长曲线拟合及细胞群体倍增时间的简化计算

0　引言　目前细胞群体倍增时间的计算方法有两种 ,而我们基于计数法绘制细胞生长曲线所获数据 ,利用 SPSS软件进行理论推导而得的理论倍增时间计算方法计算相对简单实用 ,现介绍如下 .1　材料和方法　指数函数拟合模型 (Exponential)中 ,Y=b0 × 2 b1 ×t要比 Y=b0 × eb1 × t更符合细胞的生物学特性 ,因为细胞增殖为二分裂生长 .Y=b0 × 2 b1 ×t在 SPSS的曲线模拟功能选项中并没有此函数拟合模型 ,故将原始数据的自变量时间变量作一转换 ,即将原自变量乘以 ln2即可 ,理论依据为Y=b0 × 2 b1 × t=b0 × eb1 × tln2 =b0 × eb1 ×…     

新西兰兔骨髓基质细胞构建组织工程膀胱的实验研究

目的：研究骨髓基质细胞(MSCs)在兔组织工程膀胱中的应用．方法：按献改进方法制作膀胱无细胞基质(BAMG)，从兔胫骨中分离出MSCs，体外扩增后接种于BAMG外表面，在低糖DMEM(LG—DMEM)培养12h，与BAMG复合成组织工程膀胱，对同一兔实施膀胱次全切术，用组织工程膀胱替代．20只兔实施了保留三角区的膀胱次全切术．实验随机分为3组．A组6只直接缝闭三角区；B组7只用膀胱形状的BAMG进行重建；C组7只用复合自体MSCs的组织工程膀胱进行替代手术．术前术后分别记录膀胱测压和放射线造影资料．12wk时无痛处死动物，进行大体解剖和组织染色分析．结果：体外扩增时间平均为21d．A，B和C组膀胱容积分别为术前的22％，85％和95％，顺应性分别为术前的11％，104％和107％．大体解剖显示A组仅有很小的储水能力，而B，C组具有正常膀胱形态，组织染色分析A，B组显示上皮层正常，粘膜下纤维组织增生而肌层较薄；C组则显示了与自体膀胱相似的正常的3层组织结构．结论：膀胱次全切除后原位缝合膀胱容积和顺应性均不能恢复，单纯应用BAMG膀胱容积和顺应性能够恢复正常，但逼尿肌层较薄，应用BAMG复合自体ASCs或MSCs的组织工程膀胱替代，术后12wk膀胱容积和顺应性能够恢复正常，膀胱壁组织结构与正常膀胱相似．提示膀胱次全切除后应用BAMG复合自体MSCs的组织工程膀胱替代可以获得良好功能和组织结构．     

注核方法对大鼠-小鼠种间体细胞核移植重组胚发育的影响

目的 :探讨胞质内直接注核法和电融合法对大鼠 -小鼠种间体细胞核移植重组胚发育的影响。方法 :采用血清饥饿法同步化处理的 SD大鼠成纤维细胞作为供体细胞 ,常规超排 KM小鼠获得卵母细胞 ,采用盲吸法去核 ,分别采用直接注核法和电融合法构建重组胚胎 ,6- DMAP+ CCB+乙醇激活重组胚 ,CZB培养液中培养。结果 :电场强度 ( V/cm)和脉冲 ( ms)为 :1 5 0 0 /30 ;1 5 0 0 /40 ;1 80 0 /30 ;1 80 0 /40时 ,融合率为 :81 .5 % ;83.3% ;77.6% ;82 .0 %。直接注核法和电融合法构建重组胚的卵裂率分别为 33.1 %和 2 8.9% ,桑椹胚发育率为 1 7.8%和 1 5 .5 %。结论 :电场强度为 1 5 0 0～ 1 80 0 V/cm,脉冲为 30 ms或 40 ms时 ,都能获得较高的融合率 ;直接注核法构建的核移植重组胚胎的卵裂率要比电融合法略高 ,但统计学分析差异不显著     

开放式医学机能学实验教学体系的探索与实践

机能学实验是基础医学实验教学的重要组成部分，是培养学生实践能力和创新精神的重要环节。近年来我校以构建新型实验教学体系为目标，积极探索机能实验室的开放式管理。并对开放式实验教学体系进行了试点改革。实践证明，建立在开放实验室基础上的开放式实验教学体系，有利于培养学生学习的主体意识，进一步提高其实践能力和创新意识，是培养高素质专业医学人才的有效途径之一。     

开放式医学机能学实验教学体系的探索与实践

机能学实验是基础医学实验教学的重要组成部分，是培养学生实践能力和创新精神的重要环节。近年来我校以构建新型实验教学体系为目标，积极探索机能实验室的开放式管理，并对开放式实验教学体系进行了试点改革。实践证明，建立在开放实验室基础上的开放式实验教学体系，有利于培养学生学习的主体意识，进一步提高其实践能力和创新意识，是培养高素质专业医学人才的有效途径之一。     

抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体细胞系的建立及鉴定

目的 初步建立抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体规模化制备技术平台,为制备抗人细胞色素P450(CYP450)亚型蛋白的单克隆抗体奠定基础.方法 按常规方法进行细胞融合,以酶联免疫吸附测定法(ELISA)筛选杂交瘤,以ELISA、免疫组化(IH)、免疫印迹(Western Blot)、免疫沉淀(IP)对单克隆抗体加以鉴定.结果 融合后筛出杂交瘤,其分泌抗体类型为IgG1、IgG2a、IgG2b及IgM.免疫组化(IH)图片上,人肝细胞浆内均可见阳性颗粒.免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WesternBlot)结果显示,所制备抗体与人肝微粒体蛋白有特异性结合.结论 筛选制备的单克隆抗体杂交瘤能分泌特异性较强的抗人肝微粒体蛋白单克隆抗体.