黄芩汤对溃疡性结肠炎大鼠NF-κBp65调控作用研究

研究黄芩汤对溃疡性结肠炎(UC)大鼠细胞因子、NF-κB p65蛋白表达的影响,探讨其治疗效果及作用机制。运用复合法(三硝基苯磺酸+乙醇)制备细胞免疫反应性UC大鼠模型,大鼠随机分成正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组和黄芩汤高、中、低剂量组(20、10、5 g·kg-1)。治疗5天后评估各组大鼠饮食量、体重变化及组织损伤程度,采用Griess法测定血清中NO含量,ELISA法测定IL-6、TNF-α、PGE2含量,运用免疫组化法检测NF-κB p65蛋白表达情况。结果显示,模型组大鼠饮食量及体重显著低于正常组;血清中NO、IL-6、TNF-α、PGE2水平、结肠组织NF-κB p65蛋白表达量及组织损伤程度显著高于正常组。黄芩汤高、中剂量组大鼠上述指标均较模型组显著好转。黄芩汤对溃疡性结肠炎的治疗作用可能是通过抑制NF-κB P65通路活化,进而下调促炎细胞因子NO、IL-6、TNF-α和PGE2表达实现的。     

百合地黄汤干预抑郁症大鼠的代谢组学研究

目的：探究百合地黄汤对抑郁症大鼠血清及粪便代谢组学的影响,筛选差异代谢物和代谢通路。方法：60只大鼠适应性饲养7 d后,随机分为正常组(10只)和应激组(50只),采用孤养和慢性不可预知性温和应激刺激制备大鼠抑郁症模型,造模成功的大鼠随机分为模型组,阳性对照组,百合地黄汤高、中、低剂量组,每组10只。给予百合地黄汤后,采用糖水偏好试验和旷场试验进行药效学评价;收集大鼠粪便和血清,应用LC-MS方法对大鼠血清和粪便进行非靶向代谢组学分析后,采用偏最小二乘方判别分析(OPLS-DA)和主成分分析(PCA),并联合t-test和变量投影重要性(VIP)筛选差异代谢物,应用KEGG数据库以及Metaboanalyst 5.0软件对差异代谢物进行通路富集。结果：与正常组大鼠比较,模型组大鼠体质量、糖水偏爱度和自主活动明显减少,给予百合地黄汤后,大鼠的抑郁样行为明显减少,抑郁大鼠的糖水偏爱度和在旷场中的自主活动明显增加。在代谢组学分析中,血清中共筛选出苯丙氨酰苯丙氨酸、5,6-二氢尿苷、L-谷氨酰胺等13个差异代谢物和丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢以及类固醇激素生物合成等10条代谢通路,粪便中共筛选...     

黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群的影响及肠黏膜屏障的保护作用机制

目的：研究黄芩汤对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠的药效,并探究黄芩汤在UC中是否能调节肠道菌群,发挥屏障保护作用。方法：雄性Balb/c小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、黄芩汤高(20 g·kg^-1)、中(10 g·kg^-1)、低(5 g·kg^-1)剂量组、菌群干扰组、菌群干扰模型组、菌群干扰黄芩汤组(黄芩汤,20 g·kg^-1)。灌胃抗生素(杆菌肽200 mg·kg^-1、万古霉素200 mg·kg^-1)8 d构建菌群干扰模型,自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液7 d构建UC模型,黄芩汤给药治疗7 d。实验结束后处死小鼠,取血、结肠及粪便,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠病变,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中紧...     

黄芩汤对LPS诱导的RAW264.7炎症细胞的抗炎作用

目的：以RAW264.7细胞为炎症模型,探究黄芩汤的抗炎作用机制。方法：制备黄芩汤,筛选对RAW264.7细胞的安全剂量;将RAW264.7细胞接种于24孔板中,先后加入黄芩汤和脂多糖（LPS）,分别采用Griess法和酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定一氧化氮（NO）和白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的含量;将RAW264.7细胞接种于6孔板中,设空白组、LPS组、LPS+黄芩汤组、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)抑制剂（PDTC）组、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）抑制剂（SB203580）组、细胞外信号调节激酶（ERK）抑制剂（PD98059）组、c-Jun氨基末端激酶（JNK）抑制剂（SP600125）组、Janus酪氨酸蛋白激酶（JAK）抑制剂（AG490）组,先后加入相应的抑制剂和黄芩汤,并经LPS刺激后,提取RNA和蛋白,分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测NF-κB p65、p38MAPK、ERK、JNK和JAK m...     

黄芩汤通过Nrf2信号通路对Caco-2细胞抗氧化应激作用的机制

目的：以Caco-2细胞为载体,结合基因干扰(RNAi)技术,通过体外实验进一步验证黄芩汤基于核因子E2相关因子2(Nrf2)通路发挥的抗氧化应激作用。方法：将处于对数生长期的Caco-2细胞,经siRNA转染,构建siRNA Caco-2细胞;将正常Caco-2细胞和siRNA Caco-2细胞与不同浓度的黄芩汤共同孵育后,提取RNA和蛋白,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)技术检测血红素氧合酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)、接头蛋白Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)及Nrf2 mRNA和蛋白的表达;同时,采用比色法和探针法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力及丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的表达水平。结果：与空白组比较,仅有黄芩汤400 mg·L^-1组与萝卜硫素(SFN)组可降低正常Caco-2细胞内ROS、MDA含量(P<0.01);而黄芩汤各剂量组与SFN组细胞内SOD与GSH-Px...     

仙脉通胶囊对实验性脑缺血的药效学实验研究

目的:研究仙脉通胶囊对大鼠实验性脑缺血的保护作用;方法:通过大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型试验及体外血栓形成试验,观察仙脉通胶囊的药理作用;结果:仙脉通胶囊具有明显抑制大鼠体内和体外血栓形成及对大鼠MCAO模型具有明显治疗的作用。结论:仙脉通胶囊对实验性脑缺血具有良好的保护作用。     

雪莲细胞培养物总黄酮抗炎作用的机理研究

目的：通过观察野生雪莲总黄酮、雪莲细胞培养物总黄酮对炎症大鼠血清中炎性因子IL-1β、NO、PGE2的影响，以及研究雪莲细胞培养物总黄酮对炎性因子PGE2分泌以及COX-2、iNOS、NF—κB、p65mRNA表达和对NF—κB、p65,ERK1、p38蛋白表达的影响，来探讨其抗炎机理。方法：采用角叉菜胶致足肿胀法造成大鼠炎症模型，分离血清,观察甲等雪莲总黄酮（W）和雪莲细胞培养物总黄酮（C）对炎症大鼠血清中炎症介质和细胞因子的影响。     

血液透析间期126例次急性左心衰相关性分析

目的 探索尿毒症患者血液透析间期急性左心衰的相关性因素及积极防治的措施。方法 通过对我院1998～2002年82例尿毒症维持性血液透析患者血液透析间期126例次急性左心衰，采用X^2检验和百分比法，分析充分透析和非充分透析、高血压、贫血、低蛋白血症等相关性因素，探索积极防治的措施。结果 充分透析尿毒症患者透析间期急性左心衰发生率(1．3％)大大低于非充分透析尿毒症患者(11.3％)；透析间期发生急性左心衰时高血压占97．62％，其中1级、2级、3级高血压分别占15．08％、31．95％和51．59％，无高血压只占2．38％。透析间期急性左心衰尿毒症患者均有不同程度贫血，其中以重度贫血多见(57.1％)，中度贫血次之(38.9％)，轻度贫血最少(4．0％)；低蛋白血症尿毒症患者透析间期急性左心衰发生率(77.0％)大大高于无低蛋白血症患者(23．0％)。结论 尿毒症患者透析间期急性左心衰发生不仅与非充分透析和高血压、中重度贫血有密切关系，还与低蛋白血症有关。因此，充分透析，积极控制高血压，纠正贫血和低蛋白血症是预防尿毒症患者透析间期急性左心衰发生的重要环节。     

痹清胶囊对大鼠急性痛风性关节炎白细胞介素12及诱导型环氧化酶表达的影响

目的:采用尿酸钠(MUS)诱导的大鼠急性痛风性关节炎模型,研究痹清胶囊治疗急性痛风性关节炎作用机理。方法:采用ELISA方法测定踝关节液白细胞介素12(IL-12)的含量及采用免疫组化方法测定大鼠踝关节诱导型环氧化酶(COX-2)的表达。结果:痹清胶囊明显降低痛风性关节炎模型大鼠踝关节IL-12的含量、抑制大鼠踝关节COX-2的表达。结论:痹清胶囊治疗痛风性关节炎有确切疗效,可能与降低IL-12的含量、抑制COX-2的表达有关。     

在线血液透析滤过治疗尿毒症患者急性左心衰竭58例次分析

目的探讨分析在线血液透析滤过(on line-HDF)治疗尿毒症患者急性左心衰竭的临床疗效及安全性。方法回顾性分析我院2011年1月至2012年8月41例尿毒症维持性血液透析患者58例次急性左心衰竭进行在线血液透析滤过治疗,观察患者治疗过程中出现的不良反应并统计患者治疗前后呼吸困难、电解质变化、心功能及KT/V情况,由此分析患者病情改善情况。结果所有41例患者心衰均得到纠正,心功能等级改善,呼吸困难等临床症状明显缓解,而且治疗过程中仅有2例患者出现后期的低血压反应。结论在线血液透析滤过治疗尿毒症患者急性左心衰竭临床疗效较为显著,而且安全性高,患者治疗依从性良好。